EB病毒相关性疾病病理学研究的进展

报告作者及其同事在鼻咽癌高发的广州地区所做EB病毒相关性疾病病理学研究的进展。内容包括：①EB病毒病理生物学；②EB病毒相关性疾病病理学；③检测组织中的EB病毒；④EB病毒血清学。重点是EB病毒相关性疾病的病理学以及评估各种检测EB病毒相关性疾病患者组织和血清中EB病毒的方法。     

胃癌组织中EB病毒的检测

目的：探讨EB病毒感染与人胃癌发生的关系。方法：用原位分子杂交的方法对63例人胃癌标本中EB病毒小分子RNA片段（EBER1）进行检测。结果：63例标本中有7例癌组织呈阳性反应（11．9％）,EB病毒阳性的7例中,男性5例,有明显淋巴细胞浸润的4例,7例阳性标本均为腺癌,高分化腺癌3例,中低分化腺癌各2例,结论：EB病毒感染与我国部分胃腺癌的发生有关,癌间质中大量淋巴细胞浸润可能是EB病毒感染的重要病理学特征。     

用EBER—1作探针原位杂交检测淋巴瘤组织中的EB病毒

目的 探讨用EBER－1作探针原位杂交检测淋巴瘤组织中EB病毒的意义。方法 对16例实验性淋巴瘤组织用EBER－1作探针原位杂交检测EB病毒,同时用免疫组化法检测EB病毒表达产物及电子显微镜检测EB病毒颗粒作为对照。结果 16例淋巴瘤组织中的所有肿瘤细胞EBER－1阳性,定位于胞核,容易辩认。免疫组化检测大多数瘤细胞表达BZLF1,少数表达LMP1和EBNA2,电镜证实瘤细胞核内存在EB病毒颗粒。结论 用EBER－1作探针原位检测EB病毒的方法敏感,特异性高,而且细胞定位清晰。     

用EBER-1作探针原位杂交检测淋巴瘤组织中的EB病毒

目的　探讨用EBER - 1作探针原位杂交检测淋巴瘤组织中EB病毒的意义。方法　对 16例实验性淋巴瘤组织用EBER - 1作探针原位杂交检测EB病毒 ,同时用免疫组化法检测EB病毒表达产物及电子显微镜检测EB病毒颗粒作为对照。结果　 16例淋巴瘤组织中的所有肿瘤细胞EBER - 1阳性 ,定位于胞核 ,容易辨认。免疫组化检测大多数瘤细胞表达BZLF1,少数表达LMP1和EBNA2 ,电镜证实瘤细胞核内存在EB病毒颗粒。结论　用EBER - 1作探针原位检测EB病毒的方法敏感 ,特异性高 ,而且细胞定位清晰     

EB病毒感染情况结合间接鼻咽镜筛查长沙市健康人群鼻咽癌

目的 检测EB病毒VCA-IgA在健康人群中的抗体水平,了解长沙市人群中的EB病毒感染情况,并结合间接鼻咽镜筛查鼻咽癌.方法 使用酶联免疫吸附法,检测EB病毒VCA-IgA水平.对于EB病毒VCA-IgA阳性个体,应用问接鼻咽镜检查鼻咽部,发现异常即取组织送病理检查.结果 长沙市1 808例健康人群EB病毒VCA-IgA检测:阳性者206例,检出阳性率为11.39%.其中男性阳性率为12.17%,女性阳性率为9.66%.男女无显著性差异(P=0.121).阳性个体EB病毒VCA-IgA抗体滴度在1:10~1:20之间.共对198例阳性个体进行间接鼻咽镜检查,最后病理学检查确诊鼻咽癌3例.结论 长沙市健康人群EB病毒感染率较高,存在相对较高的鼻咽癌患病风险;血清EB病毒VCA-IgA普查结合间接鼻咽镜是鼻咽癌人群筛查的有效手段.     

EB病毒与食管癌相关性的研究

目的：探讨EB病毒与食管癌发生的关系。方法：用双温聚合酶链反应(PCR)扩增出EB病毒Barn W区的121bp DNA片段，用此法对89份食管肿瘤和非肿瘤的胃镜活检标本进行了EB病毒DNA检测。结果：食管癌胃镜活检组织中EB病毒阳性率6．3％(3／48)，10例癌旁、远离癌灶5cm以上食管组织和2l例非肿瘤病变均阴性。结论：食管癌活检组织中EB病毒感染率低，两者关系的进一步研究，有助于EB病毒致瘤机制的阐明。     

