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相似文献
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1.
蜂毒素诱导骨肉瘤细胞U2OS凋亡与坏死的实验研究   总被引:11,自引:1,他引:10  
目的:研究蜂毒素是否能够诱导骨肉瘤细胞U2OS凋亡与坏死.方法:U2OS经不同浓度蜂毒素处理后,采用台盼蓝排染法测定细胞增殖抑制率,利用单克隆抗体,通过流式细胞仪检测AnnexinV、Apo2.7及Fas蛋白的表达.结果:64 mg/L蜂毒素作用U2OS 12 h、24 h,其坏死率在80%以上.16 mg/L、32 mg/L蜂毒素对细胞增殖有明显抑制作用,并且可诱导细胞凋亡和坏死的产生,增加细胞Aap2.7及 Fas 蛋白的表达.结论:蜂毒素高剂量有明显杀伤U2OS的作用,低剂量具有促细胞凋亡作用,并能上调Fas蛋白的表达.  相似文献   

2.
[目的]观察蜂毒素对肝癌细胞BEL-7402的增殖抑制作用。[方法]肝癌细胞BEL-7402体外培养,采用MTT法检测蜂毒素对其增殖抑制作用,流式细胞术测定蜂毒素对细胞增殖核抗原表达和细胞周期的影响。[结果]蜂毒素体外能够抑制BEL-7402肝癌细胞的增殖活性;并抑制细胞增殖核抗原的表达,呈剂量依赖性;干扰细胞周期,使S期细胞增加,G2/M期细胞减少。[结论]蜂毒素具有抑制BEL-7402肝癌细胞增殖的作用,机制可能与抑制细胞增殖核抗原表达和干扰细胞周期有关。  相似文献   

3.
目的:探讨片仔癀对体外培养的人骨肉瘤U2OS细胞周期的作用及机制.方法:0.8、1.2、1.6mg/ml片仔癀干预U2OS细胞24、48、72h后,MTT检测片仔癀对U2OS细胞的生长抑制作用;片仔癀干预U2OS细胞48h后流式细胞术分析细胞周期的变化;Western blot检测Survivin蛋白的表达.结果:与对照组比较,不同浓度的片仔癀作用24、48、72h后,不同程度的抑制了U2OS细胞增殖,且呈时间和剂量依赖性(P<0.05);片仔癀干预U2OS细胞48h后细胞发生G2/M阻滞,Survivin蛋白表达较对照组明显降低(P<0.05).结论:片仔癀可抑制骨肉瘤U2OS细胞的生长,诱导U2OS细胞发生G2/M周期阻滞,周期阻滞的发生与Survivin蛋白表达减少有关.  相似文献   

4.
目的探讨蜂毒多肽对人膀胱癌T24细胞的增殖及细胞周期的影响。方法以浓度为0.1、1.0、10.0、100.0μg/ml的蜂毒多肽作用于体外培养的人膀胱癌T24细胞,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)的培养增殖抑制作用,用流式细胞仪检测蜂毒多肽对细胞增殖核抗原(PCNA)表达及对该细胞周期的影响。结果蜂毒多肽能够在体外抑制人膀胱癌T24细胞的增殖活性;抑制PCNA的表达,呈剂量依赖性,各浓度组PCNA量均较对照组降低(P〈0.05或P〈0.01);干扰细胞周期,各浓度组G0/G1期均低于对照组(P〈0.05或P〈0.01),S期高于对照组(P〈0.05或P〈0.01),浓度10.0μg/ml和100.0μg/ml组G2/M期均高于对照组(P〈0.01)。结论蜂毒多肽可抑制膀胱癌T24细胞的增殖,其作用机制可能与PCNA的表达抑制及细胞周期受到干扰有关。  相似文献   

5.
目的 探究山竹醇对骨肉瘤细胞活力、细胞周期分布和凋亡的影响及对裸鼠皮下骨肉瘤生长的影响并探究其作用机制。方法 采用CCK-8实验检测山竹醇对骨肉瘤细胞活力的影响;流式细胞术分析山竹醇对骨肉瘤细胞凋亡率及细胞周期分布的影响;构建裸鼠皮下骨肉瘤模型,检测山竹醇腹腔注射对裸鼠皮下骨肉瘤生长的影响;RNA测序分析检测山竹醇处理骨肉瘤细胞后改变的基因;Western blot法检测山竹醇对骨肉瘤细胞及肿瘤组织中JAK2/STAT3信号通路的影响。结果 CCK-8法检测结果表明,山竹醇能时间、浓度依耐性的抑制骨肉瘤U2OS细胞活力;流式细胞术检测结果表明,山竹醇能诱导U2OS细胞凋亡,并导致细胞周期阻滞于S期。并且,山竹醇能抑制裸鼠皮下骨肉瘤的生长。基因富集分析结果表明,山竹醇处理的骨肉瘤细胞中JAK/STAT信号通路显著富集。Western blot法检测结果表明,山竹醇处理骨肉瘤细胞及骨肉瘤组织中p-JAK2、p-STAT3、Bcl-xl水平明显降低,而Bax表达水平显著升高。结论 山竹醇能可在体内体外发挥抗骨肉瘤作用,可能与其抑制骨肉瘤中JAK2/STAT3信号通路活性有关。  相似文献   

