循环肿瘤细胞检测技术研究进展

<正>2015年2月4日,CA期刊在线发布了《2012全球癌症统计》的全文。基于GLOBOCAN估计,2012年全球有1.41千万新发癌症病例,820万患者死于癌症。其中57%的癌症患者以及65%的癌症死亡患者来自于发展中国家。根据对全国肿瘤登记中心2011年监测数据分析,中国肿瘤登记中心2015年报发布我国当年新增癌症病例337.2万,癌症死亡病例221.3     

循环肿瘤细胞的检测

循环肿瘤细胞的检测有助于研究肿瘤转移机制、指导肿瘤治疗、判断治疗效果、为推断预后提供可靠参考、监测肿瘤的转移或复发。随着研究的进展,循环肿瘤细胞逐渐被人们所重视。外周血中循环肿瘤细胞的数目较少,精确分离很困难。目前用于循环肿瘤细胞检测的方法很多,通常包括富集技术和分析技术两个部分,实际操作中常需要选择两个部分的不同方法加以有效结合;近年来随着实验技术的进步,建立了兼有富集和分析功能的细胞搜索系统。     

循环肿瘤细胞的检测方法

循环肿瘤细胞（CTCs）携带着肿瘤发生、发展和转移的重要信息,与肿瘤转移密切相关。为了解CTCs的功能和分子特征以发展针对癌症有效地监测和治疗策略,发展CTCs富集和鉴定技术是关键环节。近年来,CTCs的体外检测技术取得了很大的进展,同时,具有实时、无创的体内检测技术也逐渐出现在市场。本文总结了目前CTCs的体内外检测方法,并提出了当前CTCs检测面临的挑战及策略。     

肺癌循环肿瘤细胞检测及临床应用的研究进展

每一年全球新发肺癌患者160万人,因肺癌死亡患者140万人[1].多数肺癌患者就诊时已为晚期,常伴发有一个甚至多个器官的转移.90％肺癌患者并非死于原发肿瘤,而是因转移灶引起器官衰竭而死亡[2].当前,无论是影像学还是血清肿瘤标志物都难以及时而精准地预测肿瘤转移的发生、发展.因此,建立一种精准、便捷、能动态监测肿瘤发生、发展的诊断方法,成为全球肺癌研究领域关注的热点.     

循环肿瘤细胞检测与临床应用进展

循环肿瘤细胞是指自发或因诊疗操作脱离实体瘤原发灶或转移灶而进入外周血循环的肿瘤细胞,其已被研究证实是包括乳腺癌、肺癌、胰腺癌、结直肠癌等在内的多种癌症的诊断和预后标志物,有助于肿瘤的体外早期诊断、耐药性监测,判断预后及生存分析,检测肿瘤复发、评价药物疗效以辅助治疗决策及调整治疗方案.但目前循环肿瘤细胞的检测方法仍存在一定的局限性,研究出具有更高灵敏度和特异性的检测新方法将有助于循环肿瘤细胞在临床上的应用.本文将从循环肿瘤细胞的检测技术、临床应用以及临床应用展望等方面对循环肿瘤细胞检测的研究进展和临床应用作一简述.     

宫颈癌循环肿瘤细胞的检测技术及临床应用研究进展

宫颈癌是女性第二大常见恶性肿瘤,随着宫颈细胞学筛查的普遍应用,宫颈癌得到早期发现和及时治疗,其发病率及病死率显著降低,但复发性宫颈癌的治疗效果并不是很乐观。目前认为循环肿瘤细胞与肿瘤的血行转移有密切的关系,被认为是肿瘤患者的实时"液体活检",根据循环肿瘤细胞的物理和生物学特性,通过不同的技术富集和检测进行研究,可能为宫颈癌的诊断、疗效检测、个体化治疗以及预后评估提供指导。     

