鱼藤酮致帕金森大鼠的脑黑质中凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达改变

目的 研究鱼藤酮致帕金森病(PD)大鼠中脑黑质凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达的改变.方法 Wistar大鼠每日颈背部皮下注射鱼藤酮2 mg(kg·d) (3～6周)造模,依据所建立的评分体系记录动物行为变化,在行为学有记分并停止给鱼藤酮4、10 d时,中脑黑质病理切片免疫组化染色比较黑质区域Bcl-2、Bax的表达. 结果在有行为学记分4 d时,记4分和8分的大鼠中脑黑质Bcl-2表达均显著减少;所有PD大鼠中脑黑质Bax表达均显著增加;Bcl-2/Bax比率均显著减少;有记分4 d时,行为学记分与Bcl-2/Bax比值成负相关性. 结论细胞凋亡参与了鱼藤酮帕金森模型大鼠黑质多巴胺神经细胞的损伤.     

高压氧结合抗震颗粒影响帕金森病大鼠黑质细胞凋亡表达

目的 研究高压氧(HBO)结合抗震颗粒对实验性帕金森病(PD)大鼠黑质细胞凋亡表达的影响。方法 通过右侧中脑腹侧被盖区注射6-羟基多巴胺(6-OHDA)的方法建立PD模型。免疫组化法测定治疗后假手术组、模型组及HBO结合抗震颗粒组PD大鼠黑质酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元、胶原纤维酸性蛋白（GFAP）及Bc1-2、Bax蛋白的表达。结果 PD模型组进行HBO结合抗震颗粒治疗后TH阳性细胞数量及Bcl-2蛋白表达均明显升高（P< 0.05)、GFAP平均光密度及Bax蛋白的表达明显降低（P< 0.05)。 结论 HBO结合抗震颗粒能明显抑制黑质神经元细胞凋亡的表达,对PD大鼠有保护性治疗作用。     

普萘洛尔对急性心肌缺血大鼠细胞凋亡的影响

目的探讨普萘洛尔对心肌缺血凋亡相关基因Bcl-2及BaxmRNA表达的影响。方法将50只sD大鼠随机分为：（1）假手术组（I组）;（2）手术组分为4个亚组：①1ml生理盐水组（Ⅱ组）;②1mgZkg普萘洛尔组（Ⅲ组）;④5mg／kg普萘洛尔组（I、Ⅳ组）;④25m／kg普萘洛尔组（V组）,每组10只。采用RT～PCR方法检测心肌组织中Bcl-2及BaxmRNA表达的变化及用TUNEL法观察心肌细胞凋亡。结果普茶洛尔可显著提高缺血心肌组织Bcl-2mRNA的表达（P〈0．01）及降低BaxmRNA表达（P〈0．01）。结论在心肌缺血性损伤中,普萘洛尔通过对大鼠心肌Bcl-2及BaxmRNA表达调控作用,防止心肌细胞的凋亡。     

高压氧结合抗震颗粒对帕金森病大鼠黑质细胞凋亡表达的影响

目的 研究高压氧(HBO)结合抗震颗粒对实验性帕金森病(PD)大鼠黑质细胞凋亡表达的影响.方法 通过右侧中脑黑质腹侧被盖区注射6-羟基多巴胺(6-OHDA)的方法建立PD模型.免疫组化法测定治疗后假手术组、模型组及HBO结合抗震颗粒组PD大鼠黑质酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元、胶原纤维酸性蛋白(GFAP)及Bcl-2、...     

