转录因子FOXC1促进胶质瘤细胞系U87的侵袭能力

目的：探讨转录因子FOXC1对人脑胶质瘤细胞系U87侵袭的促进作用。方法：qPCR、Western blot检测胶质瘤细胞系U87、U251及正常星型胶质细胞中FOXC1 mRNA和蛋白表达水平。将FOXC1-siRNA转染至U87细胞中,分别用qPCR、Western blot检测FOXC1-siRNA的转染效率。细胞划痕实验和Transwell实验检测U87细胞转染FOXC1-siRNA后对细胞侵袭能力的影响,利用 Western blot检测U87细胞上皮间质化相关通路蛋白（Snail1、β-catenin、Twist1）、标记蛋白（N-cadherin、Vimentin、E-cadherin）表达水平。结果：U87细胞下调FOXC1表达后侵袭能力明显减弱,上皮间质化相关通路蛋白（Snail1、β-catenin、Twist1）表达水平下降,上皮细胞标记蛋白表达水平E-cadherin表达水平升高、间质细胞标记蛋白N-cadherin、Vimentin表达水平降低。结论：转录因子FOXC1通过上皮间质化促进胶质瘤细胞的侵袭。     

IL-18诱导的肿瘤相关巨噬细胞对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭作用的影响

目的 探讨外源性IL-18对单核细胞(THP-1)的活化作用以及白介素18(IL-18)激活诱导的肿瘤相关巨噬细胞(Tumor-associated macrophages,TAMs)对肺癌A549细胞增殖、转移和侵袭作用的影响。方法 外源性IL-18刺激THP-1细胞后检测M1、M2型TAMs的比例;IL-18激活诱导的TAMs和肺癌细胞A549共培养,平板克隆形成实验检测共培养后A549细胞增殖作用的变化;细胞划痕实验检测共培养后A549细胞迁移作用的变化;细胞侵袭实验观察共培养后A549细胞体外侵袭作用的变化;扫描电镜观察共培养后A549细胞形态的变化;qRT-PCR和western blot检测共培养后A549细胞EMT标志蛋白E-cadherin和N-cadherin、 Snail以及Slug的表达。结果 外源性IL-18刺激THP-1细胞表型由M2向TAMs方向分化;IL-18诱导TAMs促进了A549细胞增殖、迁移和侵袭能力;扫描电镜观察发现TAMs促进A549细胞尾足生长;qRT-PCR和western blot检测结果表明TAMs抑制A549细胞E-cadherin的表达,促进了N-cadherin、 Snail以及Slug的表达,说明TAMs激活了A549细胞发生EMT。结论 在肺癌中,IL-18可以激活诱导TAMs并促进其活化,活化后的TAMs通过激活EMT机制促进肺癌A549细胞的增殖、迁移和侵袭作用。     

DEPTOR蛋白对胶质瘤间叶细胞转化能力影响及机制的探讨

目的 探讨siRNA干扰降低DEPTOR蛋白表达对U87细胞侵袭能力的影响及其机制.方法采用Western blot方法 检测U87细胞中DEPTOR蛋白表达.应用siRNA干扰技术转染U87细胞株,并用Western blot法检测瞬时转染以后DEPTOR蛋白的表达.体外侵袭实验观察转染后侵袭能力的改变.DEPTOR蛋白降低后,用Western blot检测间叶细胞来源的T-cadherin、N-cadherin、Vimentin蛋白和调节因子Snail、Twist1、Slug、Zeb1的表达.结果 转染DEPTOR质粒的U87细胞DEPTOR表达降低.DEPTOR表达降低的SiDEPTOR/U87细胞侵袭并穿透Matrigel膜基质的细胞数量为(42±0.789),明显比SCR/U87组(22±1.197)多,差异有统计学意义(P＜0.05);同时Western blot结果显示:T-cadherin降低,N-cadherin、Vimentin蛋白表达量升高,与间质转化相关的转录因子仅Twist1的表达升高,而转录因子Slug、Snail、Zeb1表达无明显改变.结论 应用siRNA干扰技术降低DEPTOR蛋白的表达使U87细胞侵袭转移能力增强,同时T-cadherin降低,N-cadherin、Vimentin蛋白和转录因子Twist1的表达量升高,提示DEPTOR蛋白表达降低可通过调节转录因子Twist1进一步影响U87细胞的侵袭.     

