L-NNA抑制福尔马林大鼠脑原癌基因表达产物c-FOS、c-JUN的表达

目的 探讨一氧化氮合酶抑制剂L-NNA对福尔马林实验大鼠脑内原癌基因表达产物c-FOS、c-JUN表达的影响。方法应用免疫组织化学ABC法研究了c-FOS、c-JUN在福尔马林大鼠脑内的表达。结果 在福尔马林实验大鼠不同脑区都存在c-FOS、c-JUN的阳性表达，一氧化氮合酶抑制剂L-NNA可抑制福尔马林实验大鼠脑内原癌基因表达产物c-FOS、c-JUN的表达。结论 一氧化氮合酶抑制剂L-NNA可抑制原癌基因的表达，提示NO可通过影响原癌基因的表达参与伤害性痛觉的调制。     

NOS抑制剂L-NNA对福尔马林致痛大鼠伤害性行为反应的影响

目的 检测和评价腹腔注射不同剂量一氧化氮合酶抑制剂L－NNA对福尔马林致痛大鼠伤害性行为反应的影响。方法 大鼠腹腔注射L－NNA 1h后，进行福尔马林实验诱导伤害性行为反应，观察L－NNA的镇痛效应。结果 腹腔注射不同剂量的L－NNA（10mg/kg,20mg/kg,40mg/kg,80mg/kg)产生明显的镇痛作用。结论 一氧化氮在伤害性痛觉调制中起重要作用，一氧化氮合酶抑制剂L－NNA有明显的镇痛作用。     

依那普利对肾性高血压大鼠脑缺血再灌注后NOS的影响

目的通过观察依那普利（ACEI）对肾性高血压大鼠脑缺血再灌注后神经功能和一氧化氮合酶（NOS）的影响，探讨ACEI的脑保护机制。方法Wistar雄性大鼠56只，随机分为依那普利治疗组（Y，n=16）、高血压，缺血再灌注组（HIR，n=16）、正常血压，缺血再灌注组（IR，n=16）、假手术组（n=8）；前三组再按时间点分为缺血2小时、再灌注24小时两个亚组，每组8只。采用狭窄肾动脉方法建立肾性高血压大鼠模型；采用线栓法造成大脑中动脉缺血再灌注模型。采用免疫组织化学方法检测脑组织内皮源性一氧化氮合酶（eNOS）、诱导性一氧化氮合酶（iNOS）、神经源性一氧化氮合酶（nNOS）的表达。结果Y组大鼠神经功能评分较HIR组和IR组降低（P〈0．05）；IR组神经功能评分低于HIR组（P〈0．05）；Y组与HIR组和IR组比较eNOS表达显著增高（P〈0．05），nNOS和iNOS表达显著降低（P〈0．05）；HIR组与IR组比较，eNOS表达明显降低（P〈0．05），而nNOS、iNOS表达明显增加（P〈0．05）。结论肾性高血压可能通过增加nNOS和iNOS表达、抑制eNOS表达加重缺血再灌注后脑损伤；ACEI能够改善局灶性脑缺血大鼠的神经功能，上调脑组织eNOS表达，抑制nNOS、iNOS表达，提示这种抗高血压药可能对脑缺血再灌注损伤有脑保护作用。     

一氧化氮合酶与脑缺血亚急性期神经损伤的关系

目的 探讨大鼠脑缺血亚急性期脑力内三型一氧化氮合酶（NOS）的表达及其与经济损伤的关系。方法 采用大鼠大脑中动脉缺血模型，用免疫组织化学方法检测局灶性脑缺血24h三型NOS在脑内的表达。结果 局灶性脑缺血24h，缺血中心区及部分边缘区内可见大量诱导型一氧化氮合酶（iNOS）阳性的胶质细胞浸润。表达神经元型一氧化氮合酶（nNOS）及内皮型一氧化氮合酶（eNOS）的神经细胞数减少。结论 脑缺血亚急性期胶质细胞iNOS表达上调与迟发性神经元损伤有密切关系。在此期给予选择性iNOS抑制剂可以减少缺血性损害。     