6.
目的 探讨MALAT-1表达对裸鼠皮下植入的骨肉瘤增殖的影响,以及抑制MALAT-1表达引起实体骨肉瘤病理切片上H-E染色、增殖细胞核抗原(PCNA)、血管内皮生长因子(VEGF)的改变。方法 使用慢病毒转染构建MALAT-1稳定低表达的骨肉瘤U2OS细胞系,实时荧光定量PCR(qPCR)验证MALAT-1表达改变。12只雄性裸鼠,4~6周龄,随机平均分为2组。实验组皮下植入MALAT-1稳定低表达的骨肉瘤U2OS细胞,对照组皮下植入空载慢病毒处理的骨肉瘤U2OS细胞。分别在植入后第3、6、9、12、15、18、21天记录两组裸鼠皮下骨肉瘤的体积。植瘤第21天处死裸鼠,完整取出骨肉瘤称重、H-E染色、PCNA及VEGF免疫组化染色,比较两组肿瘤重量、镜下形态、积分光密度、阳性表达率。结果 与对照组相比,实验组的肿瘤生长更慢,植瘤21d后的体积、重量都更小(P均<0.01),H-E染色下肿瘤基质成分增多(P=0.003),肿瘤细胞密集程度降低,免疫组化PCNA表达程度下降(P=0.025)。两组裸鼠骨肉瘤VEGF表达程度在免疫组化切片上的差异没有统计学意义。结论 抑制骨肉瘤中MALAT-1的表达,可以延缓肿瘤的生长,降低肿瘤的侵袭性,促进实体瘤中肿瘤细胞的坏死。  相似文献   

7.
目的对32种巾草药进行初步抗骨肉瘤的体外筛选实验,为中药标准化和治疗骨肉瘤提供依据。方法应用MTT法测定各中药提取物对U2OS细胞株增殖活性的影响,检测其抑制骨肉瘤细胞的剂量效应关系:应用形态学观察、FCM及AnnexinV法测定筛选m的中药水提取物对U2OS细胞的凋亡作用。结果32种中草药提取物中蟾酥、牛胆粉等对骨肉瘤U2OS细胞株具有增殖抑制作用,深入研究表明蟾酥、牛胆粉水提取物对U2OS细胞具有促进凋亡作用,其中以蟾酥促进凋广作朋最为明瞳:结论通过对32种中草药进行筛选,发现蟾酥、牛胆粉等对骨肉瘤细胞株U20S的增殖有抑制作用,为进一步开展抗骨肉瘤中草约有效成分的筛选及体内动物研究提供实验依据。  相似文献   

8.
全反式维甲酸对骨肉瘤细胞OS732生长的影响   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的 观察全反式维甲酸(all—trails—retinoic acid,ATRA)对骨肉瘤细胞OS732生长的影响,并探讨其作用的分子机制。方法 用10^-5 MATRA作用骨肉瘤细胞OS732,6d后,进行细胞形态学观察、活细胞计数、流式细胞仪分析细胞周期、半定量RT—PCR检测细胞周期调控蛋白CyclinD(D1、D2、D3)、CD比、P21^WAF1 mRNA表达的改变。结果 ATRA作用后,OS732细胞胞浆展开,细胞核变小,核浆比例变小;瘤细胞生长减慢,细胞计数为正常对照组的39.5%;G0/G1期细胞明显增多,S期细胞减少,细胞阻滞于G0/G1期;CyclinD1、CyclinD2、CDK4mRNA表达均下降,尤以CycfinD2、CDK4下降最明显,CyclinD3、P21^WAF1mRNA未见明显改变。结论 10^-5M全反式维甲酸可明显抑制骨肉瘤细胞OS732的增殖,并使细胞周期出现G1/G0期阻滞,该作用可能与维甲酸处理后OS732细胞中CyclinD2、CDK4表达的下调以致低磷酸化pRb积累有关。  相似文献   

