单细胞凝胶电泳法检测双酚A对小鼠睾丸细胞DNA损伤

目的 采用单细胞凝胶电泳法研究双酚A对小鼠睾丸细胞DNA的影响.方法 制备小鼠生殖细胞悬液,用不同浓度的双酚A染毒1 h后,应用单细胞凝胶电泳法检测睾丸细胞DNA损伤情况.结果 与对照组比较,除10-10 mol/L组外,其他各染毒组拖尾率均明显高于对照组(P＜0.05).随着双酚A染毒浓度的增加,小鼠睾丸细胞DNA损伤程度也逐渐增加(P＜0.05),在10-5 mol/L和10-6 mol/L组均出现了Ⅳ级损伤.结论 双酚A体外染毒可造成小鼠睾丸细胞DNA损伤,且随着剂量的增加有加重的趋势.     

单细胞凝胶电泳技术检测慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞DNA的损伤

目的　观察正常人及慢性乙型肝炎 (慢乙肝 )患者外周血淋巴细胞DNA的损伤情况。方法　利用快速、灵敏的检测细胞DNA损伤的单细胞凝胶电泳 (SCGE)技术结合IMI1 0慧星分析软件 ,以“彗星”尾长、尾惯量、尾 %DNA、尾矩来评价淋巴细胞DNA的损伤程度。结果　慢乙肝患者外周血淋巴细胞DNA经SCGE ,形成的“彗星”尾长、尾惯量、尾 %DNA、尾矩较健康人明显增大 (P <0 0 5 )。结论　慢乙肝病毒感染可能是造成淋巴细胞DNA断裂损伤的主要原因     

C市枯水期饮用水中有机污染物分析及对肝细胞DNA损伤的研究

目的　了解城市饮用水环境中有机污染物状况及其对肝细胞的遗传毒性。方法　用气 质联用仪毛细管色谱柱分离分析技术 (GC MS)定性分析C市以嘉陵江和长江为水源的A、B、C、D、E 5个水厂枯水期的水源水与出厂水中有机提取物并用单细胞凝胶电泳实验检测了其对原代大鼠肝细胞DNA的损伤 ,观察比较DNA迁移长度与拖尾细胞百分率。结果　定性分析共检出有机物 98种 ,其中水源水为 60种 ,出厂水为 5 8种 ,污染物主要包括 :酯类、酮类、酚类、杂环和苯及其衍生物等。水源水样品中以长江为水源的C、D、E厂在 2 5 0ml时肝细胞DNA迁移长度和细胞拖尾百分率与对照相差显著 (P <0 .0 1) ,以嘉陵江为水源的A、B厂在 5 0ml即可相差显著 (P <0 .0 1)。而全部出厂水样品诱导的DNA损伤在 5 0ml均与对照相差显著 (P <0 .0 1)。结论　C市主城区各水厂水源水与出厂水均已受到有机物的污染 ,嘉陵江的污染重于长江。且各水样的有机提取物在一定范围内均可诱导原代大鼠肝细胞DNA损伤 ,出厂水引起的DNA迁移长度大于水源水 ,提示氯化消毒可以使有机提取物的DNA损伤作用增强     

烹调油烟对大鼠肺细胞的DNA损伤机制

目的;以大鼠肺Ⅱ型细胞为靶细胞,检测烹调油烟的细胞毒作用和对细胞ＤＮＡ的损伤。方法：烹调油烟颗粒提取物对大鼠肺Ⅱ型细胞染毒２４ｈ后,应用ＭＴＴ法,溴乙锭荧光法以单细胞凝胶电泳技术检测烹高油烟对大鼠肺Ⅱ型细胞的细胞毒性和ＤＮＡ的损伤。结果;在受试剂量范围内,烹调油烟颗粒提取物具有细胞毒性,可致ＤＮＡ交联及断裂的作用随染毒剂量的增加而增强,并存在剂量－反应关系。     