黄芩茎叶黄酮对大鼠缺血性记忆障碍的改善作用及对胆碱乙酰转移酶和一氧化氮合酶蛋白表达的影响

目的探讨黄芩茎叶黄酮(flavonoids from stem and leaf ofscutellaria baicalensis georgi,SSF)对大鼠永久性慢性脑缺血引起记忆障碍的改善作用及对胆碱乙酰转移酶和一氧化氮合酶蛋白表达的影响。方法雌性sprague-dawley(SD)大鼠双侧颈总动脉永久结扎2个月制备慢性脑缺血记忆障碍模型,通过Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,免疫组化测定海马细胞中胆碱乙酰转移酶(chloine acetyltransferase,ChAT)、神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,nNOS)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)和内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)蛋白表达来探讨黄芩茎叶黄酮对大鼠缺血性记忆障碍的改善作用及对胆碱乙酰转移酶和一氧化氮合酶蛋白表达的影响。结果与假手术组相比,脑缺血模型组大鼠的学习记忆能力显著降低,找到平台的游泳路程显著延长;海马细胞中ChAT和eNOS蛋白表达显著降低;nNOS和iNOS蛋白表达显著增加。然而,17.5、35.0和70.0 mg/kg SSF灌胃给脑缺血大鼠38 d均能不同程度地改善学习记忆能力障碍,明显缩短大鼠找到平台的游泳路程;增加海马细胞中ChAT和eNOS蛋白的表达;抑制海马细胞中nNOS和iNOS蛋白的表达。结论 SSF对大鼠脑缺血性记忆障碍具有明显的改善作用,其作用机制可能与调节脑内ChAT和一氧化氮合酶的异常变化有关。     

胰岛素对神经细胞神经型一氧化氮合酶表达及活性的影响

一氧化氮合酶主要有三种同工酶:内皮细胞型一氧化氮合酶(eNOS),神经型一氧化氮合酶(nNOS)和可诱导型一氧化氮合酶(iNOS).前两者又称为构成型,它们在生理情况下催化生成少量的一氧化氮执行细胞间信息传递功能.近年来的研究发现胰岛素可上调eNOS的表达及活性,从而执行舒张血管的作用.那么,胰岛素对另一种构成型一氧化氮合酶,即nNOS,是否也有调节作用?尚未见直接的实验证据.为了进一步探索胰岛素在神经系统中的调控作用,本实验以体外培养的大鼠神经细胞为实验对象,应用流式细胞术、原位杂交、电子自旋共振等技术方法研究胰岛素对神经细胞中nNOS的调节作用.     

脑脉通对脑缺血再灌注老龄大鼠脑组织一氧化氮合酶和核因子-κB的影响

目的:从脑组织核转录因子-κB(nuclearfactor-κB,NF-κB)、热休克蛋白70(heat-shockprotein70,HSP70)和一氧化氮合酶(nitric-oxidesynthases,NOSs)的表达变化来揭示脑脉通对老年大鼠脑缺血再灌注损伤的防护机制及其量效关系。方法:采用大脑中动脉闭塞方法建立脑缺血再灌注(缺血3h再灌注12d)动物模型,观察高、中、低剂量脑脉通对脑缺血再灌注大鼠神经症状积分,脑组织含水量、病理变化及大脑皮质NF-κB、HSP70和NOS表达的影响。结果:模型组大鼠脑组织含水量,神经症状积分及NF-κB、HSP70、神经型一氧化氮合酶(neuronalnitric-oxidesynthase,nNOS)、内皮型一氧化氮合酶(endothelialnitric-oxidesynthase,eNOS)和诱导型一氧化氮合酶(induciblenitric-oxidesynthase,iNOS)表达均高于假手术组;高、中、低剂量脑脉通组和尼莫地平组大鼠脑组织含水量,神经症状积分及NF-κB、iNOS和nNOS表达均低于模型组;高、中、低剂量脉通组和尼莫地平组大鼠HSP70和eNOS表达高于模型组;中剂量脑脉通组神经症状积分和nNOS表达低于尼莫地平组,eNOS表达高于尼莫地平组;中剂量脑脉通组HSP70和eNOS表达高于低剂量脑脉通组,其他各项指标均低于低剂量脑脉通组。结论:脑脉通拮抗大鼠脑缺血再灌注损伤的机制与抑制脑组织NF-κB、nNOS、iNOS和上调HSP70、eNOS表达有关,且以中剂量效果较好。     

