8-溴-7-甲氧基白杨素通过上调Bim诱导肺癌A549细胞凋亡

目的:探讨8-溴-7-甲氧基白杨素(BrMC)诱导人非小细胞肺癌A549细胞凋亡作用及分子机制。方法:流式细胞术(PI染色)分别检测白杨素及BrMC处理后的细胞凋亡。蛋白印迹法检测BrMC对Bim蛋白表达以及N-乙酰半胱氨酸对BrMC介导Bim表达的影响。siRNA沉默Bim基因后流式细胞仪检测BrMC对细胞凋亡影响。结果:BrMC对A549细胞的凋亡作用较白杨素更强。经BrMC(10μmol/L)处理后,Bim蛋白水平呈时间依赖性增加。siRNA干扰后,BrMC诱导的A549细胞凋亡率明显降低。结论:BrMC通过上调Bim诱导肺癌A549细胞的凋亡。     

8-溴-7-甲氧基白杨素增强三氧化二砷对白血病U937细胞毒性

目的:研究8-溴-7-甲氧基白杨素增强三氧化二砷(Arsenic Trioxide,ATO)对急性单核细胞白血病U937细胞毒性作用.方法:MTT比色法检测细胞毒性,流式细胞仪(FCM)测定细胞凋亡率,Western blot分析Bax和Bcl-XL蛋白表达.结果:2.0 ?M BrMC和ATO联合处理U937细胞的毒...     

8-溴-7-甲氧基白杨素诱导人肺癌（A549）细胞凋亡及其机制的探讨

目的观察8-溴-7-甲氧基白杨素（BrMChR）诱导人肺癌（A549）细胞凋亡作用,并探讨其与P53基因超甲基化的关系。方法以体外培养的A549细胞为研究对象。PI染色流式细胞术（FCM）分析细胞凋亡率;凝胶电泳观察BrMChR诱导基因DNA梯形条带;甲基化特异性PCR检测A549细胞P53基因甲基化状态及BrMChR对P53基因甲基化的影响。结果 PI染色FCM分析显示0.3,3.0和30.0μmol/L的BrMChR作用于A549细胞48h后,其凋亡率分别为（2.8±0.60）%、（5.1±0.11）%、（19.8±1.74）%,其中30.0μmol/L的BrMChR组的凋亡率明显高于空白对照组（P〈0.01）;琼脂糖凝胶电泳呈现典型＂梯形＂DNA条带;甲基化特异性PCR显示A549细胞P53基因呈现超甲基化状态,BrMchR能逆转P53基因超甲基化。结论 BrMchR具有诱导A549细胞凋亡的作用,其作用机制可能与其逆转P53基因超甲基化作用有关。     

8-溴-7-甲氧基白杨素对Huh-7细胞系肝癌干细胞样细胞自我更新的影响

目的:研究8-溴-7-甲氧基白杨素(BrMC)抑制源自人肝细胞癌Huh-7细胞系细胞肿瘤球形成细胞即肝癌干细胞样细胞(LCSLCs)自我更新作用。方法:体外培养人肝癌Huh-7细胞系细胞,干细胞条件培养基悬浮培养法富集和扩增LCSLCs。MTT比色法测定细胞活性;肿瘤球形成法检测自我更新能力;FITC-CD133标记FCM分析CD133表达。结果:干细胞条件培养基悬浮培养6天,Huh-7细胞形成非粘附、三维生长的肝癌球体细胞即LCSLCs。与Huh-7细胞相比,BrMC抑制LCSLCs细胞活性作用更强(P<0.05),并以浓度依赖性方式减少肿瘤球数目(P<0.05),降低CD133蛋白表达(P<0.05)。结论:干细胞条件培养基悬浮培养能分离和富集LC-SLCs;BrMC具有抑制LCSLCs细胞自我更新能力作用,其作用机制与降低干细胞标记物CD133蛋白的表达相关。     

