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相似文献
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1.
R质粒的紫外线消除试验改进和体会   总被引:4,自引:0,他引:4  
质粒是细菌内染色体外具有遗传功能的环状双链DNA,在革兰阴性杆菌质粒中含有一种耐药性质粒叫做R质粒[1]。质粒虽然可自宿主细胞内自发消除,但很缓慢,其消除频率为 10-2~10-8,而利用理化因素处理,其消除频率可增加 100~100 000倍[2]。本试验对细菌带有耐氯霉素(CM)质粒进行紫外线消除做些改进和探索。1材料和方法1.1菌种处理耐氯霉素(CM)D15痢疾杆菌,经接合传递给大肠杆菌(从而获得耐CM大肠杆菌)。1.2细菌悬液的制备取培养6h密布涂菌的耐CM大肠杆菌的平板2只,每只加无菌生…  相似文献   

2.
Gao MY  Chen R  Liu SG  Feng JN 《中华医学杂志》2004,84(15):1294-1298
目的 研究外源性指导序列(EGS)体外逆转临床分离大肠杆菌氯霉素抗性的能力。方法 构建针对氯霉素(Cm)乙酰转移酶(cat)并含卡那霉素(Km)抗性基因筛选指标的:EGS重组质粒以及只含Km抗性基因但不含EGS的对照质粒。采用CaCl2方法将重组质粒导入临床分离的耐Cm大肠杆菌株中。通过质粒抽提、菌落PCR鉴定EGS阳性克隆子,分光光度计A600检测导入EGS质粒后耐Cm菌株在液体培养基中的生长率以及KB法检测在固体培养基中的药物敏感试验,探讨EGS分子逆转耐药菌的逆转效应。结果 以pEGFP-CI-EGS cat1 cat2重组质粒对16株临床分离的Cma大肠杆菌供试菌进行转化试验,EGS转化子在含Km的培养基上筛选。其中4株转化菌在Cm100~200μg/ml的液体培养基中生长受抑;在Cm 100~200μg/ml的固体培养基中药敏试验对Cm敏感;转化菌质粒抽提检测出特异EGS条带;菌落PCR扩增鉴定存在EGS。表明16株供试菌中4株临床分离株获得了耐药菌型的表型转换、耐Cm的大肠杆菌临床分离株恢复了对Cm的敏感性。结论 EGS分子具有逆转临床耐药菌为敏感菌的能力。  相似文献   

3.
罗布麻对耐药性菌株R质粒的作用   总被引:2,自引:0,他引:2  
①目的了解罗布麻对耐药性菌株R质粒的作用。②方法获取活化多重耐药痢疾杆菌D15菌株的R质粒,加入罗布麻浸液中,再与受体大肠杆菌1485相互作用,观察细菌生长情况,并设空白对照实验。③结果罗布麻浸液加入后,受体大肠杆菌1485在含有抗生素平皿上不生长。不加罗布麻浸液的受体大肠杆菌1485在含有抗生素平皿上生长。④结论罗布麻浸液对R质粒有一定的消除和抑制作用。  相似文献   

4.
千里光对大肠埃希菌R质粒消除作用的血清药理学研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的 应用中药血清药理学方法,研究千里光对大肠埃希菌R质粒的消除作用.方法 以千里光水浸液灌胃小鼠获得的含药血清作为消除剂,以临床分离的多重耐药大肠埃希菌作为靶细菌,进行体外R质粒消除试验,同时设千里光水浸液、十二烷基硫酸钠(SDS)和空白对照组.结果 含千里光血清体外作用大肠埃希菌48h后,R质粒的消除率为2.8%,而千里光水浸液、SDS和空白对照的消除率分别为2.2%,14.9%,0.1%.结论 中药千里光对大肠埃希菌R质粒具有消除作用,且含药血清消除作用强于水浸液.  相似文献   

