回药爱康方治疗中晚期肺癌机理探讨

肺癌又称原发性支气管肺癌,是原发于各支气管上皮的恶性肿瘤,是临床常见的恶性肿瘤之一,死亡率在恶性肿瘤中居首[1].     

回药爱康方治疗中晚期原发性肺癌30例效果评价

为评价回药爱康方对中晚期原发性肺癌的治疗效果,选择2006年10月至2008年12月宁夏医科大学中医门诊部收治的原发性支气管肺癌病人30例,口服回药爱康方3个月,观察患者主要症状变化、瘤灶稳定率、Kamofsky评分以及1年生存期.结果 ,治疗后患者主要症状明显改善,瘤灶稳定率为13.33%,Kamofsky评分提高稳定率为90.0%,0.5年生存率为83.3%,1年的生存率为67.7%;回药爱康方在改善肺癌患者主要症状、稳定病灶、提高患者生存质量以及延长生存期等方面有一定疗效.     

Lewis肺癌细胞小鼠KAI1基因表达受清金得生片影响的研究

目的:研究清金得生片对Lewis肺癌细胞小鼠KAI1基因表达的影响。方法:按8.1 g·kg-1·d-1剂量的清金得生片灌胃接种了Lewis肺癌细胞的小鼠,并设立模型对照组及正常对照组;采用荧光定量PCR技术检测小鼠KAI1基因的表达,观察KAI1基因表达受清金得生片的影响。结果:KAI1基因在肿瘤组织中的表达显著低于正常肺组织及癌旁组织。结论:清金得生片抗肿瘤作用可能与其上调KAI1基因的表达有关。     

益气除痰方对小鼠Lewis肺癌细胞凋亡形态学的影响

[目的]探讨益气除痰方对C57BL/6J小鼠Lewis肺癌细胞凋亡形态学的影响.[方法]选用C57BL/6J小鼠,随机分成中药组(益气除痰方组,剂量为27.3 g·kg-1·d-1)、顺铂组(剂量为1 mg· kg-1·d-1)、联合组(中药联合顺铂)、模型组,采用右腋部皮下接种Lewis肺癌细胞株法造模;采用流式细胞术测定各组小鼠Lewis肺癌细胞的凋亡率及通过透射电镜观察Lewis肺癌细胞超微结构的变化.[结果]中药组、顺铂组、联合组的细胞凋亡率均显著升高,与模型组比较差异有统计学意义(P＜0.01或P＜0.001);中药组、顺铂组、联合组在透射电镜下均可观察到Lewis肺癌细胞呈现早期凋亡形态.[结论]益气除痰方治疗肺癌的作用与诱导肺癌细胞凋亡有关.     

补中益气汤含药血清对Lewis肺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的：观察补中益气汤含药血清对Lewis肺癌细胞增殖的抑制作用及其对细胞凋亡的影响,探讨补中益气汤治疗肿瘤的机制。方法：以补中益气汤给大鼠灌胃,腹主动脉采血并制备血清。MTT法检测含药血清对肺癌细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪测定肺癌细胞细胞凋亡。结果：补中益气汤不同浓度含药血清组与空白对照组比较均可明显抑制肺癌细胞体外增殖,差异有统计学意义（ P<0.05）;补中益气汤不同浓度含药血清组Lewis肺癌细胞凋亡率与空白对照组比较,明显升高,且随着含药血清浓度的增加,细胞凋亡率明显上升,具有浓度依赖性。结论：补中益气汤含药血清对肺癌细胞体外增殖有明显的抑制作用,且可促进肿瘤细胞凋亡。     

CXCR4阳性Lewis肺癌细胞具有促发新生血管形成的特征

目的 研究CXCR4阳性Lewis肺癌细胞(LLC)在新生血管形成时的始动作用.方法 激光共聚焦检测LLC细胞系中CXCR4抗原表达情况,观察小鼠移植瘤组织内CXCR4阳性LLC与新生血管的毗邻关系;以CXCR4作为磁珠分选细胞的表面标志,检测CXCR4阳性和阴性LLC中VEGF、MMP9 mRNA表达情况,同时免疫组化检测两亚群细胞移植瘤中VEGF、MMP9以及CD31表达情况.结果 CXCR4阳性LLC多毗邻内皮细胞,周围形成血管样结构;CXCR4阳性LLC的VEGF mRNA表达(0.439 8±0.059)明显高于CXCR4阴性LLC (0.289 9±0.003 1)(P＜0.01);CXCR4阳性LLC的MMP9 mRNA表达(0.622 3±0.013 6)明显高于CXCR4阴性LLC(0.579 2±0.017 4)(P＜0.05);CXCR4阳性LLC移植瘤组织MVD(56.87±4.83)明显高于CXCR4阴性LLC移植瘤(43.52±4.91)(P＜0.01). 结论 LLC中的CXCR4阳性亚群具有更强上调VEGF、MMP9表达的能力,具有促发新生血管形成的特征.     