长期索拉菲尼暴露促进Huh7肝癌细胞上皮间质变的实验研究

目的探讨索拉菲尼耐药肝癌细胞发生上皮间质变(EMT)及侵袭、转移能力增强的机制。方法通过药物连续诱导人肝癌细胞株Huh7建立索拉菲尼耐药肝癌细胞株Huh7R,显微镜下观察细胞形态学变化;CCK-8细胞增殖试验检测Huh7R细胞增殖能力;荧光定量PCR检测ABC家族耐药基因ABCB1、ABCC1、ABCG2及EMT相关调控锌指蛋白转录因子Snail、Slug基因表达水平;Westernblot检测耐药蛋白ABCG2,EMT标记分子E-cadherin、Vimentin及N-cadherin,转录因子Snail、Slug蛋白表达水平;Transwell小室侵袭试验检测Huh7R细胞迁移、侵袭能力。结果Huh7R细胞呈细长形,伴纤维状突起,形态学上符合EMT改变;CCK-8细胞增殖试验显示在索拉菲尼作用下,Huh7R细胞生存率高于Huh7细胞;荧光定量PCR结果显示,Huh7R细胞ABCB1、ABCC1、ABCG2及Snail、Slug基因表达水平均高于Huh7细胞（均P＜0.05）;Westernblot显示,Huh7R细胞上皮标记蛋白E-cadherin表达水平低于Huh7细胞（P＜0.05）,而间质标记蛋白Vimenti、N-cadherin及Snail、Slug蛋白表达水平均高于Huh7细胞（均P＜0.05）;Transwell小室侵袭试验显示Huh7R细胞迁移、侵袭能力均较Huh7细胞增强。结论长期低剂量索拉菲尼暴露会促进肝癌细胞Snail和Slug表达,诱导肿瘤细胞发生EMT,增强其侵袭、转移能力。     

双氢青蒿素抑制非小细胞肺癌细胞迁移侵袭和血管生成拟态的初步研究

目的 探讨双氢青蒿素(DHA)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞生长、迁移侵袭和血管生成拟态(VM)能力的影响。方法 将不同浓度的DHA加入NSCLC细胞株A549与H3255中,待24 h后,CCK8法检测细胞活力,Transwell实验检测NSCLC细胞的迁移侵袭能力。qRT-PCR和Western blot分别检测E-cadherin、N-cadherin、Vimentin mRNA和蛋白表达水平。三维细胞培养观察细胞的血管样形态生成情况。qRT-PCR和Weston blot检测VM的标志物VE-cadherin mRNA和蛋白表达水平。结果 DHA抑制A549和H3255的细胞生长,并呈现时间依赖性和浓度依赖性;DHA抑制A549和H3255转移和侵袭能力(均P<0.001);DHA在A549和H3255细胞中上调E-cadherin mRNA(均P<0.001)和蛋白(P<0.001;P<0.01)的表达,下调N-cadherin mRNA(均P<0.01)和蛋白(均P<0.001)的表达以及Vimentin mRNA(P<0.01;...     

