自体CIK细胞治疗对卵巢癌调节性T细胞的影响

目的  观察细胞因子激活的杀伤细胞（CIK）对卵巢癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞及T细胞亚群变化的影响。方法  对30例经病理确诊为卵巢癌的患者,取其自体外周血单个核细胞,通过培养将其诱导为CIK细胞,然后将细胞进行自体回输。2周后采用流式细胞仪检测外周血CD4+CD25+调节性T细胞、T细胞亚群及NK细胞的变化。结果  CIK细胞输注后,患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞减少(P＜0.01),CD8+下降(P＜0.05),CD3+、CD4+细胞、CD4+/CD8+比值及NK细胞较治疗前显著升高。结论   卵巢癌患者经自体CIK细胞回输治疗后,外周血调节性T细胞的数量降低,T细胞亚群比例失调和功能低下的状况得到不同程度的改善。     

健康人和肿瘤患者CIK细胞的生物学特性

目的 比较健康人和肿瘤患者CIK（Cytokine—induced kiuer）细胞的体外扩增速度、细胞表型和杀伤活性,以期为临床应用中效应细胞的选择提供提供实验数据。方法健康人和肿瘤患者外周血各10例,经密度梯度离心获得单个核细胞（PBMC）,以干扰素-γ、CD3MAb、IL-2和IL-1为诱导剂制备CIK细胞,直接活细胞计数法比较两者的扩增速度。流式细胞杈检测比较两者细胞表型,MTT法比较两者对K562和LOVO细胞株的杀伤活性。结果健康人外周血CIK细胞的扩增速度、对K562和LOVO细胞株杀伤活性均显著高于肿瘤患者外周血CIK细胞,（P〈0．01）;流式细胞仪检测显示健康人外周血CIK细胞CD3^＋CD56^＋百分比显著高于肿瘤患者外周血CIK细胞,（P〈0．01）。结论健康人较肿瘤患者外周血CIK细胞体外扩增快,CD3^＋CD56^＋比例高,杀伤活性强。为临床应用CIK细胞进行过继性免疫治疗提供了实验依据。     

CIK细胞治疗对晚期恶性肿瘤患者疗效研究

目的 观察自体CIK细胞过继免疫治疗晚期恶性肿瘤患者后,生活质量及相关指标的变化.方法 从患者外周血中分离出单个核细胞,加入IFN-γ、抗CD3单抗、IL-2等细胞因子,扩增后CIK细胞分4次回输患者体内,观察患者生活质量、毒副反应及相关指标的改变.结果 38例接受CIK治疗的患者疼痛缓解、体重增加、睡眠改善等明显,毒副反应轻微,差异有统计学意义(P﹤0.05),并且有效率(CR+PR+MR )为66%,肿瘤标记物下降,患者外周血中CD3、CD4 T细胞和NK细胞比例均显著提高(P﹤0.05).结论 自体CIK细胞过继性免疫疗法能显著提高肿瘤患者生活质量,改善临床症状,提高患者免疫功能,对晚期肿瘤病人有积极意义.     

