P物质刺激下脊髓星形胶质细胞活化中磷酸化P38丝裂素活化蛋白激酶和c-fos的表达及作用

目的 观察P物质(substance P, SP)作用下,脊髓星形胶质细胞中P38丝裂素活化蛋白激酶的磷酸化(P-P38MAPK)和c-fos的表达,及P38MAPK磷酸化对炎性因子分泌的影响.方法 采用体外培养脊髓星形胶质细胞,施加SP刺激,分别采用Western blot和RT-PCR检测P38MAPK磷酸化和c-fos表达的变化,ELISA法检测SB203580阻断P38MAPK磷酸化对炎性因子TNF-α、IL-1β、NO分泌的影响.结果 在SP(10-7mol/L)刺激下,P38MAKP在15、30、45、60 min时均明显磷酸化,与对照组相比有显著性差异 (P＜0.05, P＜0.01),磷酸化高峰在45 min;SP(10-7 mol/L)作用下c-fos表达明显,30 min、1、3、6 h均显著高于对照组 (P＜0.05, P＜0.01),3 h达到高峰;SP(10-7 mol/L)刺激脊髓星形胶质细胞明显分泌炎性因子IL-1β、TNF-α和NO (P＜0.01), SB203580阻断P38MAKP信号通路后TNF-α和NO的分泌下降(P＜0.01),IL-1β的分泌在阻断前后无显著性差异(P＞0.05).结论 SP作用下脊髓星形胶质细胞中P38MAPK和 c-fos信号通路激活,P38MAPK磷酸化参与了SP作用下脊髓星形胶质细胞的活化及炎性因子的分泌,与星形胶质细胞在脊髓中枢对痛觉的调控有关.     

P物质对培养脊髓星形胶质细胞谷氨酸代谢的影响

目的 观察P物质（SP）对脊髓星形胶质细胞兴奋性递质谷氨酸代谢的影响。方法 采用体外培养脊髓星形胶质细胞,施加SP刺激．分别采用^3H—Glutamate掺入和RT—PCR观察脊髓星形胶质细胞对谷氨酸摄取和转运体GLT-1表达的变化。结果 脊髓星形胶质细胞在SP的刺激下^,3H—Glu的摄取逐渐下降,10^-9mol／L与正常对照组差异有统计学意义（P〈0．05）．10^-8～10^-6mol／L组与正常对照组差异有统计学意义（P〈0．01）;脊髓星形胶质细胞GLT-1的表达在10^9-10^-8mol／L SP作用组和正常组差异无统计学意义（P〉0．05）,10^-2～10^-6 mol／L SP刺激组GLT-1表达值低于正常对照（P〈0．05、P〈0．01）。结论 高浓度的SP作用下脊髓星形胶质细胞GLT-1表达和谷氨酸掺入下降,表明周围慢性疼痛可能通过致病递质SP使脊髓星形胶质细胞对谷氨酸的摄入减少,神经间隙谷氨酸堆积而导致脊髓中枢继发的神经损害。     

TRPC对脂多糖诱导的星形胶质细胞TNF-α和NO分泌的影响

目的 探讨TRPC对脂多糖诱导的星形胶质细胞TNF-α和NO分泌的影响.方法 通过摇床筛选法纯化大鼠大脑皮层星形胶质细胞,用免疫荧光法鉴定其纯度.细胞培养至80%左右融合时加入0.5 μg/mL 脂多糖(LPS)后用维持液分别培养0、2、6、12、24和48 h,检测TNF-α和NO分泌情况,观察TRPC阻断剂 2-A...     

地塞米松抑制星形胶质细胞P2Y_1受体表达及TNF-α分泌

目的观察不同浓度地塞米松对大鼠体外培养脊髓背角星形胶质细胞P2Y1受体表达及TNF-α分泌的影响。方法培养并纯化大鼠脊髓背角星形胶质细胞,地塞米松(终浓度分别为0.1、1、10μmol/L)处理24 h后,采用免疫组织化学染色观察P2Y1受体的表达,双抗夹心间接酶联免疫吸附法测定上清液中TNF-α含量。结果地塞米松(0.1、1、10μmol/L)作用24 h后,与对照组比较,脊髓背角星形胶质细胞P2Y1受体表达下调,并呈剂量依赖性(P<0.01),TNF-α分泌量亦呈剂量依赖性下降(P<0.01)。结论地塞米松能抑制体外培养大鼠脊髓背角星形胶质细胞P2Y1受体表达及TNF-α的分泌。     