HA14-1诱导小鼠Lewis肺癌细胞凋亡的实验研究

目的 观察HA14-1是否有诱导体外小鼠Lewis肺癌(LLC)细胞凋亡作用.方法 将LLC细胞培养传代,细胞分为空白组和实验组,空白组只加培养液,实验组分别加入5种不同浓度的HA14-1(12.5,25,50,75,100 μmol/L),分别作用24,48,72 h,MTT法测定LLC细胞存活分数,流式细胞学方法测定LLC细胞凋亡情况、免疫组织化学方法测定LLC细胞Bcl-2蛋白的表达情况及HA14-1作用前后Bcl-2蛋白的表达情况.结果 两组细胞中,与空白组比较,不同浓度的HA14-1实验组作用LLC细胞后,细胞存活率随浓度增加和时间延长越来越低,细胞的凋亡率随着浓度的增加有增加趋势,其差异在统计学上有显著性意义(P<0.01);免疫组织化学结果显示LLC细胞高表达Bcl-2,且HA14-1作用后Bcl-2蛋白的表达减少.结论 HA14-1有促小鼠Lewis肺癌细胞凋亡的作用.     

间歇性缺氧小鼠血清外泌体对Lewis肺癌细胞上皮间充质转化及侵袭转移的影响

目的 探讨间歇性缺氧（IH）小鼠血清外泌体对Lewis肺癌细胞（LLC）上皮间充质转化（EMT）及侵袭转移的影响。方法 选用80只C57BL/6J雄性小鼠,7～8周龄,体重22～25 g,将体重相近的两只小鼠随机分为室内空气组（RA）和IH组,两组小鼠平均体重相差≤2 g,每组40只。IH组进行IH刺激,每个循环1 min,氧分压从（6±1）%/30 s到（21±1）%/30 s,12 h/d,连续4周。RA组小鼠饲养于普通笼子。从小鼠血清中提取外泌体;CCK-8法检测细胞活力;Transwell实验和细胞划痕实验检测细胞的侵袭和迁移能力;Western blot检测E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白和基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达水平。结果 小鼠血清外泌体孵育LLC细胞后,IH组的活细胞数高于RA组,差异有高度统计学意义（P <0.01）;IH组细胞侵袭和迁移能力高于RA组,差异有高度统计学意义（P <0.01）;IH组E-钙黏蛋白表达水平低于RA组,差异有统计学意义（P <0.05）;IH组N-钙黏蛋白表达水平高于RA组,差异有统计学意义（P <0.05）;...     

拓扑异构酶Ⅰ抑制剂对小鼠Lewis肺癌细胞杀伤和诱导凋亡作用的研究

目的观察拓扑异构酶Ⅰ抑制剂（拓扑替康，TPT）对小鼠Lewis肺癌细胞杀伤和诱导凋亡作用。方法采用MTT法、AnnexinV染色、梯状DNA电泳与细胞形态学观察等方法分析TPT对小鼠Lewis肺癌细胞的杀伤作用、凋亡作用，分析靶细胞杀伤、凋亡作用与Caspase的关系。结果TPT对靶细胞株具有较强的杀伤作用，而且具有明显的时间依赖性，同时，靶细胞出现凋亡表现。Caspase酶特异性抑制剂对凋亡具有一定的影响。结论唧对小鼠Lewis肺癌细胞具有较强的杀伤和诱导凋亡作用，其机理可能涉及到Caspase-8、Caspase-3的有序性活化。     

抗癌膏穴位贴敷抗肺癌作用机制的研究

目的：观察抗癌膏穴位贴敷抗肺癌的作用机制。方法：用C57BL／6近交系小鼠，瘤细胞悬液皮下接种法建摸。建模次日开始穴位贴敷治疗，隔日治疗1次，共治疗5次。末次治疗24h后，处死小鼠，测定癌细胞周期、脾淋巴细胞转化率和NK细胞活性。结果：抗癌膏穴位贴敷能使癌细胞G0／G1期细胞比例增多，S期细胞比例减少，细胞增殖指数下降；抗癌膏穴位贴敷对荷瘤鼠脾淋巴细胞转化率和NK细胞活性无显著影响。结论：抗癌膏穴位贴敷的抗癌作用是通过抑制癌细胞的增殖来实现的。     

