低氧预适应对自体原位肝移植大鼠肠黏膜损伤的影响

目的 研究低氧预适应时肝移植大鼠肠黏膜损伤的影响.方法 建立SD大鼠自体原位肝移植模型,随机分为3组,A组:低氧预适应自体原位肝移植组(n=40),B组:自体原位肝移植组(n=40);C组:假手术组(n=8).A、B组均在术后1、6、12、24和48 h各取8只处死,取小肠组织做MDA检测,HE染色切片观察显微结构的变化,电镜观察超微结构的变化,免疫组织化学染色切片应用Mi Vnt显微图象分析系统观察肠组织IgA浆细胞数量的变化.结果 A组术后各时段肠黏膜损伤较B组术后相应时段轻,C组变化不明显.结论 低氧顸适应对大鼠无肝期肠道淤血性缺氧诱导的肠道黏膜损伤有保护作用.     

供体肝缺氧时间对肝移植大鼠生存率的影响

目的: 研究肝移植围手术期的缺氧损伤对肝移植大鼠生存率的影响.方法: SD大鼠随机分为4组,对照组:不进行低氧处理的原位肝移植组;A组:50只,供肝大鼠先进行10 min的低氧适应后在低氧处置下按传统的Kamada法行供肝切取;B组:40只,低氧处置同A组,但供肝切取按改进的取肝法,即不过度游离肝动脉,于灌肝后离断肝动脉.C组:15只,假手术组.观测各组大鼠手术后24 h和1 w的生存率.结果: 在低氧条件下,采用改进的快速取肝法手术的B组与采用常规的Kamada取肝法的A组大鼠相比,B组大鼠供肝切取时间显著缩短,一周生存率明显提高,但仍低于对照组的一周生存率.结论: 肝移植大鼠一周存活率与供肝的实际热缺血时间呈负相关.肝移植围手术期中各种因素引起的肝脏缺氧是导致供肝实际热缺血损伤的主要原因.     

不同体积大鼠原位肝移植的试验研究

目的探讨三种不同体积(100%、50%和30%)大鼠原位肝移植术后生存时间,肝功能变化等情况。评估移植物体积对于大鼠原位肝移植的影响。方法建立100%、50%和30%体积的大鼠原位肝移植模型,观察术后生存时间,术后肝功能改变及肝脏组织病理改变。结果术后14d生存率分别为:85%、70%和10%。术后肝功能变化表明30%肝移植组术后损伤较重。病理显示50%及30%肝移植组术后肝脏损害严重,30%组尤为明显。结论移植物的体积对于术后存活率具有明显影响,但外科技术的改进可能提高小移植物受体的术后存活率。     

受体来源转染pBLAST2-hHGF质粒肝卵圆细胞对大鼠移植肝肝功能的影响

目的 观察受体来源转染pBLAST2-hHGF质粒肝卵圆细胞(HOC)对受体大鼠术后肝功能的影响.方法 二袖套法复制大鼠原位肝移植模型.实验分对照组(A组)、HOC移植组(B组)、pBLAST2-hHGF/HOC移植组(C组),每组均设受体大鼠60只,A组仅行原位肝移植术,B组术中供肝种植HOC悬液,C组术中供肝种植pBLAST2-hHGF/HOC悬液.动态观察各组大鼠术后的中位生存时间(MST)、肝功能(ALT、DBil、GGT、ALP、XCHE和ALB).结果 A组术后MST明显短于B组和C组,而B组又短于C组;B组和C组大鼠术后肝细胞受损情况弱于A组(P＜0.05),合成功能和排泄功能好于A组(P＜0.05),上述肝功能指标,C组要好于B组(P＜0.05).结论 使用受体来源pBLAST2-hHGF/HOC在移植肝脏内进行种植,可以有效改善移植肝脏的肝功能,并且明显延长受体的术后中位生存时间.     

HIF-lα、VEGF在移植肝肝内胆管上皮细胞的表达及其意义

目的:低氧预适应可使重要脏器对缺血缺氧产生耐受,是一种内源性保护现象.文中探讨低氧诱导因子-lα(HIF-lα)和血管内皮生长因子(VEGF)在移植肝肝内胆管上皮细胞的表达情况及引起移植肝胆管并发症的因素.方法:建立大鼠自体肝移植模型,AT组为自体肝移植,HP组为低氧预适应后行自体肝移植,并设正常对照组.于术后6、12、24、48h取材,光镜下观察胆管上皮细胞的病理变化,免疫组织化学法检测各组胆管上皮细胞HIF-lα、VEGF的表达情况. 结果:光镜下与HP组相比,AT组胆管上皮细胞损伤严重,细胞排列缺失明显,炎性细胞浸润增加;各组胆管上皮细胞均有HIF-lα、VEGF的表达,其中HP组表达最强. 结论:HIF-lα、VEGF可能参与了低氧预适应对移植肝肝内胆管上皮细胞的保护作用.     