BCAR3诱导乳腺癌上皮间质转化及与癌细胞迁移、侵袭的关系

目的:观察他莫昔芬耐药乳腺癌细胞BCAR3的表达与上皮间质转化(EMT)现象和乳腺癌的迁移侵袭的关系。探讨他莫昔芬耐药和乳腺癌细胞EMT现象的相关性。方法:以实时定量PCR和Western blot检测乳腺癌上皮样和间质样细胞系中BCAR3的表达;Western blot检测乳腺癌MCF-7、MCF-BCAR3和BT-549中介导EMT发生的转录因子Twist、上皮性标记基因E-钙黏素(E-cadherin)和间质性标记基因N-钙黏素(N-cadherin)表达的改变情况。Transwell侵袭实验检测乳腺癌MCF-7、MCF-BCAR3和BT-549侵袭转移能力。结果:BCAR3在乳腺癌上皮样细胞系中的表达明显低于间质样细胞系;E-cadherin蛋白在MCF-7细胞中的表达为阳性,Twist和N-cadherin表达为阴性;他莫昔芬耐药的细胞MCF-BCAR3 E-cadherin蛋白表达缺失,而Twist和N-cadherin表达阳性。BCAR3过度表达导致乳腺癌细胞MCF-7迁移和侵袭能力增强。结论:过度表达BCAR3增强乳腺癌细胞迁移和侵袭能力,并对他莫昔芬治疗产生耐药,可能与BCAR3诱导乳腺癌上皮间质转化有关。     

岩藻糖基转移酶Ⅶ通过sLeX糖基化诱导肺癌A549细胞上皮间质转化的研究

目的研究岩藻糖基转移酶Ⅶ（FUT7）对肺癌A549细胞上皮间质转化（EMT）的影响。方法采用质粒转染法对A549细胞中FUT7基因进行过表达;划痕实验检测细胞侵袭能力;Westernblot法检测唾液酸化的路易斯寡糖-X抗原（sLeX）糖抗原以及EMT相关蛋白表达水平。结果转染FUT7过表达质粒后A549细胞中FUT7蛋白的表达明显增强（P＜0.01）,与空白质粒转染组相比,sLeX抗原表达增高（P＜0.05）,细胞侵袭能力增强。FUT7过表达质粒转染组与空白质粒转染组相比,E-cadherin蛋白表达减少,N-cadherin、Vimentin蛋白表达均增加（均P＜0.01）,利用sLeX抗体封闭细胞表面sLeX抗原后FUT7过表达细胞E-cadherin蛋白表达增加（P＜0.05）,而N-cadherin、Vimentin蛋白表达减少（P＜0.05或0.01）。结论FUT7可通过sLeX糖基化作用诱导肺癌A549细胞发生EMT,导致细胞侵袭转移能力增强。     

姜黄素抑制肺癌细胞A549上皮间质转化的机制研究

目的 探讨姜黄素对肺癌细胞A549上皮间质转化的影响。方法 姜黄素诱导肺癌细胞A549 24 h,CCK-8法检测A549细胞活性,Transwell实验检测A549细胞迁移、侵袭的能力,Western blotting检测上皮间质转化标志蛋白的相对表达量,实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测HOTAIR、E-cadherin、N-cadherin及Snail mRNA的相对表达量,测序方法检测姜黄素诱导后lncRNA表达的变化,实验验证介导姜黄素发挥作用的具体非编码RNA,分析HOTAIR与临床病理参数之间的关系。结果 CCK-8法检测结果显示,姜黄素诱导肺癌细胞A549 24 h后,不同浓度组肺癌细胞A549的OD值比较,差异有统计学意义（P <0.05）,随着姜黄素浓度的升高,OD值降低。Transwell结果显示,姜黄素诱导肺癌细胞A549 24 h后,姜黄素诱导组抑制肺癌细胞A549的侵袭、迁移,与对照组比较,差异有统计学意义（P <0.05）。Western blotting和qRT-PCR检测结果显示,姜黄素诱导组的间质表型基因和蛋白（E-cadherin、N-cadherin、Snail）与对照组比较,差异有统计学意义（P <0.05）,N-cadherin、Snail相对表达量下降,E-cadherin相对表达量升高。癌旁正常组和肺癌组中HOTAIR的相对表达量比较,差异有统计学意义（P <0.05）,肺癌组高于癌旁正常组。测序检测和qRT-PCR结果显示,姜黄素抑制HOTAIR的表达。分析HOTAIR在肺癌组织中的表达及其与临床病理参数之间的关系显示,HOTAIR的表达与TNM分期、分化程度、淋巴结转移密切相关。对照组、姜黄素诱导组、姜黄素诱导+HOTAIR过表达组A549细胞OD值比较,差异有统计学意义（P <0.05）。结论 姜黄素有效抑制肺癌细胞A549的增殖、侵袭及迁移,姜黄素抑制lncRNA HOTAIR表达,姜黄素抑制肺癌细胞A549上皮间质转化是通过HOTAIR实现的。     

