丹参对大鼠成骨细胞增殖和分化的影响

目的：了解丹参对SD大鼠成骨细胞增殖和分化的影响。方法：取新生的SD大鼠头盖骨，胶原酶法培养成骨细胞，用MTT法来测定不同浓度丹参对体外培养成骨细胞在24、48、72h不同时段的促细胞增殖作用；采用碱性磷酸（ALP）活性观察上述药物的促细胞分化作用。结果：0．05％、0．10％、0．15％的丹参可促进成骨细胞增殖率提高（P〈0．05）；不同浓度丹参可使碱性磷酸酶（ALP）活性增强（P〈0．05）。结论：丹参具有促进成骨细胞增殖及分化的作用。     

冲击波对体外培养的鼠成骨细胞增殖分化的影响

目的：探讨冲击波对体外培养的鼠成骨细胞的增殖及分化能力的影响。方法：将原代培养的成骨细胞随机分成冲击波组和对照组,用不同能量（5、10、15、20 kV）冲击波处理后接种于96孔培养板,根据细胞存活率和增殖情况确定最佳的冲击波能量值。将传4代成骨细胞用冲击波处理后,用CCK-8法、细胞分泌碱性磷酸酶试剂盒、茜素红染色对两组细胞增殖及分化进行测定。结果：冲击波处理体外原代培养成骨细胞的最佳能量值为10 kV（500次）,CCK-8法检测显示,冲击波组细胞增殖速度快于对照组（P〈0.001）,细胞分泌碱性磷酸酶高于对照组（P〈0.001）,茜素红染色显示,冲击波组矿化结节面积明显大于对照组（P〈0.001）。结论：最佳能量冲击波可促进成骨细胞的增殖与分化。     

大黄酸-雌酮对大鼠成骨细胞增殖和分化的作用

【目的】研究大黄酸-雌酮（LC-1）对原代培养大鼠成骨细胞增殖和分化的作用。【方法】酶消化法分离培养SD乳鼠颅盖骨成骨细胞；采取MTT法测定细胞增殖，磷酸苯二钠法（pNPP）测定细胞内外碱性磷酸酶（ALP）活性，研究不同浓度LC-1对成骨细胞增殖和分化能力的影响，并与雌酚酮和大黄酸的作用进行比较。【结果】给药3d后，与空白对照组相比：10^-6mol／L LC-1组、10^-7mol／L LC-1组和10^-7mol／L雌酚酮组明显促进成骨细胞增殖和增加细胞内外ALP活性（P〈0．05）；大黄酸抑制成骨细胞增殖，其中10^-6mol／L组有明显差异（P〈0．05），同时有增加细胞ALP活性的趋势，但无统计学差异。【结论】大黄酸-雌酮在体外可以促进成骨细胞增殖和分化。     

不同浓度淫羊藿苷对大鼠成骨细胞增殖、分化的影响

目的：观察不同浓度淫羊藿苷对体外培养大鼠成骨细胞增殖、分化及功能的影响。方法：利用酶消化法从新生小鼠颅盖骨中分离和培养成骨细胞;用组织化学染色和矿化结节法进行细胞鉴定;用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测不同淫羊藿苷浓度对大鼠成骨细胞的增殖、分化作用;同时通过检测成骨细胞碱性磷酸酶的活性,以观察淫羊藿苷对成骨细胞功能的影响。结果：与各浓度组比较,10μg/L淫羊藿苷对成骨细胞的生长增殖、分化均有促进作用,且作用最强,最为持久。结论：浓度为10μg/L的淫羊藿苷能显著促进成骨细胞增殖,并增强其成骨活性。     

大鼠长骨成骨细胞体外培养形态观察

目的 建立生长期大鼠长骨成骨细胞体外培养实验模型并观察其生长及骨化过程。方法 以10周龄Wistar大鼠股骨，胫骨为材料，采用酶分次消化法分离成骨细胞，经DME：F－12加10％胎牛血清的培养基原代和传统培养或含50μg/ml L-抗坏血酸和10mmol/L β－甘油磷酸钠的培养基连续培养，追踪观察成骨细胞在体外培养中的增殖及形态变化，并通过Giremsa,ALPey Kossa染色技术，观察细胞体外基质分泌和骨化过程。结果 （1）大鼠工骨成骨细胞具有体内成骨细胞的形态特征，增殖代谢旺盛，其群体倍增时间为78h。（2）成骨细胞分泌形成球形和无定形基质。（3）当给予钙化条件培养时，细胞形成钙化骨基质。（4）大多数细胞ALP染色呈阳性并与基质的钙化密切相关。结论 培养的生长期大鼠长骨成骨细胞具有成骨细胞的某些生物学行为，为儿童骨生长及调控的研究提供了一种实验模型。     

