慢性乙型肝炎病毒感染者外周血单个核细胞中T-bet、GATA3和FoxP3 mRNA的表达及其意义

摘 要］ 目的：检测慢性乙型肝炎病毒感染者外周血单个核细胞(PBMCs)中T-bet、GATA3和FoxP3 mRNA的表达水平,探讨其对慢性HBV感染者病情转归的影响。方法：选择86例住院患者,根据慢性乙型肝炎防治指南诊断标准,共分为4组,包括慢性乙型肝炎（CHB）中度组患者33例、CHB重度组患者21例、重型肝炎组患者16例和乙型肝炎肝硬化组患者16例,另选取健康者10名作为对照组。采用RT-PCR法检测外周血单个核细胞T-bet、GATA3和FoxP3 mRNA的表达水平。结果：CHB中度、CHB重度、重型肝炎、肝硬化组患者和对照组研究对象PBMCs中T-bet的表达水平分别为0.597±0.094、0.724±0.071、0.860±0.060、0.528±0.059和0.514±0.071;CHB重度及重型肝炎组患者T-bet表达水平均高于对照组（P<0.05）;CHB中度组患者T-bet表达水平低于CHB重度组患者（P<0.05）;CHB重度组患者T-bet表达水平低于重型肝炎组患者（P<0.05）。CHB中度、CHB重度、重型肝炎、肝硬化组患者和对照组GATA3的表达水平分别为0.966±0.037、0.973±0.021、0.725±0.028、0.759±0.037和0.535±0.028;各组患者GATA3表达水平均高于对照组（P<0.05）;重型肝炎组患者GATA3表达水平低于CHB中、重度组患者（P<0.05）。CHB中度、CHB重度、重型肝炎、肝硬化组患者和对照组FoxP3的表达水平分别为0.935±0.034、0.919±0.047、0.804±0.021、0.984±0.060和0.772±0.083,除重型肝炎组患者外其他各组患者FoxP3表达水平均较对照组显著升高（P<0.05）;重型肝炎组患者FoxP3表达水平低于其他各组（P<0.05）。CHB中度、CHB重度、重型肝炎、肝硬化组患者和健康对照组T-bet/GATA3的表达分别为0.618±0.100、0.744±0.072、1.187±0.082、0.697±0.078和0.963±0.133,各组比值与健康对照组比较差异均有统计学意义（P<0.05）,CHB中度组患者T-bet/GATA3比值低于CHB重度组和重型肝炎组（P<0.05）;重型肝炎组患者T-bet/GATA3比值高于其他各组（P<0.05）。结论：随着肝病炎症的加剧,T-bet与GATA3的表达呈反方向变化,慢性HBV感染患者T-bet/GATA3比值与 FoxP3 mRNA表达呈显著负相关关系。     

白细胞介素22在HBV相关性肝病中的表达及意义

目的:探讨白细胞介素22在HBV相关性肝病中的表达及意义。方法:酶联免疫法检测30例慢性乙型肝炎无症状携带者(ASC)、40例慢性乙型肝炎活动期(CHB)患者、45例慢性乙型肝炎后肝硬化(LC)患者、30例原发性肝癌(HCC)患者、25例健康对照者外周血清中IL-22水平。分析IL-22与肿瘤标志物AFP的相关性。结果:CHB组、LC组、HCC组外周血IL-22水平均高于对照组(P=0.010、0.003、0.000)。外周血清IL-22水平与AFP之间无相关性。结论:IL-22可能在肝脏慢性纤维化、肝癌发生方面可能起一定作用。     

