BVT.2733与肥胖小鼠中MCP-1表达的相关性研究

目的:研究BVT.2733对MCP-1表达的影响以及探讨其改善胰岛素抵抗的作用机制。方法:建立高脂饮食诱导的肥胖小鼠模型,随机分为三组:正常对照组、肥胖对照组、BVT.2733治疗组。分别给予安慰剂、BVT.2733灌胃14天,采用生化法检测血糖,放免法检测小鼠空腹胰岛素水平,Real-time PCR检测内脏脂肪中MCP-1的mRNA表达。观察各组胰岛素抵抗相关指标表达差异情况。结果:肥胖组小鼠体重明显增加,空腹血糖及胰岛素水平升高(P<0.05),形态学上发现小鼠脂肪细胞体积增大。与肥胖对照组相比较,治疗组小鼠脂肪细胞体积减小,空腹胰岛素水平下降明显(P<0.01),脂肪组织MCP-1 mRNA表达明显降低(P<0.05)。结论:BVT.2733能够降低MCP-1的表达水平,其可能通过抑制炎症来改善胰岛素抵抗。     

小鼠11β⁃羟类固醇脱氢酶敲除对肠道功能的影响

目的：探究小鼠11β?羟类固醇脱氢酶（11β? hydroxysteroid dehydrogenase,11β?HSD1）基因敲除对肠道功能的影响。方法：将C57/BL6为遗传背景的野生对照组及11β?HSD1基因敲除组各6只小鼠正常喂养至6~8周,观察小鼠及小肠组织大体变化,PCR及免疫组化确定其肠道功能及炎症变化。结果：11β?HSD1基因敲除能够显著改善肠道的炎症状态,减轻炎症,同时肠道黏膜通透性改变,肠道绒毛长度缩短,隐窝长度变长,杯状细胞数量增多,黏膜的屏障功能增强。结论：本研究成功建立了小鼠11β?HSD1基因敲除模型,证实了肠道在11β?HSD1基因敲除后炎症状态改善,为进一步11β?HSD1肠道组织特异性敲除提供了研究基础。     

肠上皮11β⁃HSD1特异性敲除小鼠的小肠上皮屏障功能的研究

目的：探究小鼠肠上皮11β?羟类固醇脱氢酶（11β?hydroxysteroid dehydrogenase,11β?HSD1）基因特异性敲除对小肠上皮屏障功能的影响。方法：在C57BL/6J小鼠构建肠上皮特异性11β?HSD1敲除模型,野生型对照组和11β?HSD1敲除组分别给予高脂饮食喂养（第6周开始,喂养8周）。通过免疫组化方法观察小鼠小肠上皮绒毛、隐窝、杯状细胞数量、紧密连接蛋白?1（zona occludens?1,ZO?1）和炎症标志物F4/80的变化。结果：11β?HSD1基因敲除能够改变高脂饮食肥胖小鼠的绒毛长度和杯状细胞数量,显著减轻高脂饮食肥胖小鼠的小肠上皮炎症,改变紧密连接蛋白表达。结论：高脂饮食导致的小鼠小肠上皮屏障功能变化与11β?HSD1的作用密切相关。     

BVT.2733影响饮食诱导肥胖小鼠中Visfatin表达的研究

目的:构建高脂饮食诱导肥胖小鼠模型,观察BVT.2733在改善胰岛素抵抗中的作用及对Visfatin表达的影响?方法:构建高脂饮食诱导的肥胖小鼠模型,分为肥胖对照组和BVT.2733治疗组,肥胖对照组给予安慰剂?治疗组给予BVT.2733灌胃2周,同时设正常饮食的小鼠为正常对照组?放射免疫法测小鼠空腹胰岛素水平,生化法检测血糖,实时定量RT-PCR 检测内脏脂肪组织Visfatin的mRNA表达?观察各组小鼠脂肪组织的形态学变化?结果:与正常对照组相比,肥胖对照组小鼠脂肪细胞明显增大,体重增加,空腹血糖?血清胰岛素水平升高(P < 0.05)?与肥胖对照组相比,BVT.2733治疗组小鼠脂肪细胞体积减小,空腹血清胰岛素水平明显下降(P < 0.01),脂肪组织Visfatin mRNA表达显著降低(P < 0.05)?结论:BVT.2733能够降低体重,减少脂肪组织,并且降低Visfatin的表达水平?     

