急性髓系白血病AML1/ETO融合基因检测及其临床意义

目的 了解急性髓系白血病中AML1／ETO融合基因表达情况及相关临床意义。方法 应用RT-PCR技术检测159例初发未治急性髓系白血病患者骨髓单个核细胞（MNC）AML1／ETO融合基因及R显带技术检测染色体,并对部分病人进行追踪检测及随访。结果 159例未经选择的初发急性髓系白血病病人中,31例（19．5％）有t（8;21）（q22;q22）易位,36例（22．6％）表达AML1／ETO融合基因,所有t（8;21）阳性的病人均存在AML1／ETO融合基因。AML1／ETO融合基因阳性病人缓解率为80．6％（29／36）,高于阴性病人（M,除外）的60．2％（56／93）;AML1／ETO阳性病人经治疗后转阴并持续阴性者预后好,而持续阳性者预后差,由阴性转阳性者可预示复发。14例持续缓解超过18个月的病人AML1／ETO融合基因仅1例为阳性。结论 （1）RT—PCR法检测AML1／ETO mRNA敏感、快速,定期检测可监测微小残留病变。（2）单次PCR法扩增AMLl／ETO融合基因优于巢式PCR法。     

CD56和CD64高表达对成人AML1/ETO+白血病患者长期生存的影响

目的 探讨CD56和CD64对成人AML1/ETO+急性髓系白血病患者长期生存的影响.方法 回顾性分析35例成人AML1/ETO+急性髓系白血病患者的临床资料,应用Log-Rank检验和Cox回归模型对患者的性别、年龄、初诊时白细胞计数、免疫表型、首疗程是否完全缓解、c-kit基因突变、复杂核型、髓外白血病进行单因素和多因素综合分析.结果 35例患者随访3~87个月,中位随访时间33个月,单因素分析显示年龄、性别、髓外白血病、复杂核型、首疗程是否完全缓解、CD19、CD9对患者3年和5年总体生存率无显著影响(P>0.05),初诊时白细胞计数、CD56+、CD64+的表达对AML1/ETO+的长期生存具有显著性差异(P=0.045,P=0.044,P=0.045).多因素分析显示,CD56表达是影响AML1/ETO+急性髓系白血病患者长期生存重要的独立预后因素.其中CD56+CD64+显著影响患者长期生存(P=0.012).结论 CD56是AML1/ETO+急性髓系白血病患者独立的预后不良因素,且CD56+、CD64+双表达预后最差.     

AML1/ETO+融合基因阳性的AML患者骨髓细胞形态学分析

目的 探讨AML1/ETO[t(8;21)(q22;q22)]融合基因阳性的急性髓细胞白血病(AML)的骨髓细胞形态学特点.方法 对66例AML(M1,M2a,M2b,M5,MDS-RAEB-Ⅱ) 骨髓片用瑞氏染液染色后,按照国内AML 分型标准进行观察分析;进行荧光原位杂交技术(FISH)检测AML1/ETO 融合基因.结果 M2a 52例, M2b 8例, M5 2例, M1 2例,MDS-RAEB-Ⅱ 2例,AML1/ETO融合基因阳性为34.84%,其中(14/52)26.9%,(8/8)100%,(0/2)0%,(0/2)0%,(1/2)50%.回顾分析AML1/ETO阳性病例骨髓涂片,都检测到多少不一的异形中幼粒细胞.AML1/ETO阳性病例在治疗过程中首次化疗完全缓解(CR)率为78.4%(9例M2a、8例M2b及1例RAEB-Ⅱ),4例M2a 2次化疗后达到CR,1例M2a 5次化疗仍为NR.结论 AML-M2b都有AML1/ETO融合基因改变,AML1/ETO融合基因阳性AML在骨髓涂片中能检测到异形中幼粒细胞.     