肝癌患者自体细胞因子诱导杀伤细胞治疗后免疫活性细胞的检测及其临床意义

目的　观察肝癌患者自体细胞因子诱导杀伤细胞 (CIK细胞 )回输后 ,外周血中T细胞亚群及树突状细胞亚群的变化 ,评价CIK细胞治疗肝癌的临床效果。方法　采用成份血采血机采集13例肝癌患者的外周血单个核细胞 (PBMC) ,经多种细胞因子诱导后 ,于培养的第 4、7、10、13、15天流式细胞仪检测细胞表型 ;CIK细胞回输前及回输后取病人外周血 ,流式细胞仪测定Ⅰ型树突状细胞(DC1)和Ⅱ型树突状细胞 (CD2 )的比例。结果　诱导培养后 ,CD3+ CD8+ ,CD3+ CD5 6 + ,CD2 5 + 效应细胞的比例明显升高 ,分别由最初的 33 5 %± 10 1%、7 7%± 2 8%和 12 3%± 4 5 % ,上升至 36 6 %±9 0 %、18 9%± 6 9%和 16 4 %± 5 9% ,其中CD3+ CD8+ 可维持较高水平 ,CD2 5 + 和CD3+ CD5 6 + 比例分别于培养后的第 7天和第 13天开始下降。CD3+ CD4 + 和NK细胞比例略有下降 ,但差异无显著意义。CIK细胞回输后DC1和CD2细胞亚群的比例明显升高 ,分别由回输前的 0 5 9%± 0 2 3%和0 2 6 %± 0 12 %上升至回输后的 0 85 %± 0 2 7%和 0 4 3%± 0 2 0 %。CIK细胞治疗后患者临床症状明显改善 ,无明显副作用。结论　CIK细胞治疗可以提高肝癌患者的细胞免疫功能 ,提高对肿瘤细胞的杀伤作用。     

CIK细胞治疗中晚期恶性肿瘤的临床研究

目的 探讨细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK细胞）治疗中晚期恶性肿瘤的疗效及安全性.方法 患者自体的外周血经血细胞分离机分离提取单个核细胞,经IFN-γ、CD3单抗和rhIL-2、rhIL-1共同作用,体外扩增培养CIK细胞,流式细胞仪检测其免疫表型的改变.取培养14～22 d的CIK细胞回输,观察其临床疗效及不良反应.结果 患者的外周血单个核细胞可以成功培养出CIK细胞,细胞增殖速度快,培养期内细胞存活率95％以上.CD3＋CD5C细胞比例由培养第0天的0.48％～2.81％上升至第14天的17.82％～28.68％.55例接受CIK细胞治疗患者稳定37例,进展18例,疾病控制率67.3％.治疗前后临床症状有明显的改善,T细胞亚群测定显示CD3＋CD4＋细胞数及NK细胞数较治疗前高（P＜0.05）.治疗过程中及治疗后患者无明显不良反应.结论 CIK细胞可以成为中晚期恶性肿瘤的有效治疗手段之一.     

细胞因子诱导的杀伤细胞治疗妇科恶性肿瘤的近期疗效观察

目的     观察回输体外培养的自体细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokine-induced killer cells, CIK）治疗妇科恶性肿瘤的近期临床疗效。方法    取8例妇科恶性肿瘤患者外周血,体外培养诱导出CIK细胞,将CIK细胞回输给患者,对比其回输前及回输后2个月的免疫功能、血清CA-125值、卡氏评分及临床症状变化,评价其近期临床疗效。 结果     回输后,外周血CD4+/CD8+比值增加(P<0.05), CD3-CD16+CD56+ 细胞所占百分比增加(P<0.05), CD4+CD25+细胞所占百分比降低(P<0.05);5例患者血清CA-125值下降;1例患者卡氏评分上升;5例患者自觉有临床症状缓解;无一例出现回输不良反应。结论    回输自体CIK细胞对治疗妇科恶性肿瘤有一定的近期疗效。     

