普通级长爪沙鼠封闭群的建立

目的：建立普通级长爪沙鼠封闭群,为医学科研实验提供合格的实验动物。方法：1999年从大连医学院引进长爪沙鼠原始种群,饲养过程中控制动物体内外的微生物和寄生虫,对动物进行驯化,对饲料进行筛选,严格控制动物的繁育。结果：建立合格的普通级长爪沙鼠封闭群,促进了该动物资源的实验动物化。结论：长爪沙鼠虽为北方物种,但经严格饲养在华南地区可以培育出合乎标准的封闭群,并可用于多方面的研究实验。     

用DNA指纹技术分析Z:ZCLA长爪沙鼠的遗传质量

目的探讨清洁级Z：ZCLA长爪沙鼠遗传组成和遗传质量。方法用重组33．6小卫星探针对清洁级Z：ZCLA长爪沙鼠核心群的20个个体进行Southern blotting检测。结果在7～15kb的分子范围内，该品系所有个体产生5～6务分子杂交条带；其中在8～9kb位置上，某些个体的分子标记呈多态性变化，其余位置的标记无多态性，经统计，该品系核心群的个体间相似系数约为0．95。结论该群体的多态性不够高，可能与因群体样本含量较小有关。     

长爪沙鼠的生物净化技术

目的实现长爪沙鼠微生物质量升级和实验动物化目标,需对长爪沙鼠实施生物净化。方法在长爪沙鼠生物净化过程中,采取孕鼠选择和临产期判断、无菌剖宫产、仔鼠代乳以及独立通风笼盒(IVC)饲养管理等措施,比较了ICR小鼠、SD大鼠、长爪沙鼠代乳和饲料中添加营养成分对仔鼠代乳的影响。结果本研究共实施长爪沙鼠无菌剖宫产达85胎次,通过ICR代乳鼠代乳并成功断乳167只。结论本研究顺利实现了长爪沙鼠生物净化,形成的关键技术有望为我国特色实验动物资源的生物净化提供参考。     

长爪沙鼠生物净化技术的研究

目的：为实现长爪沙鼠微生物质量升级和实验动物化目标,我们对长爪沙鼠实施生物净化。方法：在长爪沙鼠生物净化过程中,采取孕鼠选择和临产期判断、无菌剖腹产、仔鼠代乳以及独立通风笼盒（IVC）饲养管理和微生物检测等措施,比较了ICR小鼠、SD大鼠、长爪沙鼠代乳和饲料中添加营养成分对仔鼠代乳的影响。结果：本研究共实施长爪沙鼠无菌剖腹产达85胎次,通过ICR代乳鼠代乳并成功断乳167只。讨论：根据微生物检测结果,本研究顺利实现了长爪沙鼠生物净化,形成的关键技术有望为我国特色实验动物资源的生物净化提供参考。     

长爪沙鼠生物净化的研究

通过剖腹取胎,用SPF昆明小鼠代乳仔沙鼠,培育SPF沙鼠核心群,然后扩大清洁沙鼠生产群,繁殖的清洁级沙鼠,供出血热疫苗研制用。     

ZCLA长爪沙鼠微卫星标记遗传多样性的初步观察

用长爪沙鼠9个微卫星DNA标记研究了Z：ZCLA长爪沙鼠的遗传多态性，结果表明，Z：ZCLA长爪沙鼠除在第1个位点上只有一个等位基因外，其它位点上均有24等位基因，平均等位基因数2．6。     

ZCLA长爪沙鼠微卫星标记遗传多样性的初步观察

用长爪沙鼠9个微卫星DNA标记研究了Z：ZCLA长爪沙鼠的遗传多态性，结果表明，Z：ZCLA长爪沙鼠除在第1个位点上只有一个等位基因外，其它位点上均有2～4等位基因，平均等位基因数2．6。     

长爪沙鼠清洁生产群的建立

将ＳＰＦ长爪沙鼠生产的仔鼠引入到亚屏障系统内，作为清洁生产群种鼠进行饲养繁殖，并按远交群繁殖方法建群。进入室内的物品先行灭菌，工作人员按亚屏障系统操作细则进行工作，每季度对动物进行了１次微生物学检测。检测结果表明，该种群的微生物检测程度基本上相当于清洁级小鼠水平。     

44代Z:ZCLA长爪沙鼠生长繁殖性能的研究

目的 通过对第44代Z:ZCLA长爪沙鼠生长繁殖性能的研究与分析,为长爪沙鼠在生物医学领域的研究和应用提供科学依据.对实验动物的开发和应用具有指导意义.方法 选择繁殖性能优良,毛色具有光泽,体质健壮的亲本所产的仔鼠200只,雌雄各半,在2.5～3月龄采用随机交配的一雌一雄长期同居法配种饲养.结果 结果表明:每胎产仔数最少的1只,最多达14只,累计生产了455胎,生产仔数为3191只,每胎平均7.01只,每胎产仔数大多在5～9只,占总胎数的79.34%;观察100只母鼠不同生产胎次的间隔,胎间隔最短20天,最长127天,胎间隔大多在20～60天之间,占总数的72.16%.结论 长爪沙鼠从出生到4月龄体重、体长、尾长的增长迅速,在离乳前雌、雄差异不明显,离乳后的整个发育期,雄鼠的体重、体长、尾长均大于雌鼠.     

