大鼠局灶性脑缺血再灌注模型的研究

目的改进大鼠大脑中动脉梗塞法，建立更接近于临床缺血性脑卒中及其再灌注的可靠模型。方法沿大鼠右颈外动脉入栓，经颈内动脉到达大脑中动脉，入栓线长15～18mm，直径0．205mm，阻断其血流，观察大鼠神经病学改变及脑组织形态学变化。结果术后大鼠表现出特殊体态及典型追尾征，6h后大脑中动脉供血区出现缺血性外观（TTC染色）及相应组织学变化（HE染色），模型成功率近83％。结论本方法既可构成缺血性病灶，又能形成再灌注模型，具有可逆性重复操作的特点，其神经病学与形态学的特殊表现，可作为鉴定模型的可靠依据。     

细胞间粘附分子—1在局部缺血再灌注脑损伤中作用的研究

目的 探讨局部脑缺血再灌注后脑微血管内皮细胞表面表达的ＩＣＡＭ－１参与的缺血性炎症反应。方法 用免疫组织化学的方法观察参大鼠左侧大脑中动脉栓堵２小时再灌注０、３、１２、２４、７２、１２０小时脑微血管内皮细胞ＩＣＡＭ－１的表达。结果 大鼠左侧大脑中动脉栓堵２小时未见Ｉ－ＣＡＭ－１的表达,栓堵２小时再灌注３小时病变侧脑组织微血管内皮细胞开始出现ＩＣＡＭ－１的表达,１２￣２４小时达高峰,并持续至７２小时     

大鼠脑梗死后运动功能可逆性物质基础及发生机制

目的 探讨大鼠急性脑梗死后运动功能可逆性的物质基础及其发生机制。方法 用肾性高血压大鼠（ＲＨＲ）行大脑中动脉闭塞（ＭＡＣＯ）,以横木行走试验（ＢＷＴ）评定运动功能,应用电镜、免疫组织化学观察突触、凋亡细胞、神经丝蛋白（ＮＦ）、微管相关蛋白２（ＭＡＰ２）、生长相关蛋白４３（ＧＡＰ４３）、突触素（ＳＹＰ）等变化。结果 ＭＣＡＯ后大鼠全部偏瘫,３周起运动明显恢复并逐渐升高,ＴＵＮＥＬ染色阳性细胞随时间的     

细胞间粘附分子-1在局部缺血再灌流脑损伤中作用的研究

目的探讨局部脑缺血再灌流后脑微血管内皮细胞表面表达的ＩＣＡＭ１参与的缺血性炎症反应。方法用免疫组织化学的方法观察大鼠左侧大脑中动脉栓堵２小时再灌流０、３、１２、２４、７２、１２０小时脑微血管内皮细胞ＩＣＡＭ１的表达。结果大鼠左侧大脑中动脉栓堵２小时未见ＩＣＡＭ１的表达，栓堵２小时再灌流３小时病变侧脑组织微血管内皮细胞开始出现ＩＣＡＭ１的表达，１２～２４小时达高峰，并持续至７２小时，非缺血侧脑组织微血管未见ＩＣＡＭ１的表达。结论ＩＣＡＭ１参与了缺血性脑损伤早期的病理过程。提示在缺血早期阻断ＩＣＡＭ１的表达可能有助于减轻缺血性脑损害的程度。     

复方白花前胡对局灶性脑缺血再灌注大鼠P53蛋白表达的影响

目的观察复方白花前胡对大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型凋亡相关基因B,蛋白表达的影响。方法线拴法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,分组用药后免疫组化法观察各组脑组织切片P5,蛋白表达。结果复方白花前胡能减少模型大鼠P5,蛋白的表达（P〈0．01,P〈0．05）,减轻或消除脑缺血级联反应中的炎症反应。结论复方白花前胡具有抗细胞凋亡,保护神经元,减少神经功能缺损的作用。     