Hedgehog信号通路调控胰腺癌细胞上皮间质转化的作用机制

目的 观察特异性阻断hedgehog(Hh)信号通路对胰腺癌Panc-1细胞上皮间质转化(EMT)过程的影响,探讨其分子机制.方法 设计并合成针对Smoothened (SMO)基因特异性的RNA干扰靶点,运用慢病毒介导的RNA干扰技术沉默SMO基因表达以阻断人胰腺癌Panc-1细胞Hh信号通路.应用Matrigel/Transwell法检测阻断Hh信号通路后胰腺癌细胞侵袭能力的变化,应用实时PCR及Western印迹方法检测阻断Hh通路后Panc-1细胞EMT标志物E-cadherin、N-cadherin、β-catenin、Vimentin、Fibronectin等的表达变化;并检测EMT调控因子Snail、Slug等的表达变化.结果 稳定干扰SMO基因表达阻断Hh信号通路后,人胰腺癌Panc-1细胞侵袭能力明显降低,p=0.020;上皮表型标志物E-cadherin表达明显上调,而间质表型Vimentin、Fibronectin、N-cadherin等的表达水平显著下调,P值分别为0.020、0.001、0.031和0.022;与对照组相比,SMO干扰组细胞中转录因子Snail、Slug的表达水平均显著下调,P值分别为0.018和0.016.结论 应用慢病毒介导的RNA干扰技术特异性沉默SMO基因阻断人胰腺癌细胞中Hh通路活性,可显著抑制Panc-1细胞EMT过程,其机制与下调转录因子Snail及Slug表达有关.     

Runx3对人骨肉瘤143B细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制

目的探讨Runt域转录因子3（Runx3）对人骨肉瘤细胞143B细胞增殖、迁移和侵袭的影响及分子机制。方法构建Ruxn3的RNA干扰（Ad-siRunx3）和过表达Runx3（Ad-Runx3）的重组腺病毒质粒;MTT和克隆形成实验检测143B细胞的增殖;划痕实验和Transwell小室实验分别检测143B细胞的迁移和侵袭;RT-qPCR和Western blot检测上皮-间质转化（EMT）关键分子E-cadherin、N-cadherin、Vimentin和Snail的表达;Western blot检测PI3K/AKT和丝裂原活化蛋白激酶（MAPKs）信号通路关键分子的表达。结果下调Runx3表达可促进143B细胞的增殖、迁移和侵袭,增强N-cadherin、Vimentin和Snail表达,但抑制E-cadherin表达;过表达Runx3则可抑制143B细胞增殖、迁移和侵袭,抑制N-cadherin、Vimentin和Snail表达,但促进E-cadherin表达;同时,下调Runx3表达可增加AKT、p38和ERK1/2磷酸化水平,而过表达Runx3则能够降低AKT、p38和ERK1/2的磷酸化水平。结论 Runx3能抑制143B细胞的增殖、迁移和侵袭,其机制可能与Runx3阻止EMT进程、抑制AKT信号以及p38和ERK1/2 MAPKs信号途径有关。     