普通级Z:ZCLA长爪沙鼠在11个生化基因位点多态性的初步研究

目的探讨Z:ZCLA长爪沙鼠生化基因位点的多态性。方法用Gpd-1、Es-1、Es-2、Es-3、Es-4、Es-6、Es-8、Es-9、Es-10、Akp-1、Idh-1、Mod-1、Ce-2、Pgm-1、Gpi-1、Car-2、Hbb、Trf、Cs-1等19个生化标记位点的乙酸纤维素膜电泳技术研究了普通级Z:ZCLA长爪沙鼠的遗传多态性。结果Z:ZCLA长爪沙鼠在Es-1、Car-2、Hbb、Gpi-1、Cs-1、Ce-2、Id-l、Mod-1上呈单态性,在Es-2,Es-3,Es-4,Es-6,Es-8,Es-9,Es-10,Gpd-1,Pgm-1,Trf,Akp-1个位点上呈现多态性,等位基因从2￣4个不等,平均等位基因数3.0。结论目前本群遗传多样性水平处于中度多态。     

长爪沙鼠线粒体DNA控制区全序列测定及分析

目的对长爪沙鼠线粒体DNA控制区全序列进行测定,并对其进行鉴定及进化分析。方法根据长爪沙鼠已知基因序列设计引物,采用PCR产物测序法,对所得的片段进行测序鉴定。结合已公布啮齿类动物D-loop区序列,分析其碱基组成、遗传距离、并基于最小进化法和UPGMA法构建系统进化树。结果获得长爪沙鼠D-loop区序列,其与家鼠、小家鼠和仓鼠平均同源性为58%;碱基组成分析显示,长爪沙鼠与啮齿类动物有相似的碱基组成和碱基偏离,其A-skew和G-skew分别为0.0047和-0.28。进化分析结果显示,长爪沙鼠与家鼠(0.35)、黑家鼠(0.38)和仓鼠(0.39)具有较近的遗传距离,其分化顺序为跳鼠、蔗鼠、长爪沙鼠、仓鼠、家鼠和小家鼠。结论本研究获得长爪沙鼠D-loop区全序列,确定了长爪沙鼠与仓鼠、家鼠、小家鼠及其它啮齿动物的进化关系,为长爪沙鼠进化研究、线粒体的结构和功能研究奠定基础。     

长爪沙鼠ATPase8,ATPase6,COX3基因的克隆及序列分析

目的对长爪沙鼠线粒体ATPase8,ATPase6,COX3基因全序列进行测定,并对其进行鉴定及进化分析。方法根据长爪沙鼠已知基因序列设计引物,采用PCR产物测序法,对目的片段进行测序鉴定。结合已公布啮齿类动物ATPase8,ATPase6,COX3基因序列,分析其碱基组成、遗传距离、并基于最小进化法和UPGMA法构建系统进化树。结果获得长爪沙鼠线粒体ATPase8,ATPase6,COX3基因全序列,其与家鼠、小家鼠和仓鼠均具有较高的同源性(76～98%);进化分析结果显示,长爪沙鼠与家鼠、黑家鼠和仓鼠遗传距离较近;碱基G的含量分别为6.9%,10.7%,15.2%,符合mtDNA的特点;A+T含量分别为68.2%,64.1%,59.2%,明显低于G+C含量,符合哺乳动物的特点。结论本研究为首次获得长爪沙鼠ATPase8,ATPase6,COX3基因全序列,长爪沙鼠与家鼠、黑家鼠和仓鼠具有较近遗传距离,本研究为长爪沙鼠进化研究、线粒体的结构和功能研究奠定基础。     

长爪沙鼠与实验大小鼠RAPD图谱比较研究

目的比较长爪沙鼠与实验大、小鼠的RAPD图谱，为实验室日常鉴别动物品种品系提供一种分子生物学方法。方法提取基因组DNA（封闭群沙鼠、近交系小鼠BALB／c和C57BL／6、封闭群小鼠KM、近交系大鼠F344和BN以及封闭群大鼠SD），用6条随机引物对其进行PCR扩增。结果在6条随机引物中，p1、p2、p3、p4和p6这5条引物扩增的条带差异较为明显，表现为不同的RAPD图谱。结论RAPD方法可用于鉴定长爪沙鼠与实验大小鼠的差异。     