8-硝基白杨素诱导结肠癌HT-29细胞凋亡

目的:观察8-硝基白杨素(NOChR)诱导人结肠癌HT-29细胞凋亡作用。方法:MTT比色法测定细胞增殖活性;流式细胞分析术检测细胞凋亡率;琼脂糖凝胶电泳观察DNA梯形条带。结果:NOChR抑制HT-29细胞活性,呈浓度依赖性,其IC50值为1.78μM;NOChR具有诱导HT-29细胞凋亡作用;PPARγ特异性阻断剂GW 9662能部分拮抗NOChR诱导HT-29细胞凋亡。结论:NOChR诱导HT-29细胞凋亡作用与其活化PPARγ相关。     

8-硝基白杨素诱导人结肠癌HT-29细胞凋亡

目的 观察8-硝基白杨素(NOChR)诱导人结肠癌HT-29细胞凋亡作用.方法 MTT比色法测定细胞增殖活性;流式细胞分析术检测细胞凋亡率;琼脂糖凝胶电泳观察DNA梯形条带.结果 NOChR抑制人结肠癌(HT-29)细胞增殖,呈浓度依赖性,其IC50值为1.78μM;NOChR具有诱导HT-29细胞凋亡作用;PPAR γ特异性阻断剂(GW9662)能有效拮抗NOChR诱导HT-29细胞凋亡作用.结论 NOChR诱导HT-29细胞凋亡作用与其活化PPAR γ相关.     

活性氧生成在8-硝基白杨素诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡中的作用

目的研究活性氧生成在8-硝基白杨素(NOC)诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡中的作用。方法体外培养SGC-7901细胞,采用流式细胞术分析细胞凋亡率,ELISA法检测细胞组蛋白/DNA碎片,H2DCFH-DA探针流式细胞仪检测细胞活性氧(ROS)生成。结果 NOC诱导亚G1峰(Sub-G1)细胞百分率增高和细胞组蛋白/DNA碎片增加(P<0.01),促进SGC-7901细胞活性氧生成(P<0.01)。抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)能有效对抗NOC诱导SGC-7901细胞凋亡作用。结论 NOC诱导SGC-7901细胞凋亡作用与促进活性氧生成相关。     

8-硝基白杨素诱导HL-60细胞生长抑制和凋亡

目的:研究8-硝基白杨素(8-nitrochyrsin,NOChR)对HL-60细胞生长和凋亡的影响。方法:MTT法检测HL-60细胞增殖活性;台盼蓝染色细胞计数法测定细胞存活率,绘制细胞生长曲线;PI染色流式细胞术分析细胞周期和凋亡率。结果:NOChR呈浓度依赖性对HL-60细胞增殖具有抑制作用;NOChR显著抑制HL-60细胞生长;PI染色流式细胞术结果表明以浓度依赖方式诱导HL-60细胞凋亡,且使细胞周期阻滞于G1期。结论:NOChR具有诱导HL-60细胞凋亡的作用,其机制可能与细胞周期G1期阻滞相关。     

8-硝基白杨素增强顺铂诱导人卵巢癌HO-8910细胞凋亡作用及其机制

目的探讨8-硝基白杨素(8-NOCHR)体外增强顺铂(DDP)诱导人卵巢癌HO-8910细胞凋亡的效应及其机制。方法采用MTT法检测8-NOCHR增强DDP对人卵巢癌HO-8910细胞增殖的影响,Western blot检测不同浓度8-NOCHR及DDP作用后HO-8910细胞P38MAPK和P-P38MAPK蛋白水平的表达情况;分光光度法分别检测8-NOCHR及DDP作用后HO-8910细胞GSH含量的变化以及Caspase-3活性的变化。结果 8-NOCHR能增强DDP对HO-8910细胞的诱导凋亡效果。各用药组P38MAPK、P-P38MAPK的表达均表现不同程度地增强(P<0.05),Caspase-3的活性表现不同程度增高(P<0.01),GSH含量不同程度降低(P<0.01)。结论 8-NOCHR能促进顺铂诱导HO-8910细胞的凋亡;8-NOCHR的化疗增敏作用与细胞内GSH的耗竭,Caspase-3活性增加,促进P38MAPK、P-P38MAPK蛋白表达有关。     

