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相似文献
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1.
目的:研究miR-200a对非小细胞肺癌迁移、侵袭的调控作用及机制。方法:培养肺癌A549细胞并分组,阴性对照(NC)过表达组转染NC的模拟物,miR-200a过表达组转染miR-200a的模拟物,NC抑制组转染NC的抑制物,miR-200a抑制组转染miR-200a的抑制物。采用划痕实验检测细胞的迁移能力,采用transwell检测细胞的侵袭能力,采用Western blotting检测迁移基因N-钙黏蛋白(N-cadherin)及波形蛋白(Vimentin)、侵袭基因基质金属蛋白酶(MMP)2及MMP9、β-catenin的表达量。结果:与NC过表达组比较,miR-200a过表达组的迁移和侵袭能力明显减弱,N-cadherin、Vimentin、MMP2、MMP9、β-catenin的表达量明显减少;与NC抑制组比较,miR-200a抑制组的迁移和侵袭能力明显增强,N-cadherin、Vimentin、MMP2、MMP9、β-catenin的表达量明显增加。结论:miR-200a能够抑制非小细胞肺癌的迁移、侵袭且这一抑制作用与靶向抑制β-catenin有关。  相似文献   

2.
王俊  郭燕  章必成  关华军  陈正堂 《重庆医学》2007,36(20):2029-2031
目的 构建小鼠同源的人抗原R (HuR)基因真核表达载体,观察HuR过表达对Lewis肺癌(LLC)细胞增殖和侵袭的影响.方法 从LLC细胞中抽提总RNA,RT-PCR扩增HuR cDNA,基因工程方法将PCR片断克隆至真核表达载体pEGFP-N1的多克隆位点.重组质粒经EcoRI和SmaI双酶切鉴定和测序后,使用LipofectamineTM2000转染LLC细胞.Western blotting检测HuR在细胞中的表达.MTT和Transwell系统分别检测细胞增殖和侵袭能力.结果 经酶切、测序鉴定,小鼠HuR基因正确插入到pEGFP-N1的多克隆位点,获得pEGFP-HuR;Western blotting显示转染组与未转染组比较,HuR蛋白表达、LLC细胞增殖能力和侵袭能力均显著增强.结论 HuR过表达可提高肿瘤细胞的增殖和侵袭能力.  相似文献   

3.
目的 探讨miR-1721靶向抑制CD44的表达及对前列腺癌细胞增殖、侵袭能力的影响。方法 构建CD44 mRNA 3′-非翻译区(3′-UTR)的荧光素酶报告载体系统,通过荧光素酶系统确定miR-1721对CD44 mRNA 3′-UTR的靶向关系;脂质体转染法将miR-1721模拟物转入前列腺癌PC-3细胞中,Western印迹法检测转染后CD44蛋白表达水平的改变;MTT法检测miR-1721mimics对PC-3细胞增殖能力的影响,Transwell小室法检测其对肿瘤细胞袭侵袭能力的影响;通过干细胞成球实验检测miR-1721mimics对前列腺癌干细胞样微球体形成的影响。结果 miR-1721能特异性地与CD44 mRNA 3′-UTR结合,抑制其荧光素酶的活性,干细胞标记基因CD44是miR-1721的靶基因。过表达miR-1721的PC-3细胞中CD44蛋白表达水平明显降低,可显著抑制PC-3细胞的侵袭能力,同时过表达CD44可负调控miR-1721对PC-3细胞增殖和侵袭能力的影响;干细胞成球实验证实,miR-1721能显著抑制前列腺癌细胞PC-3干细胞的微球体形成能力。结论 miR-1721通过靶向调控CD44的表达而抑制前列腺癌细胞增殖、侵袭能力及干细胞的形成能力。  相似文献   