长期运动对大鼠十二指肠一氧化氮合酶表达的调节作用

目的:观察长期运动及应用一氧化氮合酶抑制剂(L-NAME)对大鼠十二指肠一氧化氮合酶(NOS)表达的调节作用.方法:健康雌性SD大鼠,随机分为四组,即静息组、静息并应用L-NAME组、运动组、运动并应用L-NAME组,L-NAME组的大鼠饮用水中含有L-NAME 1 g/L,后两组大鼠游泳3个月,应用免疫组织化学技术分析大鼠十二指肠神经型NOS(nNOS)和诱导型NOS(iNOS)的表达.结果:与静息组相比,运动组大鼠十二指肠nNOS及iNOS活性均明显加强,前者主要发生于绒毛上皮,后者主要发生于腺上皮和肌层.静息并应用L-NAME组的nNOS阳性表达强于静息组,而两组间iNOS阳性表达无统计学意义.运动并应用L-NAME组绒毛上皮的nNOS阳性表达和腺上皮的iNOS阳性表达均弱于运动组.结论:运动可增强十二指肠黏膜不同部位和不同类型NOS的表达,即运动可增强绒毛上皮的nNOS表达和十二指肠腺上皮iNOS的表达,推测前者可能介导肠道吸收功能的调节,后者可能参与了黏膜分泌功能的调节.     

大鼠全脑缺血再灌注后脑组织一氧化氮合酶的变化

目的 观察全脑缺血再灌注后神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthese，nNOS)与诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase，iNOS)的变化，从而探讨一氧化氮在脑缺血再灌注损伤中的作用。方法 实验分为正常组、假手术组、缺血组，采用大鼠4血管夹闭方法制作全脑缺血再灌注模型，观察nNOS、iNOS在缺血20min再灌注2h、6h、1d、3d、5d、7d时的变化及大脑皮层、海马、丘脑的组织病理学改变。结果 nNOS在缺血再灌注后2h开始升高，1d达高峰，3d开始下降，iNOS在再灌注2h开始表达，3d达高峰，5d开始下降，并持续至7d。结论 脑缺血再灌流时nNOS和iNOS表达增强，尤其是iNOS在灌注后期表达，提示N0生成增多可能与缺血后迟发性神经元死亡有关。     

丹参酮对阿尔茨海黩病样大鼠海马内乙酰胆碱酯酶和一氧化氮合酶表达的影响

目的 探讨丹参酮治疗阿尔茨海黩病（Alzheimer‘s disease,AD)样大鼠的神经化学机制。方法 应用凝聚态β-淀粉样肽1-40片段（Aβ1-40）在大鼠海马齿状回背侧进行微量注射以建立AD样记忆障碍的动物模型；利用改良的乙酰胆碱酯酶（AChE)组织化学方法观察大鼠海马内各亚区胆碱能纤维的变化；用免疫组织化学方法检测大鼠海马内神经元型一氧化氮合酶（nNOS)、诱导型一氧化氮合酶（iNOS)的表达。结果 大鼠双侧海马内注射Aβ1-40（μg）14d后，海马内各亚区AChe阳性纤维面积百分比显著低于对照组；海马内iNOS的表达上调，而nNOS的表达则明显降低。此外，大鼠海马各亚区内AChE阳性纤维面积百分比与iNOS细胞数存在显著负相关，丹参酮50mg/kg连续灌胃14d后，分别对上述变化有不同程度的改善作用。结论 丹参酮治疗AD样大鼠的作用机制可能民保护脑内胆碱能系统和调节NOS的表达有关。     

糖尿病大鼠病程早期视网膜蛋白激酶C对NO通路的影响

目的探讨蛋白激酶C(PKC)和一氧化氮合酶(NOS)在糖尿病早期视网膜功能改变中的作用,观察早期糖尿病大鼠视网膜内PKC对NOS表达及NO含量的影响。方法2周糖尿病大鼠玻璃体腔注射PKC抑制剂后用ELISA法测定PKC活性,用半定量RT-PCR法测定NOS mRNA表达量,间接法测定NO含量。结果糖尿病模型建立2周后视网膜内PKC活性、nNOSmRNA及NO含量均明显高于正常组(P<0·01),i NOS mRNA稍高但差异无统计学意义(P>0·05)。注射PKC抑制剂后12h、24h时nNOS mRNA含量明显降低(P<0·05),24h时NO含量亦降低P<0·01。结论PKC抑制剂可降低糖尿病早期视网膜nNOS的异常高表达。PKC影响nNOS表达可能是视网膜神经细胞功能紊乱和血管通透性增高的机制之一。     

