检测肾综合征出血热血清IgM的ELISA捕捉一步法的建立及初步应用

目的 :建立一种快速、简便、敏感 ,适合医院和基层门诊应用的检测肾综合征出血热血清特异性IgM的方法。 方法 :以羊抗人 μ链为包被抗体 ,以辣根过氧化物酶 (HRP)标记的抗 -HFRS病毒特异性单克隆抗体 (McAb)与HFRS病毒抗原(Ag)结合成复合物为指示标记物 ,建立了检测HFRS血清特异性IgM的ELISA反向捕捉一步法。 结果 :整个试验过程仅需1h ,操作简便。用该法与山东省淄博市生产的ELISA二步法试剂盒对比检测HFRS血清 6 0份 ,两法均为阳性 5 4份 ,均为阴性 3份 ,总符合率 95 %。结论 :ELISA捕捉一步法快速、简便、敏感 ,适合医院和基层门诊应用 ,可用于HFRS的早期诊断及流行病学研究     

改良木瓜酶-抗痛素法对Rh血型4份弱抗体特异性的检测分析

传统的木瓜蛋白酶技术有两种方法，即一步法和两步法。一步法操作简便，但灵敏性差；两步法灵敏性高，但操作繁琐、费时。鉴此，我们对两步法进行了改进，并应用改良木瓜酶一抗痛素抑制剂技术检测Rh血型系统4份弱抗体．获得明确结果，现报告如下。     

双抗体夹心一步法及两步法测HBsAg的结果分析

目的分别用双抗体夹心一步法及两步法检测200份慢性乙肝患者标本（亦作为阳性对照标本）及临床随机体检标本372份和186份排除乙肝病毒感染的阴性对照标本,并对结果进行分析比较,以寻找一种更适合基层医院的最简便快速价廉的方法。结论根据2种方法的检测结果对双抗体夹心一步法及两步法测HBsAg的结果及方法进行比较后本人认为对于HBeAg阴性的标本,用一步法和两步法检测HBsAg的结果是完全吻合的;而对于极少数皿BeAg阳性珈BsAg阴性的标本可用两步法检测HBsAg,以排除是否HBsAg浓度过高的“帚现象”引起的假阴性亦即钩镰效应。     

免疫组化标准化染色操作

免疫组化技术在病理诊断、基础医学研究工作中已成为非常重要的手段。随着免疫组化试剂出现及方法的改进,特别是即用型试剂盒的出现,使抗体的标记更加简便、快捷、规范化。但是由于它是一个多步骤、多因素决定的一种实验方法,由于各实验室采用的修复方法、染色方法、试剂厂家、抗体克隆号、检测系统等有所不同,染色结果会出现较大差异。建立标准化的染色程序,改善和提高免疫组化实验的可靠性,使免疫组化技术更具标准化,免疫     

ELISA一步法与TPPA法检测梅毒螺旋体抗体应用分析

目的 探讨酶联免疫吸附实验(ELISA)一步法与梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)检测梅毒螺旋体抗体的优劣.方法 对2007年1月至2009年3月的51 065份血清标本分别进行TPPA法和ELISA一步法检测,并对检测阳性不一致的标本采用稀释法进行ELISA检测.结果 TPPA法检测梅毒螺旋体抗体阳性1 152例(2.26%),ELISA一步法检测阳性1 117例(2.19%),差异无统计学意义(P>0.05),但ELISA一步法检测出现灰区标本35例经TPPA法复查和倍比稀释后用ELISA法检测结果均为阳性,确证阳性率为100%.结论 TPPA法检测梅毒螺旋体抗体能避免ELISA一步法引起的前带现象,并且对ELISA一步法检测梅毒螺旋体抗体时出现的灰区标本进行TPPA法复查,可提高梅毒螺旋体抗体检出率.     