mdr-1基因骨髓造血干细胞移植诱导大鼠肝移植免疫耐受

目的 探讨mdr-1基因骨髓造血干细胞移植诱导肝移植术后免疫耐受的可行性及其可能机制.方法 选用雄性Wistar大鼠30只为肝移植供体,另选雌性SD大鼠20只为异基因肝移植受体,随机分为mdr-1基因骨髓造血干细胞移植联合肝移植组(A组)和单纯肝移植组(B组).雌性Wistar大鼠10只为同基因肝移植受体(C组).比较A、B两组大鼠肝移植术后1周生存率、生存状况、生存时间,以及移植肝脏的病理变化.结果 C组大鼠生存时间均达60 d以上,A组为(31.2±4.9)d,明显高于B组[(12.1±4.7)d],差异有统计学意义(P<0.05).B组病理组织切片可见中、重度急性排斥反应,肝内单核细胞浸润较为明显,主要集中在汇管区;A组移植肝内组织损伤程度明显减轻;C组基本无排斥反应,接近正常肝组织.结论 mdr-1基因骨髓造血干细胞可明显减轻大鼠肝移植后免疫排斥反应.     

血清透明质酸在大鼠肝脏低温保存-灌注损伤中的作用

目的 :探讨血清透明质酸 (hyaluronic acid,HA )浓度与肝脏低温保存 -灌注损伤的关系。方法 :在成功建立大鼠原位肝移植模型的基础上 ,将实验动物分为 3组 :(1)对照 (A)组 ;(2 )低温保存 2 h后移植 (B)组 ;(3)低温保存 4h后移植 (C)组。分别在术后 2、4h取血清和肝脏标本检测 HA及部分肝功能指标 ,并进行病理观察。 结果 :移植后血清 HA水平比传统的肝功能指标如乳酸脱氢酶 (L DH)、天冬氨酸转氨酶 (AST)升高早 ,下降快。在 B组和 C组 ,血清 HA水平明显升高 ,与 A组相比差异显著 (P<0 .0 1)。B组和 C组可见血管内皮细胞损伤、肝窦和肝小叶结构紊乱。C组移植后 4h标本炎细胞浸润明显。结论 :肝脏低温保存导致明显的内皮细胞损伤 ,再灌注后损伤加重。血清 HA水平可反映冷缺血 -再灌注损伤的程度     

辅助性肝移植门静脉动脉化治疗大鼠急性肝功能衰竭的实验研究

目的 探讨门静脉动脉化异位辅助肝移植对大鼠急性肝功能衰竭的治疗作用和肝动脉血供对移植肝早期功能的影响。方法 将切除85％肝脏的急性肝功能衰竭大鼠随机分为三组：A组（n=20)，异位辅助肝移植门静脉动脉化加肝动脉血供建立；B组（n=20)，异位辅助肝移植门静脉动脉化；C组（n=10)，为对照组。观察肝衰组和移植组大鼠生存情况、肝功能变化、残肝和移植肝病理结构改变以及肝动脉血供对移植肝早期功能影响。结果 A组和B组大鼠2周生存率分别是85．7％和64．3％，C组大鼠48h存活率为0。移植肝再灌注后，A组胆汁分泌率比B组明显增高（P＜0．05），术后2周内，A组血清ALT、GGT、Tbil值显著降低（与B组比较，P＜0．05）。移植术后14天，A组和B组残肝细胞都明显增生，肝功能恢复正常，而移植肝开始萎缩，肝细胞变性，汇管区有淋巴细胞浸润。结论 辅助肝移植门静脉动脉化为急性肝功能衰竭提供了有效的支持作用，使原肝再生，肝功能恢复正常，而移植肝逐渐萎缩丧失功能。在大鼠辅助肝移植中，肝动脉血供有助于改善移植肝早期功能，防止术后胆道并发症的发生。     

