查尔酮类细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂的合成以及抗癌活性研究

目的:寻找活性更好的查尔酮类细胞周期蛋白依赖性激酶(CDKs)抑制剂。方法:经查尔酮路线制备8个查尔酮类类黄酮。结果:目标化合物结构经IR、1H-NMR、ESI-MS确证。活性测定结果显示有2个化合物对A549的抑制活性高于对照Flavopiridol,所有化合物对HCT116有较强的抑制活性。结论:Flavopiridol被结构类似的查尔酮代替后,可得到活性更好的类黄酮。     

类黄酮细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂的研究进展

近年来,从天然来源的黄酮类化合物出发,设计、合成细胞周期蛋白依赖性激酶(CDKs)抑制剂,是抗肿瘤药物研究的一个重要方向,许多具有抗肿瘤活性的类黄酮CDKs抑制剂已被报道,其中一些化合物已进入临床研究阶段。现对文献报道的类黄酮CDKs抑制剂的研究概况进行综述,为该类药物的进一步研发提供参考。     

细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂在眼科的研究进展

0引言在对细胞周期的研究中发现,细胞周期受多种调控因子调节,根据作用不同分为正相(刺激性)调节剂和负相(抑制性)调节剂。刺激性调节剂包括细胞周期素(Cyclin)和细胞周期蛋白依赖性激酶(CD K),Cyclin与CDK通过Rb蛋白及其相关蛋白p107、p130的磷酸化,形成活性Cyclin-CDK复合物促进细胞周期的进展;抑制性细胞周期调节剂为细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂(CKI),当DNA损伤或存在抑制性信号时,CKI抑制CD K和Cyclin-CDK复合物的活性,使细胞周期在G1/S转化前停止犤1犦。其中细胞周期蛋白依赖性激酶是细胞周期调控的中心环节,Cyclin和C…     

板蓝根二酮 B 体外抗癌活性研究

目的：板蓝根二酮Ｂ抗人肝癌ＢＥＬ－７４０２细胞,卵巢癌Ａ２７８０细胞体外活性研究,方法：ＭＴＴ法测定板蓝根二酮Ｂ对肝癌ＢＥＬ－７４０２细胞和卵巢癌Ａ２７８０细胞的抑制作用,集落形成实验观察药物的诱导分化作用,ＰＣＲ－ＥＬＩＳＡ试剂盒测定细胞的端粒酶活性。结果：板蓝根二酮Ｂ具有抑制肝癌ＢＥＬ－７４０２细胞、卵巢癌Ａ２７８０细胞增殖的能力,其ＩＣ５０分别为８．２μｇ／ｍＬ和７．８μｇ／ｍＬ,且具有诱导     

类查尔酮Nrf2激活剂的合成及ARE诱导活性

对先导化合物CPUY191001结构进行改造,以期得到活性更好的ARE-Nrf2激活剂。通过羟醛缩合反应合成17个目标化合物,采用MTT法测试目标化合物的抗增殖活性,并利用荧光素酶报告基因实验考察目标化合物对ARE的诱导活性。MTT数据显示,该系列化合物几乎无细胞毒性(IC₅₀>50 μmol/L),活性测试结果表明,大部分类查尔酮衍生物对ARE具有一定的诱导活性,其中化合物2,3,10活性较优,且具有浓度依赖性。化合物2,3,10在抗炎与肿瘤预防治疗药物的研究领域中具有一定的应用前景,值得进一步研究。     

新型2-吲哚酮类c-Met激酶抑制剂的设计、合成及活性研究

目的 设计合成新型2-吲哚酮类c-Met激酶抑制剂.方法 以c-Met激酶抑制剂SU11274为先导化合物,利用生物电子等排原理设计出系列2-吲哚酮类衍生物.以2-吲哚酮为起始原料,先后经历与氯磺酸的氯磺酰化、与3的磺酰胺化、与6a~6h,7a~7h和4a~4b的缩合反应制得目标产物10a~10r,并测定它们对c-Met激酶和MCF-7细胞增殖的抑制活性.结果与结论 成功合成了设计的18个2-吲哚酮类化合物,产物结构经1H NMR和ESI-MS确证.部分化合物显示出一定的c-Met激酶和MCF-7细胞增殖抑制活性.对目标产物进行了初步构效关系分析,为该类化合物进一步的结构优化奠定了基础.     