实验性局灶性脑缺血再灌注Fos蛋白的表达

目的　探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注Fos蛋白表达的意义及其机制。方法　采用免疫组化法观察Fos蛋白在大鼠局灶性脑缺血再灌注后皮层和基底节区的动态变化。结果　Fos蛋白在大脑中动脉阻断 1h后 ,随再灌注时间延长其分布不同。基底节区持续时间长 ,阳性细胞多 ,而皮层持续时间短 ,阳性细胞少。其中再灌注 90min ,Fos蛋白表达最显著。大脑中动脉供血中心区皮层几无表达。结论　Fos蛋白的表达与神经细胞存活密切相关 ,出现Fos蛋白表达的区域神经元易于耐受缺血性损害而存活 ,可能是神经细胞自我保护机制之一 ,Fos蛋白的表达存在扩散抑制     

用放免测定观察自发性高血压大鼠脑底动脉上血管活性肠肽和P物质含量的变化

应用放射免疫分析的方法，观察了自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）脑底动脉上血管活性肠肽（ＶＩＰ）和Ｐ物质（ＳＰ）含量的变化．结果表明，ＳＨＲ各主要脑底动脉ＳＰ的含量在２．６０～３．５１ｐｇ／ｍｇ之间．大脑前动脉（ＡＣＡ）ＳＰ的含量ＳＨＲ比对照京都Ｗｉｓｔａｒ（ＷＫＹ）大鼠小，在其它脑底动脉上ＳＰ的含量ＳＨＲ和ＷＫＹ大鼠无差异．ＳＨＲ各主要脑底动脉上的ＶＩＰ含量在２．３０～２．５５ｐｇ／ｍｇ之间，和ＷＫＹ大鼠均无明显差异．同时对ＳＨＲ脑底动脉上肽类物质含量的变化的意义作了进一步的讨论．     

雌激素对去卵巢大鼠局灶性脑缺血的保护作用及对Bcl-2蛋白表达的影响

目的：研究雌激素的脑保护作用及对Bcl-2蛋白表达的影响,探讨其脑保护作用的机制。方法：将雌性Wistar大鼠去卵巢后分别给予不同剂量的雌激素,连续6d后制成大脑中动脉闭塞模型,于缺血24h断头取脑。观察脑梗死灶的面积和Bcl-2蛋白的表达。结果：各给药组与缺血对照组比较,梗死灶面积均减小（P〈0．01）,Bcl-2阳性细胞值均明显增加（P〈0．01）。在一定范围内,大鼠血雌激素浓度和Bcl-2阳性细胞值呈正相关（r=0．41,P〈0．05）。结论：雌激素对去卵巢大鼠缺血性脑损伤具有脑保护作用,这可能是其上调了Bcl-2蛋白表达所致。     

可逆性大脑中动脉阻塞时神经元凋亡与坏死的形态学特点

目的;观察可逆性大脑中动脉阻塞时神经元凋亡与坏死的形态学特点及其发生过程,探讨缺血性神经元损伤的病理机制。方法 阻塞大鼠大脑中动脉２小时,再灌流０．５￣４８小时制成局灶性脑缺血模型,ＨＥ和ＴＵＮＥＬ染色观察凋亡细胞和坏死细胞形态,图象分析并计数。结果：ＨＥ染色可见凋亡细胞有四种形态;核固缩深染细胞大而肿胀或胞质无明显异常的凋亡细胞,细胞核裂解但胞膜完整的凋亡细胞,凋亡小体,出现于再灌注３小时;再灌     

用放免测定观察自发性高血压大鼠脑底动脉上血管活性肠肽和…

应用放射免疫分析的方法，观察了自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）脑底动脉上血管活性肠肽（ＶＩＰ）和Ｐ物质（ＳＰ）含量的变化。结果表明，ＳＨＲ各主要脑底动脉ＳＰ的含量在２．６０￣３．５１ｐｇ／ｍｇ之间，大脑前动脉（ＡＣＡ）ＳＰ的含量ＳＨＲ比对照京都Ｗｉｓｔａｒ（ＷＫＹ）大鼠小，在其它脑底动脉上ＳＰ的含量ＳＨＲ和ＷＫＹ大鼠无差异。ＳＨＲ各主要脑底动脉上的ＶＩＰ含量在２．３０￣２．５５ｐｇ／ｍｇ之间，和ＷＫＹ大     