BrMC 对肿瘤相关巨噬细胞条件培养基诱导内皮细胞管结构形成的影响

目的：研究8-溴-7-甲氧基白杨素（BrMC）对肝癌干样细胞活化的 THP-1源性肿瘤相关巨噬细胞条件培养基诱导人脐静脉内皮 HUVEC-12细胞系细胞管结构形成的作用。方法：存在或缺失 BrMC 处理的SMMC-7721细胞系肝癌干样细胞条件培养基孵育 THP-1源性巨噬细胞。细胞免疫荧光检测 CD68和 CD163表达。ELISA 检测 IL-10和 IL-12浓度。内皮管结构形成试验测定相应处理的肿瘤相关巨噬细胞条件培养基对HUVEC-12细胞管结构形成的影响。结果：肿瘤相关巨噬细胞 CD163高水平表达,细胞因子分泌谱为 IL-10high/IL-12low。BrMC 降低肝癌干样细胞活化的肿瘤相关巨噬细胞条件培养基 VEGF 浓度,抑制其诱导 HUVEC-12细胞管结构形成作用。结论：BrMC 逆转肝癌干样细胞活化的肿瘤相关巨噬细胞条件培养基诱导 HUVEC-12细胞管结构形成,其机制涉及减少 VEGF 分泌。     

索拉菲尼与BrMC合用对SMMC-7721细胞系肝癌干细胞样细胞凋亡的影响

目的 :研究索拉菲尼(SO)、8-溴-7-甲氧基白杨素(Br MC)及两者合用对SMMC-7721细胞系肝癌干细胞样细胞凋亡的影响。方法 :不同浓度Br MC、SO及两者合用处理体外培养的SMMC-7721细胞系肝癌干细胞样细胞。流式细胞术测定细胞凋亡。Western blot分析NF-κB(p65)蛋白表达。结果 :SO(2.5μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、50μmol/L)与Br MC联合处理SMMC-7721细胞系球形成细胞24h,相比于SO单独用药和Br MC单独用药对照组,凋亡率显著增加,同时,NF-κB(p65)蛋白的表达明显下调。结论 :Br MC增强SO诱导SMMC-7721细胞系肝癌干细胞样细胞凋亡作用,其机制涉及下调NF-κB(p65)蛋白表达。     

白血病细胞固有活性氧水平与As2O3促凋亡作用的关系

目的 探讨白血病细胞株的基因固有活性氧(ROS)水平与细胞对三氧化二砷(As2O3)促凋亡作用的敏感性之间的关系。方法 用2μmol/L As2O3作用于四种髓系来源的人白血病细胞株(NB4、HL60、K562、U937)，证实As2O3促凋亡敏感性在四种细胞之间的差异。然后在不加As2O3情况下，用活性氧捕获剂双氢—乙酰乙酸二氯荧光黄(DCFH—DA)或双氢罗丹明123(DHR)捕获ROS，通过流式细胞仪检测细胞的ROS水平。结果 四种白血病细胞凋亡敏感性与ROS水平存在对应关系，由高到低的顺序为：NB4、HL60、KS62、U937。结论 白血病细胞固有的ROS水平与细胞对As2O3诱导凋亡的敏感性有关。     

5,7-二甲氧基黄酮诱导白细胞U937细胞凋亡

目的:研究5,7-二甲氧基黄酮(5,7-dimethoxyflavone,DMF)诱导人前单核细胞系U937细胞凋亡作用。方法:体外培养U937细胞,PI染色FCM分析Sub-G1细胞百分率;ELISA法检测细胞培养液组蛋白/DNA碎片、Caspase-9和Caspase-3活性。结果:DMF增高U937细胞Sub-G1百分率(P<0.05),呈浓度依赖性。DMF以浓度依赖方式刺激U937细胞组蛋白/DNA碎片渗漏(P<0.05)。DMF能有效诱导U937细胞Caspase-9和Caspase-3活化。结论:DMF诱导U937细胞凋亡作用与其激活线粒体途径相关。     