4.
目的探讨miR-1-3p靶向端锚聚合酶2(TNKS2)基因对宫颈癌Ca-Ski细胞增殖、迁移及侵袭的调控作用。方法采用实时荧光定量聚合酶链式反应(q RT-PCR)检测正常宫颈鳞状细胞及不同宫颈癌细胞中miR-1-3p的表达情况,选取宫颈癌Ca-Ski细胞进行转染实验,利用脂质体转染法将miR-1-3p模拟物(miR-1-3p mimics)及模拟物对照(NC mimics)分别转染至Ca-Ski细胞,分别记为miR-1-3p mimics组和miR-NC组,将未经转染处理的Ca-Ski细胞记为Blank组(空白对照)。qRT-PCR检测各组Ca-Ski细胞中miR-1-3p的表达,噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,通过生物信息学软件分析和双荧光素酶报告基因实验验证miR-1-3p和TNKS2靶向关系,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞中TNKS2蛋白表达。结果 miR-1-3p在宫颈癌细胞中的表达显著低于正常宫颈鳞状细胞(P0.05)。转染miR-1-3p mimics 48 h后,Ca-Ski细胞中miR-1-3p的表达显著升高(P0.05)。过表达miR-1-3p能够明显抑制Ca-Ski细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P0.05)。生物信息学软件分析显示miR-1-3p和TNKS2 3’UTR存在结合位点,双荧光素酶报告基因实验显示TNKS2是miR-1-3p的靶基因,Western blot检测结果显示miR-1-3p可抑制TNKS2的表达。结论 miR-1-3p可靶向TNKS2基因抑制宫颈癌Ca-Ski细胞增殖、迁移及侵袭。  相似文献   

5.
陈艳丹  岑瑞祥  曹炜  龚国清  彭聪 《重庆医学》2021,50(22):3793-3796,3802
目的 探讨miR-134靶向基质金属蛋白酶1(MMP1)对喉癌细胞的增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响.方法 双荧光素酶报告基因实验验证MMP1基因是否为miR-134的靶向基因.转染实验分为miR-134 mimics组、miR-134 antagomir组和空白对照组,采用CCK-8、流式细胞术和Transwell法检测各组细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移情况,Western blot检测过表达或降低miR-134对MMP1蛋白表达的影响.结果 双荧光素酶报告基因结果显示miR-134能和MMP13'-UTR端结合且明显抑制荧光素酶活性.miR-134 mimics组细胞在转染后24 h的细胞活力明显低于空白对照组(P<0.01),而miR-134 antagomir组明显高于空白对照组(P<0.05).与空白对照组凋亡率[(4.32±0.36)%]比较,miR-134 mimics组[(12.02±0.45)%]明显增加(P<0.01),而miR-134 antagomir组[(2.31±0.26)%]明显降低(P<0.05).与空白对照组比较,miR-134 mimics组的细胞侵袭和迁移能力明显减弱、MMP1蛋白表达明显降低(P<0.05),miR-134 antagomir组的细胞侵袭和迁移能力明显增强、MMP1蛋白表达明显升高(P<0.05).结论 miR-134在转录后水平调控MMP 1蛋白表达来影响喉癌细胞的增殖、凋亡、侵袭及迁移.  相似文献   

6.
目的 研究miR-181靶向金属蛋白酶组织抑制因子3(TIMP3)调控胆囊癌细胞迁移及侵袭的作用.方法 培养胆囊癌GBC-SD细胞,转染miR-181 mimic、阴性对照(NC)mimic、TIMP3 siRNA、NC siRNA、表达 TIMP3的重组质粒、空白质粒,荧光定量PCR检测miR-181的表达量,Western blot检测TIMP3的表达量,Transwell检测细胞迁移和侵袭活力,生物信息学分析及荧光素酶报告基因实验验证miR-181靶向TIMP3;皮下注射转染miR-181 mimic或NC mimic的GBC-SD细胞后建立荷瘤鼠模型,检测移植瘤质量及miR-181、TIMP3表达量.结果 细胞实验显示:转染miR-181 mimic促进细胞迁移及侵袭、抑制细胞中TIMP3的表达及双荧光素酶报告基因的荧光素酶活力;转染TIMP3 siRNA促进细胞迁移及侵袭;转染表达TIMP3的重组质粒后,miR-181 mimic促进细胞迁移、侵袭的作用减弱.动物实验显示:转染miR-181 mimic使移植瘤的质量减轻、移植瘤中TIMP3的表达增加.结论 miR-181具有促进胆囊癌细胞迁移和侵袭的作用,靶向抑制TIMP3是介导该作用的分子机制之一.  相似文献   