阿魏酸钠抑制脂多糖引起的星形胶质细胞IL-1β的表达

目的 研究阿魏酸钠(SF)对脂多糖(LPS)引起的培养星形胶质细胞(AC)白细胞介素-1β (IL-1β)表达的抑制作用及机制.方法 将培养星形胶质细胞分为对照组、LPS组、SF(50,100,200μmol·L-1)组.细胞成熟后分组给药处理,ELISA法测定培养液中IL-1β表达,Western蛋白印迹法检测细胞IL-13、磷酸化JNK1和磷酸化C-Jun蛋白表达.结果 星形胶质细胞在LPS (10 mg·L“)刺激下IL-1β的释放量、IL-1β蛋白以及磷酸化JNK1、磷酸化C-Jun蛋白表达水平较对照组明显增高(P＜0.01).应用SF(50,100,200 μmol·L-1)预处理6h明显降低培养液中IL-1β含量,抑制星形胶质细胞IL-1β、磷酸化JNK1和磷酸化C-Jun蛋白表达水平.结论 SF可能通过下调JNK信号通路抑制星形胶质细胞IL-1β表达.     

远红外线干预对大鼠创面愈合期IL-1β、TNF-α、TGF-β1的影响

目的 通过对伤后大鼠进行远红外线干预,探讨远红外线干预对创面愈合影响的免疫及细胞因子等机制.方法 选择SPF级8周龄30只健康SD大鼠为实验对象,随机分为健康安静组(A)、受伤+安静组(B)、受伤+红外+安静组(C)3个组.采用付氏改良造模方法,在动物造模治疗后第3、10、17天进行断尾取血,离心取血清,ELISA法测IL-1β、TNF-α、TGF-β1.结果 在造模后,受伤大鼠的IL-1β和TNF-α含量均明显上升,其中C组大鼠的IL-1β和TNF-α含量升高相对较小,与B组比较,具有极显著性差异(P＜0.01);而C组的TGF-β1则相对较高,与B组比较,具有显著性差异(P＜0.05).结论 远红外线干预能改善受伤后大鼠免疫应激能力,减少创面持续的炎症反应,促进成纤维细胞的增殖,免疫反应变化与TGF-β1变化基本吻合.     

TNF-α、IL-1β和IL-2在评估急性胰腺炎病情中的临床意义

目的探讨急性胰腺炎（AP）患者血清的肿瘤坏死因子-α（TNF-α）,白介素-1（IL-1β）和白介素-2（IL-2）水平的临床意义。方法应用ELISA法检测9例重症急性胰腺炎（SAP）、34例轻型急性胰腺炎（MAP）及30例正常对照组血TNF-α、IL-1β和IL-2的水平,并分析三个检测指标在急性胰腺炎病情变化中的临床意义。结果与正常对照组比较,治疗前SAP、MAP患者血TNF-α、IL-1β水平升高（P〈0.01）,IL-2水平下降（P〈0.01）,以SAP组改变更为显著（P〈0.05）;治疗后患者血TNF-α、IL-1β水平下降,IL-2水平升高。结论动态观察AP患者血清中TNF-α,IL-1β,IL-2的水平变化,对SAP的早期诊断、病情判断和预后评估具有重要的临床意义。     

银莱汤对发热大鼠血清IL-1β、TNF-α、IL-6含量的影响

目的 研究银莱汤对发热大鼠体温和血清IL-1β、TNF-α、IL-6含量的影响.方法 90只SD大鼠连续测温3次,选取合格大鼠背部皮下注射20%干酵母混悬液10 mL/kg建立大鼠发热模型,随机平均分为正常组、模型组、阿司匹林组、银莱汤高剂量组、银莱汤中剂量组、银莱汤低剂量组共6组,每组8只大鼠.分别于造模前0.5 h和造模后5 h两次灌胃给药,造模后每小时测温一次,于末次给药后3 h取血,通过ELISA和RIA方法检测血清中炎性介质白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量水平.结果 银莱汤各剂量组体温均低于模型组(P<0.01),银莱汤各剂量组血清中IL-1β、TNF-α、IL-6含量均低于模型组(P<0.05).结论 银莱汤对发热大鼠具有明显的退热效果,其作用机制可能与降低机体炎症反应,减少血清中IL-1β、TNF-α、IL-6的产生或加速降解相关.     

炎症因子IL-1β、IL-8、TNF-α与乳腺癌的关系

研究发现炎症在肿瘤的生长与增殖中发挥着重要的作用,特别是炎症因子IL-1β、IL-8、TNF-α与肿瘤的发生、发展关系更为密切.炎症因子IL-1β、IL-8、TNF-α可通过改变肿瘤细胞的生存微环境,促进肿瘤新生血管生成,从而促进肿瘤细胞生长与增殖,同时也促进了肿瘤的转移,因此研究炎症因子（IL-1β、IL-8、TNF-α）与乳腺癌的关系具有重要意义.     