儿童EB病毒相关噬血细胞综合征的临床分析

目的：探讨儿童EB病毒相关噬血细胞综合症的临床特点及治疗方法。方法以20例儿童EB病毒相关噬血细胞综合症患儿为研究对象,分析其临床表现和实验室诊断指标检查结果。结果本组20例患儿均临床表现出肝脾淋巴结肿大、反复发热、呼吸道感染、黄疸等症状;对其实施实验室检查,结果显示血细胞出现进行性减少,凝血功能检测指标出现异常,乳酸脱氢酶等酶类指标增高,EB病毒DNA拷贝数明显提升。所有患儿骨髓细胞学检查,均显示出现吞噬血细胞现象。结论临床上对儿童EB病毒相关噬血细胞综合症进行诊断时,需综合考虑患儿临床表现和实验室检查结果,以提升临床诊断准确率,尽早实施对症治疗,改善患儿预后。     

银屑病患者血清抗EB病毒抗体的检测

目的：探讨EB病毒感染与银屑病的关系。方法：采用酶免疫法检测血清抗EB病毒IgG、IgM/VCA,IgG/EA-D、IgG/EBNA-1抗体。结果：银屑病患者血清抗EB病毒EB病毒IgG/EA-D抗体阳性率明显高于正常对照组（P＜0．005）。结论：银屑病患者体内EB病毒可能处于激活状态。     

胃癌组织HPV16、EB病毒及HBV感染的检测与分析

目的：探讨肿瘤相关病毒HPV16、EB病毒及HBV感染与胃癌的相关性。方法：选择临床病理确诊的胃癌组织及其癌旁正常胃黏膜组织标本各40份，用PCR方法检测标本中HPV16、EB病毒及HBV DNA。结果：胃癌及癌旁正常胃黏膜组织标本中，HPV16DNA阳性检出率分别为25％（10／40）和0（0／40），EB病毒DNA阳性检出率分别为17．5％（7／40）和0（0／40），差异均有显性（P＜0．05）；HPV16、EB病毒DNA同时呈阳性的检出率为5％（2／40）；HBV DNA在胃癌组织和癌旁正常胃黏膜组织中的检出率均为0。结论：HPV16、EB病毒感染可能与胃癌的发生相关。     

EB病毒在鼻咽癌变过程中作用的研究

小结作者参加“EB病毒在鼻咽癌变过程中作用研究”的结果。包括 :①EB病毒感染与鼻咽癌变的关系 ;②EB病毒血清学与鼻咽癌变的关系 ;③EB病毒在鼻咽癌以外的EB病毒相关性肿瘤中的作用 ;④EB病毒编码产物在鼻咽癌变中的作用。文章强调下列观点 :①EB病毒开始感染异型性上皮细胞是鼻咽癌变的早期分子事件 ;②EB病毒LMP1可在上皮癌变中起关键作用 ;③检测血清中两种以上的抗EB病毒抗体可以提高鼻咽癌血清学诊断的效益     

胃癌组织中EBV感染与患者年龄以及癌组织类型的关系

目的:调查唐山地区胃癌组织中EBV的感染状况,以分析EB病毒相关胃癌(GC)的临床流行病学特征,以及分析EB病毒在不同年龄以及不同组织学类型胃癌形成过程中的作用。方法:选择胃癌患者手术切除后经石蜡包埋的组织标本共202例。标本经切片和常规脱蜡处理后提取DNA,首先经PCR进行β-actin DNA检测,阳性标本用PCR法检测EBNA1(EB病毒核抗原1)DNA。结果:202份标本β-actin DNA阳性166例,阳性率为82%;166例标本中EBNA1PCR阳性例数为14例,阳性率为8.4%;166例β-actin DNA阳性的胃癌标本中,腺癌150例,经EBNA1PCR检测EB病毒DNA阳性例数在腺癌为14,阳性率为9.3%;150例胃腺癌中,≤45岁15例,46~65岁93例,≥66岁42例,经EBNA1PCR检测EB病毒DNA阳性例数分别为1、9、4例,阳性率分别为6.7%、9.7%、9.5%,差异无统计学意义。结论:EB病毒感染胃癌形成过程中所起的作用与患者年龄无关,而且与癌组织类型无关。     

EB病毒感染的实验室诊断研究进展

EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV) DNA载量和血清学抗体检测是当前实验室最主要的两个诊断手段。不同的检验项目和标本类型具有不同的临床意义和适用范围,对不同EBV感染相关疾病需选择合适的项目和方法。本文对检测EBV技术及在相关疾病的运用做了简单概括,并对EBV感染的免疫功能、细胞因子及相关基因检测临床应用进行了概述,其中淋巴细胞亚群分型及比例有助于评估IM患者的感染阶段和免疫状态,CAEBV患者Th17计数和Th17在CD4⁺T淋巴细胞的比例均明显升高;CAEBV、EBV-HLH患者免疫球蛋白和补体降低;多种EBV感染相关疾病IL-10的表达水平升高;鼻咽癌及其他EBV相关恶性肿瘤表达LMP2A;EBV转化B淋巴细胞多种基因表达上调或下调。     