MDR-1基因骨髓造血干细胞移植抑制大鼠肝癌移植术后复发的研究

目的探讨MDR-1基因骨髓造血干细胞移植对大鼠肝移植术后复发转移的影响。方法选用雄性Wistar大鼠30只为肝移植供体,另选雌性SD大鼠30只为异基因肝移植受体(将HCCLM6肿瘤组织原位接种于大鼠肝脏,10 d后行肝移植,2周后处死大鼠)随机分为两组,A组MDR-1基因骨髓造血干细胞移植联合肝移植组,B组为单纯肝移植组。比较两组大鼠肝移植术后2周生存率、肝内复发和肝外转移情况。结果术后两周,A组大鼠存活14只,B组存活10只(P<0.05)。两组大鼠肝内复发率均为100%,但复发瘤大小差异有统计学意义(P<0.05),A组为(323.23±29.56)mm3,B组为(692.73±142.56)mm3。A组肺转移率为22%,B组为70%,A组淋巴结转移率为15%,B组为50%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 MDR-1基因骨髓造血干细胞移植对大鼠肝移植术后复发转移有一定抑制作用。     

脑死亡对大鼠肝移植后早期移植肝损伤的影响

目的:探讨脑死亡状态对大鼠供肝肝移植后早期肝脏损伤的影响.方法:Wistar大鼠80只随机分为活体大鼠供肝肝移植组(L组)和脑死亡大鼠供肝肝移植组(B组).L组仅建立活体大鼠供肝的二袖套法原位肝移植模型,B组供体大鼠建立脑死亡模型后切取供肝行二袖套法原位肝移植.监测脑死亡模型建立过程中大鼠血压和心率变化,观察肝移植术后受体6 h、24 h存活率,检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、透明质酸(HA)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,电镜观察肝脏形态变化,TUNEL法测定肝组织细胞凋亡情况.结果:B组供体大鼠脑死亡模型建立后血压和心率与L组比较,差异有统计学意义(P=0.001.L组和B组6 h和24 h生存率差异无统计学意义(P＞0.05).与L组比较,B组ALT、AST、TNF-α和HA水平均升高(P＜0.05),肝细胞形态学损伤重、凋亡率高(P＜0.05)、Kupffer细胞显著活化.结论:供体脑死亡可以加重脑死亡供肝移植后早期肝脏损伤,其机制可能和脑死亡供体血压、心率的改变以及Kupffer细胞的活化有关.     

纳洛酮提高肝移植大鼠术后存活率的研究

目的观察纳洛酮对大鼠全肝及部分肝移植术后成活率的影响。方法建立全肝原位肝移植大鼠模型60只,随机分为A组和B组;部分肝移植大鼠模型60只,随机分为c组和D组。A组和C组模型大鼠术后（关腹前）腹腔内滴注纳洛酮0．2mg／kg,观察每组大鼠术后苏醒时间及1、3、7、15d的存活率。结果A组（与B组比较）和c组（与D组比较）大鼠的苏醒时间均明显减少,术后3、7、15d的成活率均明显提高。结论纳洛酮可有效提高全肝及部分肝移植大鼠肝移植大鼠术后的成活率。     

大鼠小体积肝移植肝动脉重建的意义探讨

目的:探讨肝动脉重建在大鼠小体积肝移植中的意义?方法:采用改良二袖套法建立大鼠40%小体积肝移植模型,实验分动脉重建组和动脉未重建组,观察1周生存率,并于术后1?2?4?7天检测肝功能?移植肝组织学变化和免疫组化法检测肝细胞的增殖细胞核抗原(PCNA)?结果:动脉重建组1周生存率为66.7%,动脉未重建组1周生存率为50.0% (P > 0.05)?丙氨酸氨基转移酶(ALT)和总胆红素(TB)术后第1天即开始明显增高,第2天达高峰,以后逐渐降低,动脉未重建组和动脉重建组各时间点相比较,TB第2?7天高于动脉重建组,ALT第2?4天高于动脉重建组,差异有显著性(P < 0.05)?动脉重建组术后中央静脉及肝窦扩张程度相对较轻,可见较多二倍体和多倍体肝细胞?PCNA表达于术后第2天最高,动脉重建组术后第1天的移植肝细胞PCNA阳性表达率高于动脉未重建组,而术后第7天移植肝细胞PCNA阳性表达率低于动脉未重建组,差异有显著性(P < 0.05)?结论:肝动脉重建可明显改善大鼠小体积移植肝的功能,促进移植肝的再生,有效地保护移植肝的组织学结构,减轻术后移植肝的组织学改变,动脉化模型术后早期增殖较静脉化模型活跃?     

