VEGF与MMP-2在子宫腺肌病子宫内膜-肌层界面的表达及意义

目的:探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)在子宫腺肌病患者子宫内膜-肌层界面(endometrial-myometrial interface,EMI)的表达及意义.方法:采用免疫组化ElivisiongTM Super法对40例子宫腺肌病患者(观察组)子宫内膜(含部分肌层)和对照组40例子宫肌瘤患者子宫内膜(含部分肌层)的组织进行标记、检测并比较.结果:观察组增生期及分泌期EMI处VEGF、MMP-2的表达均显著高于远肌层,且显著高于对照组.结论:子宫腺肌病患者EMI处VEGF的高表达,可促使异位内膜及其周围肌层血管生成,而EMI处MMP-2的过度表达与子宫腺肌病内膜组织侵袭力和平滑肌大量增生有关,二者可能在子宫腺肌病的发生发展中起协同作用.     

B细胞淋巴瘤/白血病-2在子宫腺肌病中的表达及意义

目的研究B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)在子宫腺肌病远肌层内膜、子宫内膜—肌层界面(EMI)处和异位灶内膜中的表达情况。方法应用免疫组织化学SP法测定40例腺肌病子宫(增生期20例、分泌期20例)的远肌层内膜、EMI处和异位灶内膜中Bcl-2的表达。结果从增生早期至分泌早期,Bcl-2在EMI处腺上皮细胞的表达均呈阳性反应,增生中晚期Bcl-2表达最强,至分泌中晚期则表达基本消失。EMI处、异位灶腺上皮细胞的表达高于远肌层腺上皮(P<0.05),且增生期高于分泌期(P<0.05)。EMI处与异位灶的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论异位灶腺上皮细胞Bcl-2的表达与EMI处的表达相似,均高于远肌层内膜。     

TNF-α在子宫腺肌病中的表达及其临床意义

检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)在子宫腺肌病中的免疫组化定位和表达,探讨TNF-α在子宫腺肌病发生中的临床意义。方法采用SABC免疫组化技术观察子宫腺肌病(33例)标本中TNF-α的组织定位和表达,并按照其染色强度进行统计学分析。结果子宫腺肌病中存在TNF-α的表达;TNF-α在原位子宫内膜中的表达强度,分泌期高于增生期,并且呈周期性变化;TNF-α在异位子宫内膜中的表达强度分别高于原位子宫内膜和正常子宫内膜,但是异位子宫内膜和子宫肌层中表达无周期性变化。结论TNF-α在异位子宫内膜中的高表达提示子宫腺肌病的发生发展受卵巢激素和多种细胞因子的调节。     

TNFα和TNFR1在子宫腺肌病组织中的表达及意义

目的 检测肿瘤坏死因子α(TNFα)和肿瘤坏死因子受体1(TNFR1)在子宫腺肌病(腺肌病)组织中的表达,探讨其发病机制.方法 采用免疫组化SABC法检测40例腺肌病患者在位及异位子宫内膜组织TNFα和TNFR1的表达,并与20例正常子宫内膜进行比较.结果 TNFα在腺肌病组在位、异位及对照组内膜中的表达差异均无显著性(P＞0.05);而TNFR1除在腺肌病组异位内膜显著低于对照组外(P＜0.05),余组问差异均无显著性(P＞0.05).腺肌病组在位内膜增生期与分泌期TNFα的表达差异无显著性(P＞0.05),而TNFR1的表达分泌期显著高于增生期(P＜0.05);腺肌病组异位内膜增生期与分泌期TNFα、TNFR1的表达差异均无显著性(P＞0.05);而在对照组两者的表达均分泌期明显高于增生期(P＜0.05).TNFα在腺肌病组在位内膜增生期的表达显著高于对照组同期(P＜0.05);TNFR1在分泌期的表达为腺肌病组异位内膜＜腺肌病在位内膜＜对照组,两两比较差异均具有显著性(P＜0.05).结论 TNFα、TNFR1参与正常子宫内膜的周期性调节.在位内膜分泌期及异位组织中TNFR1的低表达可能与腺肌病的发生发展有关.     