GATA-2基因高表达在AML1/ETO阳性急性髓系白血病中的临床意义

目的 探讨GATA-2基因在AML1/ETO融合基因阳性急性髓系白血病M2（acute myeloid leukemia with maturation,AML/M2）患者中的表达状况。方法 利用实时荧光定量PCR（RQ-PCR）法对23例AML1/ETO阳性AML-M2患者初诊骨髓标本中GATA-2基因的表达情况进行定量检测,并分析不同表达水平患者实验室检查及临床预后的差异。结果 患者GATA-2基因表达水平（GATA-2基因拷贝数/内参基因拷贝数）初诊时为2.17%~1 260.65%。将GATA-2基因表达水平≥82％者归为高表达组（10例）,表达水平＜82％者归为低表达组（13例）。高表达组与低表达组患者年龄、性别、初始白细胞计数、骨髓原始细胞比例以及化疗完全缓解（CR）率的差异均无统计学意义（P>0.05）,但复发率（71.43％ vs. 15.38％）及死亡率（70.00％ vs. 7.69％）的差异有统计学意义（P均＜0.05）,高表达组的无病生存（DFS）率及总生存（OS）率亦低于低表达组（P<0.01）。在高表达组中,选择移植（2/10）者均无复发存活,选择单纯化疗（8/10）的患者7例死亡。结论 AML1/ETO阳性AML-M2患者合并GATA-2基因高表达提示患者易复发且预后不良,此类患者应尽早采取常规化疗以外的其他有效治疗措施。     

急性髓系白血病患者BAALC的表达及其临床意义

目的:检测急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者BAALC(brain and acute leukemia,cytoplasmic)基因的表达并探讨其临床意义。方法:收集93例初诊AML患者(研究组)和36例非恶性血液病患者(对照组)骨髓,应用实时定量PCR(real-time quantitative PCR,RQ-PCR)法检测骨髓单个核细胞中BAALC转录本水平。采用ROC曲线根据其表达水平对AML患者再次分组并比较组间临床参数的异同,分析其临床意义。结果:AML患者BAALC表达水平明显高于对照组(P<0.001)。AML患者的BAALC表达水平根据临界值2.107(ROC曲线敏感度51%、特异性100%)分为高表达组和低表达组。两组患者的性别、年龄、外周血白细胞计数、血小板计数、血红蛋白含量和基因突变差异无统计学意义(P>0.05),但FAB分型、WHO分型、不同核型以及染色体危险程度分型差异有统计学意义(P<0.05),BAALC高表达组原始细胞计数明显高于低表达组(P<0.001)。BAALC高表达组治疗后完全缓解率低于BAALC低表达组(P=0.087);BAALC高表达组患者总体生存时间明显低于BAALC低表达组(P=0.031),正常核型AML患者中BAALC高表达组总体生存时间也明显低于低表达组(P=0.043)。结论:BAALC高表达是AML患者预后不良的影响因素,可作为AML辅助诊断的参考标志。     

VNN1基因在急性髓系白血病中的表达及临床意义

目的 通过在线数据库挖掘分析VNN1基因在急性髓性白血病(acute myeloid leukemia, AML)中的表达并探讨其临床意义。方法 使用癌症基因图谱(the cancer genome atlas, TCGA)、组织特异性基因表达库(the genotype-tissue expression, GTEx)和高通量基因表达数据集(gene expression omnibus, GEO)等数据库分析VNN1基因在AML患者和正常对照组中的表达水平;通过下载TCGA、GEO数据集中AML患者的数据信息,进行VNN1基因表达水平与临床特征及总体生存期的相关性分析;利用STRING数据库分析VNN1蛋白-蛋白互作网络,并进行GO基因富集和KEGG通路富集分析,通过单样本基因集富集分析(ssGSEA)来评估VNN1与免疫细胞浸润之间的相关性。结果 与健康对照组(0.025±0.053)相比,VNN1在AML中显著高表达(3.306±1.991)(P<0.001),且其表达水平与AML患者细胞遗传学风险、FLT3突变状态、NPM1突变状态存在密切关系(P<0.05);R...     

急性髓细胞白血病淋系抗原表达的预后意义

急性髓细胞白血病（ＡＭＬ）是一种异质性很大的疾病，伴有淋系抗原表达的ＡＭＬ（Ｌｙ＋ＡＭＬ）是一种特殊亚型，淋系抗原在ＡＭＬ中的表达频率因检测方法、所用单抗种类等不同而存在很大差异，其预后意义各家报道也不尽一致［１］，故有必要进一步探讨。材料和方法一．病例成人初治ＡＭＬ９１例。男５４例，女３７例，年龄１６～７３岁，平均４１岁。按ＦＡＢ分型，Ｍ０１例、Ｍ１１５例、Ｍ２３８例、Ｍ３１１例、Ｍ４８例、Ｍ５１５例、Ｍ６２例、Ｍ７１例。二．免疫分型肝素抗凝骨髓，常规分离单个核细胞。采用活细胞间接免疫荧光法标…     