SIRT1通过调控Snail表达参与食管癌EC-9706和Eca-109细胞的上皮间质转化

目的探讨沉默信息调节因子1（SIRT1）诱导食管癌EC-9706和Eca-109细胞上皮间质转化（EMT）发生中的作用和机制。 方法转染3条化学合成SIRT1 siRNA入食管癌EC-9706和Eca-109细胞,以空白细胞和转染阴性对照siRNA细胞作为对照, real-time PCR和western blot 检测转染效果。Transwell 侵袭小室和划痕实验检测各组细胞的侵袭转移能力变化。Real-time PCR和Western blot检测各组细胞上皮间质转化相关分子E-cadherin和vimentin的表达变化,同时进一步检测E-cadherin转录 抑制因子Snail、twist1 和ZEB的表达变化。结果与空白组和阴性对照组细胞相比,转染SIRT1 siRNA1 和SIRT1 siRNA3 的 EC-9706和Eca-109细胞SIRT1 mRNA和蛋白表达均明显降低,差异有统计学意义（P<0.01）。Transwell侵袭小室和划痕实验 结果显示转染SIRT1 siRNA1和SIRT1 siRNA3组EC-9706和Eca-109细胞穿膜细胞数和划痕愈合能力较空白组和阴性对照组 细胞下降,差异有统计学意义（P<0.05）。转染SIRT1 siRNA1和SIRT1 siRNA3组EC-9706和Eca-109细胞E-cadherin表达明显 升高,而vimentin 表达下降,与空白组和阴性对照组细胞相比差异有统计学意义（P<0.05）。转染SIRT1 siRNA1 和SIRT1 siRNA3组EC-9706细胞Snail表达下降,与空白组和阴性对照组细胞相比差异有统计学意义（P<0.01）。转染SIRT1 siRNA1和 SIRT1 siRNA3 组Eca-109 细胞Snail 和twist1 表达下降,与空白组和阴性对照组细胞相比差异有统计学意义（P<0.01）。结论 SIRT1有可能通过调控Snail表达诱导EMT发生从而在食管癌细胞侵袭转移中发挥作用。     

过表达组蛋白去乙酰基酶11抑制基底样乳腺癌细胞的侵袭和转移

目的研究组蛋白去乙酰基酶11（HDAC11）在基底样乳腺癌（BLBC）细胞侵袭和转移中的调控作用。方法利用GEO和 TCGA数据库分析了HDAC11在BLBC中的表达,并用Transwell实验和裸鼠模型研究HDAC11对BLBC细胞侵袭和转移的影 响。使用免疫共沉淀的方法观察HDAC11与Twist蛋白的相互结合,用启动子报告基因和染色体免疫共沉淀的方法鉴定HAS2 是否为Twist 的靶基因。结果与其他乳腺癌亚型相比,HDAC11 在基底样乳腺癌中的表达较低。在BLBC细胞中过表达 HDAC11可以强烈抑制BLBC细胞的体外迁移、侵袭和在裸鼠体内转移。HDAC11识别并占据Twist蛋白的DNA结合域,对抗 其促侵袭的功能,并抑制Twist诱导的HAS2基因转录。结论HDAC11过表达可抑制BLBC细胞的侵袭和转移。     

RNAi下调LOX表达对人肺癌细胞乏氧转移的影响及其分子机制

目的观察RNA干扰（RNAi）下调赖氨酸氧化酶（lysyl oxidase,LOX）表达对人肺癌细胞95D乏氧转移的影响及其分子机制。方法应用针对人LOX基因的小于扰RNA（LOX siRNA）转染常氧（19％O2）95D细胞,24h后将细胞蚩乏氧（0．5％O2）培养箱孵育,乏氧24h后采用实时PCR检测细胞LOX mRNA和Snail mRNA表达,Western blot技术评价Src、磷酸化Src（P-Src Y418）和Snail蛋白表达,Transwell小空评价细胞侵袭能力．结果与常氧95D细胞比较,乏氧引起细胞LOX mRNA表达和细胞侵袭能力分别增加14倍和2．12倍。与对照siRNA组比较,LOX siRNA转染使乏氧细胞LOX mRNA表达下降70％～75％,侵袭能力下降约30％,P—Src Y418和Snail蛋白表达降低约40％（P〈0．05）,但不影响Src蛋白表达和Snail mRNA水平（P〉0．05）。结论LOX表达下调降低人肺癌细胞乏氧侵袭与减少Src活化和Snail蛋白表达有关,为LOX成为防治肺癌乏氧转移的潜在靶点提供了实验依据。     