TNF—α在子宫腺肌病中的表达及其临床意义

目的：检测肿瘤坏死因子α（TNF-α）在子宫腺肌病中的免疫组化定位和表达。探讨TNF－α在子宫腺肌病发生中的临床意义。方法：采用SABC免疫组化技术观察子宫腺肌病（33例）标本中TNF－α的组织定位和表达,并按照其染色强度进行统计学分析。结果：子宫腺肌病中存在TNF－α的表达;TNF－α在原位子宫内膜中的表达强度,分泌期高于增生期,并且呈周期性变化;TNF－α在异位子宫内膜中的表达强度分别高于原位子宫内膜和正常子宫内膜,但是异位子宫内膜和子宫肌层中表达无周期性变化。结论：TNF－α在异位子宫内膜中的高表达提示子宫腺肌病的发生发展受卵巢激素和多种细胞因子的调节。     

基质金属蛋白酶-9及其抑制剂-1在子宫腺肌病子宫内膜-肌层界面的表达

目的：探讨子宫腺肌病患者在位子宫内膜、子宫内膜-肌层界面（endometrial—myometrial interface，EMI）基质金属蛋自酶-9（MMP-9）及其抑制物-1（TIMP—1）的表达及其生物学意义。方法：采用免疫组化SP方法对40例子宫腺肌病的子宫内膜（含部分肌层）和40例子宫肌瘤的子宫内膜（含部分肌层）的组织进行分析。结果：腺肌病组MMP-9的表达强度EMI处显著高于远肌层（P〈0．05）。EMI处MMP-9表达，腺肌病组显著高于对照组（P〈0．05）。EMI处TIMP-1在增生期和分泌期的表达，腺肌病组明显低于对照组（P〈0．05）。TIMP-1在EMI和远肌层的表达比较无显著差异（P〉0．05）。结论：子宫腺肌病组EMI处的内膜腺体中MMP-9的高表达，可使子宫内膜的侵蚀能力增强，可能参与子宫腺肌病的发生和发展。     

米非司酮对不同月经周期异位和在位子宫内膜雌激素受体α和孕激素受体表达的影响

目的 探讨米非司酮对雌激素受体α(ERα)和孕激素受体(PR)在不同月经周期的子宫腺肌症中表达的影响.方法 47例行全子宫切除术的子宫腺肌症患者分为米非司酮组(n=24)和未用药组(n=23);无腺肌症的正常子宫内膜作为对照组(n=15).运用免疫组化的方法测定异位和在位子宫内膜及正常子宫内膜在不同月经周期的腺上皮及间质细胞中ERα和PR水平.结果 未用药组ERα和PR在异位子宫内膜腺上皮及间质细胞中的表达均低于在位内膜及对照组正常内膜(P<0.05).对照组及未用药组ERα和PR在在位内膜腺上皮细胞中的表达,增生期高于分泌期(P<0.05),而在未用药组异位内膜,差异无统计学意义(P>0.05).ERα和PR在异位和在位子宫内膜中的表达,米非司酮组低于未用药组(P<0.05).结论 ERα和PR在异位子宫内膜中的表达与在位子宫内膜不同;异位内膜丧失了正常内膜的周期性变化规律;米非司酮通过下调其性激素受体(ERα和PR)含量治疗子宫腺肌症.     

VEGF在子宫腺肌病子宫内膜-肌层界面的表达及意义

【目的】探讨子宫腺肌病患者子宫内膜-肌层界面（endometrial-myometrial interface ,EM I）血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor ;VEGF）的表达及意义。【方法】采用免疫组化 ElivisiongTM Super法对40例子宫腺肌病患者（观察组）子宫内膜（含部分肌层）和40例子宫肌瘤患者（对照组）子宫内膜（含部分肌层）的组织进行标记、检测并比较。【结果】观察组增生期及分泌期EMI处VEGF的表达均显著高于远肌层（ P ＜0．05）,观察组增生期、分泌期EMI处VEGF表达均显著高于对照组（ P ＜0．05）。【结论】子宫腺肌病患者EMI处VEGF的高表达,可促使异位内膜及其周围肌层血管生成,其可能在子宫腺肌病的发生发展中起重要作用。     

米非司酮对不同月经周期异位和在位子宫内膜雌激素受体α和孕激素受体表达的影响

目的探讨米非司酮对雌激素受体α(ERα)和孕激素受体(PR)在不同月经周期的子宫腺肌症中表达的影响。方法47例行全子宫切除术的子宫腺肌症患者分为米非司酮组(n=24)和未用药组(n=23);无腺肌症的正常子宫内膜作为对照组(n=15)。运用免疫组化的方法测定异位和在位子宫内膜及正常子宫内膜在不同月经周期的腺上皮及间质细胞中ERα和PR水平。结果未用药组ERα和PR在异位子宫内膜腺上皮及间质细胞中的表达均低于在位内膜及对照组正常内膜(P<0.05)。对照组及未用药组ERα和PR在在位内膜腺上皮细胞中的表达,增生期高于分泌期(P<0.05),而在未用药组异位内膜,差异无统计学意义(P>0.05)。ERα和PR在异位和在位子宫内膜中的表达,米非司酮组低于未用药组(P<0.05)。结论ERα和PR在异位子宫内膜中的表达与在位子宫内膜不同;异位内膜丧失了正常内膜的周期性变化规律;米非司酮通过下调其性激素受体(ERα和PR)含量治疗子宫腺肌症。     