微创联合自体CIK细胞治疗原发性肝癌的安全性及有效性评价

目的 观察经微创治疗(肝动脉化疗栓塞和射频消融)后联合自体细胞因子诱导杀伤(CIK)细胞治疗原发性肝癌患者回输后的不良反应、治疗前后外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞水平的变化及肿瘤的复发率、生存率,评价微创联合自体CIK细胞治疗原发性肝癌的安全性和有效性.方法 原发性肝癌患者85例(均为微创治疗术后,经影像学检查显示病灶无活性且无远处转移),随机选55例为研究组,其余30例为对照组,研究组患者进行CIK细胞治疗,对照组患者不进行CIK细胞治疗;CIK细胞治疗前及治疗结束后抽研究组患者外周血,采用流式细胞仪(FCM)测定T淋巴细胞亚群及NK细胞水平变化;研究组和对照组每2～3个月行肿瘤影像学检查,了解肿瘤变化情况.结果 自体CIK细胞回输后,部分患者(11/55)出现轻微寒战、发热等症状,持续约2～6 h,大部分可自行缓解,无其他不良反应.CIK细胞治疗后CD3 ,CD4 ,CD56 (NK)效应细胞的比例和CD4 /CD8 比值显著上升(P＜0.05);CD8 和CD3 CD56 效应细胞比例下降(P＜0.05).研究组2年的复发率为14.55%,较对照组36.67%降低(x2=5.47,P＜0.05);研究组2年的生存率为87.27%,较对照组66.67%升高(X2=5.15,P＜0.05).结论 微创联合自体CIK细胞治疗原发性肝癌安全有效,对提高肝癌患者的免疫功能,降低肿瘤的复发率和提高生存率具有重要作用.     

DC—CIK细胞联合手术治疗原发性肝癌的临床研究

目的观察手术联合DC—CIK细胞回输患者的临床疗效及3年生存率,为原发性肝癌的生物免疫治疗提供理论依据。方法采集患者外周血单个核细胞进行体外培养获取DC和CIK细胞,流式细胞仪检测;对76例原发性肝癌患者（实验组）进行手术联合自体DC—CIK细胞回输,按RECIST评价标准进行疗效评价,术后随访3年,计算生存率：按1：1配对原则收集单独行手术治疗病例为对照组。结果实验组患者治疗后生活质量、精神状态等均有提高,未见心、肝、肾等毒性反应,总体有效率达到85．5％,与对照组（40．8％）相比明显提高,差异有高度统计学意义（P〈0．01）;实验组3年生存率为9．2％,与对照组（3．9％）相比,差异有高度统计学意义（P〈0．01）。结论DC—CIK细胞回输未引起明显毒副作用,联合治疗可明显提高总体有效率及3年生存率,该联合治疗方法实际应用价值高。     

DC疫苗联合CIK细胞治疗非小细胞肺癌疗效观察

目的探讨自体肿瘤抗原负载的树突状细胞（DC）联合细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）在非小细胞肺癌治疗中的临床疗效.方法采集70例非小细胞肺癌患者外周血单个核细胞,加入细胞因子定向诱导成CIK及DC,培养的第5天用自体肿瘤抗原（Ag）负载DC,第8天将DC与CIK细胞共培养,14d后将联合培养的细胞（Ag-DC-CIK）分次回输给患者.治疗4周后,流式细胞仪检测患者外周血T细胞亚群及细胞因子水平,以评价细胞免疫功能,结合临床指标综合评价疗效,同时观察不良反应;以35例单纯的CIK细胞治疗作为对照.结果（1）培养的第14天,Ag-DC-CIK细胞的增殖达（20.6±2.16）倍,对照组仅为（12.2±2.65）倍（P〈0.05）;CD3＋CD8＋细胞及CD3＋CD56＋细胞的表达也明显高于对照组（P〈0.05）;（2）70例接受治疗的患者中CD3、CD4、CD8T细胞的百分比均较治疗前有不同程度的提高,Ag-DC-CIK组57.14%（20例）的患者CD4/CD8比例调节至正常,与对照组（42.85%,15例）相比差异有统计学意义（P〈0.05）;（3）Ag-DC-CIK治疗后51.42%（18例）的患者Thl/Th2细胞因子比例恢复正常,而对照组恢复正常者仅占37.14%（13例）（P〈0.05）;（4）Ag-DC-CIK治疗组中Ⅱ、Ⅲ期患者的有效率分别为39.30%和28.60%,与对照组的相应期别（Ⅱ期26.90%,Ⅲ期22.20%）相比差异有统计学意义（P〈0.05）;（5）治疗后的副反应包括寒颤、发热及兴奋失眠,无1例出现毛细血管渗漏综合征及实质脏器的损害.结论肿瘤抗原负载的DC细胞可增强CIK细胞在非小细胞肺癌治疗中的临床疗效,有推广运用的价值.     