烹调油烟对大鼠肺细胞的DNA损伤机制

目的：以大鼠肺Ⅱ型细胞为靶细胞,检测烹调油烟的细胞毒作用和对细胞ＤＮＡ的损伤。方法：烹调油烟颗粒提取物对大鼠肺Ⅱ型细胞染毒２４ｈ后,应用ＭＴＴ法、溴乙锭荧光法以及单细胞凝胶电泳技术检测烹调油烟对大鼠肺Ⅱ型细胞的细胞毒性和ＤＮＡ的损伤。结果：在受试剂量范围内,烹调油烟颗粒提取物具有细胞毒性,可致ＤＮＡ交联及断裂的作用随染毒剂量的增加而增强,并存在剂量－反应关系（ｒ细胞毒性＝－０．９４８,Ｐ＜０．０１;ｒ交联＝０．９７６,Ｐ＜０．０１;ｒ断裂＝０．９５７,Ｐ＜０．０１）。结论：烹调油烟颗粒提取物对大鼠肺Ⅱ型细胞具有细胞毒性作用和ＤＮＡ损伤作用,可使ＤＮＡ链间交联和ＤＮＡ单链断裂。     

硫辛酸对细胞DNA损伤保护作用的初步研究

目的:用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)研究不同浓度过氧化氢(H2O2)分别作用于HepG2细胞2 h后DNA损伤的剂量效应关系,同时观察硫辛酸对H2O2损伤细胞DNA的保护作用. 方法: 将细胞分为对照组、损伤组和保护组,依次加入不同浓度的H2O2及硫辛酸,应用SCGE检测H2O2引起细胞DNA损伤. 结果: 随着H2O2浓度的增加,细胞DNA的损伤程度加重,能使尾长、尾部DNA百分含量和尾距显著增加(P《0.05). 硫辛酸能使H2O2损伤细胞的尾长、尾部DNA百分含量和尾距均较对照组减少(P《0.05). 结论: H2O2对细胞DNA损伤具有剂量效应关系,硫辛酸可以有效地减少H2O2引起的细胞DNA的断裂损伤.     

大鼠脑缺血再灌注后DNA单链断裂与XRCC1的表达变化

目的观察脑缺血再灌注损伤中XRCC1表达、DNA单链断裂,探索它们的关系.方法应用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型;免疫组化检测XRCC1蛋白表达;单细胞凝胶电泳检测细胞DNA单链断裂.结果基底节XRCC1在缺血再灌注10 min后即出现降低,1 h后整个大脑中动脉供血区XRCC1进一步下降,一直持续到48 h.单细胞凝胶电泳显示缺血再灌注10 min基底节区出现DNA单链断裂,12 h达到高峰,48 h仍有DNA单链断裂.结论在脑缺血再灌注中,XRCC1早期降低是DNA单链断裂无法修复的机制之一.     

单细胞电泳观察双氢青蒿素对K562细胞DNA的损伤作用

【目的】研究双氢青蒿素对人红白血病K562细胞DNA的损伤作用。【方法】体外培养人红白血病K562细胞,加不同浓度双氢青蒿素处理24 h后,MTT法测定IC50;用单细胞凝胶电泳技术观察双氢青蒿素对K562细胞DNA的损伤情况。【结果】双氢青蒿素处理细胞后,MTT检测IC50为8×10^-5mol/L;单细胞凝胶电泳显示双氢青蒿素作用24 h后可见明显的彗星状拖尾,而对照组细胞呈现明亮圆点。【结论】双氢青蒿素可抑制K562细胞的生长,对其DNA有致损效应。     

单细胞凝胶电泳检测烹调油烟对淋巴细胞DNA的损伤作用

目的　研究烹调油烟对体外和体内小鼠淋巴细胞DNA损伤作用。方法　采用单细胞凝胶电泳 ,检测细胞DNA单链断裂 ,观察在不同剂量及浓度下的DNA损伤情况。结果　以 10、50、10 0及 2 0 0 μg/L的油烟颗粒有机提取物染毒小鼠淋巴细胞 ,各剂量组均可引起小鼠淋巴细胞DNA损伤。以 10、2 0、4 0mg/m3的烹调油烟染毒小鼠 ,也可引起小鼠体内淋巴细胞DNA损伤。烹调油烟引起的小鼠体外和体内淋巴细胞DNA损伤均存在剂量 -效应关系 ,且整体染毒显示存在时间 -效应关系。结论　一定剂量的烹调油烟能引起小鼠淋巴细胞DNA损伤     