蛋白酶抑制剂对肝硬化大鼠肝移植围手术期的影响

目的　探讨蛋白酶抑制剂在肝硬化大鼠肝移植围手术期的保护作用。方法　采用二袖套法大鼠原位肝移植动物模型。 6 4只SD大鼠随机均分成两组 :实验组 (A组 ) ,于受体手术前 30min自静脉注射乌司他丁 (2× 10 4U L) 1.5ml kg ;对照组 (B组 ) ,于受体手术前 30min自静脉注射同等体积生理盐水。每组受体的一半 (n =8)用于观察存活率 ,另一半 (n =8)用于移植肝脏再灌注 2h后取血及肝脏检测。结果　实验组的 1W存活率、胆汁分泌量、抗氧化酶活力均明显高于对照组 (P <0 .0 5 ) ,血清ALT、AST、LDH、肝组织中髓过氧化物酶 (MPO)含量及过氧化产物含量均明显低于对照组 (P <0 .0 5 )。结论　蛋白酶抑制剂乌司他丁能够保护移植肝脏功能 ,对行原位肝移植的肝硬化大鼠有较好的抗手术侵袭作用。     

人工肝支持系统联合肝脏移植治疗晚期重型肝炎

目的 :总结人工肝支持系统 (ALSS)联合原位肝脏移植治疗晚期重型肝炎患者的经验体会。方法 :回顾性分析本单位 1993年 4月至 2 0 0 3年 2月所实施的 14 2例原位肝脏移植患者的临床资料 ,其中 13例晚期重型肝炎 (慢性重型肝炎 12例、急性重型肝炎 1例 )患者在移植前共进行了33例次的 AL SS治疗 ,并就其疗效与常规内科治疗组、ALSS治疗组 (未施行肝脏移植 )相比较。结果 :AL SS治疗患者临床症状好转 ,肝功能、内毒素等各项实验室指标显著改善 ,能维持的中位时间为 8d(2 d～ 2 2 6 d) ;13例患者在获及合适供肝后均得以顺利实施肝脏移植 ,自首次 ALSS治疗日计算 ,该组患者等待供肝的中位时间为 11d(2 d～ 2 2 6 d) ,移植术前血清胆红素 (TB)水平显著低于患者首次 AL SS治疗前水平 (P=0 .0 2 2 ) ;本组晚期重型肝炎患者半年存活率达 6 1.5 % ,显著高于未施行 ALSS和肝脏移组 (P<0 .0 0 1)。结论 :ALSS能显著改善晚期重型肝炎患者病情 ;1次或多次的 ALSS能有效保证一定的供肝等待时间 ,发挥顺利过渡到肝脏移植的桥梁作用 ;ALSS联合肝脏移植救治晚期重型肝炎患者取得良好疗效     

大鼠肝癌模型的化学诱导及肝癌肝移植模型的建立

目的 探讨大鼠肝癌模型的化学诱导方法和肝癌肝移植模型建立的手术操作技巧。方法 采用二乙基亚硝胺（diethylnitrosamine，DENA）诱发大鼠肝癌；在Kamada用“二袖套法”吻合血管的基础上、进行改良，并重建大鼠肝动脉血供，建立肝癌大鼠原位肝移植（OLT）模型。结果 诱癌18周以后，诱发肝癌组大鼠行肝移植和不行肝移植两组的1个月存活率分别为56．3％和21．4％，其差异有统计学意义（x^2=5．129，P〈0．05）。大鼠肝癌肝移植实验组手术成功率为87．5％，肝移植对照组手术成功率为90．0％；肝癌肝移植实验组中，移植术后肿瘤的复发和转移多表现为肺部转移和腹腔转移，而移植肝肿瘤复发仅2例；肝癌肝移植实验组和肝移植对照组的两组累积生存率差异有统计学意义。结论 DENA诱发肝癌的方法能大批量诱发出相对稳定的肝脏肿瘤；肝癌肝移植可以明显提高肝癌大鼠生存率；重建肝动脉血供的大鼠原位肝移植模型的是一个更符合生理和肿瘤演进的OLT模型。     

同期输注供者骨髓间充质干细胞对肝移植大鼠免疫的影响

目的 探讨肝移植同时输注供者骨髓间充质干细胞对受体肝移植免疫的影响.方法 实验分为空白对照组(A组)、移植组(B组)和输注供者骨髓间充质干细胞组(C组).A组SD大鼠5只,只行剖腹探查,B,C组Wistar和SD大鼠各10只.行Wistar-SD大鼠肝移植同时,C组提取供体骨髓间质干细胞同期输注给受者,B组给予输注生理盐水.观察术后第7天肝功能的变化、病理改变和受体生存期.结果 肝移植同时输注供者骨髓间充质干细胞,ALT,AST,TBIL,ALB较B组显著降低,生存期明显延长,病理改变仅呈急性轻度排斥反应,而单纯移植组呈急性重度排斥反应.结论 肝移植同时输注骨髓间充质干细胞促进受体对移植肝的免疫耐受.     

