应激系统对缺血预适应心肌细胞凋亡的影响

目的 探讨应激系统对缺血预适应中心肌细胞凋亡的影响.方法 以家兔在体心经典缺血预适应(IPC)实验为基础,增设结扎肾上腺组(Lig组),米非司酮组(皮质醇受体水平阻滞剂)(MF组),甲基强的松龙组(MP组),以TUNEL法,DNA ladder及流式细胞仪(FASCan)检测凋亡的存在及凋亡率,同时检测血清皮质醇动态变化,考察应激启动的皮质醇分泌对缺血预适应心肌细胞凋亡的影响.结果 TUNEl染色显示MP组和IPC组比较凋亡率差异没有显著性意义(5.05±2.25 % vs 3.46±0.82 %,P＞0.05),MF组和Lig组与IPC组比较差异有显著性意义(7.73±3.08 %,16.62±12.35 % vs 3.46±0.82 %,P＜0.05);DNA ladder半定量显示MP组和IPC组电泳条带明显减少;流式细胞仪检测显示Lig组,MF组心肌细胞凋亡较IPC组差异有显著性意义(3.82±1.38 %,3.22±0.67 % vs 1.72±0.2 9%,P＜0.05),MP组与IPC组比较差异没有显著性意义(2.04±0.74 % vs 1.72±0.29 %).结论 从细胞凋亡角度观察IPC的心肌保护作用,结扎肾上腺,受体水平阻滞皮质醇作用可明显削弱其保护作用,MP可一定程度模拟其保护作用,说明应激系统的部分组分通过影响IPC的心肌细胞凋亡起到其保护作用.     

腺苷A1受体激动剂延迟预处理保存大鼠心脏的实验研究

目的本研究探讨腺苷A1受体激动延迟预处理对大鼠心脏的保护效果.方法P组以高选择性A1受体激动剂CCPA预处理Wistar大鼠24h后制成离体心脏,4℃改良St.Thomas液,诱导心脏停搏,并放入该液中低温保存4h,再灌注1h.观察心功能恢复率、心肌ATP、Ck-mb释放量.另设单纯改良St.Thomas液保存对照(C).结果P组左室内压上升与下降最大变化速率恢复率(±dp/dtmax,%)为62.83±17.27,66.81±18.99,心肌ATP含量(10-3μmol/wet.g)3.67±1.42;而C组分别为40.41±18.29,44.70±25.14,1.46±0.54.P组都明显高于C组,差别均有显著性(P＜0.01或P＜0.05).结论高选腺苷A1受体激动剂延迟预处理能改善离体大鼠心脏的保存效果.     

槲皮素对糖尿病大鼠心肌非酶糖基化及细胞凋亡的影响

目的 观察槲皮素(quercertin,Que)对糖尿病大鼠心肌非酶糖基化及细胞凋亡、凋亡相关基因Caspase-3表达的影响,探讨槲皮素对糖尿病心肌的保护作用及机制.方法 16只健康雄性SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素诱发糖尿病模型,随机分为糖尿病组(DM)和槲皮素治疗组(Que).同时设立正常对照组(NC)8只.治疗组灌胃给予槲皮素100 mg/kg,每天1次,共8周.分别测定各组大鼠血糖、血清果糖胺(FMN)、心肌AGEs 含量;TUNEL法检测心肌细胞凋亡,免疫组织化学法检测心肌Caspase-3蛋白表达.结果 与正常对照组相比,糖尿病大鼠血糖、血清果糖胺(FMN)及心肌AGEs含量均明显升高(P＜0.01);Caspase-3蛋白表达显著增强(P＜0.01),心肌细胞凋亡数明显增多(P＜0.01);与糖尿病组相比,槲皮素治疗组大鼠血糖、血清果糖胺(FMN)含量无明显改变(P＞>0.05),心肌AGEs含量明显降低(P＜0.01);Caspase-3蛋白表达减弱(P＜0.01),心肌凋亡细胞数减少(P＜0.05).结论 槲皮素可通过抑制糖尿病大鼠心肌组织非酶糖化,下调Caspase-3表达,减少心肌细胞凋亡,发挥心肌保护作用.     

