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相似文献
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1.
壳寡糖作用后人结肠癌LoVo细胞株bcl-2、bax表达改变   总被引:3,自引:0,他引:3  
目的通过研究壳寡糖作用后人结肠癌LoVo细胞株bcl-2、bax表达改变,初步探讨壳寡糖抑肿瘤机制。方法整个实验分5组,壳寡糖终浓度分别为0mg/L(对照组)、50mg/L、100mg/L、200mg/L、400mg/L,光镜观察不同浓度壳寡糖作用后人结肠癌LoVo细胞形态学改变,并用免疫组织化学PowerVision两步法检测bcl-2、bax的表达。结果光镜下见高浓度组细胞生长较对照组稀疏,并可见较多的核碎裂、固缩、染色质边集等凋亡和坏死的形态学改变;同时随着壳寡糖浓度的升高,bcl-2表达逐渐下降,100、200、400mg/L组与0mg/L组比较有统计学差异(P<0.05);bax的表达逐渐升高,200、400mg/L组与0mg/L组比较有统计学差异(P<0.05)。结论通过调节bcl-2、bax的表达而诱使肿瘤细胞凋亡是壳寡糖抗肿瘤作用机制之一。  相似文献   

2.
目的 建立结肠癌细胞耐药模型LoVo/5-FU并初步筛选可能的耐药相关的microRNA.方法 采用5-FU浓度递增法建立人结肠癌细胞耐药模型LoVo/5-FU,观察其生长规律并绘制细胞生长曲线;用MTT法鉴定耐药细胞株耐药性并计算耐药指数(RI);用microRNA芯片技术检测耐药细胞株LoVo/5-FU与其亲本细胞株LoVo中mi-croRNA的表达谱,筛选差异表达的microRNA;用实时荧光定量PCR方法对筛选出的部分差异microRNA在耐药细胞及其亲本细胞中的表达情况进行验证.结果 LoVo/5-FU细胞与LoVo细胞相比,生长缓慢,细胞体积增大,耐药株LoVo/5-FU细胞相对于其亲本LoVo细胞的耐药倍数为8.08.microRNA芯片的结果显示,耐药株LoVo/5-FU细胞与亲本LoVo细胞比较,有10个microRNA表达上调,13个microRNA表达下调;实时荧光定量pcr的结果进一步证实mir-210、mir196a、mir-1281在LoVo/5-FU中显著上调,而let-7fmir-1228显著下调,其中mir-210在LoVo/5-FU与LoVo中的表达有明显差异.结论 LoVo/5-FU细胞株耐药性稳定,筛选获得的差异miRNA可能通过调控其靶基因而参与人结肠癌细胞对5-Fu的耐药,为进一步研究microRNA在结肠癌耐药机制中的作用奠定基础.  相似文献   

3.
他莫昔芬对结肠癌细胞株生长的抑制作用   总被引:1,自引:1,他引:0  
目的 研究他莫昔芬 (tamoxifen ,TMX)对结肠癌细胞株生长的抑制作用。方法 选用Caco 2和LoVo两种结肠癌细胞株 ,采用酸性磷酸酶法测定 1× 10 -4~ 1× 10 -9mol/LTMX并联合应用 5 氟尿嘧啶 (5 FU)时对细胞生长的抑制作用。以流式细胞仪测定细胞周期的改变及凋亡。结果 TMX对两种细胞株均有一定的抑制作用 ,且TMX对细胞生长抑制作用呈剂量依赖性。TMX +5 FU有协同作用 ,其作用较单药强。流式细胞仪检测表明与对照组相比 ,TMX组、5 FU组及联合用药组对细胞株均有不同程度的生长抑制作用。尤其是联合用药组 ,TMX可加强 5 FU的作用 ,强烈地诱导细胞凋亡 ,凋亡细胞比例为 33.2 6 % (LoVo细胞株 )和 4 5 .87% (Caco 2细胞株 )。结论 TMX可抑制结肠癌细胞株生长 ,并可加强 5 FU的作用。其机制可能是通过雌激素受体 (ER) β来诱导肿瘤细胞凋亡  相似文献   