雌、孕激素受体在子宫肌瘤、子宫腺肌病中的表达及其意义

目的 探讨雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)在子宫肌瘤、子宫腺肌病病灶及其在位内膜组织中的表达情况.方法 采用免疫组织化学染色法(Evision二步法)分别检测38例子宫肌瘤(肌瘤组)的肌瘤病灶和在位内膜及30例子宫腺肌病(腺肌病组)的腺肌病病灶和在位内膜中ER、PR的表达水平.结果 肌瘤组和腺肌病组病灶的ER、PR表达水平明显低于在位内膜组织;肌瘤组中ER、PR表达均符合增生期高于分泌期的变化规律,腺肌病组ER、PR除在位内膜PR外均丧失周期性变化规律.结论 子宫肌瘤的发生与雌、孕激素水平及其受体含量的周期性变化有关,腺肌病病灶ER、PR的低表达和缺乏周期性变化及相应在位内膜ER也丧失周期性变化的特点可能与子宫内膜异位症的发生、发展有关.     

神经生长因子对子宫腺肌病基质细胞生存率及雌激素受体α表达的影响

目的研究神经生长因子（NGF）对子宫腺肌病患者离体培养在位子宫内膜基质细胞雌激素受体仅表达的影响。方法用10ng／ml、50ng／ml和100ng／ml的神经生长因子分别对体外原代培养人子宫内膜细胞进行干预,用MTT法测定内膜基质细胞生长的增殖情况,用Westen—blotting测定50ng／mlNGF对病例组基质细胞雌激素受体仪表达的变化。结果50ng／ml的NGF可促进子宫内膜基质细胞增殖,细胞存活率为82．61％,比其他浓度NGF显著升高（P〈0．05）;50ng／mlNGF对病例组和对照组不同细胞雌激素受体表达有影响,病例组腺上皮细胞和基质细胞总体均数差异均具有统计学意义（P〈0．01）。结论50ng／ml的NGF可促进子宫腺肌病在位内膜基质细胞增殖及腺上皮细胞和基质细胞雌激素受体仅表达。     

雌激素受体亚型α和β及胰岛素样生长因子-Ⅰ在子宫肌瘤中的表达变化

目的检测子宫肌瘤组织雌激素受体(ER)亚型α、β及胰岛素样生长因子-1(IGF-Ⅰ)的表达,探讨其与子宫肌瘤发生发展的关系。方法采用荧光定量PCR方法,检测21例患者的增生期子宫肌瘤组织及6例配对增生期肌层组织中ERαmRNA,ERβmRNA和IGF-ⅠmRNA的表达水平。结果所有标本均以ERαmRNA表达为主,ERβmRNA表达微弱。ERαmRNA在肌瘤中表达高于肌层,ERβmRNA在肌瘤中表达低于肌层,但差异无统计学意义。IGF-ImRNA的表达在肌瘤中高于肌层(P<0.05)。ERαmRNA与IGF-ⅠmRNA表达水平呈正相关(r=0.572,P=0.014);ERβmRNA与IGF-ⅠImRNA表达水平亦呈正相关,但无统计学意义。结论子宫肌瘤中IGF-ImRNA表达增高,ERαmRNA与IGF-ⅠmRNA表达呈正相关,提示雌激素可能通过ERα上调IGF-ⅠmRNA的表达促进肌瘤生长。     

雌激素及其受体、芳香化酶在子宫腺肌病中的作用

目的 探讨雌激素、雌激素受体(ER)及芳香化酶(P450arom)在子宫腺肌病中的作用.方法 收集子宫腺肌病患者病灶组织及石蜡切片,通过酶联免疫法、免疫组织化学法检测雌激素、ER、P450arom在子宫腺肌病组织中的水平,以宫颈CINIII为对照组.通过体外培养子宫腺肌病病灶细胞,采用CCK-8法观察雌激素激活组、ER抑制剂组、ER抑制剂+E2激活组、雌激素剥夺组、雌激素剥夺+ER抑制剂组各组状态下子宫腺肌病病灶细胞的增殖抑制率.结果 与对照组子宫肌层及内膜相比较,子宫腺肌病异位病灶、在位内膜中雌激素、ER、P450arom表达水平明显升高(P＜0.05);子宫腺肌病异位病灶与在位内膜比较雌激素、P450arom表达水平无明显差异(P＞0.05),但ER表达水平明显升高(P＜0.05).ER抑制剂组及ER抑制剂+雌激素激活组均能抑制子宫腺肌病病灶细胞增殖,两组之间抑制率差异无统计学意义(P＞0.05),雌激素剥夺组与雌激素剥夺+ER抑制剂组均能抑制子宫腺肌病病灶细胞增殖,其中雌激素剥夺+ER抑制剂组抑制效果大于雌激素剥夺组(P＜0.05).结论 通过雌激素激活及剥夺状态下证实子宫腺肌病异位病灶及在位内膜过高表达的雌激素、ER、P450arom促进子宫腺肌病病灶细胞增殖,其中雌激素通过与ER结合发挥生物学效应,ER除与雌激素结合外,还可通过其他途径促进子宫腺肌病发生发展.     