Sca-1+Lewis肺癌细胞成瘤实验的研究

目的 探讨小鼠Lewis肺癌(Lewis lung carcinoma, LLC)细胞株中Sca-1 细胞的成瘤特性.方法 以Sca-1作为磁珠分选细胞的表面标志,从LLC细胞中分离Sca-1 细胞,流式细胞仪鉴定分离的纯度.将分选的Sca-1 细胞、Sca-1-细胞及未分选细胞分别以1×106、5×105、1×105、5×104、2×104密度接种于C57BL/6小鼠腋窝下,观察成瘤时间,4 周后处死小鼠,统计成瘤率、平均瘤重及体积.结果 分选前Sca-1阳性细胞百分比为(8.06±1.03)%,分选后Sca-1阳性细胞百分比为(93.92±1.07)%.Sca-1 细胞组在2×104个细胞时可以成瘤,而Sca-1-细胞组最少需要5×105个细胞.相同接种量(1×106),4周后处死小鼠,Sca-1 细胞组的瘤重及体积均大于Sca-1-细胞组(P<0.01).结论 Sca-1 细胞的成瘤性较Sca-1-细胞强.     

经纤维支气管镜局部加全身化疗治疗晚期非小细胞肺癌

目的 探讨经纤维支气管镜局部加全身静脉化疗治疗晚期非小细胞肺癌的疗效。 方法 42例经病理学或细胞学证实的晚期非小细胞肺癌患者,随机分为对照组和治疗组各21例。对照组采用NP方案(长春瑞宾加顺铂)化疗,治疗组在使用NP方案化疗的基础上,采用Olympus BF型纤维支气管镜及配套的NM-3K型注射针注入长春瑞宾10mg至瘤体中央及周围。 结果 对照组21例中,完全缓解3例(14.3％),部分缓解7例(33.3％),无变化11例(52.4％),有效率47.4％;治疗组21例中,完全缓解7例(33.3％),部分缓解10例(47.6％),无变化4例(19.1％),有效率80.9％,二组治疗有效率有显著性差异(P<0.05)。1年生存率治疗组为66.7％,对照组为31.3％,治疗组明显高于对照组(P<0.05)。 结论 经纤维支气管镜局部加全身静脉化疗治疗晚期非小细胞肺癌,能使瘤体缩小或消失,且能明显缓解患者临床症状,提高近期临床疗效及生存率,是一种有效的姑息治疗方法。     

用循证医学方法规范晚期非小细胞肺癌的化疗

目的：本文旨在评价用循证医学方法治疗晚期非小细胞肺癌的生存情况及探讨影响晚期肺癌生存和预后的因素。方法：回顾性总结我院2006年1月-2009年6月间收治的120例经病理或细胞学检查确诊的Ⅲb-Ⅳ期初治患者与1999年1月-2005年12月收治的122例经病理或细胞学检查确诊的Ⅲb-Ⅳ期初治患者进行比较,评价其1、2年生存率并进行影响生存和预后的单因素及多因素分析。结果：从症状缓解率和近期总有效率来看,对照组症状缓解率39.3%、近期总有效率27.9%,观察组症状缓解率67.5%、近期总有效率44.2%,两者比较差异有统计学意义;对照组疾病进展时间（TTP）3.5个月,无疾病进展生存期（PFS）2.7个月,中位生存期（MST）7.6个月,1年生存率21.3%,2年生存率9.0%;观察组疾病进展时间为4.7个月,无疾病进展生存期3.2个月,中位生存期12.4个月,1年生存率49.2%,2年生存率18.3%;两组1、2年生存率及中位生存期比较差异有统计学意义,其他比较差异无统计学意义。结论：经临床研究证实,通过应用循证医学方法规范治疗晚期非小细胞肺癌使近期有效率明显提高,生活质量明显得到改善,达到提高治愈率、延长生存期的目的。     

激光共聚焦显微镜观察FITC-Annexin V/PI双染色法检测人肺癌细胞凋亡

目的激光共聚焦显微镜观察FITC-Annexin V／PI双染色法检测人肺癌细胞凋亡的形态。方法对不同剂量含药血清处理的体外培养人肺癌PGLH7细胞株进行Annexin V／PI双染,激光共聚焦显徽镜观察细胞凋亡的形态特征。结果Annexin V／PI双染色法加激光共聚焦显微镜观察,经含药血清作用的人肺癌细胞ee,凋亡早期细胞呈AnnexinV高染而PI低染,细胞膜呈绿色而细胞核不着色;凋亡中、晚期细胞则AnnexinV和PI均为高染,细胞膜呈绿色而细胞核呈红色;部分细胞的核呈碎片状或梅花状,为典型的细胞凋亡形态。结论FITC—AnnexinV／PI双染色法加激光共聚焦显微镜观察凋亡细胞是目前观察凋亡的理想方法,特别适用于凋亡细胞的早期检测。     