5.
孟祥红  杨彩娥  王迪  董梅 《中国医药导刊》2017,19(12):1392-1394
目的:在体外培养条件下,研究表观遗传相关的组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸钠(VPA)对依赖利福平(R)结核分支杆菌菌株生长的影响。方法:采用匡氏琼脂培养基及技术,分别观察临床分离R依赖株和R耐药株在含R和VPA的培养基中生长情况,探究VPA对结核菌利福平依赖性的影响。结果:利福平依赖株在含R+VPA的培养基上生长较在仅含R培养基上生长落数和旺盛程度均下降;而利福平耐药株在含R+VPA的培养基上生长与在仅含R培养基上生长落数和旺盛程度比较,未见明显差别。结论:VPA在体外可显著抑制结核分支杆菌对利福平的依赖性。  相似文献   

6.
目的:研究伤寒杆菌耐药质粒pRST98与细胞外膜泡(OMV)形成的关系。方法:将(1)携带pRST98的野生型耐药性伤寒杆菌--ST1及ST2;(2)不含pRST98的野生型敏感伤寒杆菌--ST3及ST4;(3)不含质粒的大肠杆菌--E.coliK12W1485;(4)用十二烷基硫酸钠消除pRST8的突变体菌株--ST1(R^-)及ST2(R^-);和(5)经接合转移将pRST98导入敏感型伤寒杆菌及大肠杆菌的接合子--pRST98/ST3、pRST98/ST4及pRST98的耐药伤寒杆菌消除pRST98前后,不含pRST98的的敏感伤寒杆菌和大鼠肝菌在导入该质粒前后,细菌形成OMV的数量和形态均无明显变化。结论:伤寒杆菌耐药质粒pRST98在体外与细菌外膜泡的形成未发现有明显关系。  相似文献   

7.
本实验应用中药苍术作为耐药性(R)质粒消除剂,以痢疾杆菌F_13株为靶细菌进行R质粒的体外消除试验。其消除率对耐TC+SM+AP和耐SM分别为0.8%和46%;对照组的EB消除率为0.8%,SDS消除率为0.6%。对照组的消除子均表现为对单一耐药性的丢失。  相似文献   

8.
目的:克隆烟曲霉sho1基因,并构建烟曲霉sho1基因突变株,了解该基因在烟曲霉应对环境变化中的作用。方法:通过基因同源性比对,在烟曲霉基因组中找出与酿酒酵母sho1基因同源的基因,PCR扩增烟曲霉sho1基因及其上、下游各约1.0kb的DNA片段,并将其重组到质粒pDHt/SK2中,再利用pyrG作为筛选标记构建重组质粒。将重组质粒转化烟曲霉AF293.1得到烟曲霉△sho1。观察烟曲霉△sho1和烟曲霉AF293(野生株,wt)在MM、CM、BHI这3种培养基上的生长速度,测定烟曲霉△sho1在含有氯化钠、丙三醇这两种渗透压物质培养基上的生长情况,并比较烟曲霉△sho1和wt对常用抗真菌药物的敏感性。结果:烟曲霉△sho1在CM、MM、BHI这3种培养基上的生长速度均慢于wt;△sho1在含渗透压物质小于1mol/L的培养基上菌落直径没有明显变化,在含渗透压物质大于1mol/L的培养基上菌落直径明显变小;烟曲霉△sho1和wt对抗真菌药物的敏感性没有差异。结论:sho1基因影响烟曲霉的生长速度,与培养基类型没有明显关系。烟曲霉sho1基因介导渗透压传导。sho1基因对烟曲霉的抗真菌药物敏感性没有影响。  相似文献   

9.
目的:在实验条件下观测部分中草药在单味和复方组合下,对结核分枝菌的抗菌活性.方法:采用琼脂绝对浓度法,加入不同浓度的单味或复方中草药,接种结核分枝杆菌(HV37株),在37℃下培养一个月.结果:大蒜液1:10;百部液1:5;夏枯草液1:5有抑制结核茵生长作用;而大蒜百部混合液1:20;夏枯草大蒜混合液1:20;夏枯草百部混合液1:10;大蒜夏枯草百部混合液1:40均有抑制结核分枝杆菌生长的作用.结论:三种中草药在实验条件下均有抗结核分枝茵的作用,联合药效比单药的作用强.  相似文献   

