胎肌液生物效应系列研究(三)—有效成分理化特性初探

以前的实验证明,胎肌液(FME)可以在体外培养中保护CFU-GM活力,减轻细胞毒药物与物理损伤对其抑制作用。FME中具有这种保护效应的成分不明,本实验证明该成分是耐酸、耐碱、耐DNA酶的,但85℃和胰蛋白酶均可使之灭活,初步认为该成分可能是蛋白质。通过透析膜的透析处理,FME的保护效应可部分地降低而非完全消失,这一现象的意义尚不明。     

胎肌液生物效应系列研究(一)——体外抗细胞毒药物的效应

在CFU-GM培养体系中,加入细胞毒药物(阿糖胞苷、三尖杉酯碱)可抑制CFU-GM集落的产率。在一定时期用一定量的胎肌液进行处理,可减弱细胞毒药物的抑制作用,使CFU-GM产率增加。胎肌液的这种抗细胞毒效应似无药物的特异性,且与胎肌液浓度有一定关系。只有在进行CFU-GM培养前体系中存在胎肌液时,才呈现这种抗抑制效应。     

锂盐对小鼠骨髓粒系造血祖细胞增殖的刺激作用

采用小鼠骨髓细胞体外琼脂单层培养法,在直径30mm培养皿中加入CSF0.1ml,后加入不同浓度的碳酸锂溶液,在37℃恒温培养6天,显微镜下计数CFU—GM集落数量.结果表明,纯碳酸锂浓度在2.0～5.0mEq/L范围内,CFU-GM产率均有不同程度的增长,浓度为3.0mEq/L时,培养的细胞生长最好,为正常对照组产率的155.43％,P<0.01。     

神经生长因子对正常和放化疗复合损伤小鼠粒-巨噬系血发生的影响

目的 探讨神经生长因子(NGF)对小鼠粒-巨噬系血细胞发生的影响.方法 采用流式细胞术、祖细胞集落分析、血细胞计数、实时荧光定量PCR及酶联免疫吸附分析法(ELISA),检测注射NGF对正常和经60Coγ射线照射 腹腔注射环磷酰胺(放化疗复合损伤)小鼠骨髓细胞(BMC)增殖周期、粒-巨噬系祖细胞集落(CFU-GM)产率、外周白细胞总数、骨髓细胞粒-巨噬系集落刺激因子(GM-CSF)mRNA的表达及血清中GM-CSF和IL-3浓度的影响.并观察在体外培养体系中加入不同浓度的NGF时CFU-GM集落产率的变化及与GM-CSF的关系.结果 在体外CFU-GM培养中,加入重组小鼠GM-CSF (rmGM-CSF)时,NGF剂量依赖性地提高集落产率.注射NGF[7.5 μg/(kg·d)或10 μg/(kg·d)]持续7 d,正常和放化疗复合损伤小鼠外周血白细胞总数、小鼠骨髓细胞中S G2/M期细胞比例、CFU-GM集落产率显著高于注射生理盐水的对照组;放化疗复合伤小鼠血清中的GM-CSF和IL-3也显著升高.结论 NGF可与体外培养体系中的造血刺激因子协同作用,促进正常和放化疗复合损伤小鼠CFU-GM的形成.NGF在体内可促进正常和放化复合损伤小鼠骨髓细胞进入有丝分裂,促进造血干细胞向粒-巨噬系方向分化,促进CFU-GM的形成,提高外周血白细胞数;NGF还可刺激放化疗复合损伤小鼠体内GM-CSF和IL-3的分泌,这可能是NGF促进放化疗复合损伤后粒-巨噬系造血恢复的途径之一.     

Ⅱ型登革病毒对人骨髓造血细胞抑制机制的初步探讨

用Ⅱ型登革病毒(D_2 V)与人骨髓细胞混合培养48小时后,测定上清液中干扰素的浓度,发现D_2 V感染组的干扰素浓度明显高于空白对照组(P<0.001)。在骨髓CFU-GM培养中,加入D_2 V及抗γ-干扰素后,CFU-GM集落产率明显高于只加D_2 V而不加抗γ-干扰素组(P0.05)。实验研究结果提示D_2 V对人骨髓的抑制与免疫及体液因素有关。     

四氧嘧啶所致的糖尿病对大鼠CFU-GM产率的影响

本文观察到四氧嘧啶所致的糖尿病小鼠CFU-GM 产率降低,胰岛素治疗可使之部分恢复。胰岛素能直接提高扩散盒及体外培养中CFU-GM 产率,其在体外的作用与浓度有一定关系。在一定范围内高葡萄糖浓度可促进体外培养中CFU-GM 产率。     

二羧乙基锗三氧化物体外对正常人CFU—GM产率的影响

利用CFU-GM培养技术,探讨了Ge-132在体外对正常人CFU-GM产率的影响.结果表明,Ge-132在体外能显著增加CFU-GM产率,而且有效剂量范围大;去除贴壁细胞对Ge-132的造血刺激作用无明显影响,但除去T淋巴细胞,这种促进作用消失.把Ce-132直接加入无集落刺激活性(CSA)的培养体系中,未见集落生长.这些结果表明,Ge-132并非直接作用于粒-单祖细胞.     

正常和白血病小鼠骨髓细胞和脾细胞电泳及与PNA结合的某些特性

L_(801)粒系白血病小鼠骨髓细胞及脾细胞电泳率(EPM)均比相应的正常细胞为高。花生凝集素PNA能凝集正常LACA小鼠骨髓细胞,但不能凝集白血病细胞。本文还显示正常LACA小鼠骨髓细胞PNA凝集组的CFU-GM产率低于不凝集组。揭示LACA小鼠骨髓内能被PNA凝集的细胞中较成熟的细胞比较多。     

几种造血刺激剂拮抗干扰素对粒-单系祖细胞的抑制效应

本实验用C_(57)BL/6j小鼠CFU-GM集落形成的方法观察了三种CSF和氢化可的松、锂盐及硒盐对CFU-GM的影响及其对IFN的CFU-GM抑制作用的阻断作用。结果表明,三种CSF能部分拮抗IFN的CFU-GM抑制效应;微量的硒酸钠,碳酸锂均可刺激CFU-GM增殖,并使IFN200IU抑制的CFU-GM产率提高200％以上;微量的氢化可的松也能部分阻断IFN的CFU-GM抑制。     

人脐血粒-单系造血祖细胞冻存研究

目的:观察人脐血在不同温区保存时粒-单系造血祖细胞(CFU-GM)的损伤情况及有效地长期深低温保存的可行性。方法:采用传统的室温制备—程序降温—液氮保存方法,观察脐血造血细胞活力及 CFU-GM 产率。结果:在室温存放12 h 不受影响,而-8℃、-20℃温区存放12 h 其活力及产率下降,产率分别比冻存前减少了15.5%和38.1%,-30℃温区继续下降,而-80%温区未再进一步降低。液氮中不同时间-80℃保存不会进一步降低 CFU-GM 产率。结论:-8℃～-30℃之间是冻存损伤造血祖细胞主要的危险区,而液氮中长期深低温保存不会进一步损伤脐血造血祖细胞。故-80℃冻存脐血比较合适。