4.
壳寡糖对肿瘤抑制作用实验研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的观察壳寡糖对肿瘤抑制作用的影响。方法采用体内注射的方法将壳寡糖注入荷瘤小鼠腹腔及瘤内,观察肿瘤生长情况及MTT比色法观察壳寡糖对肿瘤细胞的体外作用。结果壳寡糖对荷瘤小鼠肿瘤的生长有抑制作用,显微镜观察显示肿瘤组织出现坏死;壳寡糖对肿瘤细胞生长有抑制作用,其抑瘤率与浓度有关,与时间无关,细胞经壳寡糖作用后,透射电镜显示细胞有凋亡趋势。结论壳寡糖可抑制肿瘤生长,同时壳寡糖可能诱导肿瘤细胞凋亡。  相似文献   

5.
目的:探讨西咪替丁对体外培养的人结肠癌细胞株LoVo的抑制和诱导细胞凋亡的作用.方法:采用MTT比色法、流式细胞术、形态学观察和TUNEL法检测不同浓度的西咪替丁溶液处理LoVo细胞后的生长状况、形态学、分子生物学改变.结果:西咪替丁可抑制LoVo细胞的增殖,且有剂量依赖性的趋势:1×10-2mol/L西咪替丁处理LoVo细胞48h后,在光镜、电镜检测中,可见典型的凋亡细胞;流式细胞术检测凋亡率为32.7%,bcl-2相关蛋白表达率为36.74%;TUNEL法进一步从分子生物学角度证实凋亡的发生.结论:西咪替丁对结肠癌细胞LoVo有抑制作用,主要机制为诱导其发生凋亡,凋亡发生的原因与西咪替丁可下调bcl-2蛋白的表达有关.  相似文献   

6.
目的:共刺激细胞是一种对肿瘤细胞有杀伤作用的 NK样T细胞,既往研究表明羽扇豆醇作为一种天然植物提取物,能改变NK细胞、γδT细胞的生长及其对肿瘤细胞的作用。文中主要探讨羽扇豆醇对人共刺激细胞杀伤结肠癌细胞株 SW480的影响。方法取健康人外周血单个核细胞在体外经多种细胞因子诱导为共刺激细胞;不同浓度的羽扇豆醇在作用于共刺激细胞及结肠癌细胞株不同时间段后,甲基偶唑蓝( MTT)法检测羽扇豆醇对共刺激细胞及结肠癌细胞株 SW480生长的影响;乳酸脱氢酶( LDH)法检测共刺激细胞对结肠癌细胞株SW480的杀伤活性。结果羽扇豆醇浓度在0.1~200.0μg/mL时对共刺激细胞的生长有促进作用,对结肠癌细胞株SW480有抑制作用;羽扇豆醇诱导后,共刺激细胞对SW480的杀伤活性增强,浓度为12.5 mg/L时与空白对照比较的差异有统计学意义(76%vs 40%, P<0.05)。结论羽扇豆醇能促进共刺激细胞的增殖,抑制结肠癌细胞株SW480的生长,并能增加SW480对共刺激细胞的敏感性,增强共刺激细胞对SW480细胞株的杀伤能力。  相似文献   

7.
目的评价灵芝三萜组分GLA的体内外抗肿瘤活性。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法体外检测GLA对多种肿瘤细胞株的生长抑制作用;建立小鼠H22肝癌移植瘤模型,小鼠S180肉瘤移植瘤模型和人结肠癌Colon26裸小鼠移植瘤模型,评价GLA的体内抗肿瘤活性。结果 GLA对人肝癌细胞株SMMC-7721、人早幼粒白血病细胞株HL60和人Burkitt淋巴瘤细胞株CA46有较强抑制作用,IC50分别为为0.50,0.52,0.53 mg/mL,对人肝癌细胞株HepG2、人结肠癌细胞株SW480、人慢性粒细胞白血病细胞株K562和人胃癌细胞株SGC-7901也有一定的抑制作用,IC50分别为0.70,0.82,0.85 mg/mL和0.97 mg/mL,对人肺腺癌细胞株SP-CA-1和人恶性神经母细胞瘤株SH-SY5Y基本无抑制作用;体内实验表明,GLA在高剂量2 g/kg对小鼠H22肝癌细胞、小鼠S180肉瘤细胞及裸小鼠Colon26结肠癌细胞生长有一定抑制作用,其抑瘤率分别为65.6%,50.1%和46.5%。结论体内外试验均表明灵芝三萜组分GLA有较强的抗肿瘤作用。  相似文献   