10.
目的:构建白念珠菌钙调蛋白基因(CMD1)缺陷HS3酵母菌体,为进一步探讨钙调蛋白基因突变对真菌生长周期及致病性的影响奠定基础。方法:首先将含cmd1::TRP1置换序列的质粒I转化二倍体酵母菌株YPH501(his3trplural),经Soutthern印迹法筛选出含TRP1序列的菌株。其次,将含CMD1序列的质粒Ⅱ转化以上TRP1阳性菌株,进行减数分裂后选择得到TRP1阳性酵母菌株单倍体。最后,将含trp1:HIS3置换序列质粒Ⅲ转化上述TRP1阳性单倍体菌株,用不含His培养基培养得到钙调蛋白基因缺陷HIS3酵母菌株。结果:经Southern印迹法证实cmd1:TRP1基因置换克隆;减数分裂后选择得到了TRP1阳性酵母菌株单倍体;质粒Ⅲ转化单倍体后经不含His培养基培养得到CMD1缺陷HIS3菌株,接种于不含Trp倍养基上未见有菌落生长,说明质粒Ⅲ转化单倍体后已将his3TRP1转换成HIS3trp1。结论:成功构建了钙调蛋白基因缺陷HIS3酵母菌株,基因型为cmd1trp1HIS3。  相似文献   

11.
目的:探讨不同品种芦荟的蒽甙的抑菌作用研究.方法:选取新鲜的皂质芦荟、木立芦荟、龙山芦荟、中华芦荟和库拉索芦荟叶各10条作为研究对象.测定并比较不同品种芦荟叶皮和叶肉中蒽醌的含量的差异;测定不同品种芦荟叶皮中的蒽醌对大肠杆菌、金色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌的抑菌效果的差异;测定芦荟蒽醌对各受试菌的最小抑菌浓度.结果:不同品种的芦荟叶皮中的蒽醌含量均高于叶肉中的含量,且差异均具有统计学意义;皂质芦荟、木立芦荟、龙山芦荟叶皮中的蒽醌含量高于中华芦荟和库拉索芦荟,且差异具有统计学意义;不同芦荟品种中的蒽醌对大肠杆菌、金色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌都有一定的抑菌效果,其中皂质芦荟中的蒽醌对大肠杆菌、金色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的抑菌效果均比较理想,抑菌环直径均超过了7mm;中华芦荟和库拉索芦荟中的蒽醌对各受试菌的抑菌效果相对较差,抑菌环直径均未超过5mm.芦荟中蒽醌溶液在较低浓度下对个受试菌均有不同程度的抑菌能力,其中对大肠杆菌和金色葡萄球菌的最小抑菌浓度均为0.125mg/mL,对枯草芽孢杆菌的最小抑菌浓度为0.063mg/mL,对铜绿假单胞菌的最小抑菌浓度为0.25mg/mL.结论:不同品种的芦荟叶皮中的蒽醌含量均高于叶肉中的含量,皂质芦荟中的蒽醌对各受试菌的抑菌效果比较理想,芦荟蒽醌对枯草芽孢杆菌的抑菌效果最敏感.  相似文献   

12.
目的:观察仙鹤草-马齿苋药对提取物对福氏志贺菌2a、福氏志贺菌4、宋内志贺菌、大肠埃希菌、痢疾志贺菌等致病菌株的联合抗菌作用。方法:采用棋盘试验法测定药对的不同浓度、不同溶媒提取物对各菌株的最低抑菌浓度,计算部分抑菌浓度(fractional inhibitory concentration,FIC)指数并判定联合效应,评价仙鹤草-马齿苋的联合抗菌作用。结果:仙鹤草-马齿苋药对水提液联合应用对福氏志贺菌2a、福氏志贺菌4、宋内志贺菌、大肠埃希菌、痢疾志贺菌的FIC指数分别为:0.675、0.486、0.236、0.115、0.236;醇提液联合应用时的FIC指数分别为:0.245、0.200、0.250、0.571、0.300。结论:仙鹤草-马齿苋药对提取液对福氏志贺菌4、宋内志贺菌、痢疾志贺菌菌株均表现为协同作用;其中水提液对福氏志贺菌2 a表现为相加作用,对大肠埃希菌表现为协同作用,而醇提液只对大肠埃希菌表现为相加作用;药对之间配伍均无拮抗作用。  相似文献   