BVT.2733对肥胖小鼠胰岛素抵抗及炎症指标的影响

目的:观察BVT.2733对饮食诱导的肥胖小鼠胰岛素抵抗及炎症指标的影响.方法:建立饮食诱导的肥胖模型小鼠,并将其分为肥胖组和BVT.2733治疗组.肥胖组给予安慰剂;治疗组给予BVT.2733灌胃两周,另设正常饲养的小鼠为止常组,检～114,鼠体内代谢及炎症相关指标,观察三组小鼠在胰岛素抵抗以及炎症方面的差异.结果:与正常组相比,肥胖组小鼠脂肪细胞明显增大,体重增加,空腹血糖、血清胰岛素及TNF-α升高,脂肪组织TLR4 mRNA表达增高,经BVT.2733治疗后,肥胖鼠脂肪细胞体积减小.体重减轻.卒腹血糖、血清胰岛素明显下降,脂肪组织TLR4 mRNA表达减少,而血TNF-α没有显著变化.结论:BVT.2733能改善肥胖小鼠的胰岛素抵抗并且降低脂肪组织TLR4 mRNA的表达,而对于血清TNF-α水平没有明显的影响.     

雌性11β⁃HSD1敲除小鼠肠道类器官体外研究

目的：研究雌性11β?HSD1敲除小鼠肠道类器官功能改变。方法：分离年龄性别匹配的C57BL/6J小鼠和11β?HSD1敲除小鼠的肠道组织。细胞流式定量分析肠道上皮层干细胞、祖细胞、潘氏细胞分别所占比例。实时定量PCR检测干细胞和潘氏细胞的标志基因表达情况。分离小鼠肠上皮隐窝单位进行体外3D类器官培养,观察类器官增殖率及类器官分化程度。免疫荧光染色研究小肠类器官干细胞及潘氏细胞的定位和定量。结果：11β?HSD1敲除小鼠与野生组相比,其小肠上皮所含潘氏细胞数显著增高,干细胞数目无明显差异,祖细胞数目增多,肠道干细胞标志基因Lgr5在小肠上皮的表达有增高趋势。同时在大肠上皮组织中有类似的结果,11β?HSD1敲除组大肠干细胞、祖细胞数目及Lgr5基因表达均增高。体外研究结果显示,小肠隐窝成类器官比例有增高趋势,11β?HSD1敲除组增殖分化出的类器官对比野生组具有更复杂的结构及更多数目的类隐窝区域,但大肠隐窝类器官培养结果未见显著差异。对小肠类器官的干细胞及潘氏细胞染色发现,11β?HSD1敲除小鼠肠道类器官含有更多的潘氏细胞,干细胞数目亦有增多趋势。结论：11β?HSD1敲除后小鼠肠道细胞组成发生改变,在小肠上皮组织中,潘氏细胞数目显著增多;在大肠上皮组织中,干细胞、祖细胞数目及干细胞标志基因表达量均显著增加。体外研究显示,11β?HSD1敲除组小肠类器官包含更多的潘氏细胞,类器官具有更强的增殖及分化能力。     