1800MHz电磁波辐射对大鼠外周血细胞DNA的损伤作用

目的探测1800MHz电磁波照射大鼠后对其外周血细胞DNA的损伤效应．方法72只Wistar大鼠随机分为4组（2个实验组和各自的对照组）．实验组大鼠在功率密度分别为0．5mW／cm^2（实验Ⅰ组）和1．0mW／cm：（实验Ⅱ组）的1800MHz连续电磁场条件下照射，对照组进行虚拟暴露，每天12h，连续21d后，用单细胞凝胶电泳试验检测大鼠外周血细胞DNA的损伤情况．结果照射后，两个实验组大鼠外周血细胞拖尾面积均高于对照组（P〈0．05）．结论大鼠经模拟手机辐射强度1800MHz辐射后，大鼠外周血细胞DNA有一定的损伤．     

顺铂联合环磷酰胺化疗对卵巢癌患者外周血淋巴细胞DNA损伤的研究

目的 初步探讨顺铂联合环磷酰胺（ＰＣ）化疗对卵巢癌患者外周血淋巴细胞ＤＮＡ的损伤情况,为其临床用药方式提供理论依据。方法 采用单细胞凝胶电泳技术（ＳＣＧＥ）检测３１例卵巢癌患者外周血淋巴细胞ＤＮＡ损伤状况。结果 化疗前的卵巢癌患者外周血淋巴细胞ＤＮＡ断裂所形成的彗星出现率及彗星样尾长与对照人群相比,相差无显著性;经联合化疗后的卵巢癌患者比化疗前及对照组的彗星出现率明显增加,彗星样尾长明显加长,分别     

彗星试验检测武汉市氯化饮水有机提取物对HepG2 DNA的损伤

目的 研究武汉市主要水源C江、D湖、H水的氯化饮水有机提取物对HepG2 DNA的损伤。方法 氯化饮水有机提取物染毒HepG2后，用单细胞凝胶电泳(亦称彗星试验)检测DNA损伤。结果 氯化饮水有机提取物诱导DNA损伤的最低浓度，C江、D湖、H水丰水期(8月份)均为1．67ml/ml培养液，平水期(3月份)分别为167、16．7、1．67ml/ml培养液；最高浓度(167ml/ml培养液)氯化饮水有机提取物诱导的HepG2 DNA迁移度，C江、D湖的丰水期均明显高于平水期(均P＜0．05)；最高浓度氯化饮水有机提取物诱导HepG2DNA损伤的强度，H水＞D湖和C江(均P＜0．01)。结论 武汉市主要水源C江、D湖、H水的氯化饮水有机提取物对HepG2 DNA有损伤作用，损伤作用的严重程度H水＞D湖＞C江，丰水期＞平水期。     

应用单细胞凝胶电泳检测大鼠死后脾细胞核DNA降解与死亡时间的关系

目的:探讨应用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)检测大鼠死后脾细胞核DNA降解与死亡时间的一般规律,为早期死亡时间的推断提供新的方法。方法:建立大鼠死亡模型,在死后27h内,每隔3h取脾组织样本进行单细胞凝胶电泳,用共聚焦显微镜摄取彗星图像,应用彗星图像分析软件(IMI1.0)进行图像分析,并作统计学分析。结果:大鼠死后,脾细胞在电泳图像上出现了明显的彗星形拖尾,其尾长(TL)、尾矩(TM)在一定的时间范围内(0～15h)随死亡时间的延长而逐渐增大,二者均与死亡时间(PMI)呈现一定的相关回归关系。结果:单细胞凝胶电泳技术可应用于早期死亡时间的推断;彗星图像分析软件为SCGE的结果分析提供了便利。     

Oxidative damage to DNA and its relationship with diabetic complications

Objective To detect the oxidative DNA damage in diabetic patients and to investigate the relationship of oxidative DNA damage with diabetes and diabetic nephropathy. Methods Single cell gel electrophoresis （SCGE） was used to detect the DNA strand breaks in peripheral blood lymphocytes, and oxidative DNA damage product and serum 8-OHdG were determined by a competitive ELISA in 47 cases, including 25 patients without diabetic complications, 22 patients with diabetic nephropathy and 25 normal control subjects. Results Diabetic patients showed greater oxidative damage to DNA. The percentage of comet cells and the length of DNA migration （comet tail length） of peripheral blood lymphocytes were significantly increased in patients with diabetes, and significantly higher in patients with diabetic nephropathy than in diabetic patients without vascular complications （P〈0.05）. There was a significant increase in serum 8-OHdG in diabetic patients compared with normal subjects （P〈0.05）. Moreover, serum 8-OHdG was much higher in patients with diabetic nephropathy than in diabetic patients without vascular complications （P〈0.05）. Coneluslon There is severe oxidative DNA damage in diabetic patients. Enhanced oxidative stress may be associated with diabetes, especially in patients with diabetic nephropathy.     