8.
徐康  范钰  林庚金  钱立平  黄富春 《上海医学》2002,25(10):642-644
目的 探讨羟基喜树碱治疗结肠癌LoVo细胞的作用机制。方法 应用四唑盐比色试验、琼脂糖凝胶电泳、DNA末端原位标记染色法研究羟基喜树碱对结肠癌LoVo细胞生长及诱导凋亡的作用,采用Western Blot法分析羟基喜树碱处理结肠癌细胞前后bcl-2、p53基因的表达情况。羟基喜树碱对结肠癌LoVo细胞生长具有较强的抑制作用,可诱导结肠癌细胞凋亡,且其凋亡一浓度及时间依赖性。羟基喜树碱处理结肠癌LoVo细胞后,bcl-2基因表达下降,p53基因表达上升。结论 羟基喜树碱可诱导结肠癌细胞凋亡,可能与下凋bcl-2基因及升高p53基因表达有关。  相似文献   

9.
唐一帆  蔡端 《上海医学》2006,29(4):242-244,F0003
目的研究他莫昔芬对结肠癌细胞株LoVo的促凋亡作用及其机制。方法采用流式细胞仪测定他莫昔芬对结肠癌细胞株LoVo的促凋亡作用。采用免疫印迹法测定雌激素受体(ER)在结肠癌细胞株LoVo中的表达及他莫昔芬对生存素表达的影响。结果流式细胞仪检测显示,1×10-6、1×10-5、1×10-4mol/L浓度的他莫昔芬作用于LoVo 48 h后的凋亡率分别为59.24%、17.01%和7.33%。1×10-4和1×10-5mol/L他莫昔芬组的凋亡率与对照组的显著有差异性(P<0.01)。结肠癌细胞株LoVo中,ERβ有高表达,而ERα没有表达。进一步研究发现,他莫昔芬引起LoVo细胞生存素表达降低,而5-氟尿嘧啶(5-FU)对生存素表达没有影响。结论他莫昔芬有显著诱导LoVo细胞凋亡的作用,其促凋亡机制可能是以ERβ为靶点使人结肠癌细胞株LoVo的生存素表达下降。  相似文献   

10.
目的研究华蟾素对人结肠癌细胞株SW480细胞生物学行为的影响。方法采用华蟾素(0.01mg/L、0.1mg/L、1mg/L)干预SW480细胞,MTT实验检测细胞增殖能力的改变,流式细胞术检测细胞凋亡比例变化,Transwell小室实验观察药物作用前后细胞侵袭能力的改变。结果华蟾素对SW480细胞有显著的增殖抑制作用,且呈现浓度和时间依赖性,经药物作用的细胞凋亡比例显著增高,侵袭能力明显下降。结论华蟾素能抑制结肠癌细胞增殖,诱导其凋亡,具有一定的临床应用前景。  相似文献   

11.
目的通过体内外实验检测六肽分子HP-10的细胞内转导能力和抗LoVo细胞增殖活性。方法MTT法观察75、37.5、18.75μmol/LHP-10对人结肠癌LoVo细胞增殖的影响,运用激光共聚焦显微术和流式细胞仪分别检测HP-10的LoVo细胞内转导能力以及对LoVo细胞周期和凋亡的影响;建立LoVo细胞裸鼠皮下移植瘤模型,验证750、375、75μmol/LHP-10在体内的抗结肠癌生长作用。结果75、37.5、18.75μmol/LHP-10对LoVo细胞体外增殖有明显的抑制作用,且呈剂量依赖性抑制(P<0.05);HP-10能直接跨膜进入LoVo细胞并促进LoVo细胞凋亡发生,但对其周期无明显影响;在结肠癌模型上HP-10能显著地抑制肿瘤生长(P<0.05)。结论HP-10是一种无需穿膜肽引导可直接进入细胞的寡肽,在体内外对LoVo细胞具有明显的抑制生长作用,这种作用是通过诱导细胞凋亡产生的。  相似文献   