亚毒性浓度HNPG体外对X线照射人骨肉瘤Saos-2细胞增殖抑制的增敏作用及机制

目的：检测亚毒性浓度5-羟基-4’-硝基-7-丙酰氧基金雀异黄素（HNPG）体外X线照射对骨肉瘤Saos-2细胞增殖抑制的增敏作用及其可能分子生物学机制。方法：体外培养骨肉瘤Saos-2细胞,用MTT法检测亚毒性浓度HNPG体外对X线抑制Saos-2细胞增殖的增敏作用;用FCM检测亚毒性浓度HNPG体外对X线诱导Saos-2细胞凋亡、活性氧表达、膜电位变化的增敏作用;用ELISA检测亚毒性浓度HNPG体外对X线调节Saos-2细胞SOD、CAT、GSH和MDA的增敏作用;用Western blot检测亚毒性浓度HNPG体外对X线调节Saos-2细胞bcl-2、bax、cyt-c和cleaved-caspase-3蛋白的增敏作用。结果：亚毒性浓度HNPG体外可增强X线抑制Saos-2细胞增殖作用,提高X线诱导Saos-2细胞凋亡率,同时增强X线对Saos-2细胞SOD、CAT、GSH下调,促进MDA、ROS上调,增强线粒体膜电下降,与NS组、HNPG组和X线组比较组间差异有统计学意义（P＜0.05）;伴随着bax、cyt-c和cleaved-caspase-3蛋白表达上调,bcl-2蛋白表达降低,与NS组、HNPG组和X线组比较组间差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：亚毒性浓度HNPG在体外能增敏X线对骨肉瘤Saos-2细胞的增殖抑制作用,其机制可能与其促进X线调节细胞内SOD、CAT和GSH表达,上调活性氧含量,损伤线粒体内膜,诱导细胞线粒体途径凋亡相关。     

ADFMChR诱导人急性髓性白血病HL-60细胞分化

目的:研究5-烯丙基-7-二氟甲基白杨素(ADFMChR)诱导人急性髓性白血病HL-60细胞分化作用。方法:体外培养人急性髓性白血病HL-60细胞。瑞氏-吉姆萨染色法观察细胞分化的形态学改变;细胞免疫组织化学法和间接免疫荧光显微镜观察细胞表面分化抗原CD11b表达。结果:瑞氏-吉姆萨染色结果显示,ADFMChR诱导HL-60细胞发生分化成熟的形态学变化;细胞免疫组织化学显示ADFMChR增加HL-60细胞粒细胞系的特异性表面分化抗原CD11b的表达;间接免疫荧光显示经ADFMChR处理的HL-60细胞表面分化抗原CD11b表达增强,阳性表达率呈剂量依赖性升高。结论:ADFMChR具有诱导HL-60细胞分化的作用。     

柔红霉素诱导急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞凋亡的作用因素研究

目的探讨柔红霉素（DNR）致急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞株凋亡的作用因素。方法不同浓度（0、0．05、0．1、0．5、1μg／mL）DNR及N-乙酰半胱氨酸（NAC）预处理组作用于Jurkat细胞株,采用MTT法检测细胞活力,Hoechst／PI双染法观察细胞凋亡,流式细胞术检测细胞活性氧（ROS）浓度及凋亡,RT—PCR法检测bax、survivin、bcl-2和bcl—xl基因的表达。结果DNR可明显抑制Jurkat细胞株的活性,0、0．05、0．1、0．5、1μg／mL的DNR及NAC预处理组分别作用于Jurkat细胞株24h后,ROS水平分别为（7．98&#177;0．55）％、（8．88&#177;0．86）％、（9．46&#177;0．98）％、（17．48&#177;2．98）％、（24．46&#177;2．43）％和（11．59&#177;1．29）％,加入NAC后ROS生成受到抑制（P〈0．01）;细胞凋亡率分别为（11．41&#177;1．44）％、（34．96&#177;3．32）％、（45．58&#177;3．12）％、（84．19&#177;2．65）％、（87．93&#177;1．74）％和（80．47&#177;0．63）％,NAC预处理组与0．5μg／mL DNR组比较,细胞凋亡率变化无统计学意义（P〉0．05）。NAC抑制bax基因mRNA表达,上调survivin、bcl-2和bcl—xl表达（均P〈0．05）。结论DNR能够诱导Jurkat细胞株凋亡;ROS参与了DNR诱导的Jurkat细胞株凋亡;凋亡相关基因bax、bcl-2、bcl-xl及survivin能够与ROS相互作用,调节DNR诱导的Jurkat细胞株凋亡。