OPGL诱导小鼠外周血单核细胞分化为破骨细胞及其破骨活性

目的 :观察在小鼠外周血单核细胞培养中破骨细胞抑制因子配基 (osteoprotegerinligand ,OPGL)诱导单核细胞分化为破骨细胞的作用 ,以及地塞米松对破骨细胞分化和骨吸收活性的影响 .方法 :将外周血单核细胞分组培养 ,在A组中加入巨噬细胞集落刺激因子和OPGL ,B组中再加入地塞米松 .多核巨细胞形成后行抗酒石酸酸性磷酸酶 (tartratere sistantacidphosphatase,TRAP)及甲苯胺蓝染色 .将象牙骨片上骨吸收面积经计算机图像分析以确定其差异 .结果 :外周血单核细胞培养 7～ 10d ,可以见到大量的多核巨细胞 ,体积巨大 .B组中 ,多核巨细胞出现较A组早 .几乎所有的多核巨细胞表现为TRAP强阳性 ,而多数单核细胞和巨噬细胞为TRAP阴性或弱阳性 .在象牙骨片上有大量的骨吸收陷窝形成 ,A、B两组的骨吸收无明显差异 (P >0 .0 5 ) .结论 :OPGL可以诱导小鼠外周血单核细胞分化为破骨细胞并具有骨吸收活性 .地塞米松可加速OPGL诱导的破骨细胞分化作用 ,但对于破骨细胞的骨吸收活性无影响     

骨吸收机理与破骨细胞分子生物学研究的进展

口腔牙齿与牙槽骨和颌骨的吸收是口腔临床医学中的一个极其重要的问题。骨的修复，改建和形态学发生是一个生理控制过程，它包括由成骨细胞作用的骨基质的合成和由破骨细胞作用下的骨的协同吸收，破骨细胞（osteoclast)与成骨细胞（osteoblast)是骨组织形成和吸收的关键性生物活性细胞，在骨组织再生与修复方面，也是矛盾与对立的统一体，近十年来，在破骨细胞与骨吸收机理的分子生物学领域研究方面，已有着长足的进展，在此重点讨论骨吸收机理与破骨细胞分子生物学研究的进展。     

氟对兔体外破骨细胞性骨吸收影响的研究

目的:探讨不同剂量氟化钠 (Na F)对兔体外破骨细胞功能的影响。方法:从新生兔四肢长骨中分离破骨细胞 ,采用体外培养破骨细胞的方法 ,用倒置相差显微镜和计算机图像分析技术 ,测量在含有不同浓度 (1.0 0×10 - 7～ 1.0 0× 10 - 4m ol/ L )的 Na F培养液中骨吸收陷窝数和表面积。结果:染氟 1.0 0× 10 - 6 、1.0 0× 10 - 5和 1.0 0×10 - 4m ol/ L 组骨片上骨吸收陷窝数量和表面积与对照组比较均减少 (P <0 .0 1) ,而且骨吸收陷窝数及表面积随氟浓度的增加而减少。 结论 :氟对体外培养的破骨细胞有直接的损伤作用。     

破骨细胞的起源

破骨细胞的起源谭汉坤综述郭绢霞审校（广西梧州市卫校）破骨细胞由Ｋｏｌｌｉｋｅｒ于１８７３年发现。它是一种含有２～５０个核的大细胞，无分裂活动。常紧贴于骨质表面，其贴骨面有皱褶缘，是主要承担溶解吸收骨质（破骨）功能的特殊结构。胚胎时期以及胎儿出生后至成...     

骨片吸收陷窝光镜计数法定量测定破骨细胞功能

目的 研究定量检测体外培养破骨细胞（ＯＣ）骨吸收功能。方法 应用改良Ｆｅｎｔｏｎ等的方法，由１ｄ龄ＳＤ大鼠四肢长骨分离ＯＣ并中于牛皮质骨骨片上连续培养，超声去除细胞后，骨片经１％甲苯胺蓝色３～４ｍｉｎ光镜下对整片吸收陷窝观察并计数，根据骨片上陷窝的数目定量ＯＣ的骨吸收功能。结果 骨片吸收陷窝经甲苯胺蓝染色后光镜下可清晰识别，并为扫描电镜（ＳＥＭ）所证实，甲苯胺蓝染色－光镜观察技术对骨片吸收陷窝计数     

诱导法与机械法体外培养破骨细胞的比较研究

目的 探讨不同方法培养的破骨细胞(OC)在形态学及骨吸收功能的差异,为体外培养OC提供方法学实验依据.方法 采用机械分离的方法,即从1d龄SD大鼠四肢长骨机械分离获得成熟OC;诱导法,即利用RANKL(100 ng/mL)和M-CSF(100 ng/mL)诱导RAW264.7细胞形成破骨样细胞(OLC).对获得的OC和OLC进行形态学和骨吸收功能观察比较.结果 OC和OLC均为TRAP染色阳性的多核巨细胞,与细胞共培养骨片上可形成骨吸收陷窝;与机械分离法比较,诱导法培养出的OLC数目较多,但骨吸收陷窝较小而浅.结论 直接分离培养法可获得骨吸收功能较活跃的OC,但数目较少,适合骨吸收功能分析、破骨迁移黏附、凋亡研究及单细胞分子生物学研究.诱导形成的OLC数量较多,但骨吸收功能较差,适合用于OC分化发育过程的研究.     