Evi1基因在急性髓系白血病中的表达及意义

目的　探讨急性髓系白血病 (AML)中Evi1基因的表达及意义。方法　应用半定量RT -PCR方法检测了HEL白血病细胞系 (Evi1阳性细胞株 )、94例AML(初治 49例 ,复发 2 3例 ,缓解 2 2例 )患者及 10名正常对照Evi1基因的表达。结果　① 10名正常人骨髓单个核细胞中无Evi1mRNA的表达 (阴性 ) ,HEL细胞系Evi1阳性。②AML患者Evi1基因总的阳性表达率为 18.1% (17/94) ,M5型未见表达 ,M1～M4各型的阳性率无差异 (P >0 .0 5)。AML初治、复发、完全缓解的Evi1基因阳性率分别为 2 6.5%、17.4%、4.5% ,各组间无明显差异 (P >0 0 5)。③AML初治患者中Evi1阳性表达者首次完全缓解 (CR1)后缓解持续时间短于Evi1阴性表达者 (P <0 0 1) ,早期病死率 (确诊后 3个月内死亡 )明显升高 (P <0 .0 1)。结论　Evi1基因在AML的发病中可能起一定作用 ,可作为判断AML预后不良的一个指标     

双色双融合荧光原位杂交检测成人急性白血病PML/RARα、MLL、AML1/ETO基因重排

目的探讨双色双融合荧光原位杂交技术（DC-DF-FISH）在成人急性白血病（Acute Leukemia,AL）中的应用价值。方法应用DC-DF-FISH检测我院26例AL患者相应的AML1/ETO、MLL、PML/RARa融合基因,并与常规R-显带技术进行比较。结果 26例AL患者中,R-显带发现4例存在标记染色体,检出率15.4%（4/26）,17例为正常核型和其他异常核型,未检出包含11q23染色体异常,DC-DF-FISH检测发现8例特异目的基因为阳性,包括R-显带检测出的4例,检出阳性率30.8%（8/26）。结论双色双融合荧光原位杂交技术是检测成人急性白血病PML/RARα、MLL、AML1/ETO基因重排的可靠方法,适用于AL的诊断、疗效判定及微小残留病灶的检测。     

四川地区AML1-ETO融合基因与急性髓系白血病临床特征的相关性及预后因素分析

目的 分析四川地区AML1-ETO融合基因与急性髓系白血病(acute myeloid leukemia, AML)临床特征的相关性,探讨AML-M2型患者预后影响因素。方法 选取AML1-ETO融合基因阳性AML-M2患者94例与AML1-ETO融合基因阴性AML-M2患者51例,回顾性比较分析其临床特征、治疗反应,并随访观察两组患者的预后情况。结果 与AML1-ETO融合基因阴性AML-M2患者相比,AML1-ETO融合基因阳性AML-M2患者的临床症状差异无统计学意义（P>0.05),主要以贫血、发热、出血为主;两组患者的红细胞（RBC）、血小板（PLT）、粒红比、粒系（NC）%、CD34、人类白细胞DR抗原（HLA-DR）、CD56、CD19差异有统计学意义（P<0.05),数据的中位数值除RBC、PLT偏低外,其余均偏高;两组患者疗效与生存曲线分布差异无统计学意义（P>0.05);在AML-M2患者的长期生存影响因素分析中,CD56、骨髓原粒细胞百分比是长期生存的不利因素,完全缓解因素对长期生存有利。结论 四川地区AML1-ETO融合基因阳性AML-M2人群与阴性人群相比,临床症状无特异,除部分血液、骨髓、流式实验数据有差异外,其他临床特征相似。两组患者的生存分析和预后也无明显差异,AML-M2疗效和预后影响因素多,准确评价AML1-ETO的预后诊断作用,应采用分层分析。     