他莫昔芬对人胃癌细胞增殖和丝氨酸蛋白酶抑制剂9表达的影响

目的：研究他莫昔芬（TAM）对胃癌细胞雌激素受体α、β（ERα和ERβ）的表达情况及对胃癌细胞增殖和丝氨酸蛋白酶抑制剂9（PI9）表达的影响。方法对前期筛选出的ERα表达阳性胃癌细胞株MNK45、SGC7901（PI9表达阳性）和ERβ表达阳性胃癌细胞株BGC823（PI9表达阴性）,采用免疫荧光化学法检测 TAM 对ERα和ERβ表达的影响,CCK8法检测 TAM 干预后胃癌细胞株的增殖情况,逆转录PCR观察TAM干预后PI9表达的变化。结果 ERα表达于MNK45和SGC7901细胞核上, ERβ表达于BGC823细胞核上,经TAM 干预后 ERα和 ERβ表达均无明显改变;TAM 在0．1～100．0μmol／L 时可明显抑制SGC7901、MNK45的细胞增殖,与阴性对照组比较,差异有统计学意义（P＜0．05）,对BGC823和MNK28的细胞增殖无明显剂量依赖关系;TAM干预后SGC7901的PI9 mRNA的相对灰度值为（0．402±0．020）,MNK45的PI9 mRNA的相对灰度值为（0．359±0．048）,较阴性对照组灰度值均明显降低,差异有统计学意义（P＜0．05）。结论 TAM 对ERα和PI9阳性表达细胞的增殖抑制作用强于PI9阴性表达细胞,并呈较好的剂量依赖性;TAM 对胃癌的生长抑制作用可能与改善PI9介导的免疫耐受有关。     

剪接因子对雌激素受体α7号外显子选择性剪接调控作用的研究

目的通过上调或下调肿瘤细胞内hnRNP G、hnRNP I、h Tra2-beta1的表达,探索细胞内三种剪接因子对内源性ERaΔ7形成的作用。方法 Real-Time PCR和Western blot筛选ERα阳性表达细胞株,对细胞株转染hnRNP G、hnRNP I、hTra2-beta1表达质粒和shRNA干扰质粒以上调或下调三种剪接因子的表达,Real-time PCR检测ERaΔ7和ERαexon7的表达量。结果筛选出M CF-7为ERα阳性表达细胞株。在hnRNP G表达上调组中,ERαΔ7和ERαexon7的相对表达量与上调空载体对照组存在统计学差异（P〈0.05,P〈0.05）,在hnRNP G表达下调组中,ERαΔ7和ERαexon7的相对表达量与下调空载体对照组显著差异（P〈0.05,P〈0.05）;在hnRNP I表达上调组中,ERαexon7的相对表达量与上调空载体对照组显著差异（P〈0.05）;在h Tra2-beta1表达上调组中,ERαΔ7和ERαexon7的相对表达量与上调空载体对照组显著差异（P〈0.05,P〈0.05）,在h Tra2-beta1表达下调组中,ERαΔ7和ERαexon7的相对表达量与下调空载体对照组显著差异（P〈0.05,P〈0.05）,其中hnRNP G和h Tra2-beta1对ERα7号外显子的作用为相反趋势。结论 hnRNP G和h Tra2-beta1这两种蛋白可能在ERαexon7的选择性剪接方面存在相互拮抗的作用,hnRNP I对于ERαexon7的纳入存在拮抗作用,据此推测hnRNP G和hnRNP I在ERαexon7的选择性剪接存在协同作用。     