一种改良帕金森大鼠模型的制作

目的 建立一种改进的帕金森（PD）大鼠模型制作方法，并对模型进行综合评价。方法 选取Wistar大鼠60只，分别制作右侧中脑黑质致密部（SNc）和中脑内侧前脑束（MFB）两点6-OHDA毁损传统PD大鼠模型及中脑内侧前脑束（MFB）单点6-OHDA毁损改良PD大鼠模型；检测大鼠行为及黑质多巴胺（DA）能神经元变化。结果 改良组大鼠死亡率低于传统组和对照组，行为学检测和免疫组化检测与传统组差异无显著性（P〉0．05），与对照组比较注射侧黑质多巴胺能神经元显著减少（P〈0．01）。结论 本实验方法可快速简便地建立稳定的PD大鼠模型．     

Genistein对帕金森病模型大鼠黑质铁含量及Bcl-2蛋白表达的影响

目的 研究染料木素（genistein）对6-OHDA制备的帕金森病（PD）模型去卵巢（OVX）大鼠黑质（SN）多巴胺能神经元、铁含量及Bcl-2蛋白表达的影响.方法 应用6-OHDA制备的OVX PD模型大鼠,侧脑室给予genistein或（17-β-estradiol）17-β雌二醇.免疫组织化学染色酪氨酸羟化酶（TH）阳性神经元和Bcl-2蛋白.Perls铁染色检测SN铁含量.结果 Genistein和17-β-estradiol可明显减少6-OHDA制备的PD模型大鼠单侧旋转行为（P＜0.01）.在损毁侧SN,genistein和17-β-estradiol能促进TH阳性神经元数量显著增多（P＜0.01）,Bcl-2蛋白表达明显增加（P＜0.01）,铁染色阳性细胞数量明显减少（P＜0.01）.结论 genistein具有类雌激素样作用,通过降低SN铁含量及增加Bcl-2蛋白的表达,发挥其对6-OHDA所致PD模型大鼠SN多巴胺神经元的保护作用.     

Fas／FasL、Bax及Bcl-2在1型糖尿病大鼠中的表达及其与凋亡的关系

目的探讨Fas／FasL、Bax及Bcl-2在1型糖尿病大鼠中的表达及其与凋亡的关系。方法链脲佐菌素诱导1型糖尿病大鼠模型,TUNEL法检测1型糖尿病大鼠（模型组）及其正常大鼠（正常组）胰腺组织的细胞凋亡,应用RT-PCR法及其免疫组化法检测Fas／FasLmRNA、Bcl-2／BaxmRNA及蛋白的表达情况。结果模型组胰腺组织中细胞的凋亡比正常组的大鼠多,Fas／FasLmRNA及BaxmRNA的表达水平在模型组的表达均比正常组显著提高,而Bcl-2mRNA的表达水平显著下降,两者相比差异均有统计学意义（均P〈0．05）。随血糖的升高,凋亡指数亦增加,Fas／FasLmRNA及BaxmRNA的表达升高,但Bcl-2mRNA的表达下降。结论Fas／FasL的表达及其细胞凋亡在大鼠l型糖尿病的形成中起着重要作用,Bax对凋亡起促进作用,Bcl-2对凋亡起抑制作用。     

移植骨髓间充质干细胞对帕金森大鼠旋转行为的影响

目的研究经侧脑室移植骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）对帕金森（Parkinson’s disease,PD）大鼠行为能力及中脑黑质TH表达的影响。方法雄性SD大鼠36只,随机分为假手术组（Sham组）,PD模型组（PD组）,MSCs移植组（MSCs组）。采用6-OHDA制备PD大鼠模型,经侧脑室移植骨髓MSCs,术后2周、4周、8周,腹腔注射阿朴吗啡诱导PD大鼠旋转行为,采用Western blot方法测定中脑黑质TH蛋白的表达。结果移植术后2周、4周、8周,MSCs组与PD组比较,旋转次数明显减少（P〈0.05）,移植细胞干预PD模型8周后中脑黑质TH表达,MSCs组较PD组明显增高（P〈0.05）。结论经侧脑室移植骨髓MSCs通过提高中脑黑质TH的活性,改善PD大鼠的行为能力。     