FLT3基因表达在急性髓系白血病中的临床意义

目的 研究急性髓系白血病（AML）患者骨髓中FMS样酪氨酸激酶3基因（FLT3）表达水平与FLT3基因内部串联重突变（FLT3-ITD突变）、临床表现和疾病预后的相关性及意义。方法 采用荧光定量PCR法检测128例AML患者初诊时骨髓标本中FLT3基因表达水平,以FLT3基因表达量＜35%作为低表达组,≥35%作为高表达组,并探讨不同FLT3基因表达水平的FLT3-ITD突变、临床症状、实验室检查结果及疾病预后,采用多因素logistic回归分析FLT3基因高表达的影响因素,采用单因素Cox回归和生存曲线进行生存分析。 结果 剔除1例不合格的M2患者RNA样本,最终纳入127例进行分析。AML患者初诊时FLT3表达量为0.01～180.68（均值14.65）。FLT3基因表达水平在WHO的AML分型中M1最高,M6最低,但各亚型间差异不具有统计学意义。FLT3基因高表达组AML患者外周血白细胞计数（WBC）较低表达组高（P<0.01）,且高表达组患者更容易发生贫血及发热临床症状（P<0.05）,多因素logistic回归发现,FLT3基因高表达的可能相关因素为WBC〔回归系数（B）=1.508,比值比（OR）=4.518,95%可信区间（95%CI）：1.465~13.390,P=0.009〕及贫血（B=2.142,OR=8.513,95%CI：3.201~22.644,P<0.001）。 FLT3基因低表达组AML患者完全缓解率（CR）为81.82%（36/44）,高于FLT3基因高表达组38.55%（32/83）,（P<0.05）。生存曲线显示,FLT3基因高表达组患者生存时间较低表达组短（P<0.05）。Cox回归显示, FLT3基因表达高水平患者死亡风险是FLT3基因表达低水平者的3.810倍（B=1.338,相对危险度3.810,95%CI：1.820~7.947,P<0.001）。高表达组总生存率为56.63%,低表达组为70.45%,两组间差异有统计学意义（P<0.05）。结论 FLT3基因高表达可能与AML患者WBC及贫血症状有关。FLT3基因高表达是AML患者预后不良的指标。     

难治型急性髓细胞白血病P-糖蛋白表达及其临床意义

目的　探讨经典多药耐药（ＭＤＲ１） 在成人难治型急性髓细胞白血病（ＡＭＬ） 细胞表面的表达及其预后意义。方法　采用流式细胞仪间接免疫荧光技术及抗Ｐ－ 糖蛋白（Ｐｇｐ） 单克隆体ＵＩＣ２ 检测２３ 例难治型ＡＭＬ 患者Ｐｇｐ 的表达。结果　６５ ．２％ 的患者Ｐｇｐ 阳性（Ｐｇｐ＋） ,Ｐｇｐ＋ 者的缓解率为６ ．７ ％ ,显著低于Ｐｇｐ－ 患者的５０ ％ （ Ｐ＜０ ．０５）。结论　ＭＤＲ１ 高表达是成人难治型ＡＭＬ预后差的重要因素。     

CD184表达与急性髓细胞白血病预后相关因素分析

目的:探讨急性髓细胞白血病(AML)患者CD184表达与预后关系。方法:应用流式细胞术(FCM)检测了54例初治急性髓细胞白血病患者CD184表达情况,并分析CD184表达与CR1率,髓外浸润,复发率相关性。结果:CD184阳性组AML患者CR1率低,髓外浸润,复发率均较CD184阴性组增高,有统计学差异(P<0.05);CR1组患者CD184水平较非CR1组患者低,有统计学差异(P<0.05)。结论:CD184高表达与CR1率低,髓外浸润,复发等不良预后有关;CD184是急性髓细胞白血病预后预测因子。     

急性髓性白血病多药耐药基因的表达及其临床意义

目的 探讨急性髓性白血病（AML）多药耐药基因mdrl表达与临床耐药和化疗疗效的关系。方法 应用反转录－聚合酶链反应（RT－PCR）,检测30例AML患者骨髓和10名正常人外周血单个核细胞中mdrl基因的表达。结果 正常对照组均为阴性表达。AML初治组mdrl阳性率为26.32%,而复发难治组mdrl阳性率为81.82%,两组之间存在明显差异（P＜0.01)。初治组中mdrl阳性患者的首次完全缓解率（20.00%)明显低于mdrl阴性患者的首次完全缓解率（85.71%)（P＜0.01)。结论 AML的mdrl基因过度表达与临床耐药密切相关,是判断疗效及预后的一个重要指标。     