9.
探讨骨形成蛋白(BMP)对人骨肉瘤细胞的作用及意义.方法:将重组人BMPZ基因的反义核酸逆转录病毒表达载体PDOR-AB用脂质体导入BMP表达阳性的骨肉瘤细胞OS-99OI,观察骨肉瘤细胞OS-99OI的BMP表达、增殖活性、肿瘤抑制基因"m23的表达、细胞周期和电镜下形态改变.结果:转染后,OS-99o1细胞中内源性的BMP表达产物明显下降;增殖活性明显下降;肿瘤转移抑制基因"m23表达未见改变;细胞周期分析表明:GI期细胞比例上升,S期比例下降;电镜观察可见细胞质中溶酶体增多,染色质有断裂现象.结论:反义核酸技术阻断BMPZ在OS-99o1细胞中的表达后,肿瘤细胞的增殖活性降低,证实骨肉瘤细胞中BMP的表达增加了肿瘤细胞的增殖活性.  相似文献   

10.
目的 观察蜂毒素对小鼠肝癌H22细胞增殖的影响,探讨其抗肿瘤的可能作用环节。方法 以MTT法测定蜂毒素体外对小鼠肝癌H22细胞增殖的影响,运用流式细胞术分析增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,并观察iv蜂毒素对荷瘤小鼠的抑瘤作用。结果蜂毒素对H22细胞的抑制作用随药物浓度增加而增强;蜂毒素作用于H22细胞后,细胞PCNA平均荧光强度低于对照组;iv蜂毒素对小鼠皮下H22肝癌细胞具有明显的抑制作用,抑瘤作用随浓度增加而增强。结论蜂毒素在体内外对小鼠肝癌H22细胞增殖均有明显的抑制作用,下调细胞PCNA表达可能是其作用环节之一。  相似文献   

11.
水飞蓟宾对人肝癌细胞株HepG2增殖的影响及其机制研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
任孟军  左国庆  何松 《重庆医学》2005,34(3):369-371
目的研究水飞蓟宾(Silibinin,Slybin)在体外对人肝癌细胞株HepG2的抗增殖作用及其机制.方法 MTT法观察水飞蓟宾对细胞增殖的抑制作用,免疫细胞化学检测增殖细胞核抗原(PCNA)及Ki-67蛋白的表达,流式细胞仪分析细胞周期分布及凋亡率,光镜及透射电镜观察细胞形态和超微结构的变化.结果水飞蓟宾可明显抑制HepG2的增殖,经水飞蓟宾作用后PCNA及Ki-67的表达显著减弱(P<0.01);水飞蓟宾可使实验组细胞阻滞于G2/M期,并产生明显凋亡(P<0.05);光镜发现细胞体积缩小,变圆,胞浆浓缩,核固缩深染,电镜可见凋亡及凋亡小体.结论水飞蓟宾可通过下调HepG2中PCNA及Ki-67蛋白的表达,改变细胞周期进程,诱导细胞凋亡来发挥其增殖作用.  相似文献   

12.
梁蓉  黄高升  王哲  冯骥良  郭英  杨国嵘 《医学争鸣》2003,24(17):1560-1562
目的 :观察正常人骨髓成纤维样细胞系HFCL对白血病细胞U937增殖的影响 .方法 :采用免疫组化对HFCL细胞进行鉴定 .建立U937细胞和HFCL细胞共培养体系 ,台盼蓝拒染法测定生长曲线 ;HE染色和瑞氏 吉姆萨染色后进行分裂指数 (MI)测定 ;流式细胞仪 (FCM)检测细胞周期的变化 ;WesternBlot检测增殖细胞核抗原 (PCNA)表达 .结果 :与单独U937细胞培养相比 ,与HFCL细胞共培养后 ,U937细胞生长受抑 ,且与HFCL细胞直接接触组的抑制作用大于用transwell组 .其分裂指数单独白血病细胞组 >用transwell组 >与HFCL直接接触组 .细胞周期分析发现U937细胞与HFCL细胞共培养后 ,G1期细胞增高 ,S期细胞减少 ,以直接接触组为甚 .与HFCL细胞共培养后 ,U937细胞的PCNA表达下调 ;而与U937细胞共培养 ,HFCL细胞生长和细胞周期无明显变化 .结论 :正常人骨髓成纤维样细胞HFCL能抑制白血病细胞U937的增殖 ,阻止U937细胞细胞周期的运行 ,而U937细胞对HFCL细胞的生物学特性影响不大  相似文献   

13.
目的 研究反义PCNA基因片断对胶质瘤细胞株U251的细胞增殖的抑制作用。方法 用脂质体介导寡核苷酸转染培养的U251胶质瘤细胞,以MTT法检测细胞增殖活性,RT-PCR、原位杂交和免疫组织化学方法分别检测相关基因和蛋白的表达,通过流式细胞仪检测细胞周期和TUNEL法检测细胞凋亡。结果 不同浓度的反义寡核苷酸对肿瘤细胞的增殖活性均有抑制作用,且有一定的剂量依赖性。PCNA反义寡核苷酸能够诱导胶质瘤细胞凋亡,且与反义寡核苷酸浓度和作用时间有关。结论 反义PCNA寡核苷酸片断能有效地抑制胶质瘤细胞的体外增殖,且能够诱导胶质瘤细胞的凋亡。  相似文献   