大鼠大脑中动脉闭塞局灶脑缺血再灌注改良模型的建立

目的 介绍一种简便可靠的插线法，可用于制作SD大鼠大脑中动脉(MCA)闭塞局灶脑缺血再灌注模型。方法 结扎并游离颈外动脉，用2-0丝线悬吊翼腭动脉，用插入端蘸不饱和聚酯的白色鱼线从颈外动脉切口处插入，经颈内动脉，可逆性阻断大鼠一侧大脑中动脉。随后进行神经病学评分、TTC染色、亚甲蓝染色以观察模型的可靠性，将此改良法与经典的Longa法进行对比研究。结果 大鼠MCA阻断2h后进行再灌注，模型成功则出现Horner’s征阳性、神经病学评分≥1分，TTC染色显示梗死范围，亚甲蓝染色提示MCA供血区神经元大量缺失。与经典的Longa法模型对比，改良模型的成功率高、死亡率低。结论 该改良模型简便可靠，稳定性好，是研究MCA局灶脑缺血再灌注较为理想的实验动物模型。     

新型查尔酮FMC对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 研究新型查尔酮（FMC）（3''-甲酰基-4'',6''-二羟基-2''-甲氧基-5''-甲基查尔酮）对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法 建立重复性好、梗死部位恒定、成功率高的局灶性脑缺血再灌注损伤模型,以水溶性的FMC溶液腹腔注射,观察FMC对脑缺血大鼠神经行为、脑梗死范围以及脑组织的含水量、超氧化歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）的影响。结果 术后出现追尾征及特殊体态,于2h后大脑中动脉供血区出现缺血。脑组织TTC染色均匀,出现梗死的脑组织面积相对于全脑百分比为27.96%±9.45%,动物模型成功率为78.6%。FMC组的脑含水量、MDA显著降低,SOD显著升高,梗死率降低。结论 本方法构成局灶性缺血再灌注模型,操作简单,重复性好,大鼠体重和年龄、麻醉剂应用、栓线直径和插入深度、控制出血和术后护理等是模型制作成功的关键因素。FMC可能通过降低脑组织水含量、MDA水平,升高SOD水平,减少梗死体积,对缺血再灌注损伤的脑组织起到一定的保护作用。     

丁基苯酞对大鼠局灶缺血脑组织VEGF及bFGF表达的影响

目的研究丁基苯酞(NBP)对大鼠缺血脑组织中血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维生长因子(bFGF)表达的影响。方法健康雄性SD大鼠,用大鼠大脑中动脉线栓法(MCAO)建立永久缺血模型。实验分为假手术组、模型对照组和NBP组,每组各20只大鼠。NBP组术后予以NBP灌胃,每天2次,每次25mg/kg;假手术组、模型对照组每天灌胃相应剂量食用植物油。局灶性缺血72h后行神经功能评分(Longa评分),然后断头取脑。TTC染色观察脑梗死体积,免疫组织化学(SP)方法观察梗死周围区、海马区和梗死核心区脑组织VEGF和bFGF蛋白的表达,原位杂交方法(POD法)检测VEGF mRNA和bFGF mRNA的表达。结果NBP组神经功能缺损评分低于模型对照组(P<0.05),NBP组在梗死周围区和海马区VEGF和bFGF蛋白,VEGF mRNA和bFGFmRNA表达均高于模型对照组和假手术组(P<0.05),在梗死核心区差异均无统计学意义(P>0.05)。结论NBP明显改善缺血后大鼠的神经功能,上调大鼠梗死周围区和海马区脑组织VEGF、bFGF蛋白和mRNA的表达,可能通过此机制治疗保护缺血脑组织。     