11β/HSD1与糖脂代谢异常的相关关系研究

目的：探讨11β?羟基类固醇脱氢酶1（11β?hydroxysteroid dehydrogenase,11β/HSD1）对机体糖脂代谢异常的影响及其在肥胖和胰岛素抵抗发生发展过程中的作用及机制。方法：首先构建脂肪组织特异性敲除11β/HSD1（Fabp?11β/HSD1-/-）小鼠。然后选择5周龄Fabp?11β/HSD1-/-小鼠和正常C57BL/6小鼠各5只,建立高脂饮食诱导的肥胖（DIO）小鼠模型,分别在喂食5周和6周时进行腹腔葡萄糖耐量试验（IPGTT）和胰岛素耐量试验（ITT）,喂食12周后处死并称量皮下及内脏脂肪重量,采用HE染色方法观察脂肪组织内脂肪空泡改变程度,取血检测血糖、甘油三酯、胆固醇、尿素、肌酐等血清生化指标,同时应用Western blot与QRT?PCR方法检测脂肪组织中11β/HSD1表达和糖脂代谢相关转录因子的蛋白表达情况。结果：脂肪组织特异性敲除11β/HSD1小鼠构建成功。高脂喂养12周后两组小鼠体重、内脏脂肪湿重没有明显差异。Fabp?11β/HSD1-/-组小鼠血清空腹血糖明显低于正常组,其他生化指标没有明显改变,但Fabp?11β/HSD1-/-组小鼠脂肪组织HE染色可见脂肪空泡比正常组小,且糖耐量和胰岛素敏感性明显高于对照组,Western blot与QRT?PCR结果显示Fabp?11β/HSD1-/-小鼠脂肪组织中11β/HSD1、PPAR?γ、C/EPB?α的蛋白表达量明显低于正常组。结论：在高脂饮食下脂肪组织内11β/HSD1表达的下调可减少脂肪细胞内脂滴的沉积,一定程度上改善机体对胰岛素敏感性的下降。     

姜黄素对神经病理性疼痛大鼠脊髓11β羟基固醇脱氢酶1表达的影响

目的 探讨皮质醇和11β羟基固醇脱氢酶1(11βHSD1)在神经病理性疼痛大鼠痛觉过敏中的作用,并揭示姜黄素缓解大鼠神经病理性疼痛的作用机制.方法 雄性SD大鼠随机分成4组:假手术(Sham)组、坐骨神经慢性压榨损伤模型(CCI)组、CCI+溶剂(SC)组、CCI+姜黄素100 mg/kg(Cur100)组.于术前2 d和术后1、3、5、7、10、14 d测定鼠爪热痛阈(PTWL)和机械痛阈(PMWT),术后3、7和14 d取血,同时取大鼠术侧L4、L5脊髓背角和背根节,用ELISA法测血清皮质醇浓度,用免疫组化法和Western印迹法分析脊髓背角和背根节11βHSD1表达的动态变化.结果 与Sham组相比,CCI组大鼠术后1~14 d PTWL和PMWT明显降低(P<0.05),血清皮质醇浓度明显升高(P<0.05),术侧脊髓背角和背根节内11βHSD1阳性神经元的表达显著增多(P<0.05).Cur100大鼠PMWT和PTWL显著提高(P<0.05),同时组大鼠血清皮质醇浓度显著降低(P<0.05),脊髓背角和背根节11βHSD1阳性神经元细胞的表达也明显降低(P<0.05).结论 神经病理性疼痛所致应激引起血清皮质醇浓度升高、脊髓背角和背根节11βHSD1阳性神经元细胞表达增加,姜黄素能减轻CCI大鼠机械性痛觉过敏和热痛觉过敏,降低血清皮质醇浓度及脊髓背角和背根节11βHSD1阳性神经元细胞表达.皮质醇及脊髓背角和背根节的11βHSD1阳性神经元细胞可能与神经病理性疼痛的发病和维持有关.     

11β-羟基类固醇脱氢酶1在炎症调控中的作用

11β-羟基类固醇脱氢酶(11β-HSD)是调节糖皮质激素(GC)作用的关键酶。11β-HSD有两个同工酶:11β-HSD1和11β-HSD2,催化具有活性的皮质醇与无活性的可的松之间的相互转化。1βl-HSD1主要表达于GC的靶器官,如肝脏、肺、脂肪组织、卵巢、脑组织等,在体内主要作为还原酶起作用,催化可的松还原为皮质醇。11β-HSD1在下丘脑-垂体-肾上腺轴及代谢综合征、肥胖、胰岛素抵抗、炎症调控等众多领域中有重要作用。11β-HSD1的作用越来越受到重视,现阐述11β-HSD1在炎症调控中的意义。     