13.
目的研究芒果核提取物动物体内外抑菌效果及其使用的安全性。方法采用二倍稀释法及琼脂扩散法,观察芒果核提取物对常见肠道感染致病菌(标准和耐药)志贺痢疾杆菌、福氏痢疾杆菌、大肠埃希菌的体外抑菌作用;采用小鼠复制感染模型观察芒果核提取物动物体内抑菌效果;用小鼠空腹经口灌胃给予芒果核提取物做急性毒性试验。结果芒果核提取物对标准和耐药志贺痢疾杆菌、福氏痢疾杆菌、大肠埃希菌有不同程度体外抑菌作用,其最低抑菌浓度(MIC)分别为7.8、7.8、7.8、15.6、15.6mg/ml和15.6mg/ml,抑菌圈直径分别为20、18、21、19、17、18mm;动物体内大、中、小剂量对(标准及耐药组)福氏痢疾杆菌及志贺痢疾杆菌感染小鼠有明显抑菌作用;小鼠灌胃最大耐受量40g/kg,相当临床用量的50倍。结论芒果核提取物对常见3种肠道感染菌具有较明显的体内外抑菌作用及具有良好的安全性。  相似文献   

14.
鲜芦荟配合硫酸镁混合液外敷治疗静脉炎的临床研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的 探讨鲜芦荟配合硫酸镁混合液外敷治疗对静脉炎的价值.方法 对96例运用鲜芦荟配合硫酸镁混合液和87例单纯运用50%硫酸镁溶液湿敷治疗不同程度静脉炎患者进行临床研究.结果 鲜芦荟配合硫酸镁混合液外敷治疗静脉炎的治愈率58.33%,总显效率88.54%,总有效率100%,单纯使用50%硫酸液外敷治疗静脉炎的治愈率25.29%,总显效率59.77%,总有效率95.40%,芦荟配合硫酸镁混合液治疗组治愈率、总显效率以及总有效率均显著高于单纯50%硫酸镁溶液治疗组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 鲜芦荟配合硫酸镁混合液外敷治疗静脉炎能显著提高药物引起的静脉炎的治疗效果.  相似文献   

15.
The punched-hole and the paper disc diffusion methods were used in screening for the antimicrobial activity of six common ingredients used locally in cough mixtures, against the following bacteria: Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus. Enterococcus faecalis, Escherichia coli, Salmonella spp, Salmonella paratyphi, Shigella dysenteria, Shigella sonnei and Candida albicans. The results, evaluated as the diameter of zone of inhibition of microbial growth, showed that lime, garlic onion, onion and honey were active against Staphylococcus aureus, Streptococcus faecalis, Candida albicans, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, Salmonella spp and Shigella dysenteriae. Bitter-kola nut extract and palm kernel oil showed no antimicrobial activities against any of the tested organisms. None of the extracts inhibited the growth of Salmonella paratyphi and Shigella sonnei and the most susceptible organisms were Escherichia coli and Salmonella spp.  相似文献   

16.
目的分析志贺菌属整合子对耐药性的贡献及其稳定性。方法对志贺菌属1类、2类整合子的耐药基因盒分别克隆、转化DH5α,观察阳性克隆菌对多种抗生素敏感性的变化。将整合子阳性克隆菌与多重耐药志贺菌进行质粒接合实验,并测定耐药性的改变。对10株耐药谱不同、携带整合子不同的志贺菌属细菌进行无抗生素压力下连续多次传代实验,检测其耐药性及整合子的变化。结果志贺菌属1类整合子耐药基因盒dfrA17-aadA5阳性克隆菌对链霉素和甲氧苄啶的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)分别提高了8倍和32倍;2类整合子耐药基因盒dfrA1-sat1-aadA1阳性克隆菌对链霉素和甲氧苄啶的MIC分别提高了64倍和32倍;整合子阳性克隆菌经质粒接合传递后对抗生素的MIC无改变。1株携带2类整合子的志贺菌属菌株经过多次传代培养后丢失整合子及其耐药性。结论志贺菌属整合子-耐药基因盒系统可引起特定抗生素的耐药性,对质粒接合传递耐药性无影响。志贺菌属的2类整合子可发生丢失。  相似文献   