益气解毒颗粒对鼻咽癌高危人群EB病毒感染活性抑制作用的临床观察

为观察益气解毒颗粒对鼻咽癌高危人群EB病毒感染活性的抑制作用.将111例鼻咽癌高危患者随机分为2组,分别予益气解毒颗粒及鼻咽清毒剂,连用3月,观察其对壳抗原抗体(IgA/VCA)和早期抗原抗体(IgA/EA)滴度的影响.结果:治疗组IgA/VCA由21.485±2.956降至3.678±3.821,IgA/EA由6.987±1.575降至1.771±2.407,显效率51.72%,总有效率87.93%;对照组则分别由21.793±3.094降至15.139±3.375,7.598±1.732降至5.438±2.329,显效率7.55%;总有效率24.53%,组间差异均为P＜0.01.结论:益气解毒颗粒对鼻咽癌高危者EB病毒感染活性有很强的抑制作用.     

小鼠补体受体Ⅱ型基因改造后感染EB病毒

通过对小鼠补体受体Ⅱ型基因（CR2）进行定点突变,然后将野生型和突变型小鼠CR2/1（MCR2/1）及人CR2（hCR2)用电穿孔方法导入小鼠SP2/0进行表达,采用免疫组织化学等方法鉴定阳性细胞系。用EB病毒对转染阳性细胞进行感染,EBER-1杂交结果显示,仅转染hCR2和突变型MCR2（mtMCR2)的SP2/0细胞感染了EB病毒,前者感染EB病毒的阳性率较后者高很多。这为进一步研究EB病毒进入细胞的机制及建立EB病毒相关的鼻咽癌动物模型奠定了良好的基础。     

血清TNF-α、SAA、ADA对儿童EBV相关传染性单核细胞增多症的诊断价值研究

目的探讨血清肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、淀粉样蛋白A(serum amyloid A,SAA)、腺苷脱氨酶（adenosine deaminase,ADA）诊断儿童EBV相关传染性单核细胞增多症（infectious mononucleosis,IM）的价值。 方法选择EBV相关IM患儿201例（感染组）和健康儿童200例（对照组）,检测血清TNF-α、SAA、ADA水平,分析TNF-α、SAA、ADA与EBV相关IM患儿血常规、生化指标、异型淋巴细胞计数、EB病毒脱氧核糖核酸（epstein-barrvirus deoxyribonucleic acid,EBV-DNA）拷贝数之间相关性。受试者工作特征曲线（Receiver operator characteristics curve,ROC）分析TNF-α、SAA、ADA诊断EBV相关IM的价值。 结果感染组血清TNF-α、SAA、ADA水平均高于对照组（P＜0.05）,TNF-α、SAA、ADA水平均与淋巴细胞、异型淋巴细胞、EBV-DNA、ALT呈正相关（P＜0.05）。ROC分析结果显示TNF-α、SAA、ADA诊断EBV相关IM的曲线下面积（AUC）分别为0.752、0.787、0.788、0.931,敏感度分别为70.65%、77.61%、76.12%、92.04%,特异度分别为76.50%、82.00%、84.50%、96.00%。 结论EBV相关IM患儿血清TNF-α、SAA、ADA水平明显升高,其水平与异型淋巴细胞、EBV-DNA拷贝数、肝功能具有密切相关性。联合TNF-α、SAA、ADA可提高EBV相关IM诊断的准确率。     

CONSTRUCTION OF HU-PBL／SCID CHIMERAS AND DEVELOPMENT OF EBV-RELATED LYMPHOMAS

Objective To construct hu-PBL/SCID chimeras and to investigate the development of lymphoma and oncogenicity of the Epstein-Barr virus (EBV). Methods Human peripheral blood lymphocytes (PBLs) were isolated from healthy adult donors and transplanted intraperitoneally into severe combined immunodeficient (SCID) mice. Mice with hu-PBL engraftment from healthy EBV seronegative donors were injected intraperitoneally with EBV-containing supematant from suspension culture of B95-8 cell line (active infection), whereas mice receiving lymphocytes from healthy EBV seropositive donors were not re-infected with B95-8 derived EBV (latent infection). Pathological examination and molecular analysis were performed on experimental animals and induced neoplasms. Results In the early stage of this experiment, 12 mice died of acute graft-versus-host disease, mortality was 34.3% (12/35 mice) with an average life span of 17.5 days. In 19 survival hu-PBL/SCID chimeric recipients from 12 healthy donors,tumor incidence was 84.2% (16/19 mice). The average survival time of tumor-bearing mice was 65.5 days. EBV-related neoplasms in SCID mice were nodular tumors with aggressive and fatal features. Histological morphology of tumors exhibited diffuse large cell lymphomas. Immunohistochemistry revealed that LCA (CD45) and L26 (CD20) were positive, but both PS1 (CD3) and UCHL-1 (CD45RO) were negative, and EBV products ZEBRA, LMP1, and EBNA2 were expressed in a small number of tumor cells. EB virus particles were seen in the nuclei of some tumor cells by electron microscopy, and EBV DNA could be amplified in the tumor tissues by PCR. In situ hybridization indicated that the nuclei of tumor cells contained human-specific Alu sequence. Conclusions EBV-induced tumors were human B-cell malignant lymphomas. We obtained direct causative evidence dealing with EBV-associated tumor deriving from normal human cells.     