帕金森病模型大鼠黑质磁共振ESWAN序列R2*值与酪氨酸羟化酶表达相关性的研究

目的应用ESWAN序列测量正常大鼠和帕金森病（PD）模型大鼠脑黑质R2*值,探讨R2*值与多巴胺能神经元标志酶酪氨酸羟化酶（TH）阳性面积的相关性。方法将60只雄性SD大鼠,随机抽取20只为对照组,剩余40只大鼠通过向左侧黑质输注6-羟基多巴胺（6-OHDA）诱导PD模型,于造模后第15天进行旋转实验以验证模型,最终造模成功23只,作为模型组;期间每隔10d对两组大鼠的一般情况进行观察,第45天对两组大鼠进行旋转实验、MRI测量黑质R2*值及TH免疫组化染色。结果模型组大鼠损伤侧黑质R2*值较对照组显著升高（P＜0.05）;模型组大鼠损伤侧多巴胺能神经元TH的表达较对照组减低,差异有统计学意义（P＜0.01）;模型组、对照组大鼠黑质R2*值与TH阳性面积之间呈负相关。结论ESWAN序列可以成功测量PD大鼠黑质R2*值,对早期评价PD黑质多巴胺能神经元损伤情况有指导作用。     

白藜芦醇对帕金森病大鼠的保护作用及机制研究

目的观察白藜芦醇对帕金森病大鼠的保护作用,并探讨其可能机制。方法应用6-OHDA纹状体内注射制作PD模型大鼠,将模型成功大鼠随机分为4组：模型组及白藜芦醇（10,20。40mg/kg/d）治疗组,并设假手术组及正常给药组（白藜芦醇20mg／kg/d）,每日口服给药一次,连续10周,给药过程中每周进行一次行为学检测。电镜下观察黑质神经元超微结构改变,RT—PCR法检测大鼠黑质部caspase－3 mRNA的表达。结果①白藜芦醇能改善大鼠的旋转行为;②白藜芦醇能减轻6-OHDA诱导的帕金森病大鼠黑质多巴胺能神经元的变性;③白藜芦醇抑制大鼠黑质中caspase－3 mRNA的表达。结论白藜芦醇对帕金森病大鼠产生保护作用,其机制可能与caspase-3 mRNA的表达下调有关。     

利咽解毒方加减对口腔黏膜下纤维化患者CCR2、TLR2水平的影响

目的探究利咽解毒方加减对口腔黏膜下纤维化患者趋化因子CCR2、Toll样受体2(TLR2)表达的影响。方法选取2019年3月至2020年3月于湖南中医药大学第一附属医院接受治疗的口腔黏膜下纤维化患者114例,随机分为常规治疗组、利咽解毒方组,每组57例,常规治疗组患者使用西药进行治疗,利咽解毒方组在常规治疗组治疗基础上使用利咽解毒方加减进行治疗。对比两组患者张口度、病变面积、中医证候评分,免疫透射比浊法检测GSH-Px、LPO、MDA水平,酶联免疫吸附实验法检测hsCRP、IL-17、TGF-β1水平,检测两组患者血液流变学指标血浆黏度(PV)、纤维蛋白原(FIB)、高切全血黏度(HS),Western blot法检测CCR2、TLR2表达,对比两组治疗有效率。结果治疗后,与常规治疗组相比,利咽解毒方组张口度较高,病变面积较小,中医证候评分较低(P<0.05),且两组较治疗前均有改善。治疗后,与常规治疗组相比,利咽解毒方组GSH-Px水平较高,LPO、MDA、hs-CRP、IL-17、TGF-β1、CCR2、TLR2及血液流变学指标PV、FIB、HS水平较低(P<0.05)。与常规治疗组相比,利咽解毒方组患者治疗总有效率较高(P<0.05)。与治疗前比较,两组治疗后上述指标均得到改善(P<0.05)。结论利咽解毒方加减可使口腔黏膜下纤维化患者张口度受限状况明显缓解,病变面积缩小,炎症反应、氧化应激损伤明显减轻,血液流变学明显改善,CCR2、TLR2表达下调,治疗效果显著。     