大鼠脑创伤后一氧化氮合酶对学习和记忆功能的影响

目的：探讨神经元型一氧化氮合酶（neuronal nitric oxide synthase,nNOS）和诱生型一氧化氮合酶（inducible nitric oxidesynthase,iNOS）对大鼠创伤性颅脑损伤（traumatic braininjury,TBI）后空间学习和记忆的影响及7-硝基吲哚（7-nitroindazole,7．NI）和氨基胍（aminoguanidine,AG）的治疗作用。方法：将250只Wistar大鼠随机分成5组,按照Marmarou方法造成大鼠重型弥漫性TBI,免疫组化检测海马CA1区nNOS和iNOS表达情况,原位细胞DNA断裂检测（TUNEL）法检测海马CA1区凋亡细胞,采用Morris水迷宫测试各组大鼠的空间学习和记忆情况。结果：大鼠TBI后海马CA1区存在nNOS和iNOS明显表达,nNOS在伤后6h左右达高峰（P〈0．05）,iNOS在伤后3天左右达高峰（P〈0．05）。TUNEL阳性细胞于伤后3天达高峰（P〈0．05）,伤后6h7-NI治疗组和联合治疗组与创伤组比较减少明显（P〈0．05）,伤后3天各治疗组均减少,且以联合治疗组减少最为明显（P〈0．05）。结论：大鼠TBI后学习和记忆功能下降与NOS过表达引起的神经毒性作用有关。7-NI和AG通过抑制nNOS和iNOS的活性或表达起到神经保护作用,改善了大鼠的学习和记忆功能。     

人参皂甙对内毒素休克大鼠NO/NOS系统的影响

目的：研究人参皂甙和非选择性一氧化氮合酶(NOS)抑制剂L—硝基—精氨酸(L-NNA)对内毒素休克大鼠NO／NOS系统的影响。方法：大鼠腹腔注射大肠杆菌脂多糖(LPS，10mg／kg)后随机分为对照组、LPS组、L-NNA组与人参皂甙组，观察平均动脉压(MAP)、肌酐清除率(Ccr)、肾组织NO浓度，总NOS(tNOs)、诱导型NOS(iNOS)活性与iNOS／tNOS比值以及肾组织病理变化。结果：(1)LPS组MAP及Ccr显著降低，肾组织NO增高，tNOS与iNOS活性以及iNOS／tNOS比值升高。肾间质水肿伴炎症细胞浸润，部分小管上皮细胞变性、坏死并见管型，死亡率20％。(2)L-NNA组MAP升高，但肾功能与病理损害更著，iNOS／tNOS比值较LPS组更高，死亡率达32％。(3)人参皂甙可纠正低血压，改善肾功能及病理损害，减轻肾组织NO过度升高，tNOS与iNOS活性以及iNOS／tNOS比值均较LPS组明显下降，死亡率8％。结论：L-NNA虽能阻止LPS引起的低血压，但肾功能与病理损害恶化，死亡率增加，可能与其对结构型NOS(cNOS)的抑制较iNOS更著有关；人参皂甙可维持血压，改善肾功能，维持cNOS、抑制iNOS、调节NOS亚型的特异性作用。     

缺血后处理对糖尿病大鼠脑组织 NO及 NOS 含量的影响

目的：探讨缺血后处理对糖尿病大鼠脑组织一氧化氮（ NO）及一氧化氮合成酶（ NOS）含量的影响。方法将30只Wistar大鼠（180-200 g）按随机数字表法分为空白组、缺血组和缺血后处理组。均经一次性链脲佐菌素（STZ）腹腔注射建立糖尿病大鼠模型。缺血组和缺血后处理组大鼠结扎颈总动脉,造脑缺血模型,缺血后处理组对大鼠进行缺血后处理。 HE染色观察各组大鼠脑组织形态学变化,ELISA法检测大鼠血清中NO及NOS各亚型的含量变化,同时免疫印迹（ Western blot ）法检测脑组织中NOS蛋白的表达情况。结果缺血后处理组大鼠脑组织缺损降低,神经元细胞增多,与缺血组相比,缺血后处理组iNOS明显下降,差异具有统计学意义（ P ＜0.05）,而与空白组大鼠差异无统计学意义（ P ＞0.05）。 WB结果显示,缺血后处理大鼠中iNOS的表达明显弱于缺血组（ P ＜0.05）,与空白组差异无统计学意义（ P ＞0.05）。结论缺血后处理对糖尿病大鼠脑组织具有一定的保护作用,可能是通过抑制NOS特别是iNOS的活性,达到治疗的作用。     