小鼠11β- HSD1基因真核表达载体的构建及应用

构建小鼠11β-羟类固醇脱氢酶（11β- HSD1）基因的慢病毒真核表达载体PLJM1-11β-HSD1-GFP,建立小鼠前体脂肪细胞（3T3-L1）高表达11β-HSD 1 基因的稳定感染细胞株,为11β- HSD1基因的功能研究奠定基础。方法利用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）从小鼠肝脏cDNA 中扩增11β-HSD1开放阅读框ORF,构建针对11β-HSD 1 基因的真核表达载体,转化感受态DH5α菌株,抽提质粒并进行测序鉴定。用测序成功的质粒和慢病毒包装质粒共同转染293T细胞,产生慢病毒并转染3T3-L1 细胞。根据绿色荧光效率挑取单克隆细胞团筛选出稳定细胞株,通过Western blot鉴定PLJM1-11β-HSD1-GFP转染成功。结果经酶切、PCR 及测序验证,PLJM1-11β-HSD1-GFP 真核表达载体构建成功,并包装慢病毒,绿色荧光效率90%以上,并利用其慢病毒悬液成功感染3T3-L1 细胞,筛选出的稳定感染细胞株的3T3-L1细胞成功高表达11β-HSD1 蛋白。结论成功构建了11β-HSD 1 基因的真核表达载体,并建立高表达11β-HSD 1 的稳定感染细胞株PLJM1-11β-HSD1-GFP-3T3-L1,为进一步研究11β-HSD 1 基因的功能,特别是在肥胖中的研究奠定了基础。     

沉默GCN5或SOX9基因对Thy⁃1肾炎大鼠肾组织中TGF⁃β1生成的影响

目的：研究沉默大鼠肾组织中通用控制核苷酸合成5（general control nonderepressible 5,GCN5）基因、性别决定区Y框蛋白9（SRY related HMG box?9,SOX9）基因对Thy?1肾炎（Thy?1 nephritis,Thy?1N）大鼠肾组织内转化生长因子?β1（transforming growth factor?β1,TGF?β1）生成的影响。方法：分别用慢病毒（lentivirus,LV）包装GCN5和SOX9发夹状小干扰RNA（shRNA）,即制备LV?shGCN5和LV?shSOX9重组病毒。然后行大鼠肾动脉灌注术将LV?shGCN5和LV?shSOX9分别导入大鼠肾脏,再经尾静脉注射兔抗大鼠胸腺细胞抗血清（anti?thymocyte serum,ATS）复制Thy?1N模型。在注射ATS后3 h,取大鼠肾组织,用RT?PCR和Western blot检查各组大鼠肾组织中GCN5和SOX9的mRNA及蛋白表达水平,以验证干扰效果及GCN5、SOX9对TGF?β1产生的影响。结果：利用肾动脉灌注术将LV?shGCN5或LV?shSOX9重组病毒导入大鼠肾组织后,不仅能有效沉默相应的靶基因,而且还能下调TGF?β1的表达。结论：沉默大鼠肾组织中GCN5或SOX9基因后能显著抑制Thy?1N大鼠肾内TGF?β1的生成。     

11β⁃羟化类固醇脱氢酶敲除对高脂饮食喂养小鼠认知功能的影响

目的：探究11β-羟化类固醇脱氢酶1（11β-hydroxysteroid dehydrogenase,11β-HSD1）基因敲除对小鼠整体代谢和认知功能的影响。方法：将C57BL/6J为遗传背景的野生对照组及11β-HSD1基因敲除组各15只小鼠高脂喂养20周,代谢笼评估能量代谢,行为学评估观察小鼠认知功能,电镜评估海马体的线粒体结构,免疫荧光及PCR确定其认知功能、线粒体功能相关基因及炎症基因的变化。结果：11β-HSD1基因敲除能够提高高脂喂养小鼠学习和记忆能力,改善握力,改善海马体的微结构、线粒体含量变多,认知相关基因、线粒体呼吸功能相关基因上调,炎症相关基因改变。结论：11β-HSD1敲除后高脂饮食喂养小鼠认知功能显著改善,握力显著提高,可能是治疗认知功能障碍的有效靶点。     