不同肺癌细胞迁移和粘附能力的比较研究

目的 研究和比较不同肺癌细胞移植、粘附等生物学行为,探讨肿瘤细胞的转移机制。方法 将4株肺癌细胞培养在含10％热灭活小牛血清、青霉素（100U／ml）和链霉素（100μg/ml）、37℃、5％CO2下的RPMI1640培液中,然后按Dean Sheppard方法测定细胞的粘附能力;用划痕法和琼脂滴法测定细胞迁移能力;同时测定各肺癌细胞的铺展、软琼脂集落形成能力、梯形DNA和细胞生长曲线。结果 95C的迁移能力、细胞铺展率和增殖率最高,95D、A4次之,H460最弱;95D的粘附能力最强,其次为95C、A4、H460的粘附率最低。只有H460出现较强的梯形DNA;各株细胞软琼脂集落形成能力无显著差异。结论 不同肺部细胞移植和粘附能力存在差异。提示肺癌细胞的转移能力可能与其生物学行为有关。     

反义Cyclin B1提高Lewis肺癌细胞对健择化学敏感性的体内外研究

目的研究CyclinB1反义全长cDNA(AS-CLB1)对小鼠Lewis肺癌细胞(LL/2)化疗敏感性的影响,为将该方法联合健择化疗用于非小细胞肺癌的治疗提供实验依据。方法通过流式细胞术检测LL/2亲本(LP),LL/2空载体(LV)及LL/2/AS-CLB1(LA)细胞的凋亡及细胞周期分布。用健择(20nmol/L～20μmol/L)处理上述三种细胞,分别于1h及24h后用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法评估健择对各组细胞的体外杀伤作用。将上述三种细胞分别接种C57BL/6小鼠,成瘤后用健择〔25～125mg/(kg·d)〕处理各组动物,3d1次,一共4次,观察细胞在体内的成瘤性及动物的生存时间,并用流式细胞仪检测各组动物肿瘤组织的细胞凋亡。结果LA细胞较对照(LP和LV细胞)出现了明显的G1期阻滞及凋亡;健择对LA细胞的体外杀伤作用显著增强;在LA细胞组,细胞的成瘤性明显下降,该组动物肿瘤组织的细胞凋亡明显增加,动物的生存时间也显著延长。结论AS-CLB1可以明显增强LL/2细胞体内外对健择的化学敏感性,其作用可能与AS-CLB1诱导细胞发生G1期阻滞及凋亡,从而增强了健择的抗肿瘤作用有关。     

美洲大蠊提取物对Lewis肺癌小鼠抑瘤作用的研究

目的探讨美洲大蠊提取物对Lewis肺癌小鼠抑制效应及其作用机制．方法Lewis肺癌小鼠分为生理盐水组、美洲大蠊提取物高、低剂量组。检测各组小鼠的体重变化和抑瘤率，瘤组织HE染色观察病理学变化。应用流式细胞术进行瘤细胞DNA倍体分析．结果美洲大蠊提取物高、低剂量组体重没有生理盐水组增加明显。其抑瘤率分别为41．24％及81．08％；肿瘤组织HE染色发现：美洲大蠊提取物高、低剂量组较NS组瘤细胞坏死增多、瘤组织内及其周围微血管少见；流式细胞术检测美洲大蠊提取物能诱导肿瘤细胞凋亡，随着药物剂量的增高，其凋亡率也升高，并能影响肿瘤的细胞周期，肿瘤细胞S期及G2／M期细胞数大量减少，细胞被阻滞在G0／G1期．结论美洲大蠊提取物对Lewis肺癌小鼠瘤组织的生长具有一定的抑制作用，可促进肿瘤细胞凋亡．     

肺基底细胞样大细胞癌的临床病理学分析

目的 分析肺基底细胞样大细胞癌（BLCC）的临床病理学特征.方法 对2012年全年病理确诊的9例BLCC患者的临床病理学资料进行回顾性分析,并通过免疫组化方法检测HCK、P63、Syn、CgA、TTF-1等指标的表达情况.结果 9例BLCC占同期肺大细胞癌（LCC）的10.8％,占同期肺癌的0.6％.其中,男性8例,女性1例;平均年龄66.8岁;肿瘤最大径平均5.3 cm;影像学多表现为中央型.术前通过痰脱落细胞学、纤维支气管镜活检和肺穿刺活检三种手段,无1例确诊.9例患者均行手术切除.术后组织病理学9例均得以确诊,其中1例BLCC合并浸润性腺癌,3例发生淋巴结转移.结论 BLCC发病率低,是一种高度侵袭性的恶性肿瘤.BLCC的临床表现无特异性,确诊依靠病理学诊断.充分掌握BLCC独特的病理形态学特点和免疫组化表达特点,可显著提高BLCC的确诊率.