清热解毒方对实验性胃溃疡大鼠模型的作用及对胃黏膜中表皮生长因子表达的调节机制

目的探究清热解毒方对胃溃疡大鼠模型的保护作用及其对胃黏膜中表皮生长因子表达的调节。方法选择50只SD雄性大鼠,用乙酸复制实验性胃溃疡大鼠模型,随机分为对照组、模型组、兰索拉唑组、清热解毒方组和联合给药组,对照组和模型组灌胃蒸馏水,兰索拉唑组灌胃兰索拉唑,清热解毒方灌胃清热解毒方,联合给药组灌胃兰索拉唑和清热解毒方。比较各组胃溃疡指数、胃溃疡抑制率、胃液pH值、胃蛋白酶活性、胃组织病理变化、血清中EGF和EGFR水平。结果清热解毒方组和兰索拉唑组胃溃疡指数和胃蛋白酶活性均显著大于联合给药组,差异有统计学意义(P<0.05);清热解毒方组和兰索拉唑组大鼠的胃溃疡抑制率、胃液pH值、血清中EGF和EGFR水平均显著小于联合给药组,差异有统计学意义(P<0.05);清热解毒方组和兰索拉唑组胃溃疡指数、胃蛋白酶活性、胃溃疡抑制率、胃液pH值、血清中EGF和EGFR水平均没有显著性差异(P>0.05);兰索拉唑组和清热解毒方组大鼠胃黏膜损伤程度显著降低,胃黏膜上皮变性坏死以及溃疡症状均小于模型组,胃黏膜上水肿、出血、炎症等症状轻中度;联合给药组大鼠胃黏膜损伤显著改善,与对照组大鼠胃组织病理变化基本相同。结论清热解毒方可以有效改善乙酸致实验性胃溃疡大鼠的胃溃疡症状,但联合应用西药与清热解毒方时,则能收到更加有效的治疗效果。清热解毒方促进胃溃疡修复过程的机制可能为促进EGF和EGFR表达。     

健脾解毒方治疗裸鼠胃癌及其诱导胃癌细胞凋亡的研究

目的:研究健脾解毒方诱导胃癌细胞凋亡的作用并探讨其部分机制。方法:建立裸鼠人胃癌MKN-45细胞皮下移植瘤模型,随机分为空白对照组、替加氟组、健脾解毒方组、联合用药组4组,每组12只;给药14 d后观察各组对裸鼠胃癌的治疗作用及其对荷瘤裸鼠生存期的影响;TUNEL法检测各组胃癌细胞凋亡情况;分别采用实时荧光定量PCR方法和免疫组化S-P法检测健脾解毒方干预后Bcl-2、Bax的mRNA和蛋白表达情况。结果:与空白对照组相比,健脾解毒方组凋亡指数显著升高、Bcl-2 mRNA水平及Bcl-2蛋白表达显著降低、Bax的mRNA和蛋白表达明显上调、Bcl-2/Bax显著下降,健脾解毒方组和联合用药组均能明显抑制瘤体生长(P0.01),延长荷瘤鼠的生存期(P0.01)。联合用药组在抑制胃癌细胞生长和诱导胃癌细胞凋亡方面的作用均优于单纯化疗药组和单纯健脾解毒方组(P0.05或P0.01)。结论:健脾解毒方能抑制裸鼠胃癌细胞生长,诱导胃癌细胞凋亡,其机制可能与调控Bcl-2、Bax表达有关。     