胰腺癌循环肿瘤细胞检测及其临床应用

胰腺癌肿瘤细胞的转移是造成胰腺癌患者死亡的主要原因。部分肿瘤细胞伴随循环系统迁移至其他组织或器官,这些细胞被称为循环肿瘤细胞(circulating tumor cells, CTCs)。目前实现CTCs定量检测的技术可分为两类,即体外检测和体内检测。体外检测常用的方法有免疫介导法、聚合酶链式反应(PCR)法等;体内检测方式主要为活体流式细胞术(in vivo flow cytometry, IVFC)。CTCs对胰腺癌的早期诊断、辅助分期、评价疗效及预后评估方面都具有重要意义。本文将对胰腺癌循环肿瘤细胞的检测及临床应用进行综述。     

循环肿瘤细胞的检测及其在鼻咽癌中的研究进展

循环肿瘤细胞(CTCs)是指从原发肿瘤或转移灶中脱落进入机体循环系统的肿瘤细胞,与肿瘤的复发、转移密切相关.CTCs作为一种新型的生物标志物,其在乳腺癌、前列腺癌、结直肠癌等多种类型肿瘤的早期诊断、疗效评价及预后评估等方面的作用已得到了证实.近年来,CTCs在鼻咽癌的相关研究中也取得了一定的进展.本文就CTCs的特性、...     

乳腺癌病人循环肿瘤细胞检测的临床意义

目的:探讨乳腺癌外周静脉血中循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)检测的临床意义.方法:收集女性乳腺癌病人60例,在新阶段治疗前采集病人外周静脉血,采用密度梯度离心法联合流式细胞术法检测CTCs,免疫组织化学法检测ER、PR、HER-2、p53、Ki-67表达.同期选取20名健康女性志愿者作为阴性对照组.结果:观察组CTCs阳性表达率为38.3% (23/60),对照组均未检出CTCs阳性表达,2组CTCs阳性表达差异有统计学意义(P<0.01).不同年龄、不同病理类型病人间CTCs阳性表达差异均无统计学意义(P>0.05);不同TNM分期病人CTCs阳性表达差异有统计学意义(P<0.01);转移性乳腺癌病人CTCs阳性表达明显高于非转移性病人(P<0.01).不同ER、PR、HER-2、Ki-67表达病人的CTCs阳性表达差异均无统计学意义(P>0.05),不同分子分型病人间的CTCs阳性表达差异亦无统计学意义(P>0.05).结论:CTCs与乳腺癌TNM分期及肿瘤细胞转移有关,对指导乳腺癌的诊断、治疗及预后判断有重要意义.     

乳腺癌分子分型与外周血循环肿瘤细胞相关性探讨

目的探讨乳腺癌分子分型与外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cell,CTC)的相关性。方法抽取116例乳腺癌及20例乳腺纤维腺瘤患者外周静脉血5 ml,利用密度梯度离心法富集单个核细胞,通过荧光定量PCR技术检测所获单个核细胞中细胞角蛋白(cytokeratin,CK)19 mRNA表达阳性的CTC,分析乳腺癌分子分型与CTC的关系。结果 116例乳腺癌患者中CTC阳性率为31%(36/116),20例乳腺纤维腺瘤患者均未检测出CTC。36例CTC阳性患者的中位CTC水平为1.65(1.18,2.87)个MCF-7细胞/2μg总RNA;116例乳腺癌患者中各分子亚型(luminal型、HER-2过表达型、basal-like型)所占比例分别为62.1%(72/116)、17.2%(20/116)、20.7%(24/116);各亚型(luminal型、HER-2过表达型、basal-like型)CTC阳性率分别为27.8%(20/72)、35%(7/20)、37.5%(9/24),差异无统计学意义(P=0.615),各亚型(luminal型、HER-2过表达型、basal-like型)CTC阳性患者的中位CTC水平分别为2.1(1.18,3.9)、1.37(1.12,2.12)、1.53(1.32,2.64)个MCF-7细胞/2μg总RNA,差异有统计学意义(P=0.046)。结论乳腺癌各分子亚型间CK-19 mR-NA阳性CTC水平存在差异,提示各亚型间临床异质性可能与患者CTC水平相关。     