TGF⁃β1在二尖瓣腱索断裂患者血清与组织中的表达

目的：探究人转化生长因子β1（transforming growth factor β1,TGF?β1）在二尖瓣腱索断裂患者血清和组织中的表达,为进一步明确TGF?β1对于二尖瓣腱索病变的促进作用提供依据。方法：选取2020年5—12月南京医科大学第一附属医院收治的二尖瓣腱索断裂患者20例作为实验组,另选取同期健康体检者作为对照组。采用ELISA试剂盒检测血清TGF?β1水平,比较两组实验室检查及心脏彩超结果。同时,收取实验组断裂的二尖瓣腱索以及同期8例心脏移植受者正常二尖瓣腱索组织进行免疫组化染色和扫描电镜分析。结果：实验组患者血清TGF?β1水平高于对照组（P＜0.05）;实验组心脏彩超左房内径、左室舒张末期内径高于对照组（P＜0.01）;免疫组化染色显示TGF?β1、α?平滑肌动蛋白在断裂的二尖瓣腱索组织中呈高表达;扫描电镜显示断裂腱索组织镜下结构胶原纤维束排列紊乱,疏松层（外层）明显增厚、分层和断端,致密层（内层）可见有明显裂隙。结论：TGF?β1在二尖瓣腱索断裂患者的血清和腱索组织中呈高表达,提示其可能与二尖瓣腱索断裂的发生及发展有密切关系。     

牙周炎对肥胖小鼠炎症因子、肾纤维化的影响

目的：初步探索牙周炎对肥胖小鼠炎症因子、肾损伤的影响。方法：采用高、低脂饲料诱导小鼠肥胖合并牙周炎的模型,分为高脂牙周炎组（High+Pre）、高脂非牙周炎组（High+NCPre）、低脂牙周炎组（Low+Pre）、低脂非牙周炎组（Low+NCPre）;观察小鼠血清总蛋白、白蛋白、肌酐含量的变化;采用免疫印迹试验（Western blot）检测TGF?β1/Samd6信号通路相关蛋白、基质金属蛋白酶（matrixmetalloprotease,MMP）?2、MMP?9、金属蛋白酶组织抑制因子（tissue inhibitor of metalloproteinases?1,TIMP?1）的蛋白水平;应用酶联免疫吸附测定法 （ELISA）检测肿瘤坏死因子?α（tumor necrosis factor?α,TNF?α）、白细胞介素?6（interleukin?6,IL?6）水平的变化。结果：高脂饲喂小鼠的体重第20周已达显著肥胖;与Low+NCPre组相比,High+NCPre组和High+Pre组小鼠血清中总蛋白、白蛋白显著降低（P < 0.05）,肾组织MMP?2、MMP?9蛋白含量显著下调（P < 0.05）,血清肌酐、TNF?α、IL?6显著升高（P < 0.05）,肾组织中TIMP?1蛋白水平显著增加（P < 0.05）,促进肾组织TGF?β1蛋白表达（P < 0.05）,抑制肾组织Samd6、E?cadherin蛋白分泌（P < 0.05）;与High+NCPre组相比,High+Pre小鼠血清中总蛋白、白蛋白显著降低（P < 0.05）,抑制炎症因子TNF?α、IL?6、MMP?2、MMP?9蛋白表达水平（P < 0.05）,血清肌酐、肾组织TIMP?1显著增加（P < 0.05）,肾组织TGF?β1蛋白显著上调（P < 0.05）,肾组织Samd6、E?cadherin蛋白显著下调（P < 0.05）。结论：牙周炎加重肥胖小鼠肾损伤,其可能通过影响TGF?β1/Samd6信号通路促进肾纤维化,抑制细胞外基质降解,促进上皮间质转化。     