解毒化瘀方对凝血酶合并缺氧诱导PC12细胞损伤ERK1/2信号通路表达的影响

目的：探讨急性缺血性中风（AIS）瘀毒病机的分子机制及解毒化瘀方对凝血酶合并缺氧损伤的保护作用。方法（1）用凝血酶合并缺氧损伤PC12细胞,模拟急性缺血性中风的体外细胞模型。（2）将细胞分为空白组,模型组,解毒化瘀方含药血浆组和PD98059组（MEK抑制剂组）,应用荧光定量实时RT-PCR方法检测MEK1、PAR-1及ERK1/2的mRNA表达,应用免疫荧光法检测ERK1/2、P-ERK1/2的蛋白表达。结果 PCR结果提示：模型组MEK1、PAR-1及ERK1/2的mRNA表达与空白对照组相比显著升高（P<0.01）,解毒化瘀方组和PD98059组MEK1、PAR-1及ERK1/2的mRNA表达较模型组显著降低（P<0.01）,免疫荧光结果提示：解毒化瘀方组和PD98059组ERK1/2、P-ERK1/2的蛋白表达较模型组显著降低（P<0.01）。结论解毒化瘀方以凝血酶为作用的分子靶点,能够显著降低ERK1/2信号通路在缺血性中风体外细胞模型中的表达。     

细胞凋亡和Bcl-2、Bax基因在兔肺缺血再灌注损伤中的作用

目的:探讨细胞凋亡在兔肺缺血再灌注损伤中的作用以及Bcl-2和Bax基因的调控.方法:健康日本大耳白兔48只,随机分为对照组与肺缺血再灌注损伤1 h、3 h和5 h组.复制在体肺缺血再灌注损伤模型.采用TUNEL法观测肺组织细胞凋亡;予免疫组化及原位杂交技术检测肺组织细胞Bcl-2、Bax蛋白和基因表达.结果:随着再灌注时间的延长,凋亡指数(AI)及Bax蛋白、BaxmRNA水平进行性升高;Bcl-2蛋白及Bcl-2mRNA先升高而后下降(均P＜0.01).凋亡指数(AI)与Bax蛋白及Bax mRNA之间均呈显著正相关(r分别=0.926,0.933;均P＜0.01),而与Bcl-2蛋白/Bax蛋白及Bcl-2mRNA/BaxmRNA的比值呈显著负相关(r分别=-0.836,-0.879;均P＜0.01).结论:肺组织细胞凋亡参与了肺缺血再灌注损伤的发生,Bcl-2/Bax的比值下降是促进凋亡的重要因素.     

前列地尔联合针刺对噪音性耳聋大鼠耳蜗毛细胞血管内皮生长因子、Bcl-2及Bax表达的影响

目的:观察针刺联合前列地尔对噪音性耳聋大鼠耳蜗毛细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、Bax及Bcl_2表达的影响.方法: 32只雄性Wistar大鼠按照随机数字法分为4 组:空白对照组、模型组、前列地尔治疗组和针刺联合前列地尔治疗组.除对照组外,其余3组制备噪音性耳聋大鼠模型.对各组大鼠进行听觉脑干诱发电位( au-ditory brainstem response,ABR)听力阈值测试.联合治疗组的针刺治疗穴位选取三焦经腧穴翳风(双)、外关(双).对各组大鼠进行耳蜗VEGF、Bax及Bcl-2表达检查.结果: 造模结束后,各组大鼠ABR听力阈值显著高于对照组;模型组VEGF水平较空白对照组低,耳蜗Bcl-2 mRNA表达减弱, Bax mRNA表达增强,差异有统计学意义(P＜0. 05);联合治疗组与模型组相比,大鼠耳蜗基底膜毛细胞VEGF水平显著恢复,耳蜗Bcl-2 mRNA表达增强, Bax mRNA表达减弱,差异有统计学意义( P＜0. 01).结论: 针刺联合前列地尔治疗能改善噪声导致的听力损害,其改善听力、保护耳蜗结构是通过调节耳蜗基底膜毛细胞VEGF、耳蜗相关凋亡因子Bcl-2、BaxmRNA的表达而达到的.     