含查尔酮结构香豆素衍生物的合成及抗肿瘤增殖活性

基于活性亚单元拼接原理,将查尔酮分子片段拼接到香豆素结构中,设计并合成了一系列新型含查尔酮结构的香豆素衍生物;以苯乙酮和对甲基苯甲醛为原料,经克莱森-施密特缩合、溴代、环合、消除等反应制备得到24个目标化合物;化合物结构经¹H NMR、ESI-MS确证。采用MTT法评价了化合物对HepG2、DU145及A549肿瘤细胞的抗增殖作用。结果表明,部分化合物对肿瘤细胞具有较好抗增殖作用,其中Ⅰc,Ⅱb,Ⅱc和Ⅱd对HepG2和A549的抗增殖作用较强,IC₅₀分别为2.05~9.16 mol/L和3.48~10.81 mol/L,在此基础上初步探讨了此类化合物的构效关系。     

甘草黄酮类化合物对CDK1的抑制活性及体内外抗肝癌活性

探讨甘草黄酮类化合物对细胞周期依赖性蛋白激酶(CDK1)的抑制活性及抑制肝肿瘤细胞Bel-7402活性。采用CDK1和CCK-8试剂盒分别测试甘草黄酮类化合物对CDK1的抑制活性和对肝癌Bel-7402细胞的体外增殖抑制活性。构建肝癌Bel-7402裸鼠皮下肿瘤模型,并将小鼠随机分为3组:灌胃给药组、阳性药物组和空白对照组,连续灌胃给药18 d,每隔1天记录实验小鼠的体重、肿瘤大小变化。结果表明,甘草黄酮类化合物对CDK1/cyclin B均展现出了抑制活性,尤其是异甘草素对CDK1/cyclinB的抑制活性(IC₅₀=0.05±0.005 μmol/L)是阳性药物夫拉平度(IC₅₀=0.29±0.230 μmol/L)的近6倍;通过分子对接研究发现,异甘草素在CDK1中能够与氨基酸残基K33、E81、L83、S84、D86、D149形成6个氢键,而阳性药物夫拉平度仅与氨基酸残基E81、L83、S84、Q132、D149形成5个氢键;体外抗肿瘤活性研究表明,甘草黄酮类化合物对Bel-7402有较强的抑制作用,其中异甘草素对Bel-7402(IC₅₀=0.7±0.11 mol/L)展现出了最强的抑制活性,是阳性药物夫拉平度(2.4±0.34)mol/L的3倍。动物体内研究表明,异甘草素的LD₅₀为4.38 mg/kg,并能够有效抑制肝癌Bel-7402细胞的增长。     

熊果酸衍生物的合成及其体外抗肿瘤活性评价

目的 通过合成系列熊果酸衍生物,测试其抑制肿瘤细胞增殖活性,探讨熊果酸衍生物抑制肿瘤细胞增殖的构效关系,获得抗肿瘤活性更好的熊果酸衍生物.方法 通过乙酰化反应对熊果酸的3-位羟基进行保护后,再将其28-位羧基制备成酰氯并与氨基酸酯反应,最后再在碱性条件下水解制备得28-位羧基被修饰的熊果酸衍生物.所有熊果酸衍生物的结构通过核磁共振氢谱(1HNMR)、核磁共振碳谱(13CNMR)和高分辨质谱(HRMS)进行确认.采用MTT法测试熊果酸衍生物抑制U937、HL-60、Jurkat、K562、DU145、EC109、MDA231和SMMC7721肿瘤细胞的增殖活性.结果 仪器分析结果表明所制备的熊果酸衍生物均为设计的目标化合物.对抑制U937肿瘤细胞增殖结果表明熊果酸28-位羧基被对4-氨甲基苯甲酸、7-氨基己酸和8-氨基辛酸修饰后,在给药浓度为5.0×10-6 mol/L时对U937细胞增殖的抑制率分别达到(18.84 ±2.58)％、(43.17±4.52)％和(68.38±7.95)％,明显优于母体熊果酸母体(10.06 ±2.35)％ (P ＜0.05).对Jurkat细胞增殖的抑制率则分别达到(68.42±8.19)％、(58.36±7.99)％和(61.08±5.77)％,远高于熊果酸的(6.89±2.31)％(P＜0.05).结论 对熊果酸28-位羧基进行延长修饰,有利于提高熊果酸的抗肿瘤活性,当延长7～8个碳原子,抗肿瘤效果最好.     