11β-羟基类固醇脱氢酶1与代谢综合征

11β羟基类固醇脱氢酶1(11βHSD1)在体内主要为还原酶,负责活性的糖皮质激素向其无活性前体的转换,调节局部糖皮质激素浓度,是糖皮质激素受体前调节,并决定糖皮质激素流向其受体而发挥作用。代谢综合征糖皮质激素敏感性增加,11βHSD1调节异常,可能是肥胖、糖耐量低减、高血压和心血管疾病等代谢综合征重要发病机制之一,选择性11βHSD1抑制剂有望成为其治疗靶点。     

11β-羟类固醇脱氢酶1型在小鼠胰腺组织和胰岛β细胞系NIT-1中的表达

目的 探讨 11β-羟类固醇脱氢酶 1 型(11β-HSD1)在 C57BL/6J 小鼠胰腺组织和胰岛β细胞系 NIT-1 中的表达及其生物学意义.方法 以11β HSD1 肝脏组织中的表达为阳性参照,RT-PCR 法和 Western blot 法检测小鼠胰腺组织中 11βHSD1 mRNA 和蛋白表达.细胞免疫化学法检测 NIT-1 细胞中 11β-HSD1 的分布与表达,RT-PCR 法和Western blot 法检测 NIT-1 细胞中 11β-HSD1 mRNA 和蛋白表达.结果 ①在正常 C57BL/6J 小鼠胰腺组织中有 11β-HSD1 mRNA 和蛋白表达,其表达量均低于肝脏组织(均P<0.01).②细胞免疫化学染色示 NIT-1 细胞胞质见棕黄色染色阳性颗粒,同时 NIT-1 细胞中有11β-HSD1 mRNA 和蛋白表达.结论 小鼠胰腺组织和胰岛β细胞系 NIT-1 中有11β-HSD1 基因表达,为研究糖皮质激素代谢对胰岛细胞功能的影响以及其它潜在的生理功能,提供了一条研究途径.     

性激素对女性脂肪组织11βHSD mRNA表达的部位特异性调控

目的:观察性激素对育龄期和绝经期妇女不同部位脂肪组织11β羟基类固醇脱氢酶Ⅰ型(11β-hydroxysteroid dehydrogenase type 1,11βHSD1)mRNA表达水平的调控作用?方法:育龄期非妊娠妇女6例,年龄(29.83 ± 3.43)岁及绝经期妇女16例,年龄(65.19 ± 6.81)岁,取其皮下和网膜脂肪组织进行培养,应用雌激素和雄激素刺激脂肪组织24h,实时定量PCR方法测定脂肪组织11βHSD1 mRNA水平?结果:雌激素可使绝经期妇女皮下脂肪组织11βHSD1 mRNA表达明显增加(P < 0.05),使网膜脂肪组织11βHSD1 mRNA表达水平下降30%?雄激素刺激可抑制育龄期妇女皮下脂肪组织11βHSD1 mRNA表达近40%(P = 0.001),而使绝经期妇女网膜脂肪组织11βHSD1 mRNA表达增加1.9倍(P = 0.005)?结论:性激素对脂肪组织11βHSD1 mRNA表达的调控呈现年龄和部位特异性改变,可能是不同时期女性体脂分布的重要分子生物学机制?     

11β-羟类固醇脱氢酶1抑制剂改善肥胖大鼠胰岛素抵抗机制的初步研究

目的研究11β-羟类固醇脱氢酶1（11β-HSD1）抑制剂对饮食诱导肥胖（DIO）大鼠胰岛素敏感性的影响及其可能的机制。方法选择24只雌性SD大鼠为研究对象,随机分为11β-HSD1抑制剂组（n=12）和对照组（n=12）;每组再按食物不同分为普食组（n=6）和高脂组（n=6）。DIO造模成功后,抑制剂组大鼠予11β-HSD1抑制剂（20 mg/kg）灌胃,对照组大鼠给予生理盐水灌胃（20 mg/kg）,2次/d,持续10 d;抑制剂组在灌胃前后分别称体质量,之后分别行腹腔葡萄糖耐量试验（IPGTT）,采血时间点分别为0、15、30、60和120 min,观察血糖及胰岛素敏感性的变化。采用Real-time PCR测定肝脏11β-HSD1、过氧化物酶体增殖剂激活受体-α（PPAR-α）、PPAR-γ和葡萄糖激酶（GcK）mRNA的表达。结果 11β-HSD1抑制剂灌胃后结果显示：抑制剂高脂组大鼠的体质量、血糖和胰岛素水平较灌胃前均有下降;抑制剂普食组大鼠肝脏11β-HSD1的表达上调;抑制剂组和对照组的PPAR-α、PPAR-γ、GcK mRNA的表达均升高,与普食组比较,高脂组升高更明显（P〈0.01）。结论 11β-HSD1抑制剂可减轻大鼠体质量、改善DIO大鼠的胰岛素抵抗和增加胰岛素敏感性,这可能与增加葡萄糖的利用、改善脂代谢有关。     