bcl-2基因在急性髓系白血病细胞中的表达及意义

采用链霉亲和素过氧化酶免疫组织化学方法 (S -P法 )检测 30例初发成人急性髓系白血病(AML)患者的骨髓细胞bcl - 2蛋白表达 .结果 :( 1)AML患者骨髓细胞中bcl - 2蛋白阳性表达率为( 55 12± 2 3 78) % ( 19%～ 93% ) ,显著高于正常对照 (P <0 0 1) . ( 2 )AML按FAB分型各亚型间比较 :bcl- 2蛋白表达在M1,M2 型阳性率较高 ( 60 58± 19 0 5) % ;M3 型则较低 ( 2 1 50± 6 2 2 ) % ;M4 ,M5型最高( 69 64± 14 96) % . ( 3)经标准诱导治疗后 ,完全缓解 (CR)组的bcl- 2蛋白表达显著低于未缓解 (NR)组 (P <0 0 5) .提示 :bcl- 2蛋白在AML细胞中呈高表达 ,并为白血病化疗耐药的预后指标之一 .     

DNA甲基转移酶DNMT1与EZH2在急性髓系白血病中的表达及相关性研究

目的探讨DNA甲基转移酶DNMT1与EZH2在急性髓系白血病(AML)中的表达及其相关性。方法采用荧光定量PCR技术检测50例AML患者骨髓细胞中DNMT1与EZH2 mRNA的表达水平,分析DNMT1表达水平与临床特征和预后的关系以及与EZH2的相关性。结果 50例AML患者骨髓细胞中DNMT1 mRNA的表达显著高于30例正常供者的(2.72±0.73vs 0.89±0.27,P<0.01);EZH2的表达水平也显著高于正常供者的(4.39±1.06,1.87±0.33,P<0.01);EZH2与DNMT1的表达水平呈显著正相关(r=0.51,P=0.002);DNMT1表达水平与外周血幼稚细胞比例≥60%(P<0.05)、WBC≥50×109/L(P<0.05)显著相关;DNMT1高表达组患者中位生存时间15个月(95%CI:9~19个月),显著低于DNMT1低表达组患者的32个月(95%CI:27~40个月)(P=0.006)。结论 DNMT1和EZH2在AML患者中均高表达,两者表达水平呈正相关,DNMT1与AML患者预后不良相关。     

HLX基因的表达与急性髓系白血病相关性

目的 研究HLX表达水平与AML的临床变量及AML不同危险度分层的相关性。方法 应用实时荧光定量PCR方法检测32例初治AML患者骨髓单个核细胞中HLX表达量,分析其与患者FAB分型、血象、骨髓原始细胞、分化程度及AML不同危险度分层关系。结果 初治AML患者HLX表达量在AML-M₃中明显降低（P<0.01）,AML-M₅中明显升高（P<0.05）;HLX表达水明与骨髓原始细胞数呈负相关（P<0.01）,与外周血血小板水平呈正相关（P<0.05）,且AML-M₃ HLX表达量与外周血白细胞水平呈正相关（P<0.05）,AML-M₅ HLX表达量与外周血白细胞水平呈负相关（P<0.05）;AML-M₅组中分化不良组HLX表达水平明显高于分化良好组,（P<0.05）,病例组及非M₃组初治AML患者中,低危组与中危组HLX表达水平差异无统计学意义（P>0.05）。结论 HLX表达水平在部分亚型（如AML-M₅）中表达升高,且在不同的FAB分型中有差异。该基因与白血病细胞的增殖、分化和成熟相关。本研究暂无证据表明HLX在不同AML危险度分层中有差异,仍需进一步实验研究。     

ATM基因在髓性白血病原代细胞中的表达及其对基因治疗的意义

目的 研究在髓性白血病原代细胞和肿瘤细胞株中共济失调毛细血管扩张症突变基因(ATM)的转录水平。以确定反义封闭ATM基因治疗在白血病中应用的可行性。方法 利用半定量RT-PCR技术。检测了正常人及31例髓性白血病患者和9种肿瘤细胞株的ATMmRNA表达量。结果 31例髓性白血病患者及9种肿瘤细胞株中ATM mRNA表达量普遍降低。结论 由于白血病患者中ATM mRNA表达量普遍降低，因此，反义封闭ATM对于白血病原代细胞基因治疗的适应性有待商榷。