单中心连续203例肝移植临床疗效分析

目的探讨进一步提高肝移植疗效的措施。方法回顾性分析复旦大学附属中山医院2001年4月至2004年10月连续203例肝移植的临床资料。肝移植患者包括肝细胞癌142例、肝炎后肝硬化36例、暴发性肝功能衰竭7例、Wilson病6例以及其他终末期肝脏疾病12例。其中,尸体供肝移植199例,包括2例减体积肝移植、1例劈裂式肝移植;活体供肝移植4例。采用Cox多元回归分析确定影响肝癌肝移植预后的危险因素。结果203例肝移植患者术后1年、2年生存率分别为85．0％和82.4％。总的排斥反应发生率为12．3％。142例肝癌肝移植患者中有20例复发(复发率14.1％),1年、2年生存率分别为80.2％和78,4％,1年、2年无瘤生存率分别为85．3％和80．3％。多元回归分析显示肿瘤直径和门静脉癌栓是影响无瘤生存率的独立预后因素。结论肝移植是我国治疗各种终末期肝脏疾病的有效手段,同时可使部分肝癌患者获得治愈或延长生命的机会。     

Effect of emodin in suppressing acute rejection following liver allograft transplantation in rats

<正>Objective:To investigate the mechanism of action of emodin for suppressing acute allograft rejection in a rat model of liver transplantation.Methods:Brown Norway(BW) recipient rats of orthotopic liver transplantation(OLT) were divided into three groups,Group A receiving isografting(with BW rats as donor), Group B receiving allografting(with Lewis rats as donor),Group C receiving allografting and emodin treatment (50 mg/kg daily).They were sacrificed on day 7 of post-transplantation,and their hepatic histology,plasma cytokine levels,and T-cell subset expression were detected.Results:Compared with those in Group A,rats in Group B exhibited severe allograft rejection with a rejection activity index(RAI) of 7.67±0.98,extensive hepatocellular apoptosis with an apoptosis index(Al) of 35.83±2.32,and elevated plasma levels of interleukin-2 (IL-2),interleukin-10(IL-10),tumor necrosis factor-α(TNF-α),CD4~+ and CD4~+/CD8~+ ratio.However,recipients in Group C showed a decrease in histological grade of rejection and hepatocellular apoptosis,as well as a decrease in plasma levels of IL-2,TNF-α,CD4~+ and CD4~+/CD8~+ ratio,but elevated levels of IL-10 as compared with the allograft group.Conclusion:Post-OLT acute rejection could be attenuated by emodin,its mechanism of action may be associated with protecting hepatocytes from apoptosis,polarizing the Th 1 paradigm to Th2,and inhibiting the proliferation of CD4~+ T cell in plasma.     

索拉菲尼治疗肝癌肝移植术后肿瘤复发患者的疗效及安全性分析

目的探讨索拉菲尼治疗原发性肝细胞癌肝移植术后肿瘤复发患者的临床疗效和安全性。方法 10例肝移植术后肿瘤复发患者,确诊复发后即口服索拉菲尼400 mg,每日两次治疗(A组);8例未接受索拉菲尼治疗的肝癌肝移植术后肿瘤复发患者(B组);同期接受相同剂量的索拉菲尼治疗的肝癌患者25例(C组)。比较3组患者的带瘤生存时间、索拉菲尼的毒副作用及其他不良反应发生情况。结果 3组患者的带瘤生存时间分别为5~22个月(中位数10个月)、1~8个月(中位数4个月)和2~21个月(中位数4个月),三组之间整体间差异有统计学意义(K-M法,以log-rank检验,P=0.045)。两组肝移植患者没有发生急性排斥反应,但服用索拉菲尼组有1例患者因上消化道出血而死亡,服用索拉菲尼的两组患者不良反应发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论索拉菲尼能明显延长肝癌肝移植术后肿瘤复发患者的生存期,并不增加排斥反应发生率。     

大鼠原位全肝移植术的手术技巧

目的：探讨用二袖套法建立稳定大鼠原位全肝移植模型的手术技巧。方法：用二袖套法进行了50例原位大鼠全肝移植术。结果：受体无肝期时间平均为17min，术后24h存活率为90％，1周存活率为50％。结论：自制血管袖套和取肝修肝方法的改进，有利于建立稳定的大鼠原位肝移植模型。