腺苷A1受体激动剂预处理延迟效应保护大鼠心脏的实验研究

目的探讨腺苷A1受体激动剂预处理延迟效应对大鼠心脏的保护效果.方法A组以高选择性A1受体激动剂CCPA预处理Wistar大鼠24 h后制成离体心脏,4℃改良St.Thomas液,诱导心脏停搏,并放入该液中低温保存4 h,再灌注1 h.观察心功能恢复率、心肌ATP、Ck-Mb释放量.另设单纯改良St.Thomas液保存对照组(C).结果A组左室内压上升与下降最大速率恢复率(±dp/dtmax,%)为(62.83±17.27),(66.81±18.99),心肌ATP含量10-3μmol/wet·g(3.67±1.42);而B组分别为(40.41±18.29),(44.70±25.14),(1.46±0.54).A组都明显高于B组,差别均有显著性(P＜0.01或P＜0.05).结论以腺苷A1受体激动剂预处理延迟效应能改善离体大鼠心脏的保存效果.     

吗啡后处理抑制缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡 及其抗氧化机制

 【目的】 探讨吗啡后处理抑制缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡的作用以及与氧化应激的关系。【方法】 SD大鼠45只随机分成3组,每组15只: S组(假手术,只穿线,不结扎);I/R组(单纯缺血再灌注);M组(吗啡后处理 + 缺血再灌注)。再灌注末,TUNEL染色检测细胞凋亡,检测氧化应激指标和心肌caspase-3的活性。【结果】 再灌注120 min,可在I/R组缺血区心肌检测到大量凋亡心肌细胞(18.0 ± 1.1)%,吗啡后处理显著降低心肌细胞凋亡指数(10.8 ± 1.2)%,P < 0.01)。与I/R组相比,吗啡后处理明显上升了心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)活力,降低了心肌组织丙二醛(MDA)含量(P < 0.01)。与假手术的对照组比较,缺血再灌注损伤组caspase-3活性明显增强(P<0.01),而吗啡后处理组明显降低了缺血再灌注损伤所增强的caspase-3活性(P < 0.01)。【结论】 大鼠在体心脏缺血模型,吗啡后处理可通过抗氧化应激,抑制缺血再灌注损伤诱导的心肌细胞凋亡。     

二氮嗪与1,6-二磷酸果糖心麻痹液对大鼠心肌细胞的保护作用

目的 观察含二氮嗪(DZ)与1,6-二磷酸果糖(FDP)心麻痹液对冷保存大鼠心脏心肌细胞凋亡的影响.方法 SD大鼠24只,分为3组(n＝8):对照组、STH组和DF组.离体心脏在4 ℃条件下保存6 h后,在Langendorff装置灌注20 min,转为离体左心脏工作模型10 min.实验终了取心肌组织,检测心肌细胞凋亡指数;心肌丙二醛(MDA)含量,心肌线粒体钙离子含量([Ca2 ]m)、细胞质细胞色素C(Cyt c)含量、细胞质caspase-3活性;部分心肌液氮保存,采用RT-PCR检测心肌细胞caspase-3 mRNA含量.结果 与对照组比较,STH组与DF组再灌注后心肌细胞凋亡指数较明显升高(P＜0.01),但DF组明显低于STH组(P＜0.01).STH组心肌MDA含量、[Ca2 ]m、细胞质 Cyt c 含量显著增高,细胞质caspase-3 mRNA表达增加,caspase-3活性明显高于对照组(P＜0.01).DF组较STH组各项指标显著改善(P＜0.01).结论 含二氮嗪与1,6-二磷酸果糖心麻痹液能减少缺血再灌注引起的心肌细胞凋亡.     

川芎嗪对缺血再灌注后心肌细胞凋亡的影响

目的观察缺血再灌注后大鼠心肌细胞凋亡的特点及川芎嗪对其的影响。方法结扎冠状动脉左前降支45 min,再灌注180 min复制大鼠心肌缺血再灌注(IR)模型,川芎嗪保护组(IR+TMP)在结扎冠脉前30 min腹腔注射川芎嗪(20 mg/kg)。以TUNEL法检测细胞凋亡率,免疫组化法分析Fas、FasL、Capase-8及Capase-3蛋白表达,荧光分析法测定Capase-3活性。结果缺血再灌注组(IR)心肌细胞凋亡指数23.47±3.88较对照组0.41±0.03有显著性升高(P<0.01),Fas、FasL、Capase-8、Capase-3蛋白及Capase-3活性均显著高于对照组(P均<0.05)。川芎嗪保护组(IR+TMP)心肌细胞凋亡指数1.81±0.25较IR组23.47±3.882有显著性降低(P<0.05),Fas、FasL、Capase-8、Capase-3蛋白及Capase-3活性均显著性低于IR组(P均<0.01)。结论缺血再灌注后心肌细胞凋亡数有明显的增多;川芎嗪对缺血再灌注后心肌细胞凋亡有较好的拮抗作用,其机制可能与降低Fas死亡受体通路的信号转导有关。     