一种改良NaIO_4标记法应用于HRP-IgG及其在GSH-Px研究

谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)是体内一种重要的抗脂质过氧化物酶,近年来,免疫酶技术在研究GSH-Px细胞内分布、代谢等方面得到广泛应用。这种技术需要重复性好,效果优良的标记法和高效稳定的酶标抗体。传统的辣根过氧化物酶(HRP)标记抗体的过碘酸钠法(Nakane法),酶活性显著下降和IgG-HRP大分子聚合物的形成,影响了GSH-Px抗原抗体反应的敏感性,为克服这一缺陷,木文采用一种新的HRP标记IgG过碘酸钠法,将标记物用于GSH-Px的酶联免疫吸附测定(ELISA)法、免疫组化及免疫电镜研究,取得满意结果。     

联合Zenon标签技术和显微映像分析研究正常人和银屑病患者表皮细胞

背景:一种新的标记Zenon技术能和荧光免疫组化标记技术联合以更好的呈现银屑病患者和正常人的表皮细胞特征,Zenon技术可与一抗大量快速共价结合。标化法数字显微映像分析角蛋白10和角蛋白6(分化),Ki-67抗原(增殖)和角蛋白15和β-1整联蛋白(基底层)的表皮表达及不同蛋白的协同表达。方法:免疫组化法比较正常皮肤和银屑病皮损。Zenon技术标记角蛋白6,10,15抗体,异硫氰酸荧光素共价标记Ki-67抗原和β-1整联蛋白抗体。使用标准化映像分析,测量表皮不同抗体的强荧光区域。结果:银屑病皮损区Ki-67抗原表达显著增强,而和正常皮肤比较角蛋白10和…     

AMACR、34βE12双重免疫组化标记在前列腺癌诊断中的应用

目的:通过与α-甲酰辅酶A消旋酶(AMACR)、34βE12抗体单独免疫组化染色效果对比,评估AMACR/34βE12混合双重免疫组化标记对前列腺癌(PCa)的诊断价值.方法:31例前列腺标本,包括PCa 18例、良性前列腺增生(BPH)10例和正常前列腺标本3例;4 μm连续切片,分别行AMACR、34βE12抗体单独免疫组化标记以及AMACR/34βE12双重免疫组化标记,比较单独及双重标记结果.结果:所有PCa标本中34βE12单独及双重免疫组化标记均为阴性,而在BPH和正常前列腺中均为阳性.PCa中AMACR单独免疫组化标记的阳性率为88.9%,而在双重免疫组化标记中AMACR阳性率为94.4%.单独应用AMACR免疫组化标记和双重免疫组化标记对诊断PCa无显著差异.结论:应用AMACR/34βE12双重免疫组化标记对诊断PCa具有一定的临床意义,当标本量少以及病变部位细小局限时尤为重要.     

量子点对膀胱癌BIU-87细胞抗原的标记检测

目的:探讨不同的量子点免疫荧光组织化学方法对膀胱癌BIU-87细胞抗原特异性标记的效果,以优化细胞标记方法。方法:分别采用量子点免疫荧光组织化学三步法、二步法、一步法检测前列腺干细胞抗原(PSCA)在膀胱癌BIU-87细胞中的表达情况,观察并分析三种方法特异性标记的效果。结果:PSCA特异性的表达于BIU-87细胞胞质或膜,三种方法在紫外光激发下均能观察到表达部位明显的红色荧光,三步法实验技术成熟,量子点标记的链霉亲和素性质稳定,检测灵敏度高,背景清晰,但实验步骤繁琐,耗时较长,不宜用于活细胞标记;二步法实验步骤和操作时间都相对有所减少,但量子点标记的二抗性质不稳定,非特异吸附较强;一步法操作简便,省时,标记效果明显,特异性强,但是标记一抗成本较高,且对一抗的剂量要求较大。结论:三种量子点荧光标记方法均能对固定细胞表面抗原进行特异性标记,需根据不同实验需求选择合适的标记方法以达到最佳实验效果。特异性一步法量子点荧光标记在活细胞及活体靶向成像示踪中具有巨大的应用前景。     

常规石蜡切片免疫组织化学双标记染色

作者用铁蛋白抗体和α_1-抗胰糜蛋白酶抗体,S-100蛋白抗体和α_1-抗胰糜蛋白酶抗体,对恶性组织细胞增生症瘤组织常规石蜡切片的免疫组化双标记染色进行了探讨。实验步骤简单,结果明确,是一种较为理想的免疫酶双标记染色。