12.
马强  张方信  康生朝  陈嘉屿 《医学争鸣》2006,27(15):1399-1402
目的:观察在阿霉素诱导大肠癌LoVo细胞产生多药耐药过程中,端粒酶逆转录酶基因表达,明确端粒酶是否参与了多药耐药机制. 方法:采用阿霉素浓度递增法,建立人大肠癌细胞多药耐药模型LoVo/Adr;用MTT法鉴定耐药LoVo/Adr细胞的耐药性;以流式细胞术检测其周期分布;用RT-PCR方法检测hTERT mRNA水平在诱导耐药过程中的变化. 结果:历经8 mo 、传代67次连续培养,建立了人大肠癌耐药模型LoVo/Adr细胞株;LoVo/Adr对阿霉素、长春新碱、丝裂霉素、环磷酰胺和5-氟尿嘧啶耐药倍数分别是61倍、14倍、3倍、9倍和1倍;LoVo/Adr细胞与LoVo细胞相比,S期细胞减少,而G1, G2期增多;亲本LoVo细胞的hTERT mRNA呈低水平表达,在阿霉素诱导初期即显著增高,随后基本保持高表达状态,并不随着耐药性增加而增强. 结论:耐药株LoVo/Adr是一个典型的具有多药耐药性表型的耐药模型,端粒酶参与了其耐药机制.  相似文献   

13.
目的观察榄香烯对人脑胶质瘤U251细胞放射敏感性的影响。方法应用MTT法检测不同浓度榄香烯对人脑胶质瘤U251细胞的增殖抑制率。采用榄香烯单独或联合放射线作用于脑胶质瘤U251细胞,用集落形成实验和单击多靶模型拟合细胞存活曲线,获得放射增敏比;应用流式细胞技术分析榄香烯对U251细胞凋亡率的影响。结果榄香烯可抑制脑胶质瘤U251细胞的增殖,且与浓度相关;97.86μmoL和195.72μmoL榄香烯分别作用脑胶质瘤U251细胞24 h后,联合放射的放射增敏比(SER)分别为1.179和1.429;195.72μmoL榄香烯分别作用脑胶质瘤U251细胞3 h和6 h后,联合放射的SER分别为1.139和1.356;流式细胞仪分析表明榄香烯作用24 h后,随着榄香烯浓度的增加,U251细胞凋亡率越高,比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论榄香烯能够抑制人脑胶质瘤U251细胞的增殖,并有放射增敏作用,且放射增敏作用的大小与药物作用浓度及作用时间有关系。  相似文献   

14.
[目的 ]探讨体外细胞培养制备微核模型的环磷酰胺的适宜剂量 ,为以后的抗突变物质的功能评价提供依据 .[方法 ]进行体外淋巴细胞培养的微核实验 .[结果 ]不同浓度 (2 5,5 0 ,10 0 ,2 0 0mg/L)的环磷酰胺对淋巴细胞导致的微核率和微核分布有不同的影响 ,较低浓度时具有致微核率升高的性质 ,较高浓度的环磷酰胺除具有致突变作用外 ,还能显著地抑制细胞的分裂和生长 .[结论 ] 5 0mg/L的环磷酰胺是细胞培养致突变实验的适宜剂量  相似文献   

15.
Thegrowthofleukemiainsemisolidcultureinvitrowasdependentonthepres-enceofexogenousserum.Serumisamix-turecontaininglargenumberofunidentifiedchemicalcomponentsandunidentifiedbio-logicallyactivesubstances[1],whichprovidethenutrientsnecessaryforthecellgro…  相似文献   

16.
目的 探讨人参皂苷Rg3对人结肠癌LoVo细胞迁移和侵袭能力的影响.方法 通过四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定不同浓度Rg3对LoVo细胞增殖的影响,并确定用于研究抑制LoVo细胞迁移和转移功能作用的Rg3浓度和作用时间.设置空白对照组及Rg3实验组(5、10、20、30、40、50μmol/L),通过划痕试验,对LoVo细胞划痕加药处理24 h后,观察不同浓度Rg3对细胞迁移的影响.采用Transwell法观察不同浓度Rg3对细胞侵袭的影响.采用Western blot检测不同浓度Rg3对CD44、基质金属蛋白酶2(MMP2)、基质金属蛋白酶抑制剂2(TIMP2)、E-cadherin和β-catenin表达水平的影响.结果 MTT结果显示:0~30μmol/L Rg3处理LoVo细胞24 h对其生长无明显影响.随Rg3作用时间的延长和浓度的增加,Rg3对LoVo细胞抑制作用逐步增强.划痕试验和Transwell试验表明:Rg3浓度增加,对LoVo细胞迁移及侵袭能力抑制作用增强,浓度达15μmol/L以上时,Rg3对实验组有显著抑制作用.Western blot检测表明Rg3浓度的升高,伴随CD44、MMP2蛋白表达水平下降,TIMP2表达上升,但E-cadherin和β-catenin蛋白表达水平无明显改变.结论 人参皂苷Rg3对人结肠癌LoVo细胞迁移和转移能力有抑制作用,其抑制作用具有时间和浓度依赖性.  相似文献   