基于氧化石墨烯/金纳米棒的表面增强拉曼散色技术检测循环肿瘤细胞

目的 开发一种结合表面增强拉曼散色（SERS）光谱与静电吸附的方法用于检测循环肿瘤细胞。方法 氧化石墨烯经过聚苯乙烯磺酸钠（PSS）的非共价修饰后,通过金种子法原位合成氧化石墨烯/金纳米棒（GO/GNR）复合材料,再利用聚-二烯丙基二甲基氯化铵（PDDAC）非共价修饰GO/GNR,使其表面带正电荷。通过电荷靶向作用实现GO/GNR与肿瘤细胞的靶向结合,用SERS技术对GO/GNR-肿瘤细胞复合物进行检测。采集健康志愿者血液标本,将不同密度的肿瘤细胞加入血液标本中制成模拟血样,按上述方法检测模拟血样中的肿瘤细胞。结果 带正电荷的GO/GNR复合材料能够有效地与肿瘤细胞靶向结合,并且能够在50~10 000个细胞的范围内对肿瘤细胞进行拉曼光谱检测,但白细胞对肿瘤细胞的检测有一定的干扰。结论 GO/GNR复合材料可作为SERS探针实现对循环肿瘤细胞的拉曼光谱检测。     

循环肿瘤细胞检测技术的研究进展

循环肿瘤细胞（circulating tumor cell, CTC）检测是一种新型的“液体活检”技术,具有无创、便捷、实时、整体、精准和可重复操作等特点,为临床提供了从肿瘤细胞到分子水平的分析平台,弥补了现有临床肿瘤诊断方法的不足,有助于实现肿瘤患者的精准医疗。本文主要就CTC检测技术的临床应用价值和常用方法等最新进展作一综述。     

循环肿瘤细胞在肝细胞癌诊疗中的应用及展望

肝细胞癌(HCC)是一种高度恶性肿瘤,是癌症相关死亡的第三大原因。血清甲胎蛋白和放射影像是HCC早期诊治和疗效动态监测最常用的检测手段。然而这些手段的准确性有限,不能明确反映肿瘤的潜在生物学特性。因此,开发更准确的能够全面反映肿瘤生物学特性的新型HCC肿瘤标志物具有潜在的临床应用价值和潜力。循环肿瘤细胞(CTC)是来源于原发肿瘤或转移灶的循环中的癌细胞,提供了关于肿瘤进展和转移的重要信息,是早期诊断、复发或转移、预后评估的良好候选者,甚至是HCC患者潜在的治疗靶点。本文将讨论CTC在HCC患者临床全疗程管理中的应用,以及它的局限性和未来的研究方向。     

循环肿瘤细胞和播散肿瘤细胞对食管癌患者预后的meta分析

目的 用循环肿瘤细胞(CTCs)和播散肿瘤细胞(DTCs)预测食管癌患者的预后仍存在争议,本文旨在探究食管癌患者CTCs/DTCs是否与患者临床病理特征、预后及生存状况存在相关性.方法 通过PubMed、Web of Science、Embase及Cochrane数据库检索所有CTCs/DTCs相关研究.制定文献纳入/排除标准并依此选择文献.以比值比(OR)、相对危险度(RR)、风险比(HR)和95％可信区间(95％ CI)作为效应指标,用Review Manager5.3、Statal2.0软件进行计算和分析.结果 共纳入19项研究,包含1766例食管癌患者.Meta分析显示,CTCs/DTCs与患者下列临床病理参数:肿瘤分期(OR=1.95)、浸润深度(OR=1.99)、淋巴结转移(OR=2.44SEN)、远处转移(OR=5.98sEN)、分化程度(OR=1.67)、淋巴脉管转移(OR=4.48);预后:复发(RR=6.86SEN)、转移(RR=3.22);生存状况:总体生存率(OS)整体分析(HR=3.46)、无病生存率/无进展生存率(DFS/PFS)整体分析(HR=3.00)显著相关.结论 食管癌患者CTCs/DTCs与肿瘤分期、浸润深度、淋巴结转移、远处转移、分化程度、淋巴脉管转移、复发、转移显著相关,也与总体生存率、无病生存率/无进展生存率显著相关.因此,CTCs/DTCs可作为食管癌患者临床预测指标.     