LyGD1基因转染对肺腺癌A549细胞生长及放化疗敏感性的影响

目的研究转染LyGDI基因对肺腺癌A549细胞生长及放、化疗敏感性的影响。方法用脂质体介导的方法,将构建于pEGFP载体上的LyGDI及空载体pEGFP-C1转入A549细胞,用G418筛选出稳定表达株,RT-PCR法了解LyGDI基因在转染细胞中的表达情况;用平板克隆形成实验研究细胞生长情况;体外划痕试验观察对细胞侵袭及转移能力的影响;甲基偶氮唑蓝法、克隆形成实验分别研究细胞对放、化疗的敏感性。结果转染细胞中有相应融合基因表达;与转染前比较,基因转染后,阳性细胞尤其是表达LyGDI的A549细胞克隆形成能力显著降低（P〈0.01）,对常用化疗药物顺铂和放射线敏感度显著提高（P〈0.05或〈0.01）。结论建立了稳定转染细胞株;LyGDI转入抑制了A549细胞的生长能力,且增加了细胞对放、化疗的敏感性。     

HA 转 hGM-CSF HepG2疫苗对 IL-6诱导 HepG2细胞 EMT的影响及机制

目的：探讨 HA 转 hGM-CSFHepG2疫苗逆转 IL-6诱导 HepG2肝癌细胞上皮-间质转化（EMT）的机制。方法：体外用 HA 转 hGM-CSFHepG2疫苗共培养受 IL-6刺激的 HepG2细胞,采用 Traswell 迁移实验,Western-blot、RT-PCR 方法分别检测疫苗处理前后 HepG2细胞的增殖及侵袭能力的变化、EMT 标志物 E-cadherin、调控因子（p-Stat3、Twist）蛋白及 E-cadherinmRNA、TwistmRNA 表达变化情况。结果：① IL-6组较阴性对照组穿膜细胞数明显增多,侵袭能力明显增强,差异有统计学意义。② IL-6组较阴性对照组 E-cadherin 的表达水平降低, p-Stat3、Twist 蛋白表达升高,差异均有统计学意义。③疫苗组的穿膜细胞数较其他三组明显减少,侵袭能力下降,差异均有统计学意义。④转染后的疫苗组较其他三组 E-cadherin 蛋白表达升高,而 p-Stat3、Twist 蛋白表达下降,且差异均有统计学意义。⑤疫苗组较其他三组 E-cadherinmRNA 表达上调、TwistmRNA 表达下调,且差异均有统计学意义。结论：① IL-6能诱导 HepG2细胞产生 EMT 现象。②60Co 处理的转 hGM-CSF 基因 HepG2疫苗可能通过下调转录因子 Twist及 Stat3的表达进而逆转 IL-6诱导 HepG2细胞 EMT。     

汉黄芩素对肺癌细胞株A549的体外作用研究

目的:探讨体外汉黄芩素对肺癌细胞株A549增殖、侵袭及凋亡的影响。方法:应用MTT(噻唑蓝)法检测汉黄芩素对于A549细胞增殖活性;用形态学方法观察汉黄芩素对A549细胞的促凋亡作用;应用Transwell法观察细胞侵袭能力。结果:汉黄芩素对A549细胞增殖和侵袭活性具有明显抑制作用,对肺癌细胞有明显促凋亡作用,镜下可见染色体聚集及细胞核碎裂。结论:汉黄芩素对肺癌A549细胞的增殖迁移均有明显抑制作用并可促进肿瘤细胞凋亡。     

Twist蛋白在结直肠癌中的表达水平及其促进癌症发展的机制研究

目的  研究Twist蛋白在结直肠癌中的表达水平,其对结直肠癌细胞的增殖以及侵袭能力的影响,并探讨其促进癌症发展具体的机制。方法  经结肠镜活检取20例患者组织和20例正常人的标本,采用实时定量PCR的方法检测了Twist的mRNA表达水平。采用脂质转染法对结直肠癌细胞系CT-26细胞进行RNA干扰,采用CCK-8法及transwell法观察干扰Twist后对结直肠癌细胞的增殖以及侵袭能力的影响;采用RT-PCR以及Western blot检测了CT-26细胞中MMP-9的mRNA及蛋白水平。结果  Twist在结直肠癌组织中的mRNA水平显著高于对应癌旁组织以及对照组（P <0.05）;在伴有淋巴结转移的癌组织中Twist mRNA的表达水平显著高于无淋巴结转移的组织（P <0.05）;与转染对照组比较,Twist siRNA转染的CT-26细胞增殖水平及迁徙能力均显著降低（P <0.05）;干扰Twist的CT-26细胞能够显著降低金属蛋白酶MMP-9 mRNA及蛋白的水平。结论  Twist蛋白能够增加结直肠癌癌细胞的增殖及迁徙能力,其影响机制可能与金属蛋白酶MMP-9有关。