17.
目的 探讨丙泊酚对不同分化程度人结肠癌细胞体外增殖、迁移及肿瘤细胞中Wnt1、β-catenin mRNA表达的影响。 方法 选取2株分化程度不同的人结肠癌细胞株Caco-2(高分化)和LoVo(低分化),分别按丙泊酚浓度分为P0(0 μg/mL)、P6.25(6.25 μg/mL)、P25(25 μg/mL)、P100(100 μg/mL)组,CCK-8法检测丙泊酚对Caco-2和LoVo细胞生长增殖的影响,Transwell迁移实验检测丙泊酚对Caco-2和LoVo细胞迁移的影响,比较不同分化程度结肠癌细胞对丙泊酚的敏感性。Real-time PCR检测丙泊酚处理后Caco-2和LoVo细胞中Wnt1和β-catenin基因mRNA的表达。 结果 CCK-8检测结果显示,对于高分化Caco-2细胞,P100组处理24 h与P0组相比细胞存活率差异有统计学意义(P<0.001),P25组处理48 h与P0组相比,差异有统计学意义(P<0.05);对于低分化LoVo细胞,P100组处理24 h与P0组相比,细胞存活率差异有统计学意义(P<0.05),P25组处理48 h与P0组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。Transwell迁移实验结果表明,Caco-2细胞系P6.25、P25、P100组与P0OD570 nm值比较,差异有统计学意义(P<0.001);LoVo细胞系P25、P100组与P0OD570 nm值比较,差异有统计学意义(P<0.001)。Real-time PCR结果表明,Caco-2细胞系P25、P100组与P0组Wnt1 mRNA表达差异有统计学意义(P<0.05),LoVo细胞系P25、P100组与P0组Wnt1 mRNA表达差异有统计学意义(P<0.001);Caco-2细胞系P25、P100组与P0组β-catenin mRNA表达差异有统计学意义(P<0.001),LoVo细胞系P100组与P0组β-catenin mRNA表达差异有统计学意义(P<0.001)。 结论 丙泊酚呈剂量和时间依赖性抑制人结肠癌细胞Caco-2和LoVo的生长增殖及迁移。Caco-2较LoVo对丙泊酚的抑制作用更敏感。  相似文献   

18.
Objective:To investigate the association of the transportation characteristics of nolatrexed in tu-mor cells with its drug sensitivity. Methods: The sensitivity of 3 tumor cell lines, C6, SRS82 and LoVo, to nolatrexed were determined by growth inhibition study. After exposure to 20μmol/L nolatrexed at different time intervals ranging from 0 to 30 rain, or to nolatrexed at different concentrations ranging from 0 to 40μmol/L for 10 min, the intracellular drug concentration was measured using high-performance liquid chro-matography. Results: C6 was the most sensitive cell line among the three, with sensitivity 6.8-fold and 13.8-fold those of SRS-82 and LoVo cells respectively. Transportation of nolatrexed in the 3 cell lines were qualitatively similar, which rapidly achieved steady-state within 5 min, and linear relationship between the in-tracellular and extracellular drug concentration was observed. The intracellular steady-state level achieved in C6 was significantly higher than those in the other two cell lines, the latter having comparable levels. Con-clusion: Nolatrexed enters the cell very quickly and different transport capacities are involved in the genera-tion of varied sensitivity to nolatrexed in tumor cells.  相似文献   

19.
目的 观察子宫颈癌HeLa细胞中PMS2的表达及化疗药物对其的影响.方法 通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)法及逆转录基因扩增(RT-PCR)的方法检测化疗药物顺铂(CDDP)对HeLa子宫颈癌细胞株细胞生长的影响,并选择最佳浓度观察其基因表达水平的变化.结果 顺铂对于HeLa细胞的生长具有明显的抑制作用,并与药物浓度相关,尤其是在10 mg/L的浓度培养24 h后最为明显,细胞生长率为68.2%.在此药物浓度培养下,HeLa细胞生存能力明显下降,同时PMSz基因表达水平明显上调(P<0.01).结论 PMS2可能参与子宫颈癌的发生、发展及转移过程,对于子宫颈癌的早期诊断以及化疗药物疗效及预后的判断有一定的意义.  相似文献   

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