马桑内酯激活的星形胶质细胞条件培养液对正常大鼠脑内IL-1β的影响

目的揭示星形胶质细胞对大鼠脑内IL-1β的影响及其在癫痫发病中的作用。方法将马桑内酯（coriaria lactone，CL）激活的星形胶质细胞条件培养液（astrocytic conditioned medium，ACM）注射入正常SD大鼠侧脑室，观察大鼠的行为变化，运用免疫组织化学及放射免疫分析的方法，观察大脑皮质、海马区域内白细胞介素1β（IL-1β）免疫反应的变化及脑组织匀浆、脑脊液内IL-1β含量的变化。结果ACM组大鼠在注射ACM后30min出现癫痫行为，2h恢复正常；免疫组织化学显示：ACM作用后2h，IL-1β免疫反应阳性神经元数和平均吸光度值明显增加（均P〈O．05），12h恢复正常水平；放射免疫分析显示：ACM作用后2h大脑皮质、海马IL-1β含量均开始增加，4h达高峰（P〈0．05），脑脊液中IL-1β含量则在ACM作用后2h即达到高峰。结论马桑内酯激活的星形胶质细胞条件培养液可增强大鼠脑内IL-1β的表达，并导致痫性发作。     

标准化病人职业化的思考

标准化病人（SP）在我国近年来发展较快,但目前尚未职业化。现分析SP职业化提出的背景和SP自身存在的问题,对实现SP职业化的途径提出初步设想和措施。SP职业化是一个渐进的过程,需要不断规范,不断完善。     

高三尖杉酯碱对大鼠佐剂性关节炎SP及IL-1β、TNF-α影响的实验研究

[目的]观察高三尖杉酯碱对大鼠佐剂性关节炎模型(AA)的作用.[方法]采用大鼠佐剂性关节炎模型,以雷公藤多甙作为阳性药物对照,观察高三尖杉酯碱对大鼠佐剂性关节炎模型SP及IL-1β、TNF-α的影响.[结果]经高三尖杉酯碱,雷公藤多甙干预后,AA大鼠血清与滑膜中TNF-α、IL-1β含量,以及血浆,滑膜中SP含量均明显下降.[结论]高三尖杉酯碱有与雷公藤多甙相类似的抗炎作用,可能是通过明显抑制AA大鼠血清与滑膜中TNF-α、IL-1β含量,以及血浆、滑膜中SP含量的分泌和释放,起到治疗AA大鼠关节炎作用的.     

浅析学生自身担当SP在验光技术实训教学中的优势与不足

验光技术实训教学中学生自身担当SP具有很大的优势,不但解决了临床教学资源匮乏的问题,而且学生能够熟练掌握各项临床技能,同时有助于提高学生的沟通技巧,优化了临床技能考核评估。当然,同时也存在一些问题及不足。     

P物质在胃溃疡中的表达及意义

目的:检测P物质(substance P,SP)在人胃溃疡组织中的表达和分布,探讨SP在胃溃疡发病机制中的作用,为内分泌治疗胃溃疡提供理论依据.方法:收集潍坊医学院附属医院2000～2005年的胃溃疡标本,进行免疫组织化学染色,观察SP在胃溃疡组织中的表达.结果:SP免疫阳性细胞主要分布于黏膜和黏膜下层的神经内分泌细胞,细胞呈椎体形;肌层的细微神经纤维阳性物质很少,也呈细丝或串珠状排列于平滑肌之间.胃溃疡全层SP免疫阳性物质较正常胃组织明显减少(P＜0.05).结论:免疫组织化学结果在分子水平显示胃溃疡中SP表达的变化,表明SP在胃溃疡发病中起着重要的作用.     