外周血T淋巴细胞及NK细胞亚群试用于临床评估晚期肿瘤病人预后及化疗

目的 探讨晚期肿瘤病人细胞免疫功能的变化及其临床意义。方法 检测晚期肿瘤病人及正常成人外周血中淋巴细胞亚群、NK细胞亚群。结果 与正常人比较，晚期肿瘤病人外周血中的CD3＋T细胞降低（P〈0．05），CD4＋T细胞明显降低（P〈0．01），CD8＋T细胞升高（P〈0．05），CD4＋／CD8＋比值无明显差异（P〉0．05），NK细胞升高（P〈0．05）；临终病人CD3＋T细胞、CD4＋T细胞下降更明显（P〈0．01），NK细胞升高（P〈0．05）；其中化疗结束3周后病人较未化疗病人，其CD3＋T细胞升高（P〈0．05）、CD4＋T细胞数，CD8＋T细胞，CD4＋／CD8＋比值，NK细胞均无明显差异。结论 晚期肿瘤病人的细胞免疫功能低下，化疗能改善细胞免疫，检测患者外周血T淋巴细胞亚群NK细胞亚群表达对评估晚期病人及其化疗后的细胞免疫功能具有重要意义。     

自体CIK细胞治疗恶性肿瘤免疫表型和杀伤活性变化

目的观察自体CIK细胞治疗恶性肿瘤前后免疫袁型和杀伤活性变化。方法采用流式细胞术检测50例肿瘤患者CIK细胞治疗前、后免疫表型的变化,采用3H—TdR释放法检测杀伤活性的变化。结果CIK治疗后,CD3^＋、CD4^＋细胞百分率上升,CD8^＋细胞百分率下调,CD4^＋／CD8^＋比值上升,CD19细胞百分率下降,与治疗前比较差异有统计学意义（P〈0．05）,但CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋细胞绝对值未达到健康者水平（P〉0．05）。治疗后NK细胞百分率明显升高（P〈0．05）,达到健康者水平（P〉0．05）。在杀伤活性的研究中,与CIK细胞治疗前（19±6）％相比,治疗后杀伤活性百分率（22±5）％明显升高,达17．5％（P〈0．01）,但未达到健康者水平（P〈0．05）。结论自体CIK细胞治疗能明显提高肿瘤患者细胞免疫功能。     

原发性非小细胞肺癌患者手术前后外周血T细胞亚群和NK细胞检测的临床意义

目的探讨原发性非小细胞肺癌（NSCLC）患者手术前后外周血中T细胞亚群的定量变化及其临床意义。方法将原发性非小细胞肺癌Ⅱ～Ⅲb进行手术治疗的患者40例作为研究组（A组）,肺部良性肿瘤进行手术的患者15例作为对照组（B组）,40例正常健康成人作为基础对照组（C组）,于术前取全组外周静脉血检测T细胞亚群和NK细胞活性;术后第10天取A组和B组外周血再检测T细胞亚群和NK细胞活性。结果术前A组T细胞亚群和NK细胞与B组和C组的比较,除CD8^＋外均明显降低（P〈0．05）。术后完全性切除和不完全性切除的患者CD8^＋低于剖胸探查者（P〈0．05）,其余各项指标均高于剖胸探查组（P〈0．05）,而完全性切除与不完全性切除之间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论检测T淋巴细胞亚群、NK细胞可用于肺癌患者的免疫监测,其中CD4^＋／CD8^＋的比值在一定程度上可以反映原发性非小细胞肺癌患者癌负荷的情况。完全性切除和不完全性切除都能显著性提高肺癌患者的免疫功能,为放疗或化疗取得更好的疗效创造较好的条件。     