黄芪桂枝五物汤改善大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤: 药理和代谢组学证据

  目的  研究黄芪桂枝五物汤对脑缺血损伤的神经保护作用,并探讨其可能作用机制。  方法  将50只大鼠随机分为假手术组, 模型组及黄芪桂枝五物汤低、中、高剂量组(5、10、20 g·kg-1),每组10只。除假手术组外,大鼠采用线栓法建立大脑中动脉闭塞(MCAO)模型。中药组大鼠灌胃给予复方水煎液,假手术组和模型组大鼠灌胃给予等量的生理盐水。连续灌胃7 d后,处死大鼠。通过神经功能缺损评分、脑梗死面积、脂质过氧化和炎症细胞因子水平检测来评估各组大鼠脑缺血性损伤程度。同时通过代谢组学研究黄芪桂枝五物汤对脑缺血再灌注损伤的可能机制。  结果  黄芪桂枝五物汤可显著降低神经功能缺损评分和脑梗死面积,减少脂质过氧化和炎症细胞因子水平,表明其可有效减轻MCAO诱导的大鼠脑缺血性损伤。进一步的代谢组学研究表明,脑缺血再灌注损伤后血清代谢紊乱,共筛选和鉴定出23种与缺血性中风相关的代谢物发生显著性变化,是脑缺血潜在的生物标志物。代谢通路分析显示,MCAO主要通过靶向乙醛酸和二羧酸代谢,以及苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸的生物合成来诱导脑缺血性损伤。黄芪桂枝五物汤干预后,大部分代谢标记物发生了逆转, 主要包括吲哚氧基硫酸、柠檬酸、3-羟基十二酸、3-甲基-2-丁烯酸、苹果酸、丁醛和尿酸等。  结论  黄芪桂枝五物汤可有效改善大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤, 其发挥神经保护作用的机制可能与抑制炎症、改善多种代谢途径有关。      

Buyang Huanwu Decoction (补阳还五汤) Reduces Infarct Volume and Enhances Estradiol and Estradiol Receptor Concentration in Ovariectomized Rats after Middle Cerebral Artery Occlusion

Objective：To investigate the effect of Buyang Huanwu Decoction（补阳还五汤,BYHWD） on estradiol（E2） and estradiol receptor（ER） in serum and brain in ovariectomized rats after middle cerebral artery occlusion（MCAO）.Methods：Adult female rats were ovariectomized and focal cerebral ischemic was induced by MCAO.Rats were randomly divided into normal,ovariectomy（OVX）,MCAO,OVX＋MCAO,OVX＋MCAO＋E2,and OVX＋MCAO＋BYHWD group.Rats were administered BYHWD 5 g/kg daily,estradiol valerate 500 μg/kg per day or distilled water for 7 consecutive days.Neuronal function and infarct volume were measured on day 7 after artery occlusion,and E2 and ER concentration in serum and brain were checked by enzyme-linked immunosorbent assay.Results：BYHWD significantly improved the neurological behavior,reduced the infarction volume,increased E2concentration in serum and brain,and increased ER concentration in the brain in ovariectomized rats after MCAO.Conclusion：The neuroprotective effects of BYHWD are associated with estrogen and its receptor.     

脑缺血再灌注后大鼠氧化水平和神经功能损伤及异丙酚的影响

目的 观测大鼠脑缺血再灌注后神经损伤及血清氧化水平的变化及异丙酚的影响.方法 采用大脑中动脉线栓法制备大鼠脑缺血再灌注模型,88只大鼠随机分为假手术组(n=8)、缺血再灌注模型组(n=40)和异丙酚(100mg/kg)干预组(n=40).分别于再灌注6、24h,2、4、7d对大鼠进行神经功能损伤评分,并行梗死灶的观察及分光光度法对血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的检测.结果 与模型组比较,异丙酚干预组大鼠缺血再灌注后的神经功能损伤评分低,24h、2 d差异有统计学意义(P<0.05);梗死灶面积减小,MDA降低,SOD的活性升高(P<0.05).结论 异丙酚能明显提高SOD的活性,减少MDA的积聚,缩小脑梗死体积,改善脑缺血再灌注损伤后神经损伤.     