联杂环类新型蛋白激酶抑制剂的设计、合成及抗癌活性的研究

目的:分析现有的蛋白激酶抑制剂的结构特征,将联杂环(嘧啶联苯)确立为母核骨架的模型,围绕嘧啶联苯这个骨架,在该模型基础上设计并合成新型的类药性小分子.方法:采用拼合原理反复优化嘧啶联苯这个母环模型,得到一系列结构新颖的联杂环类化合物.采用噻唑蓝法对所合成的化合物进行体外抗肿瘤活性的初步测定.结果:试验结果显示该类联杂环化合物对肿瘤细胞的增长具有抑制作用.结论:通过采用确定中心药效团并对其衍生化的方法,发现了一系列以嘧啶联苯为中心药效团的新型抗肿瘤化合物.     

邻菲咯啉衍生物的合成及抗癌活性研究

[目的]研究邻菲咯啉衍生物的合成方法及衍生物的抗癌活性。[方法]以邻菲咯啉为原料合成邻菲咯啉衍生物,用质谱、核磁共振表征了其结构,并用MTT法对其进行了抗肿瘤活性初步研究。[结果]合成得到5个邻菲咯啉衍生物：2-（1H-苯并咪唑-2-基）-1,10-邻菲咯啉（化合物1）、2-（1H-萘并[2,3-d]咪唑-2-基）-1,10-邻菲咯啉（化合物2）、2-（5,6-二苯基-1,2,4-三唑-3-基）-1,10-邻菲咯啉（化合物3）、9-（1,10-邻菲咯啉-2-基）萘[1,2-e][1,2,4]三嗪（化合物4）、3-（1,10-邻菲咯啉-2-基）菲咯啉基[9,10-e][1,2,4]三嗪（化合物5）。其中化合物2-（1H-苯并咪唑-2-基）-1,10-邻菲咯啉以及2-（1H-萘并[2,3-d]咪唑-2-基）-1,10-邻菲咯啉浓度为20μg/ml时,对人胃癌细胞株SGC7901体外有一定抑制作用。[结论]邻菲咯啉衍生物的合成,可为开发高效、低毒的抗肿瘤药物提供科学依据。     

人细胞周期蛋白D1及细胞周期蛋白激酶CDK4的原核表达及鉴定

【目的】构建表达人细胞周期蛋白D1及细胞周期蛋白激酶CDK4融合蛋白的重组体。【方法】用RT-PCR从HL-60细胞中扩增细胞周期蛋白D1及CDK4基因片段,克隆到pGEM-Teasy载体上。测序鉴定后切下相应的片段,连接到表达载体pET-22b(+)上,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DL3),使之高效表达融合蛋白细胞周期蛋白D1及CDK4。SDS-PAGE电泳及Westernblotting鉴定表达蛋白。【结果】用PCR扩增得到了正确的目的基因片段并构建成pET-cyclinD1和pET-CDK4两个原核表达载体。将其转化大肠杆菌,Westernblot检测证实了转化的大肠杆菌能表达细胞周期蛋白D1及CDK4融合蛋白。【结论】本研究成功构建了细胞周期蛋白D1及CDK4原核表达载体,后两者在细胞内能正确表达细胞周期蛋白D1及CDK4融合蛋白。     

盐酸米托蒽醌注射液抗癌活性观察

作者对盐酸米托蒽醌注射液的抗癌活性进行了观测,发现该药对艾氏腹水癌、白血病P388和Sar-coma-180等三个实验系统瘤株均有显著疗效,尤其对白血病P388效果特佳。其抗癌效果比米托蒽醌粉剂稳定和优越。除静脉和腹腔注射外,局部皮下注射亦无不良反应,效果显著,对艾氏腹水癌皮下实体型肿瘤抑瘤率可达90％以上。提示该剂型可供临床上作各种途径给药时选择。     