半嵌合细胞因子诱导的杀伤细胞治疗晚期非小细胞肺癌的疗效

目的 观察半嵌合细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokines induced killer cells,CIK）治疗对中晚期非小细胞肺癌患者生存期的影响。方法 回顾性分析2010-2013年在解放军总医院接受治疗的47例中晚期非小细胞肺癌患者。其中观察组24例,对照组23例。观察组为经过半嵌合CIK细胞免疫治疗联合化疗方案的患者,对照组为仅采用化疗方案的患者,比较两治疗组的生存时间和免疫状态。结果 观察组治疗后外周血中总CD3^＋、CD3^＋CD56^＋、CD3^＋CD56^＋CD8^＋细胞百分比显著高于对照组（P〈0.001）;观察组中位无进展生存时间及1年生存率显著高于对照组（7.3个月vs 5.3个月,66.7%vs 41.4%）（P〈0.001）。结论 半嵌合CIK细胞联合化疗治疗非小细胞肺癌可以改善患者机体的免疫状况,有效延长患者生存时间。     

非小细胞肺癌外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节T细胞分析

目的分析非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节T细胞（Treg）占CD4^＋T细胞的比例变化,探讨其临床意义。方法采用流式细胞仪检测32例非小细胞肺癌患者和15例正常健康者（对照组）外周血中CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋Treg占CD4^＋T细胞的比例。结果健康对照纽外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋Treg占CD4^＋T细胞比例为（0．54±0．51）％;NSCLC患者外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋Treg占CD4^＋T细胞比例为（1．40±0．98）％。两组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论NSCLC患者外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋Treg占CD4^＋T细胞的比例明显升高,提示与肺癌免l癌逃逸有美。     

术前放化疗对老年直肠癌患者免疫功能的影响

目的探讨术前同期放化疗对进展期中低位直肠癌老年患者的细胞免疫功能的影响.方法35例60～75岁之间进展期中低位直肠癌老年患者,采用术前口服化疗药物卡培他滨（Capecitabine,Xeloda）单药方案,每日1000mg/m^2,连用2两周,休息1周,共两个疗程;放疗选择在口服化疗药物2d后进行,采用常规分割放疗,照射次数10次,三野照射总计量30Gy.治疗结束3周后手术.分别于入院当天、手术前1天,手术后7d,术后1月抽取患者外周血,采用流式细胞术（flow cyometry,FCM）检测T细胞亚群百分率（CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋/CD8^＋）及NK细胞含量变化.结果术前放化疗前后,患者外周血CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋/CD8^＋及NK细胞水平无明显差异（P〉0.05）,手术后7d、CD3^＋、CD4^＋、CD4^＋/CD8^＋及NK细胞水平较入院当天明显降低,CD8^＋升高（P〈0.05）,术后1月CD3^＋、CD4^＋、CD4^＋/CD8^＋及NK细胞含量较术后第7天均升高,CD8^＋明显降低（P〈0.05）,与术前相比细胞免疫无明显差异（P〉0.05）.结论术前同期放化疗对进展期中低位直肠癌老年患者的细胞免疫功能无明显影响,是一种安全有效的治疗方法.     

高强度聚焦超声对恶性肿瘤患者细胞免疫功能的影响

目的探讨高强度聚焦超声(HIFU)对恶性肿瘤患者细胞免疫功能的影响。方法取52例恶性肿瘤患者HIFU治疗前和治疗后7d外周血2ml,用流式细胞仪检测NK、rdT、CD4+T、CD8+T细胞百分数和CD4+/CD8+。结果经HIFU治疗后患者的NK细胞、rdT细胞百分数显著升高(P0.05),CD4+T细胞百分数和CD4+/CD8+比值明显升高(P0.05),CD8+T细胞百分数则下降(P0.05)。结论HIFU既能非侵入性、微创、准确、适形灭活肿瘤,又能提高恶性肿瘤患者机体内的细胞免疫功能。     