神经纤维瘤病2例报告

<正> 神经纤维瘤病不常见,呈家族遗传性,易被临床医师忽视,1994年以来我们遇到2例,现报告如下。 例1,女,50岁。因耳鸣3年,头痛,行走不稳2月于1994年12月入院。3年前自觉右耳鸣,听力下降,未治疗,2月前出现头痛、行走不稳。查体:蹒跚步态,伸舌偏右,左耳后可触及数枚蚕豆大小结节。双眼水平震颤,心肺阴性,右     

小鼠破骨细胞骨髓诱导模型的建立及功能观察

目的 获得大量高质量小鼠破骨细胞,为体外研究破骨细胞骨吸收功能提供丰富的细胞来源.方法 采用巨噬细胞集落刺激因子(maerophage colony stimulating factor,M-CSF)和破骨细胞分化因子(receptor activator of nuclearfactor-κB ligand,RANKL)诱导小鼠骨髓单核细胞分化为破骨细胞,并通过抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phos-phatase,TRAP)染色和骨吸收实验来鉴定破骨细胞及其噬骨能力.结果 诱导3 d后可见TRAP( )多核细胞出现,诱导5 d后骨片上可见蓝紫色的吸收陷窝.随着培养时间的延长,TRAP( )多核细胞数目和吸收陷窝呈现时间依赖性增长趋势(P<0.05).结论 M-CSF和RANKL诱导小鼠骨髓单核细胞可产生大量的具有活跃噬骨能力的破骨细胞.     

重组RANK蛋白抑制破骨细胞活性的实验研究

目的研究重组RANK蛋白在体外实验中对破骨细胞的抑制作用。方法成骨细胞与RAW264.7细胞以4∶1比例混合培养6d,以抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色鉴定后,加入3种浓度（10-4g/L、10-5g/L、10-6g/L）重组RANK蛋白,并设空白对照。3d后观察破骨细胞数目和形态,计数骨磨片吸收陷窝。结果混合培养6d后,体系中可见成熟破骨细胞出现。加重组RANK蛋白3d后,与对照组相比,各药物组TRAP阳性细胞个数、骨磨片吸收陷窝计数均明显减少。结论体外实验中重组RANK蛋白可以显著抑制破骨细胞活性及吸收功能。     

白细胞介素1刺激破骨细胞性骨吸收作用的实验研究

目的：了解白细胞介素1β（IL－1β）在破骨细胞性骨吸收中的刺激作用及其相应的作用机制。方法：分别将新生大鼠破骨细胞单独以及和成骨细胞联合接种于预置象牙片的培养板中。24h后培养液中加入不同浓度的IL－1β。继续培养48h,然后取出象牙片,超声处理后行甲苯胺蓝染色,光镜下观察骨吸收陷窝的数目并计算其部面积。结果：IL－1β能够明显增加坡骨细胞和成骨细胞联合培养组象牙片上吸收陷窝的数目和面前,且刺激作用呈剂量依赖性,但对单独培养的破骨细胞无明显刺激作用。结论：IL－1β的刺激骨吸收作用由成骨细胞所介导,而非直接作用于破骨细胞。     

钛离子对破骨细胞形成及功能的影响*

目的 研究钛离子对破骨细胞的影响,初步探讨钛离子与种植体周无菌性骨吸收的关系.方法 分别用常规培养基和加入钛离子的培养基诱导破骨细胞,并与破骨细胞在牙本质磨片上联合培养48 h,检测钛离子对破骨细胞形成的影响,并检测破骨细胞在牙本质磨片上的骨吸收陷窝.结果常规培养基和钛离子培养基诱导的破骨细胞数目分别为5.4±1.9和 11.6±2.7,而在牙本质上的骨吸收险窝面积百分比分别为(12.6±2.9)%和(41.2±4.0)%.结论钛离子可促进破骨细胞形成,并增强了其骨吸收功能.     