牛磺酸对大鼠心肌缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡的影响

目的　探讨牛磺酸对缺血再灌注损伤时心肌细胞凋亡的保护及初步机制。方法　采用在体结扎大鼠冠状动脉左前降支建立心肌缺血再灌注模型。以TUNEL法检测心肌凋亡细胞 ,免疫组化法分析心肌细胞Fas/FasL、Caspase 8及Caspase 3蛋白表达变化。荧光分析法测定Caspase 3活性。结果　凋亡组 (心肌缺血 1h ,再灌注 2 4h)心肌细胞凋亡指数为 (16 .3± 4 .5 2 ) ,较对照组 (0 .4 3± 0 .0 4 )有显著性升高 ,Fas/FasL及Caspase 3蛋白水平也均显著高于正常对照组 (P <0 .0 5 )。牛磺酸保护组的心肌细胞凋亡指数、Fas/FasL、Caspase 3蛋白水平及Caspase 3活性均显著性低于凋亡组。结论　牛磺酸对缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡有较好的拮抗作用 ,其机制可能与降低Fas死亡受体通路中相关蛋白酶水平及其活性有关。     

Effect of heme oxygenase-1 on protection of myocardial cells by resveratrol against doxorubicin-induced apoptosis

目的 探讨血红素加氧酶1(HO-1)在白藜芦醇(RES)抑制阿霉素(DOX)致心肌细胞凋亡中的作用.方法 60 只雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、DOX组、DOX+ RES组和DOX+ RES+HO-1抑制剂锡原卟啉(ZnPP)组,每组15只;除对照组外,均采用经腹腔注射DOX(总剂量12 mg/kg)建立心肌损伤模型.苏木精-伊红(HE)染色后光学显微镜下观察心肌组织病理学改变.采用化学比色法测定血清肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)的活性;分光光度法检测心肌组织HO-1和半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的活性;Western blotting法检测心肌组织HO-1蛋白表达;免疫组织化学法检测心肌组织凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达;TUNEL法检测心肌细胞凋亡率.结果 与对照组比较,DOX组小鼠的CK、LDH和Caspase-3活性、Bax蛋白表达及心肌细胞凋亡率均显著升高(P＜0.01),而HO-1活性及HO-1、Bcl-2蛋白表达均显著降低(P＜0.01).与DOX组比较,DOX +RES组小鼠的CK、LDH和Caspase-3活性、Bax蛋白表达及心肌细胞凋亡率均显著降低(P＜0.01),而HO-1活性及HO-1、Bcl-2蛋白表达均显著升高(P＜0.01);与DOX+ RES组比较,DOX+ RES+ZnPP组小鼠的CK、LDH和Caspase-3活性、Bax蛋白表达和心肌细胞凋亡率均显著升高(P＜0.01),而HO-1活性及HO-1、Bcl-2蛋白表达均显著降低(P＜0.05).结论 HO-1参与RES对DOX致心肌细胞凋亡的抑制作用.     

不同肝切量对肝硬化大鼠肝细胞凋亡及肝储备功能的影响

目的探讨肝硬化大鼠不同量的肝切与肝细胞凋亡、肝储备功能的关系.方法将40只雄性Wistar大白鼠随机分为实验组30只,对照组10只.实验组采用复合因素(CCL4,乙醇)制备肝硬化模型,于模型制成后(15周)再将实验组大白鼠随机分为A、B、C组,每组10只,各组分别作15%、30%和45%肝组织量的切除.切除前后抽血作常规肝功能检测;对切除的肝组织进行石蜡包埋,连续切片作常规病理、细胞凋亡检测.结果A、B、C组大白鼠细胞凋亡指数(AI)肝切前后分别为15%组(25.94±7.24)和(34.17±11.8)、30%组(26.58±8.92)和(44.57±15.49)、45%组(27.16±5.94)和(49.71±19.98),肝切后均较肝切前明显升高(P＜0.05或P＜0.01).结论肝细胞凋亡指数与肝切除量之间呈正相关关系,检测肝硬化患者的肝细胞凋亡程度对了解其肝储备功能具有重要的意义.