子宫腺肌病患者UAE治疗前后子宫内膜中ER、P450arom表达的变化

目的:研究子宫腺肌病子宫动脉栓塞术(UAE)治疗前后子宫内膜中ER、P450arom表达的变化。方法:采用免疫组化法测定33例子宫腺肌病患者治疗前、后30d及90d内膜中ER、P450arom表达的变化及阳性人数的变化,与30例正常对照组患者比较。结果:30例子宫腺肌病组中有78.8%患者内膜中P450arom高表达,表达强度为18.6±3.45,明显高于正常对照组(P<0.01);100%患者ER表达,表达强度为16.1±2.67,明显高于对照组的4.51±0.98(P<0.01);UAE治疗后内膜中ER表达由治疗前的16.1±2.67降低到治疗后的6.23±0.98,ER阳性人数百分比由治疗前的100%降低到治疗后的39.4%;P450arom表达由治疗前的18.6±3.45降低至治疗后的5.3±1.66,阳性人数百分比由78.8%降低至39.4%,各组比较差异有显著性意义(P<0.01)。治疗后1个月ER、P450arom表达开始逐渐下降,治疗后3个月降低最明显。结论:高表达的ER、P450arom在子宫腺肌病发生、发展中发挥重要的作用;UAE主要通过减少子宫腺肌病病灶血供和抑制内膜中ER、P450arom表达发挥其治疗效果;ER、P450arom可作为子宫腺肌病疗效判断和预后的指标之一。     

大豆异黄酮对去卵巢大鼠阴道雌激素受体表达的影响

目的研究大豆异黄酮对去卵巢大鼠阴道雌激素受体亚型的影响。方法选择Wistar大鼠50只，随机分为假手术组、模型组、阳性对照组、大豆异黄酮高剂量组和大豆异黄酮低剂量组，每组10只，给药6周后处死大鼠，分离摘取阴道，常规石蜡包埋，切片进行HE染色及免疫组化染色雌激素受体α和β（Estrogen Receptor，ERβ和ERβ）。结果大豆异黄酮能使去卵巢大鼠阴道的重量增加，上皮增厚，但作用弱于雌激素。模型组、阳性药物对照组、大豆异黄酮高剂量组、大豆异黄酮低剂量组ERα的灰度值分别为443．39±67．64、1026．83±133．58、513．78±121．34、670．65±37．49。ERβ分别为7．86±2．23、127．67±24．99、151．56±33．98、129．02±21．89。结论大豆异黄酮具有雌激素活性，可使去卵巢大鼠阴道上皮细胞ERα和ERβ的表达量增加。     

雌激素受体单核苷酸多态性与妊娠期肝内胆汁淤积症遗传易感性研究

目的探讨雌激素受体单核苷酸的多态性与妊娠期肝内胆汁淤积症（ICP）遗传易感性的相互关系。方法应用PCR和RFLP技术,对我院2009年8月～2011年10月收治的200例ICP患者（ICP组）及200例非ICP患者（对照组）产妇的雌激素受体α（ERα）基因多态性进行分析。结果 ICP组ERαPvuⅡ酶切后基因型PP、Pp、pp的基因频率以及等位基因P与p的基因频率与对照组差异无统计学意义（P〉0.05）;ERαXbaⅠ酶切后基因型XX、Xx、xx基因频率以及等位基因X与x的基因频率与对照组差异无统计学意义（P〉0.05）。两组ERα基因的PvuⅡ和XbaⅠ的联合基因型分布差异无统计学意义（P〉0.05）。结论雌激素受体单核苷酸的多态性与ICP的发病无明显相关。     

基于内膜-肌层交界区细胞探讨少腹逐瘀汤对子宫腺肌病的镇痛作用

【目的】探讨少腹逐瘀汤对子宫腺肌病痛经在细胞水平上的治疗机制。【方法】进行人体外内膜-肌层交界区(EMI)平滑肌细胞原代培养。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法确定少腹逐瘀汤抑制EMI细胞增殖的最佳浓度,设置对照组、实验组。采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的d UTP缺口末端标记(TUNEL)染色法评价细胞凋亡,酶联免疫吸附分析(ELISA)测定EMI细胞雌二醇(E;)、前列腺素E;(PG-E2)、雌激素受体(ER)的水平,采用蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测白细胞介素6(IL-6)、血管内皮生长因子(VEGF)、神经生长因子(NGF)的表达水平。【结果】与对照组比较,实验组EMI细胞增殖抑制率、细胞凋亡率显著增加(P<0.05或P<0.01),E2、PG-E2、ER、IL-6、VEGF的表达量降低(P<0.05或P<0.01),NGF表达下调,但差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】少腹逐瘀汤可有效促进EMI细胞凋亡,抑制EMI细胞的增殖,可能通过减少雌激素、血管生成因子、炎症因子表达,达到减轻子宫腺肌病痛经的目的,体现了其中医"活血化瘀止痛"功效的特点。