靶向调控破骨细胞活性治疗骨质疏松的研究进展

骨质疏松症是以骨组织微结构退行性变和骨量丢失为显著特征的一种全身性代谢性骨病,结构的改变引起骨生物力学特性发生改变,在外力作用下骨折发生率大大增加。骨骼结构在一生中时刻在发生精微的变化,需要成骨细胞和破骨细胞的参与,其中破骨细胞参与骨吸收,当骨吸收多于骨形成时就会削弱骨强度,引起骨质疏松,因此抑制骨吸收便成为治疗骨质疏松的重要途径。本文从激素、细胞因子、益生菌、中草药有效成分及其信号通路等重要的破骨细胞活性调节点入手进行综述,以期为骨质疏松破骨细胞的靶向治疗提供新的思路。     

两种破骨细胞培养方法的比较及其吸收骨质的动态观察

目的:比较分析破骨细胞(osteoclast, OC)体外分离培养的方法,并动态观察其形态、分化及功能,为进一步探讨药物对OC性骨吸收的作用奠定基础.方法:采用两种OC的培养方法,即从新生24 h的兔长干骨骨髓腔内壁机械分离成熟OC和1,25(OH)2维生素D3诱导鼠骨髓细胞形成破骨样细胞(osteoclast-like cell, OLC)的方法,对获得的OC进行形态学和功能观察.结果: 倒置显微镜下观察,OC是一种多核巨细胞,有伪足并借助伪足的凹凸伸缩而变化形态、运动行走;HE染色均可见OC多核、胞浆有空泡;特异性抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色可见OC胞浆阳性,呈酒红色,多核.体外OC与骨片共同培养形成骨吸收陷窝,且在培养的7 d内陷窝数目和面积逐渐增大.1,25(OH)2维生素D3诱导鼠骨髓细胞形成OLC,其形态结构特征与成熟OC相同,诱导出的破骨样细胞数目多于机械分离的方法,但每个细胞胞核数目总体上少于机械分离的方法,而且胞核多位于细胞周边,在骨片上形成的陷窝也较小而浅;培养液上清中的钙离子含量和酸性磷酸酶(acid phosphatase ,ACP)含量在培养的1～12 d内随时间逐渐增加.结论: 针对不同实验目的可以采用不同的分离培养OC方法.从骨髓腔内壁机械分离培养的方法可获得骨吸收功能较活跃的OC.1,25(OH)2维生素D3诱导鼠骨髓细胞形成的OLC数量较多,适于对OC分化过程的研究.     

神经纤维瘤病的研究进展

历史回顾早在１８４７年Ｖｉｒｃｈｏｗ首次报道了一家数人患有多发性神经瘤病。到１８４９年Ｓｍｉｔｈ对神经纤维瘤的临床症状作了较为全面的描述。随后德国内科医生ＶｏｎＲｅｃｋｌｉｎｇｈａｕｓｏｎ于１８８２年通过病理学研究对其组织学特点及其与神经系统的关系作...     

体外培养破骨细胞功能的定量评定

目的 建立适用于体外药理学研究的破骨细胞骨吸收功能的定量评定方法。方法 机械分离法获得破骨细胞,接种于象牙薄片底物上,分别于培养１ｄ、３ｄ、５ｄ、７ｄ取出象牙薄片各４张,采用光镜和扫描电镜观察骨陷窝数量的变化;对随机拍摄的陷窝照片进行计算机形态计量分析,测算陷窝的面积和浓度。结果 骨吸收陷窝计数光镜法和扫描电镜法具有良好的相关性,ｒ＝０．９９９８,Ｐ〈０．００１。随着培养时间的延长,陷窝数量逐渐增     

骨片吸收陷窝光镜计数法定量测定破骨细胞功能

目的研究定量检测体外培养破骨细胞（ＯＣ）骨吸收功能。方法应用改良Ｆｅｎｔｏｎ等的方法，由１ｄ龄ＳＤ大鼠四肢长骨分离ＯＣ并接种于牛皮质骨骨片上连续培养，超声去除细胞后，骨片经１％甲苯胺蓝染色３～４ｍｉｎ，光镜下对整片吸收陷窝观察并计数。根据骨片上陷窝的数目定量ＯＣ的骨吸收功能。结果骨片吸收陷窝经甲苯胺蓝染色后光镜下可清晰识别，并为扫描电镜（ＳＥＭ）所证实。甲苯胺蓝染色—光镜观察技术对骨片吸收陷窝计数结果同ＳＥＭ计数结果基本一致（ｒ＝０．９９６７，Ｐ＜０．０５）。结论骨片吸收陷窝光镜计量法评价体外培养破骨细胞骨吸收能力简便、快速、可靠，可用于骨质疏松症病理生理和开发新药的研究     

神经纤维瘤病家系调查

１ 临床资料 先证者男,３５岁,因全身多发性皮肤结节１３年于２０００年８月入本院门诊。查体：系统检查无异常,意识清楚,智力正常。全身可见散在分布的高出皮肤表面的黄豆至鸽蛋大小、形状不一的结节,触之软．活动性差,胸背部可见散在的数片咖啡斑及条状色素沉着。Ｘ线检查心肺、四肢未见异常。组织病理：肿瘤组织界限清楚,无包膜,部分扩展到皮下组织。肿瘤细胞丰富,胞浆淡染,胞核卵圆形．由神经鞘细胞和未成熟胶原纤维和胶原纤维束组成。整个瘤间质内偶见粘液变性。诊断：神经纤维瘤病。 家系调查：主要通过患者的口述和医生的…