他罗利姆对癫痫持续状态大鼠海马的影响及脑保护作用

目的研究免疫抑制剂他罗利姆（FK506）对癫痫持续状态（SE）大鼠海马组织一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶（NOS）、丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）的影响及其脑保护作用。方法随机将162只Wistar大鼠分为癫痫组、FK506干预组、对照组各54只。采用匹鲁卡品腹腔注射制作SE模型,FK506干预组在注射匹鲁卡品之前24、1?h 2次腹腔注射FK506,对照组注射等体积生理盐水;采用比色法和羟胺法分别检测海马组织中NO、MDA含量、NOS、SOD活性;采用免疫组化法检测海马组织神经元型一氧化氮合酶（nNOS）的表达;采用HE染色观察神经元形态变化。结果与癫痫组相比,FK506干预组NO、MDA含量、NOS活性明显降低（P均＜0.01）,SOD活性在癫痫发作后12?h以内降低（P＜0.05）,在3?d之后升高（P＜0.01）;海马nNOS的表达降低（P＜0.01）,存活神经元增加。结论FK506可能通过抑制NOS/NO途径发挥抗癫痫和脑保护作用。     

一氧化氮合成酶神经化学重塑在脊髓损伤大鼠下尿路功能障碍中的机制及应用

目的 观察完全性脊髓损伤(SCI)大鼠下尿路传入神经一氧化氮合成酶(NOS)的表达及鞘内注射NOS抑制剂对SCI大鼠膀胱测压参数的影响.方法 ①选取SD大鼠24只,随机分为正常对照A组、SCI 1周组、SCI 4周组和SCI 8周组(n=6),SCI1周组、SCI 4周组和SCI 8周组大鼠横断胸10脊髓节段建立完全性SCI模型,免疫组织化学法检测各组大鼠L6～S1脊髓节段神经型NOS(nNOS)和诱导型NOS(iNOS)的表达.②另选取SD大鼠16只,随机分为正常对照B组(n=9)和损伤组(n=7),损伤组大鼠横断胸10脊髓节段建立完全性SCI模型4周后,两组大鼠分别鞘内注射0.1 mL生理盐水、1μmol nNOS抑制剂和1μmoliNOS抑制剂,观察给药前后两组大鼠膀胱测压参数的变化.结果 ①SCI 1周组和SCI 4周组大鼠脊髓后角nNOS阳性表达细胞数[(5.5±2.7)/视野和(10.3±7.9)/视野]显著大于正常对照A组[(2.0±1.5)/视野](P＜0.05),SCI 8周组大鼠脊髓前角nNOS阳性表达细胞数[(6.7±1.5)/视野]显著大于正常对照A组[(4.3±1.5)/视野](P＜0.05).②损伤组大鼠鞘内注射nNOS抑制剂后最大膀胱测压容积[(1.58±0.94)mL]显著大于给药前[(1.06±0.70) mL] (P ＜0.05).结论 脊髓水平一氧化氮可能不参与正常排尿反射过程,一氧化氮相关的神经化学递质的可塑性改变与SCI后自主排尿反射的触发有关,鞘内注射药物调节脊髓水平神经化学递质的表达为SCI后下尿路功能障碍的治疗提供了新思路.     

NOS抑制剂在内毒素休克大鼠模型中的作用

目的：探讨在内毒素休克大鼠模型中，不同类型NOS抑制剂对平均动脉压、血中NO浓度及肾功能的影响。方法：给SD大鼠腹腔注射LPS（4mg/kg)建立内毒素休克，急性肾功能衰竭大鼠模型，实验动物分为4组，对照组、LPS组，NNA组，Can组，观察指标有平均动脉压，血中NO浓度，血肌酐浓度，结果：LPS可显著降低SD大鼠的MAP，血肌酐浓度，血中NO浓度升高，该组大鼠死亡率为31．3％。L－NNA使LPS大鼠的MAP显著升高，血中NO浓度无明显升高，肾功能损害更加明显，血肌酐浓度升高更著，死亡率为45％，L－Canavanine能纠正LPS引起的低血压，肾功能损害更加明显，血肌酐浓度升高更显著，死亡率为45％。L－Canavanine能纠正LPS引起的低血压，防止LPS所致的血NO浓度升高，明显缓解LPS导致的肾功能损害，死亡率为13．3％，结论：iNOS与cNOS的表达和活性不平衡可能是内毒素休克时ARF病理生理改变的重要因素之一，NOS抑制剂均能预防LPS引起的低血压，但非特异性NOS抑制剂加重肾损伤，增加死亡率，而特异性iNOS抑制剂则能调节iNOS和eNOS之间的不平衡，保护肾功能、降低死亡率，可能是针对败血病休克的有价值的治疗方法之一。