乳腺癌患者外周血中循环肿瘤细胞和外泌体的表达及其临床意义*

目的 探讨循环肿瘤细胞（CTCs）和外泌体在乳腺癌患者外周血中的表达情况及其临床意义。方法 收集87例乳腺癌患者、40例乳腺良性肿瘤患者及20例健康体检者外周血,采用Cell search系统检测外周血中CTCs,实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测microRNA-1246（miR-1246）的表达。结果 乳腺癌患者外周血中CTCs为（4.36±1.08）个/ml,高于良性乳腺肿瘤患者和健康体检者（P?<0.05）;乳腺癌患者外周血中miR-1246相对表达水平为（102.94±43.28）,高于良性乳腺肿瘤患者与健康体检者外周血 miR-1246（P?<0.05）。外周血中CTCs诊断乳腺癌的符合率为68.9%,miR-1246的诊断符合率为63.2%;CTCs 联合miR-1246诊断乳腺癌的符合率为81.6%,3组间诊断符合率比较差异有统计学意义（P?<0.05）。以病理活检为金标准,外周血CTCs和miR-1246单独诊断乳腺癌的κ值均<0.4（一致性较差）;两者联合诊断乳腺癌 κ值为0.46（具有较好的一致性）。结论 外周血中CTCs与miR-1246联合检测有助于早期发现乳腺癌,为乳腺癌的个性化检测和治疗提供方向。     

巢式RT-PCR检测乳腺癌外周血循环肿瘤细胞的临床价值

目的:联合采用细胞角蛋白19(cytokeratin 19,CK19)及乳腺上皮黏蛋白(small breast epithelial mucin,SBEM)指标,探讨通过巢式RT-PCR(nested RT-PCR)方法检测乳腺癌患者外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTC)的临床价值?方法:采用MCF-7 RNA与健康志愿者外周血单核细胞(peripheral mononuclear cell,PMNC)RNA进行梯度混合后的反转录产物,检测优化后巢式RT-PCR体系的敏感性,再选择10例健康志愿者以及20例乳腺良性疾病患者外周血检测其特异性后,对56例乳腺癌患者外周血中CK19 mRNA及SBEM mRNA表达情况进行检测? 结果:优化后的检测体系能够在3 ml外周血PMNCs中检测到1个MCF-7细胞,10例健康志愿者以及20例乳腺良性疾病患者外周血中未检测到CK19 mRNA与SBEM mRNA的表达;两者的表达与原发肿瘤大小,腋窝淋巴结状况及TNM分期相关(P < 0.05),而与原发肿瘤病理类型,激素受体以及C-erbB-2的表达无明显相关性(P > 0.05)? 结论:经过优化的巢式RT-PCR体系联合检测乳腺癌患者外周血CK19 mRNA及SBEM mRNA的表达敏感性和特异性较高,能用于检测外周血CTC,对进一步精确评估预后及指导治疗可能有较高的临床价值?     

循环肿瘤细胞在晚期食管鳞癌患者疗效评估中的临床价值*

目的 探究循环肿瘤细胞（CTC）在评估晚期食管鳞癌患者同步放化疗疗效的临床应用。方法 选取2015年12月31日—2016年12月31日安徽医科大学第一附属医院肿瘤放疗科的食管鳞癌晚期患者（Ⅲ、Ⅳ期）38例,予以50?Gy的三维适行放疗联合TP方案（紫杉醇135?mg/m2;顺铂25?mg/m2）化疗,在放化疗前采集患者的外周血检测CTC,并对患者进行2年密切随访,运用t检验,Z检验分析CTC值变化,Kaplan-Meier方法及Log-rank χ2检验分析患者CTC值与生存率的关系,并运用Cox回归模型进行多因素分析。结果 食管鳞癌患者同步放化疗后肿瘤直径较治疗前明显减小,同步放化疗前后CTC差值（dCTC）、CEA的差值（dCEA）、CA199的差值（dCA199）、放疗前CA125值对患者预后有影响,dCTC和放疗前CA125值是评估入组患者预后的独立影响因素。结论 对食管癌同步放化疗的患者,放疗前后CTC的差值,放疗前CA125值相比较放疗前CTC、CEA及CA199值,能更好地评估患者的预后。