灯盏细辛对急性期大鼠脑缺血再灌注后细胞凋亡影响作用的研究

目的研究灯盏细辛对急性期大鼠脑缺血再灌注后细胞凋亡的影响作用。方法将健康SD大鼠65只分成3组,分别为正常组（5只）、脑缺血再灌注模型组（20只）、灯盏细辛治疗组（20只）。除正常组外,模型组和治疗组设2个时间点,即3 d与7 d,每个时间点10只。利用采用改良的Zealonga法建立大鼠大脑中动脉局灶缺血,即再灌注梗死（MCAO）模型,分别于脑缺血再灌注3 d和7 d进行神经病学评分和脑组织含水量测定,用苏木精-伊红（HE）进行形态学观察,用TUNEL法检测脑组织凋亡细胞的变化。结果再灌注3 d和7 d神经病学评分和脑组织含水量测定,治疗组Bederson评分均高于模型组（P〈0.05）;治疗组大鼠脑组织含水量与模型组比较均减小（P〈0.05）。结论灯盏细辛对急性期大鼠脑出血再灌注后细胞凋亡有明显的抑制作用,对促进受损脑组织的恢复作用明显。     

大鼠局灶性脑缺血后神经功能评分与脑梗死体积相关性分析

目的探讨大鼠大脑中动脉阻塞模型(middle cerebral artery occlusion,MCAO)的神经功能评分与脑梗死体积的相关性。方法 20只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠按随机数字表法分为5组,采用线栓法制作短暂性MCAO模型,于缺血再灌注后24 h、3 d、7 d、14 d、30 d进行三种神经功能评分(Longa 5分法、前肢踩空实验、Ludmila Belayev 12评分法),取脑组织后行HE染色。计算各组大鼠脑梗死体积相对百分比,采用方差分析及相关性分析统计结果。结果缺血再灌注后24 h到30 d,三种神经功能评分均有降低,7 d组与30 d组的前肢踩空实验和Ludmila Belayev 12评分法的评分结果相比较,差异有统计学意义(P<0.05)。脑梗死体积随着时间延长有所降低,但各组之间差异无统计学意义。三种神经功能评分中,缺血再灌注3 d组及30 d组,Ludmila Belayev 12分法评分的结果与脑梗死体积呈显著相关(P<0.05),其余时间点与三种神经功能缺失评分均无显著相关性。结论在线栓法制作的SD大鼠短暂性MCAO模型中,Ludmila Belayev 12评分法与缺血再灌注后第3 d、30 d的梗死体积有显著相关性,该评分法可用于评估这两个时间点的大鼠脑梗死损伤程度。     

EFFECT OF DL-3-N-BUTYLPHTHALIDE ON BRAIN EDEMA IN RATS SUBJECTED TO FOCAL CEREBRAL ISCHEMIA

The present study evaluated the effect of dl-3-n-butylphthalide(NBP) ,a novel brain protective agent, on brain edema in rats following focal ischemia. Edema was induced by occluding the right middle cerebral artery (MCAO).producing permanent focal ischemia in the right cerebral hemisphere,which developed ip-silateral brain edema reproducibly. Edema was assessed 24 h after MCA occlusion by determining the brain water content from wet and dry weight measurements,and the sodium,potassium concentrations with ion-selective electrodes. In this model,NBP at the dose of 80,160 and 240 mg/kg po 15 min after MCAO prevented from brain edema in a dose-dependent manner. A significant reduction of sodium content and an increase in potassium level were observed in all drug-treated groups. It showed that NBP strongly attenuated brain water entry,sodium accumulation and potassium loss. Nimodipine treatment(5mg/kg sc) also reduced brain edema (P<0. 05). The results suggest that a strong anti-edema activity of NBP may pla