Rapid Internal Control Reference Recombinase-Aided Amplification Assays for EBV and CMV Detection

Epstein-Barr virus (EBV) and cytomegalovirus (CMV), two of the most prevalent human herpesviruses, cause a wide spectrum of diseases and symptoms and are associated with serious health problem. In this study, we developed an internal control reference recombinase-aided amplification?(ICR-RAA)?assay?for?the?rapid?detection of EBV and CMV within 30 min. The assay had a sensitivity of 5 and 1 copies/test for EBV and CMV, respectively, with no cross reaction with other pathogens. In comparison with those of the commercial quantitative polymerase chain reaction (qPCR), the sensitivity of the EBV and CMV ICR-RAAs using extracted DNA was 93.33％? and 84.84％, respectively; the specificity was 98.75％? and 100.00％, respectively;?and the Kappa values were 0.930 and 0.892 (P? < 0.05), respectively. In comparison?with?those?of?qPCR,?the?sensitivity?of?the EBV and CMV ICR-RAAs using the DNA by thermal lysis was 72.22％? and 80.00％, respectively; the specificity was 100.00％;?and the Kappa values were 0.764?and?0.878?(P?相似文献   

结外NK/T细胞淋巴瘤鼻型34例临床分析

［摘要］目的　分析结外NK/T细胞淋巴瘤鼻型的临床特点及治疗方案,提高对该特殊类型淋巴瘤的认识．方法　对经病理证实的结外NK/T细胞淋巴瘤鼻型患者34例的临床资料进行回顾性的分析．结果 　31例患者中,EB病毒（EBV）感染阳性组26例,近期疗效结果显示阳性组疗效显著低于阴性组（38.46% vs 87.50%;P＜0.05）．随访截至2015年10月,34例患者中,死亡19例．其中17例死于疾病复发或进展,2例死于其他疾病．15例患者生存,（其中11例无病生存）,中位生存时间为37个月．患者2 a生存率与临床分期、B症状、EBV感染等有关（P值分别为0.017/0.001、0.005、0.039）．结论　EB病毒感染与患者的治疗反应有关;患者的预后与临床分期、B症状、EBV感染等临床特征有关．     

EBV病毒全基因组cDNA探针的设计与制备

目的 设计和克隆所有EB病毒(EBV)已知和预计的编码基因作为cDNA探针用于构建EBV微阵列,以促进研究EBV在其相关疾病中的发病学作用。方法 cDNA探针首先由Oligo6.0,Blast和Primer Primier软件设计和筛选全EBV基因组探针,它们的长度被定在300~600 mer并且具有高度特异性。从B95-8细胞和NPC组织的基因组DNA和RNA中,通过PCR和RT-PCR方法扩增这些探针,之后克隆入T/A克隆载体。所有的探针被测序鉴定。结果 除LF1和LF3基因在B95-8细胞的EBV基因组中不存在外,其余85个基因片段(BWRF1基因有7个重复阅读框架)和两个EBERs基因被成功克隆。结论 EBVcDNA探针的设计和克隆为制备EBV微阵列和进一步研究EBV基因组在其相关疾病中的作用奠定了基础。     

EBV病毒全基因组cDNA探针的设计与制备

目的设计和克隆所有EB病毒(EBV)已知和预计的编码基因作为cDNA探针用于构建EBV微阵列,以促进研究EBV在其相关疾病中的发病学作用.方法cDNA探针首先由Oligo6.0,Blast和Primer Primier软件设计和筛选全 EBV基因组探针,它们的长度被定在300～600 mer并且具有高度特异性.从B95-8细胞和NPC组织的基因组DNA和 RNA中,通过PCR和RT-PCR方法扩增这些探针,之后克隆入T/A克隆载体.所有的探针被测序鉴定.结果除LF1和LF3基因在B95-8细胞的EBV基因组中不存在外,其余85个基因片段(BWRFl基因有7个重复阅读框架)和两个EBERs基因被成功克隆.结论EBV cDNA探针的设计和克隆为制备EBV微阵列和进一步研究EBV基因组在其相关疾病中的作用奠定了基础.