7.
目的 研究microRNA-211(miR-211)对卵巢癌SKOV-3细胞上皮-间质转化(EMT)功能的影响及其相关机制.方法 SKOV-3卵巢癌细胞株分别转染miR-211模拟物(211M组)及其阴性对照模拟物(NCM组),并设立未转染对照组,采用RT-PCR法检测各组细胞miR-211含量;Transwell实验检测3组细胞迁移能力和侵袭能力;Western blot法检测3组细胞Snail、α-连环蛋白(α-Catenin)和与性别决定相关的高迁移率基因群4(SOX4)表达水平;采用Western blot法检测SOX4过表达对miR-211抑制EMT的拮抗作用;双荧光素酶实验检测miR-211与SOX4的关系.结果 211M组miR-211的表达水平明显上调,表达水平为未转染对照组的(706.67±30.95)倍(P<0.05).211M组迁移细胞数量为(12.32±0.77)个/视野,明显低于未转染对照组的(82.25±1.05)个/视野(P<0.05).211M组侵袭细胞数量为(9.22±0.32)个/视野,明显低于未转染对照组的(62.10±1.77)个/视野(P<0.05).211M组细胞Snail蛋白表达量明显降低,α-Catenin蛋白表达量明显升高,SOX4蛋白表达量明显降低.SOX4+211M组卵巢癌细胞中Snail蛋白表达量明显升高, α-Catenin蛋白表达量明显降低.双荧光素酶检验结果显示SOX4为miR-211的下游靶基因.结论 miR-211可能通过降低下游靶基因SOX4水平影响EMT相关蛋白表达,抑制卵巢癌SKOV-3细胞的EMT功能.  相似文献   

8.
目的 探讨慢病毒介导miR-145对成骨肉瘤细胞MG-63侵袭及迁移能力的影响。 方法 通过慢病毒携带miR-145表达载体转染骨肉瘤MG-63细胞,实验分为:转染组(转染miR-145阳性序列)、对照组(转染阴性对照序列)、空白组(PBS)。利用生物信息学软件预测血管内皮生长因子(VEGF)为miR-145的候选靶基因,利用双荧光素酶报告基因检测验证miR-145对靶基因VEGF的直接调控作用。实时荧光定量PCR检测基因表达,Western-blot检测蛋白表达,Transwell小室侵袭实验检测细胞侵袭能力,细胞划痕实验检测细胞迁移运动能力。 结果 与对照组比较,转染组细胞内荧光素酶活性明显下降(P<0.05); 与对照组和空白组比较,转染组miR-145 mRNA的表达量显著增加(P<0.05),VEGF mRNA及蛋白表达量显著减少(P<0.05),穿膜细胞数及细胞划痕愈合率均显著降低(P<0.05)。 结论 miR-145通过靶向VEGF基因,进而抑制骨肉瘤MG-63细胞的侵袭及迁移能力。  相似文献   

9.
目的 探索MTA1基因与宫颈癌细胞HeLa侵袭迁移能力的关系.方法 以脂质体LipofectamineTM2000介导的方法将含有MTA1全长基因的质粒pEGFP-C1/MTA1转染HeLa细胞,应用Western blotting检测转染效果,细胞黏附实验检测细胞黏附能力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力的变化,Transwell小室侵袭实验检测细胞侵袭能力的变化.结果 MTA1质粒转染的宫颈癌HeLa细胞中,MTA1蛋白的表达、黏附能力、迁移及侵袭能力均明显高于转染空载体组及未转染组(P<0.05).结论 MTA1基因与宫颈癌细胞的侵袭迁移能力有关,MTA1基因可能成为宫颈癌治疗的一个新的靶点.  相似文献   

10.
目的:研究miR-503对人皮肤黑色素瘤细胞A375迁移、侵袭能力的影响及相关机制.方法:实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)检测黑色素瘤组织及细胞系中miR-503的表达水平;将miR-503模拟物(miR-503 mimics)或miR-503抑制物(miR-503 inhibitors)瞬时转染A375细胞,Transwell实验检测转染后细胞迁移及侵袭能力的变化;生物信息学预测miR-503与CXCL9的结合位点,双荧光素酶报告基因实验检测其靶向结合关系;将CXCL9单独转染或与miR-503共转染A375细胞后,检测细胞迁移及侵袭能力的变化.结果:黑色素瘤组织中miR-503的表达明显低于癌旁组织(t=6.602,P=0.000),且黑色素瘤细胞(A375、SK-MEL-1及SK-MEL-5)中miR-503的表达也均明显低于人表皮黑色素细胞HEM(F=19.445,P=0.000);A375细胞转染miR-503 mimics后迁移及侵袭能力明显受到抑制(P=0.017,P=0.049),而转染miR-503 inhibitors后迁移及侵袭能力明显增强(P=0.004,P=0.000);CXCL9是miR-503的直接靶基因;CXCL9能促进A375细胞的迁移和侵袭(P=0.000,P=-0.009),但其作用效果能被miR-503逆转.结论:miR-503通过靶向调控CXCL9而抑制黑色素瘤细胞的迁移及侵袭.  相似文献   