     

甲状腺乳头状癌中PBX3和Twist表达的临床意义

目的：研究前B细胞白血病同源盒基因3（PBX3）和Twist在甲状腺乳头状癌（PTC）中mRNA和蛋白的表达特点,探讨其表达的临床意义。方法：收集60例PTC和30例相应癌旁组织（距离肿瘤≥2 cm）的手术切除标本,应用免疫组化En Vision二步法检测石蜡包埋组织PBX3 和Twist蛋白的表达,实时荧光定量PCR检测新鲜组织中PBX3和Twist mRNA的表达水平,通过统计学软件分析PTC中PBX3和Twist的mRNA和蛋白表达与患者不同临床病理特征的关系,并对二者蛋白表达的相关性采用Spearman等级相关分析。结果：实时荧光定量PCR结果显示,PTC组织中PBX3和Twist mRNA表达水平均高于癌旁组织（P ＜0.05）;免疫组化结果显示,PTC组织中PBX3和Twist蛋白的阳性表达率分别为73.33%（44/60）和68.33%（41/60）,癌旁组织分别为16.67%（5/30）和13.33%（4/30）,癌组织中的表达显著高于癌旁组织（P ＜0.05）。伴有包膜侵犯、淋巴结发生转移和III～IV期PTC组织中PBX3 mRNA和蛋白表达均高于无包膜侵犯、无淋巴结转移及I～II期PTC组织（P ＜0.05）。包膜是否侵犯、淋巴结是否转移及I～II期和III～IV期PTC组织中Twist mRNA和蛋白表达均有差异（P ＜0.05）。PBX3 和Twist蛋白在PTC中的表达呈明显的正相关（r =0.400,P ＜0.05）。结论：PTC组织中PBX3 和Twist mRNA和蛋白表达均出现上调,其异常高表达与PTC的发生、侵袭和转移密切相关。PBX3 和Twist的表达呈正相关,表明二者表达变化可能在PTC的进展中起协同作用。     

去泛素化酶USP33通过下调SLIT2/ROBO1信号通路抑制肺腺癌的侵袭和转移

目的探讨去泛素化酶USP33参与调节SLIT2/ROBO1信号通路抑制肺腺癌的侵袭转移的机制。方法采用qPCR、免疫 组化的方法检查USP33在肺腺癌中的表达,利用A549、SPC-A-1细胞,以沉默USP33后作为沉默组,空白组作为对照,72 h后用 qPCR与Western blot检测USP33的沉默效果,利用划痕实验、细胞迁移和侵袭基质胶法检测USP33沉默后对细胞侵袭转移的 影响,利用Western blot检测USP33的沉默后SLIT2和ROBO1表达,IL6刺激后USP33的表达。结果qPCR、免疫组化显示与 肺腺癌癌组织相比,癌旁组织USP33表达量明显增加（P<0.05）;与空白组相比,qPCR、Western blot结果显示沉默组USP33的表 达量明显下降（P<0.05）;划痕实验,Transwell 迁移实验,Boyden 侵袭实验提示USP33 沉默后细胞迁移、侵袭转移率明显增加 （P<0.05）;抑制USP33 后,SLIT2 和ROBO1 表达均下调;IL6 刺激使USP33 的表达增加（P<0.05）。结论USP33 抑制A549、 SPC-A-1细胞迁移、侵袭转移,其侵袭转移的机制可能与炎症因子IL6、SLIT2/ROBO1信号通路存在交叉作用。