11β-羟化类固醇脱氢酶1在饮食诱导性肥胖大鼠组织中的表达

目的:探讨11-βhydroxysteroid dehydrogenase type 1(11-βHSD1)在肥胖发生过程中的作用。方法:建立饮食诱导的肥胖(DIO)大鼠模型,应用Western blotting方法检测各组织11-βHSD1的蛋白表达,同时应用实时定量PCR检测LPL、re-sistin、FAS等肥胖相关基因的表达,采用放射免疫分析法检测血糖、血脂、胰岛素、TNFα等指标。结果:DIO组大鼠体重、体脂明显高于正常组,DIO组大鼠脂肪、脑、骨骼肌的11-βHSD1表达明显高于正常组,肥胖相关基因LPLr、esistin、FAS等在DIO组内脏脂肪的表达高于正常组,外周血脂、胰岛素DIO组高于正常组,但血糖、TNF-α两组间无明显差异。结论:11-βHSD1在饮食诱导性肥胖大鼠相关组织的表达高于正常组,具有组织特异性;11-βHSD1在内脏脂肪组织的高表达促进肥胖的发生。     

IL⁃1β和TNF⁃α通过骨髓MSCs降低多西环素对骨髓瘤细胞株H929的细胞毒性作用

目的：骨髓来源的间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）在骨髓微环境中参与骨髓瘤细胞的耐药性。本研究旨在通过体外实验,研究经细胞因子预处理的骨髓MSCs在与人骨髓瘤细胞株H929共培养条件下,是否影响多西环素（doxycycline,DOX）对骨髓瘤细胞株的细胞毒性作用,并初步探讨其可能的作用机制。方法：经白细胞介素（interleudin,IL）?1β或肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）?ɑ预处理的人骨髓MSCs,与H929细胞共培养,并以DOX处理细胞,分别采用CCK8法和流式细胞术（FCM）,检测DOX对H929细胞增殖和凋亡的影响;采用FCM和实时荧光定量PCR（RT?qPCR）法检测IL?1β或TNF?α处理后,骨髓MSCs中血管细胞黏附分子（VCAM?1）表达;Western blot法检测在DOX存在时,不同处理的骨髓MSCs作为共培养饲养层细胞的条件下,H929细胞p?Erk1/2的变化。结果：DOX可抑制骨髓瘤细胞株H929的增殖并诱导其凋亡。人骨髓MSCs与H929共培养可以减少DOX对H929的细胞毒性作用,而经IL?1β或TNF?α预处理的人骨髓MSCs再与H929共培养,则可以进一步降低DOX的细胞毒性作用。人骨髓MSCs经IL?1β或TNF?α处理后,其VCAM?1 mRNA转录水平和蛋白表达水平均升高。经预处理的骨髓MSCs与H929共培养后,可以降低DOX对骨髓瘤细胞株p?Erk1/2的下调作用。结论：DOX在体外对骨髓瘤细胞株表现出剂量和时间依赖性的细胞毒性作用;而IL?1β和TNF?α可通过骨髓MSCs来间接拮抗DOX对H929的细胞毒性作用;IL?1β和TNF?α的这一作用机制可能与上调骨髓MSCs的VCAM?1表达与上调p?Erk1/2有关。