舒筋Ⅰ号对退变腰椎间盘细胞Fas表达的影响简

目的：探讨舒筋I号对退变腰椎间盘细胞Fas表达的影响。方法：采用纤维环针刺法复制腰椎间盘退变动物模型。造模成功后,将30只大鼠随机分为舒筋I号（ShuJinN01,sj）、活血方（HuoxueDecoction,HD）、模型对照组（modelcontrolgroup,MC）3组,给药2周。采用免疫组化法检测椎间盘细胞Fas表达情况。结果：舒筋I号、活血方均可抑制间盘细胞Fas的表达。结论：舒筋活血药物抑制Fas表达可能是其治疗椎间盘退变的机理之一。     

解毒祛瘀滋阴药对SLE患者Bax/Bcl-2基因mRNA表达的影响

目的：研究解毒祛瘀滋阴药对系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血淋巴细胞Bax／Bcl-2基因mRNA的影响。方法：临床选择SLE患者45例，随机分单用激素组和并用中药组，利用RT．PCR法检测各组治疗前后Bax／Bcl．2基因mRNA表达情况。结果：SLE患者的Bax／Bcl-2基因表达比值明显低于正常人（P〈0．001）；活动期低于缓解期（P〈0．05）；治疗后两组Bax／Bcl-2基因表达比值明显上升，而并用中药组治疗后明显高于单用激素组（P〈0．05）。结论：激素合解毒祛瘀滋阴药治疗，能明显提高SLE患者外周血淋巴细胞Bax／Bcl-2基因mRNA表达比值，这可能与其诱导淋巴细胞凋亡、调节免疫内环境的作用有关。     

国医大师刘祖贻病证结合论治麻木经验

麻木为临床常见病症,发病因素多样,病变涉及多个学科。国医大师刘祖贻认为麻木病在肌肤,气血亏虚为发病之本,邪滞血脉为发病之标,气血不通、经脉失养为基本病机,气血失调贯穿疾病发展始末,治疗上重视调理气血,临床上主张病证结合,擅用经方黄芪桂枝五物汤为基础方加减治疗麻木:中风后肢体麻木,常用黄芪桂枝五物汤合涤痰汤;糖尿病性周围神经麻木,常用黄芪桂枝五物汤合益气养阴通脉汤;颈椎病上肢麻木,常用黄芪桂枝五物汤合葛桂舒筋饮;腰椎间盘突出症下肢麻木,常用黄芪桂枝五物汤合独活寄生汤;癌症放化疗后手足麻木,常用黄芪桂枝五物汤合参楼扶正解毒方;功能性麻木,常用黄芪桂枝五物汤合柴胡疏肝散。     

健脾消癌方对缺氧微环境诱导的结肠癌细胞生物学行为影响及抑癌机制研究

目的研究健脾消癌方对缺氧微环境下结肠癌细胞生物学行为的影响,并探讨其抑癌机制。方法将对数生长期的结肠癌SW620细胞随机分为健脾消癌方组(10%健脾消癌方的含药血清培养)和对照组(10%的空白血清培养),两组同时在缺氧环境下诱导培养14 d。采用Real-time PCR和Western blot检测两组结肠癌细胞低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、VEGF、Bcl-2、Caspase-3、MMP-9、Survivin mRNA及蛋白的表达;MTT法检测细胞增殖;Transwell检测细胞迁移能力;流式细胞术检测细胞凋亡。结果与对照组比较,健脾消癌方组结肠癌SW620细胞HIF-1α、VEGF、Bcl-2 mRNA和蛋白水平降低(P<0.05),Caspase-3 mRNA和蛋白水平升高(P<0.05);健脾消癌方组结肠癌SW620细胞在48、72、96 h时细胞存活率降低(P<0.01),迁移和穿透室膜细胞数降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05)。结论健脾消癌方能下调缺氧微环境中结肠癌细胞HIF-1α水平,间接影响其下游靶基因的表达,抑制结肠癌细胞增殖、促进细胞凋亡、减弱细胞的迁移,发挥抗癌作用。