JNK信号通路在乙醛刺激的肝星状细胞凋亡中的作用

目的: 观察用特异性c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)特异性阻断剂SP600125阻断JNK信号传导通路对乙醛刺激的大鼠肝星状细胞(Hepatic stellate cell,HSC)凋亡的影响.方法: 体外培养大鼠HSC株;用不同浓度的SP600125(20,60,100 μg/L)对乙醛(200 μmol/L)刺激的大鼠HSC进行处理,分别以DNA片段凝胶电泳及流式细胞仪检测细胞凋亡,用Western Blotting法检测JNK激酶的活性变化.结果: 不同浓度的SP600125(终浓度为20,60,100 μg/L)对乙醛刺激的HSC内p-JNK的水平有明显下调作用,强度呈剂量依赖关系,同乙醛组相比有显著性差异[MVI: (35.6±0.9),(24.4±1.1),(3.4±0.2) vs (48.2±0.9),P<0.05];同时SP600125具有促进HSC凋亡的作用: 空白对照组及乙醛组中细胞凋亡率为[(2.0±0.2)%和(6.0±0.5)% ,两者有显著性差异(P<0.05)],经SP600125处理后细胞凋亡率上升[分别为(11.1±0.4)%,(26.9±0.9)%,(33.1±1.3)%,P<0.05],同乙醛组相比有显著性差异(P<0.05).结论: SP600125通过阻断JNK通路促进HSC凋亡,故JNK信号通路可能参与了HSC的凋亡.     

JNK信号通路对乙醛刺激的大鼠肝星状细胞增殖的影响

目的: 初步探讨JNK信号通路调控乙醛刺激的大鼠肝星状细胞(HSC)增殖的分子机制.方法: 体外培养大鼠HSC株,用c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)特异性阻断剂SP600125对乙醛刺激的大鼠HSC株进行处理,以MTT比色法检测细胞增殖,Western-blotting检测磷酸化JNK(p-JNK)水平的变化.结果: 乙醛刺激后HSC内p-JNK的水平升高,增殖明显;SP600125对乙醛刺激的HSC对p-JNK的水平有明显下调作用,同乙醛组相比有显著性差异.{MVI比值[(36.0±3.4),(24.2±1.8),(3.2±0.9)]vs (47.6±8.6),P<0.05},强度呈剂量依赖关系;同时具有抑制细胞增殖的作用: 空白对照组及乙醛组中吸光度(A)为(0.07±0.01)和(0.16±0.02),两者有显著性差异(P<0.01),经不同剂量的SP600125(20,60,100 μg/L)处理后吸光度值下降[分别为(0.13±0.01),(0.12±0.01),(0.12±0.01)],同乙醛组相比有显著性差异(P<0.05),细胞抑制率分别为19.3%,22.4%,28.6%.结论: JNK活性变化与乙醛刺激的大鼠HSC的增殖呈正相关,抑制JNK活性可影响HSC的增殖,提示JNK信号传导通路在调节HSC的增殖中起着重要的作用.     

浅谈SP的招募与队伍稳定发展

OSCE（Objective Structured Clinical Examination,客观结构化临床考试）是一种标准化的评估学生各方面能力的考试方法,其中SP（Standardized Patients,标准化病人）是OSCE考试不可或缺的组成部分。文章就制定政策,招募高素质的SP志愿者;人文关怀,积极采纳意见与建议;畅通联络,创建无障碍沟通平台;定期培训,提高SP队伍专业素质;吸收新成员,保持SP队伍持续发展五个方面论述了如何培养稳定的高素质SP队伍。     

P物质及其受体在乳腺肿瘤中表达的研究现状

P物质（SP）和P物质受体（SPR）作为一种免疫调节和神经调节共同因子正逐渐受到人们的重视,目前关于SP和SPR对恶性肿瘤的发生、发展和转移过程中的作用已进行了大量的研究,但SP和SPR在乳腺肿瘤中相关研究较少。为了进一步探讨SP和SPR在乳腺肿瘤中的作用,本文将国内外的相关文献进行综合、分析,认为SP和SPR在乳腺肿瘤发生、发展和转移过程中起十分重要的调控作用。     

PBL教学法在《外科学》场景教学中的应用

场景教学是将模拟的临床场景引入到课堂教学中。在场景教学中引入以问题为基础的教学法（Problem—based Learning,PBL）,并以标准化病人（Standardized patient,SP）和教师共同构建教学场景,由问题引出教学内容,进行启发式教育,使学生在掌握专业知识的前提下培养临床思维能力、探索意识和实践能力。南方医科大学第二临床医学院在《外科学》教学中应用该模式进行教学,在此就教学实践进行总结。     

临床场景教学模式的初步实践

目的探讨临床场景教学模式在外科教学中的初步实践。方法在2004及2005年级5年制临床医学专业外科学教学大课中,由教师和SP在课堂上共同构建模拟临床工作场景,由此引出理论知识,并展开学生分组讨论。结果课堂气氛活跃,学生反馈良好,调动了学生的学习积极性和主动性,优化了教学资源,提高了教学质量。该教学模式结合LBL教学与PBL教学各自的优点,可作为广泛开展PBL教学的过渡,运用于我国医学教学实践中。