14.
目的 :探讨肿瘤坏死因子 ( TNFα)对人鼻咽癌 CNE3细胞生长相关基因表达的影响。方法 ;体外培育的人鼻咽癌低分化上皮细胞株 CNE3,通过 MTT细胞毒试验确定TNFα的最佳抑制剂量 ,用免疫组织化学技术观察 TNFα作用 48h后 ,CNE3细胞中增殖相关的几种蛋白表达的变化。结果 :TNFα可下调 PCNA、Ki- 67、p2 1 ras、mtp5 3等蛋白的表达 ,增强 p2 1 WAF1蛋白表达。结论 :TNFα可通过影响有关细胞周期进程基因蛋白表达而抑制细胞生长  相似文献   

15.
土槿皮乙酸对大鼠脑胶质瘤C6细胞增殖的抑制作用   总被引:1,自引:0,他引:1       下载免费PDF全文
目的研究土槿皮乙酸(pseudolaric acid B,PAB)对大鼠脑胶质瘤C6细胞增殖的抑制作用。方法采用MTT法检测0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6、8、16 μg/ml PAB对C6细胞增殖能力的影响;流式细胞术检测碘化丙啶(PI)染色后细胞周期的变化;皮下注射C6细胞建立C6种植瘤大鼠模型并测量种植瘤体积;免疫组化法测定大鼠脑胶质瘤C6细胞种植瘤组织中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达变化。结果体外实验结果表明,PAB呈剂量依赖性地抑制胶质瘤C6细胞生长,半数致死剂量(IC50)为0.03 μg/ml,同时,可使C6细胞周期阻滞于G2/M期;体内实验结果表明,PAB给药后大鼠种植瘤体积有所降低,种植瘤组织中PCNA表达呈下降趋势。结论PAB可抑制大鼠脑胶质瘤C6细胞增殖,阻滞细胞周期中G2/M期、下调PCNA表达为其可能的作用机制。  相似文献   

16.
目的 观察核心蛋白对细胞增殖和细胞周期调控的影响。方法 观察表达HCV核心蛋白的细胞株HePG2-C和作为对照的细胞株HePG2-CMV的细胞形态;绘制细胞生长曲线;检测细胞周期;用流式细胞仪、免疫组化染色检测PCNA,P16,P27,P53;半定量RT-PCR检测P16,P27,P53mRNA。结果 转染重组质粒PBK-HVCC的HePG2-C细胞与转染空载体PBK-CMV的HePG2-CMV细胞相比细胞形态未见明显变化。生长曲线显示HePG2 细胞在转染PBK-HCVC和空载体PBK-CMV后,生长速度无明显变化。检测转染空载体的细胞HePG2-CMV 81.3%进入G0/G1期,7.7%进入S期;而转染PBK-HCV C的细胞HePG2-C73%进入G0/G1期,13.7%进入S期。在进一步分子机制的探讨中发现HePG2-C细胞PCNA、P53表达显著增加,P16、P27表达显著降低。 同样的变化也发生在转录水平。结论 HCV核心蛋白可能通过调节某些基因的转录与表达,增加细胞DNA合成,扰乱细胞周期,进而参与致癌过程。  相似文献   

17.
靶向siRNA对人子宫颈癌细胞的抑制作用   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的构建增殖细胞核抗原(PCNA)的小发夹结构RNA(shRNA)的真核表达载体并在人HeLa细胞表达,同时观察PCNAshRNA对HeLa细胞体外增殖及生物学特性的影响。方法将PCNAcDNA的shRNA引物插入真核表达载体pGenesil-1,构建真核表达质粒pGenesil-1-PCNA(1—4),并通过酶切和测序等方法进行鉴定,将真核表达质粒pGenesil-1-PCNA(1—4)转染HeLa细胞,运用Western blot方法检测PCNA蛋白的表达,流式细胞仪分析细胞周期变化。结果PCNAshRNA能显著抑制人HeLa细胞的生长,阻滞细胞于G0/G1期,PCNA的蛋白表达同时受到抑制。结论PCNAshRNA能显著抑制人HeLa细胞的生长,其抑制作用可能通过阻断PCNA蛋白表达实现,实验结果为进一步研究PCNAshRNA对子宫颈癌的基因治疗奠定了基础。  相似文献   

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