抗癌药筛选的策略及方法

抗癌中草药的开发研究涉及到多学科多领域。作者就如何更为有效的筛抗癌中草药，结合当前国内外最新研究成果，从筛选的方向，体系、程序和方法等几方面进行了综述。     

卵巢上皮性癌组织中细胞周期素B1和CDK1的表达

目的:探讨卵巢上皮性癌组织中细胞周期素B1(CyclinB1)和细胞周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)的表达及其意义。方法:应用免疫组化SP法检测20例正常卵巢组织、20例卵巢良性上皮性肿瘤组织、40例卵巢上皮性癌组织中CyclinB1和CDK1蛋白的表达。结果:①卵巢上皮性癌组织中CyclinB1和CDK1蛋白的阳性表达率分别为77.5%和90.0%,良性卵巢上皮肿瘤组织分别为25.0%和35.0%,正常卵巢组织分别为5.0%和10.0%,3者相比差异有统计学意义(χ2=33.036,39.568;P<0.001)。②CyclinB1蛋白的表达与卵巢上皮性癌FIGO分期、组织分化和淋巴结转移有关(P<0.05),CDK1蛋白的表达与卵巢上皮性癌临床病理特征无关。结论:CyclinB1和CDK1蛋白在卵巢上皮性癌组织中存在异常高表达,可能在卵巢上皮性癌的早期恶变过程中发挥重要作用。     

Survivin和CyclinD1及CDK4在胃癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨凋亡相关基因Survivin在胃癌组织中的表达及其与CyclinD1、CDK4表达的相关性。方法:选择胃癌42例和正常胃粘膜24例,对Survivin、CyclinD1和CDK4抗体行SP法免疫组织染色。结果:42例胃癌标本中Survivin有35例阳性,阳性率为83%,24例正常胃粘膜组织中有5例阳性表达,阳性率为20.8%(P<0.01)。CyclinD1和CDK4的表达仅发现在胃癌中,阳性率分别为47.6%(20/42)、42.8%(18/42),有统计学意义。(p<0.05),Survivin和CyclinD1、CDK4在胃癌中的表达显示基本一致性关系。Survivin基因表达均与年龄、性别、部位、组织学类型、淋巴结转移均无相关性。但在高、中分化胃癌中的强阳性(++～+++)表达率明显高于低分化腺癌(p<0.05)。Cy clinD1和CDK4在低分化胃癌中强阳性(++～+++)表达明显高于高、中分化腺癌。(p<0.05)。结论:Survivin及CyclinD1和CDK4过度表达和活性增强可能参与胃癌的发生,Survivin基因在胃癌中表达上调,提示该基因对胃癌发生发展起重要作用,可能是胃癌发生的早期事件。Survivin和CyclinD1在胃癌中可能相互独立起作用。     

Cdk1在HepG2细胞的表达及活性对肝癌细胞凋亡的影响

目的观察Cdk1蛋白表达及其活性对肝癌细胞凋亡的影响。方法克隆Cdk1基因质粒和Cdk1siRNA,并将其转染到肝癌HepG2细胞中,另外应用roscovintine（Cdks的抑制剂）刺激细胞,然后给予紫外线（UV）照射。用Western Blot检测转染的Cdk1蛋白的表达,用核素标记测定其活性;用HO 33342（Hoechst 33342）的免疫荧光染色细胞核判断细胞凋亡的情况。分析Cdk1蛋白表达及活性对肝癌细胞凋亡的影响。结果 Cdk1可以在HepG2良好地表达;Cdk1siRNA可以有效地沉默Cdk1的表达;roscovintine可抑制Cdk1的活性;细胞凋亡率在roscovintine刺激细胞时最高比较Cdk1转染细胞组和Cdk1siRNA转染细胞组（P〈0.01）,在Cdk1转染细胞高于Cdk1siRNA转染细胞组（P〈0.01）和空载体转染细胞组（P〈0.05）,在Cdk1siRNA转染细胞最低。结论过度表达Cdk1可以增加肝癌细胞死亡,抑制肝癌的增殖。抑制Cdk1活性可更有效增加肝癌细胞死亡,抑制肝癌的增殖,可望成为研究和探讨肝癌靶点之一。     

鼠麴草黄酮类化合物抗氧化性研究

采用微波辅助提取鼠麴草黄酮类化合物,并测定其体外抗氧化性。结果表明:当鼠麴草黄酮提取液浓度超过5%时,抑制超氧阴离子自由基(O2-)能力逐渐增强,对猪油的抗氧化作用明显,且与VC、柠檬酸有较好的协同增效作用。这说明鼠麴草黄酮类合物抗氧化性明显,值得开发利用。