槲皮素对长波紫外线引起表皮癌细胞DNA损伤的预防作用

目的观察长波紫外线引起人表皮癌细胞DNA链断裂损伤的情况,以及槲皮素对这种损伤的预防作用。方法用长波紫外线照射细胞,用单细胞凝胶电泳法检测DNA损伤。结果长波紫外线剂量依赖性地诱发表皮癌细胞的DNA链断裂损伤,损伤的高峰出现在照射1 h。表现为慧星细胞百分比的降低和彗星尾巴长度的缩短,并有量效关系。结论槲皮素可以预防长波紫外线照射引起的皮肤癌细胞DNA链断裂损伤。     

单细胞碱性凝胶电泳用于检测小鼠胸腺细胞DNA链断裂

目的 引进单细胞凝胶电泳(SCGE)实验方法,用以检测小鼠胸腺细胞DNA链断裂。方法 载有经紫外线和H2O2作用过的胸腺细胞和凝胶的玻片首先在pH10的弱碱性裂解液中作用1h,在电泳缓冲液中解旋30min,电泳30min,胸腺细胞核用20mg／L的EB染色5min,用荧光显微镜和显微细胞图像分析系统观察和分析H2O2和紫外线在体外条件下对正常胸腺细胞的DNA损伤作用。结果 紫外线和不同浓度H2O20．001、0．01、0．1、1．0mmoL／L均可导致小鼠胸腺细胞DNA损伤,且随着H2O2浓度的增加DNA损伤逐渐加重。结论 SCGE可用于检测小鼠胸腺细胞DNA链断裂,使用这一实验方法成功地检测出H2O2和紫外线引起的胸腺细胞DNA损伤。     

SCGE和染色体畸变分析用于遗传毒性检测的比较

目的 比较单细胞凝胶电泳技术(SCGE)和染色体畸变分析(CA)在遗传毒性检测中的灵敏性. 方法48只小鼠分为4组,3个实验组小鼠分别用不同剂量(0.5,1,2mg/kg)的丝裂霉素C(MMC)进行一次性腹腔注射,对照组小鼠注射等体积生理盐水,分别用SOGE和CA对小鼠骨髓细胞的遗传损伤进行检测.结果采用SCGE方法检测,三个MMC剂量组的小鼠骨髓细胞拖尾率与平均尾长均高于对照组,差异有统计学意义;采用CA检测,只有2 mg/kg MMC组的畸变细胞率显著高于对照组(P<0.01).结论对于遗传毒性的检测,SCGE更为敏感,更适用于低剂量致变因子遗传毒性的检测分析.     

胭脂红对3T3细胞DNA损伤的SCGE检测

目的 研究人工合成偶氮类色素胭脂红对体外培养小鼠胚胎成纤维细胞株(NIH3T3)DNA的损伤作用.方法 单层培养的3T3细胞中加入不同浓度胭脂红培养4 h,用碱性单细胞凝胶电泳技术(single cell gel electrophoresis, SCGE)检测3T3细胞DNA的单链断裂(single-strand breaks,SSBs)情况.结果 各染毒组彗星细胞率、彗星细胞的尾长、尾部DNA含量及尾矩与胭脂红浓度正相关,呈剂量-反应关系.结论 胭脂红对体外培养3T3细胞DNA具有损伤作用,浓度越大,损伤越严重.     

利用单细胞凝胶技术估算淋巴细胞受照剂量

目的 明确γ射线照射致淋巴细胞DNA损伤的量效关系,拟合曲线方程。方法 采用聚苯乙烯凹槽单层铺胶后进行碱性单细胞凝胶电泳,观察γ射线外照射引起的人外周血淋巴细胞DNA损伤效应。应用IPP软件采集“彗星”尾长,利用SPSS软件进行数据分析和曲线拟合。结果 γ射线照射导致淋巴细胞DNA单链断裂,DNA断片电泳图像清晰。“彗星”尾长与照射剂量正相关(r=0.907,P<0.01),量效曲线的拟合方程为y=109.369319-40.258796x 13.636240x~2(P<0.001)。结论 一元二次方程可以很好反映淋巴细胞DNA断片迁移长度与γ射线照射剂量之间的量效曲线。