1,25(OH)2D3对体外培养大鼠成骨细胞RANKL/OPG mRNA表达的影响

目的：观察1，25（OH）2D3对体外培养的大鼠成骨细胞RANKL／OPG mRNA表达的影响，探讨其促进骨吸收的作用机制。方法：体外分离培养大鼠成骨细胞，分别观察不同浓度1，25（OH）2D3及用1，25（OH）2D，处理不同时间对RANKL／OPG mRNA表达的影响，RANKL／OPG mRNA表达采用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法测定。结果：1，25（OH）2D3呈时间和剂量依赖性地刺激大鼠成骨细胞RANKL mRNA的表达，而抑制OPG mRNA的表达，使RANKL／OPG值增高。结论：1，25（OH）2D3通过调节成骨细胞RANKL／OPG的基因表达，从而发挥促进破骨细胞介导的骨吸收作用。     

钛片表面粗糙度对成骨细胞合成分泌TGF-β1的影响

目的：研究不同表面粗糙度钛片对成骨细胞TGF-β1蛋白表达的影响。方法：将原代培养的成骨细胞与5种不同表面粗糙度的钛片一机械打磨组G、喷砂组SB1-3、钛浆喷涂组TPS共同培养。采用扫描电镜观察成骨细胞在不同表面钛片上粘附形态的变化，并用ELISA双抗体夹心法对各组细胞培养上清液中TGF-β1蛋白进行了定量检测。结果：粗糙表面细胞为多边形，胞浆丰富，有多个伪足突起呈分化表型，光滑表面细胞呈长梭形，少见伪足突起，粗糙组（SB、TPS）TGF-β1表达较光滑组（G）高，差异有显著性（P＜0．05）；其中喷砂各组随粗糙度的增加TGF-β1的表达呈上升趋势，而TPS表面TGF-β1的表达低于SB3组（P＜0．05）。结论：一定程度的粗糙表面能促进成骨细胞的分化和TGF-β1蛋白表达。     

胰岛素样生长因子-1对成骨细胞增殖影响的实验研究

目的：研究不同浓度胰岛素样生长因子－1（IGF－1）对兔成骨细胞增殖的影响。方法：采用组织块细胞培养技术进行兔成骨细胞分离培养,取第2代成骨细胞分别与0．1ng/ml,1ng/ml,10ng/ml,20ng/mlIGF-1培养,培养24、36小时后行四唑盐比色法检测细胞增殖情况。结果：IGF－1与成骨细胞培养24、36小时,经MTT法检测,不同浓度IGF－1与对照组比较,有显著性差异（P＜0．01）。IGF－1浓度为0．1、1、10ng/ml,各组之间相比存在显著性差异（P＜0．05）,结论：IGF－1对成骨细胞有明显促进增殖作用,在0．1－10ng/ml范围,存在浓度的依赖性。     

鈦片表面微形态对成骨细胞促骨形成因子IGF-I、TGF-β1表达的影响（摘要）

目的研究不同处理钛片表面微形态对成骨细胞促骨形成因子IGF—I、TGF-β1基因表达的影响．材料和方法将原代培养的成骨细胞与5种不同处理的钛片一机械打磨组G、喷砂组SB1～3、钛浆喷涂组TPS共同培养，采用扫描电镜观察了成骨细胞在不同表面钛片上粘附形态的变化，实时荧光定量PCR方法检测不同表面钛片上细胞IGF—ImRNA表达的差异，并用ELISA双抗体夹心法对各组细胞培养上清液中IGF-I、TGF—β1蛋白进行了定量检测．结果（1）细胞粘附形态：     

骨碎补总黄酮对大鼠成骨细胞VEGF和FGF-2表达的影响

目的：观察骨碎补总黄酮对体外培养大鼠成骨细胞血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）和成纤维细胞生长因子2（fibroblast growth factor 2,FGF-2）表达以及碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）活性和矿化结节的影响。方法：在大鼠成骨细胞体系中加入不同浓度的骨碎补总黄酮作用24 h和48 h。采用ELISA和RT-PCR法检测VEGF和FGF-2表达变化,PNPP法检测ALP活性以及von Kossa染色检测矿化结节形成。结果：骨碎补总黄酮可刺激VEGF和FGF-2,使其在蛋白和mRNA水平表达均明显升高,显著提高成骨细胞ALP的活性和促进矿化结节的形成。结论：骨碎补总黄酮可提高成骨细胞VEGF和FGF-2的表达,促进其成骨作用。