利用双重PCR.技术研究长爪沙鼠的微卫星结构

目的 为了建立快速检测长爪沙鼠群体遗传多样性的方法及获得Z:ZCLA长爪沙鼠封闭群现用微卫星位点的结构.方法 利用17个微卫星位点(9个来自长爪沙鼠,8个来自大小鼠)进行了PCR反应体系及反应条件的优化,组合了6组双重PCR及两个复合式点样,用上述8个组合对普通级z:ZCLA长爪沙鼠封闭群43、44、45三个世代核心群各.100只种鼠进行遗传检测.结果 三个世代的300只种鼠的检测结果表明,9个长爪沙鼠位点均为微卫星,其中7个位点为完全型的微卫星,1个为复合型,1个为不完全型,多态性主要表现在核心序列的重复;来自大小鼠的8个微卫星位点,有7个在z:ZCLA长爪沙鼠核心群中得到有效扩增,只有3个位点在三个世代中均有出现,对测序结果分析后发现,其核心序列均为小卫星.结论 来自长爪沙鼠的位点,无论结构还是遗传方式均符合微卫星遗传标记的特点,可用作检测长爪沙鼠的群体遗传多样性.     

线粒体DNA序列分析封闭群小鼠遗传稳定性

目的分析ICR小鼠线粒体ATPase6和D—Loop基因多态性及封闭群ICR小鼠遗传稳定性。方法在一个亲本雌鼠100只繁殖产生的共1000只后代群体中随机取12周龄雄鼠20只,提取小鼠睾丸生殖细胞DNA,PCR扩增小鼠线粒体ATPase6和D-Loop基因,产物纯化后测序,测序结果与小鼠线粒体标准序列比对,比较20只小鼠的序列差异。结果检测的20只小鼠ATPase6和D—Loop基因序列完全一致,且与小鼠线粒体标准序列完全一致。结论ICR小鼠群体内未检测到ATPase6和D—Loop基因的多态性变异,该群体具有较好的线粒体遗传稳定性。     

长爪沙鼠载脂蛋白E4外显子的克隆初报

目的 克隆并获得长爪沙鼠载脂蛋白ApoE基因E4外显子的序列.方法 根据Genbank中的相关序列,用自行设计的引物,通过常规的RT-PCR方法,从长爪沙鼠肝脏中克隆及测序得到所需要的基因序列.结果 长爪沙鼠载脂蛋白ApoE基因E4外显子长约987 bp,经比较发现最终测序的结果与大小鼠ApoE基因的同源性达到了73%～74%,与人ApoE基因的同源性达到了62%,与猪、牛ApoE基因的同源性达到了60%以上,与非人灵长类ApoE基因的同源性达到了57%,用DNAstar进行编码氨基酸预测,基因共编码263个氨基酸,已向genbank提交,登录号码EU780067.结论 利用基因进化的保守性通过PCR方法可以得到长爪沙鼠载脂蛋白E4基因的序列,本实验为筛选长爪沙鼠高脂血症模型的遗传多样性标记,为培育长爪沙鼠的血脂代谢新品系打下基础.     

蒙古种沙土鼠的饲养与繁殖

从北京引进了蒙古种沙土鼠。两年来,饲养和繁殖了四百余支,本文总结了关于沙土鼠的配种、营养、清洁卫生及对雌鼠、孕鼠的饲养管理等经验,并测量了不同鼠龄沙土鼠的体重。为在昆明地区开展沙土鼠实验动物化总结了一些饲养的经验。     

长爪沙鼠血清雌性激素的比较研究

目的测定长爪沙鼠、NIH小鼠和SD大鼠的血清雌二醇(E2)和孕酮(P)水平,为研究长爪沙鼠的生殖和胚胎工程提供基础资料。方法用放射免疫分析法测定上述动物生产前后血清雌二醇(E2)和孕酮(P)水平,进行统计学处理和分析。结果不同阶段雌性沙鼠E2值差异无显著性(P>0.05),P值差异有显著性(P<0.01);E2值比较,处女期沙鼠与同期NIH和SD差异有显著性(P<0.01),而在经产期的动物间水平接近(P>0.05);P值比较,处女期沙鼠与NIH接近,与SD差异有显著性(P<0.01);而经产期沙鼠在三种动物中是最高的(P<0.01)。结论长爪沙鼠血清E2、P的含量具种属特异性,并随动物的生理发育时期而变化。