11.
肺部肿物开胸手术21例分析   总被引:2,自引:1,他引:1  
对21例有肺部肝物的患者行开胸手术和术前抗炎、抗痨治疗,结果治愈5例,术后早期死亡2例,无效4例。文中对肺癌诊断、术前治疗、术后用药及术式等问题进行了讨论.  相似文献   

12.
Background The lung functional status could be displayed on lung perfusion images. With the images, the radiotherapy plans of lung cancer could be guided to more optimized. This study aimed to assess quantitatively the impact of incorporating functional lung imaging into 3-dimensional conformal radiotherapy (3DCRT) and intensity-modulated radiation therapy (IMRT) planning for non-small cell lung cancer (NSCLC). Methods Ten patients with NSCLC who had undergone radiotherapy were included in this study. Before radiotherapy, each patient underwent CT simulation and lung perfusion imaging with single photon emission computed tomography (SPECT). The SPECT images were registered with simulation planning CT and used to contour functional lung (lung-F) and non-functional lung (lung-NF). Two 3DCRT plans and two IMRT plans were designed and compared in each patient: two anatomic plans using simulation CT alone and two functional plans using SPECT-CT in addition to the simulation CT. Dosimetric parameters of the four types of plans were compared in terms of tumor coverage and avoidance of normal tissues. Total radiation dose was set at 66 Gy (2 Gyx33 fractions). Results In incorporating perfusion information in 3DCRT and IMRT planning, the reductions on average in the mean doses to the functional lung in the functional plan were 168 cGy and 89 cGy, respectively, compared with those in the anatomic plans. The median reductions in the percentage of volume irradiated with 〉5 Gy, 〉10 Gy, 〉20 Gy, 〉30 Gy and 〉40 Gy for functional lung in the functional plans were 6.50%, 10.21%, 14.02%, 22.30% and 23.46% in 3DCRT planning, respectively, and 3.05%, 15.52%, 14.16%, 4.87%, and 3.33% in IMRT planning, respectively. No greater degree of sparing of the functional lung was achieved in functional IMRT than in 3DCRT. Conclusion Function-guided 3DCRT and IMRT plannings both appear to be effective in preserving functional lung in NSCLC patients.  相似文献   

13.
目的:探讨单肺移植治疗终末期肺病的手术方法、早期临床结果及围手术期处理方法.方法:2006年6月至2007年1月,为4例终末期肺疾病患者施行了单肺移植手术,均为右侧单肺移植.其中第1和第2例为同1天完成.结果:第1例术后合并顽固的铜绿假单孢杆菌和不动杆菌感染,几乎对所有的抗生素耐药,于术后第33天死于严重感染所致的多脏器衰竭.其余3例均顺利出院,目前生活质量明显改善,SaO2和FEV1均显著提高.结论:单肺移植是治疗终末期肺病的有效方法,但术后感染及排异发生率高,加强围手术期处理非常重要.  相似文献   

14.
目的 探讨床边肺超声方法对ARDS肺复张及保持肺开放效果。方法 通过对2012年11月—2014年3月在该院进行住院治疗的30例急性呼吸窘迫综合征肺复张患者给予床边B超,评价患者的肺损伤程度及肺复张容积,比较患者的肺损伤程度和氧合指数的一致性,肺含气超声评分同P-V曲线相关性分析。结果 所有患者经超声检查阳性率为100%,超声评分为(24.6±7.1)分,经Kappa检验K=0.475,具有良好的一致性;肺复张平均容积为(494.9±212.5)mL,通过对肺含气超声评分同P-V曲线相关性分析,r=0.82,P〈0.05,差异有统计学意义,表明肺含气超声评分同P-V曲线具有良好的相关性。结论 床边B超可以有效测定患者的肺部损伤程度,肺含气超声评分同P-V曲线相关性分析具有良好相关性,临床值得推广应用。  相似文献   

15.
16.
目的 探讨结缔组织病(CTD)患者肺功能尤其是肺弥散功能的损伤情况及其与病程时间的关系;分析肺功能检测对于CTD肺部疾病的临床意义.方法 对我院风湿免疫科已确诊CTD的71例患者进行肺通气功能及弥散功能检测,并与正常组比较.结果 80.00%CTD患者存在肺功能的异常,主要以弥散功能下降为主,其次为肺容积的减少、气道阻塞等.肺功能各项指标的异常率(DLCO)为71.83%,DLCO/肺泡通气量(VA)为31.00%,用力肺活量(FVC)为36.62%,慢肺活量(SVC)为31.00%,1秒用力呼气容积(FEV1)为29.58%,FEV1/FVC为5.60%,VA为69.01%,最大呼气流速(FEFmax)为12.68%,小气道功能(FEF) 25%~75%为35.21%.结论 CTD患者肺功能损害主要以肺弥散功能为主,并伴有肺容量的减低等.肺功能检查较肺部CT更早出现异常,对CTD患者肺部疾病的早期发现、治疗及预防有很好的临床意义.  相似文献   