17.
重庆市区(1997~1998)痢疾流行菌株的分子流行病学研究   总被引:5,自引:0,他引:5  
目的:了解近半年来重庆市区志贺菌的流行菌型。方法:对近两年收集的349株志贺菌进行血清学分型,质粒图谱分析和药敏试验。结果:334株细菌的质粒图谱显示;98.8%的菌株含有质粒,其中279株福氏志贺菌共有8种质粒,分为12种闰图谱模式。所有菌株对常用抗生素均为三重及三重以上耍药,且显示神速氏志加菌的多重耐药较宋内志 力更为严重。结论:福氏志贺菌和宋内志贺菌是本地区当前流行的两大菌群,福氏2a血清型  相似文献   

18.
目的了掌握深圳市食品、公共场所从业人员志贺菌血清型分布和耐药情况。方法按国标肠道致病菌中志贺菌的检验方法和国家卫生行业标准WS/T 125-1999纸片法抗菌药物敏感试验标准方法进行。结果33株志贺菌分型,B群32株占总数的96.97%,C群1株占3.03%。在B群中,2型12株占36.36%,4型10株占30.30%,1型4株占12.12%,X变种5株占15.15%,Y变种1株。33株菌对庆大霉素、左旋氧氟沙星、氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、头孢噻腭、头孢唑啉、头孢美唑、痢特灵为100%敏感,对麦迪霉素100%耐药。结论深圳市食品、公共场所从业人员中志贺菌型分布有所改变;治疗菌痢应首选药物为痢特灵,环丙沙星,氧氟沙星等。  相似文献   

19.
目的比较两种运送培养基以及无菌棉拭子三种标本运送系统维持细菌活性的能力。方法选用金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、福氏志贺菌、白色念珠菌、化脓链球菌、肺炎链球菌、卡他布兰汉菌、流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌,在0h、1h、4h、8h、12h、24h分别检测它们在三种运送系统上存活的情况,每个时相点重复检测10次。结果金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、福氏志贺菌、白色念珠菌24h内在三种运送系统上存活,且菌量无明显变化。但对苛养菌包括化脓链球菌、肺炎链球菌、卡他布兰汉菌、流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌在两种运送培养基上的存活时间和菌量不同程度优于无菌棉拭子。结论运送培养基运送临床微生物标本效果好于无菌棉拭子,特别是对苛养菌的细菌培养意义重大。  相似文献   

20.
王芳  何湘  赵江丽  姜铮  袁静  黄留玉 《中国热带医学》2011,11(8):911-912,915
目的构建痢疾杆菌GST-IpaH4.5融合蛋白表达质粒,并在大肠杆菌(E.coli)中诱导表达。方法以痢疾杆菌福氏2a 301株全基因组为模板,PCR扩增痢疾杆菌ipaH4.5基因,在ipaH4.5的上游加上BamHⅠ酶切位点,下游加上XholⅠ酶切位点,将ipaH4.5基因定向插入质粒pGEX-4T-1中,构建原核表达质粒pGEX-IpaH4.5并转化E.coliDH5α,筛选阳性重组子,限制性内切酶切鉴定和DNA序列测定,DNA序列正确后提取质粒转化E.coli BL21,筛选阳性转化子,异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定表达结果。结果成功构建IpaH4.5原核表达质粒pGEX-IpaH4.5并表达出大小约86 000Mr的GST-IpaH4.5融合蛋白。结论 GST-IpaH4.5融合表达载体的构建,为进一步纯化IpaH4.5蛋白和研究其在痢疾杆菌致病机制中的作用奠定了基础。  相似文献   

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