奈达铂联合多西他赛治疗晚期非小细胞肺癌临床疗效及其对于细胞免疫功能的影响

目的：研究奈达铂联合多西他赛治疗晚期非小细胞肺癌临床疗效及其对于细胞免疫功能的影响。方法：研究共对96例晚期非小细胞肺癌患者进行了研究,将入组患者随机分为观察组和对照组,每组48例,观察组接受奈达铂联合多西他赛治疗,对照组接受顺铂联合紫杉醇治疗。对照两组疗效,生存率、无疾病进展时间、T淋巴细胞亚群水平以及并发症的发生情况。结果：观察组的部分缓解（PR）率高于对照组,进展（PD）率低于对照组;对照组治疗后的NK、CD3^＋、以及CD4^＋/CD8^＋水平均低于治疗前,CD8^＋水平高于治疗前,差异均具有统计学意义（P〈0.05）;观察组的NK、CD3^＋、以及CD4^＋/CD8^＋水平均高于对照组,CD8^＋水平低于对照组,差异均具有统计学意义（P〈0.05）;观察组的1年生存率高于对照组,无疾病进展时间长于对照组。结论：奈达铂联合多西他赛治疗晚期非小细胞肺癌可以取得良好的疗效,且生存率高,无疾病进展时间长,而且对于患者细胞免疫功能影响较为轻微。     

CIK细胞在肿瘤免疫治疗中的作用

目的研究细胞因子诱导的杀伤细胞（CIKcells）的体外扩增特性及其在抗肿瘤免疫治疗中的作用。方法通过提取健康供血者的PBMNC,培养诱导CIK细胞,显微镜下观察其扩增倍数、增殖速率,流式细胞仪分析细胞免疫表型,用MTT法观察其对K562细胞的体外杀伤效应,并通过流式细胞仪进一步分析30例实体瘤患者CIK细胞输注前后外周血免疫活性细胞表型的改变。结果经2周培养,CIK细胞平均增加了30倍,总数达（4.8～5.0）×109,活性细胞比例〉90%;体外杀伤率约50%,表型检测效应细胞CD3＋、CD3＋CD4＋、CD3＋CD8＋、CD3＋CD56＋亚群比例显著升高,差异有高度统计学意义（P〈0.01）。实体瘤患者CIK细胞输注后外周血中免疫活性细胞比例也明显升高,差异也有统计学意义（P〈0.05）。结论CIK细胞在体内外能明显抑制肿瘤生长,有效改善患者的免疫功能,为晚期肿瘤治疗提供了新的方法。     

CIK细胞免疫治疗对术后肾癌患者免疫功能的影响

目的探讨CIK细胞免疫治疗对术后肾癌患者免疫功能的影响.方法选取Ⅰ期、Ⅱ期肾癌患者70例,经手术治疗后随机分为,CIK细胞治疗组和常规治疗组,每组35例;分别于CIK细胞治疗前、治疗后2周、4周和8周,动态监测患者免疫功能指标,包括外周血CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋比值、NK细胞比例以及Th1/Th2细胞因子水平.结果CIK细胞治疗组于CIK细胞治疗后2周,外周血CD3＋、CD4＋T细胞、NK细胞及CD4＋/CD8＋的比值、IL-2、INF-r水平较治疗前升高（P〈0.01）,于治疗后4周达高峰,此后逐渐回落（P〈0.05）;而CIK细胞治疗组Th2细胞因子（IL-4、IL-10）于CIK细胞治疗后2周下降,治疗后4周降至低谷.CIK细胞治疗组于CIK细胞治疗后2、4、8周CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋、NK细胞、IL-2、INF-r、IL-4和IL-10与常规治疗组各时点比较差异有统计学意义（P〈0.05）.结论CIK细胞免疫治疗能增强术后肾癌患者的免疫功能.