17.
764—3对大鼠实验性肺纤维化的保护作用   总被引:10,自引:2,他引:8  
给大鼠气管内一次滴注博莱霉素,观察肺部炎症及其修复形成肺纤维化的过程.滴注后第7、21天,可见肺系数及肺组胺含量显著升高。第21天时还有血清丙二醛含量显著升高,而此时肺羟脯氨酸含量无明显改变。提示为亚急性炎症阶段。第60天时,肺羟脯氨酸含量显著升高,表明有肺纤维化形成。764-3治疗可显著缓解博莱霉素所致的上述指标的变化。提示764-3可防止博莱霉素所致肺炎症及其随后发展成肺纤维化。这一作用除直接与其对抗早期的炎症过程有关外,尚不能排除直接地抗纤维化作用。  相似文献   

18.
目的:分析 CT 引导下经皮肺穿刺与纤维支气管镜在慢性阻塞性肺疾病中的诊断价值。方法:选取自2012年8月至2014年11月本院住院患者69例(其中男性45例、女性24例),釆用 CT 引导下经皮肺穿刺、纤维支气管镜,确诊为慢性阻塞性肺疾病,比较二者灵敏度和特异度,并进行 X2检验,观察各自疗效。结果:(1)33例纤维支镜检查患者有1例出现气胸,1例检查过程中发生大出血,无其他明显并发症,并发症总发生率为6.1%。36例 CT 引导下经皮肺穿刺活检患者中有5例患者出现并发症,总发生率为13.9%。其中气胸3例,咯血例1,血胸1例。比较两组方法,经皮肺穿刺活检并发症显著高于纤维支气管镜检查,差异具有统计学意义。(2)以病理检查结果定为金标准诊断为大量脓痰阻塞35例、痰栓形成及堵塞33例,诊断后总确诊率为95.55%(确诊例数/总例数100%)。纤维支气管镜诊断灵敏度,特异性,阳性预测值,阴性预测值(NPV)和准确率分别为90.0%,100%,100%,96.7%,和97.4%。经皮肺穿刺,其值分别为70.0%,59.8%,37.5%,85.2%,和62.4%(P=0.052;P<0.001, P<0.001;P=0.011;P<0.001)。大量脓痰阻塞(35例)诊断准确率,纤维支气管镜准确率高于经皮肺穿刺(94.6%比77.8%;P=0.044)。痰栓形成及堵塞(33例)诊断准确率,纤维支气管镜和经皮肺穿刺的同样高(97.9%比96.3%;P=0.689)。结论:两种检查手段在肺部疾病的诊断上有不同的临床价值,临床上经有机地结合它们,能最大程度地减少漏诊率和误诊率,并且能获取良好的治疗效果。  相似文献   

19.
左肺移植的实验研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的为临床肺移植积累经验。方法分析总结29例犬左肺移植的资料。其中15例的供体肺用Euro-Collings液在4℃下保存6h,14例用UW液保存22~25h,作同种异体移植,并阻断受体的右肺动脉,以测定移植左肺的功能。结果所有的移植左肺均能胜任气体交换,循环稳定。结击本左肺移植方法可靠,可供临床应用时参考。  相似文献   

20.
目的探讨单侧肺移植治疗终末期间质性肺病的手术方法、效果及围手术期的处理措施.方法4例终末期间质性肺病患者包括2例肺淋巴管平滑肌瘤病和2例矽肺,均接受单侧肺移植,其中1例由非血缘供体肺叶移植.术后均接受抗排异免疫治疗及抗感染治疗.结果手术死亡率及术后早期(术后<90 d)死亡率均为零.术后肺动脉压力、血氧分压及二氧化碳分压均较术前有明显改善(P<0.01).随访率为100%.1例术后4个月死亡,1例术后生存2年3个月死亡,其余2例仍在随访中.结论肺移植是目前治疗终末期间质性肺病的唯一有效手段.肺水肿、排异反应、感染、呼吸道并发症以及过度通气等是引起术后呼吸功能不全的主要原因.围手术期的处理是保证肺移植手术成功的关键.  相似文献   

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