肝损伤患者外周血单个核细胞中白介素5 mRNA的表达及其临床意义

目的 探讨肝损伤患者外周血单个核细胞(PBMCs)中IL-5 mRNA的表达水平及其意义.方法 采用RT-PCR法检测64例肝损伤(36例慢性肝病、17例急性重型肝炎、11例原发性肝癌)患者和18例健康对照者(对照组)PBMCs中IL-5 mRNA的表达水平,并分析IL-5 mRNA表达与血清胆红素、内毒素血症及患者预后的关系.结果 慢性肝病、急性重型肝炎、原发性肝癌患者PBMCs中IL-5 mRNA的表达水平[分别为(0.1611±0.1035)、(0.2838±0.0537)和(0.3313±0.1348)均显著高于对照组(0.0223±0.0047),差异有统计学意义(P<0.01);而急性重型肝炎和原发性肝癌患者IL-5 mRNA表达水平亦显著高于慢性肝病患者,差异有统计学意义(P<0.01).64例肝损伤患者中,血清高胆红素(≥342 μmol/L)水平者PBMCs中IL-5 mRNA表达水平显著高于低胆红素(<342 μmol/L)水平者,内毒素(+)者IL-5 mRNA表达水平显著高于内毒素(-)者,死亡者IL-5 mRNA表达水平显著高于存活者,差异均有统计学意义(P<0.01).结论 检测PBMCs中IL-5 mRNA的表达水平,对于了解肝损伤患者的肝损害程度、早期诊断和预后具有重要的意义.     

Th17细胞在乙型肝炎病毒相关性肝病中的表达及意义

目的 探讨Th17细胞在乙型肝炎病毒(HBV)相关性肝病中的表达及相互关系.方法 收集慢性乙型肝炎(CHB)患者21例(CHB组)、HBV相关性肝硬化患者36例(LC组)及健康对照者20例(HC组).应用流式细胞术检测外周血Th17细胞频率;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血浆白细胞介素17(IL-17)水平;实时荧光定量PCR法检测肝组织中IL-17mRNA的表达;免疫组织化学染色检测肝脏组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达和分布.结果 LC和CHB组外周血单个核细胞(PB-MC)中Th17细胞频率、血浆IL-17水平均明显高于HC组(P＜0.01),且外周血中Th17频率与对应血浆IL-17水平呈正相关(r=0.430、0.660,P=0.009、0.001);LC组患者肝组织中IL-17 mRNA水平、α-SMA表达量均明显高于HC组(P＜0.01),且α-SMA的表达与肝脏炎症程度(r=0.602,P=0.014)和纤维化分期(r=0.506,P=0.045)呈正相关.结论 Th17细胞可能参与了HBV相关性肝硬化的发生和发展.     

乐山地区12082例女性人乳头瘤病毒感染及亚型分析

目的运用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测慢性乙型肝炎（CHB）患者循环血清中miRNA-122水平的相对表达量,分析其在CHB患者循环血清中的表达水平及与HBV DNA载量和CHB患者病情程度的相关性。方法选取2019年3月至2020年3月于我院就诊的100例CHB患者为研究对象,以25例乙肝病毒携带者、30例HBV相关性肝硬化代偿期患者、20例健康体检者为对照组研究对象,所有研究对象均采用qRT-PCR法检测miRNA-122表达水平的相对表达量。结果 CHB组患者循环血清中miRNA-122水平的相对表达量较健康体检组过表达,差异有统计学意义（P<0.01）;乙肝病毒携带者组血清miRNA-122水平的相对表达量较乙肝肝硬化组比较差异无统计学意义（P>0.05）;不同病情程度的CHB患者随病情加重,其miRNA-122水平相对表达量逐渐高表达,较乙肝病毒携带者组比较差异有统计学意义（F=249.25,P<0.01）;乙肝携带者组、CHB组及乙肝肝硬化组患者血清中miRNA-122表达水平与HBV DNA载量间均呈正相关系（r=0.323,P=0.031;r=0.484,P=0.000,r=0.179,P=0.033）;CHB患者血清中miRNA-122水平的相对表达量较HBsAg、HBeAg水平呈正相关系（r=0.335,P=0.000;r=0.314,P=0.000）;CHB患者血清中miRNA-122水平的相对表达量与HBsAb、HBeAb、HBcAb水平比较无相关性（r=0.123,P=0.141;r=0.167,P=0.450;r=0.019,P=0.821）;CHB患者血清中miRNA-122的表达水平与TBil、ALT水平呈正相关系（r=0.903,P=0.000;r=0.799,P=0.000）。结论CHB患者血清miRNA-122与HBV DNA载量、TBil、ALT水平关系密切,有助于CHB病情程度判定及抗HBV治疗终点时机选择与病情复发评估的指标之一。     

HBV感染慢性肝病患者体内microRNA-29表达水平及临床价值

【摘要】目的：评估微小RNA(microRNA)-29在乙型肝炎病毒(HBV)感染慢性肝病患者体内的表达水平及临床价值。方法：选取我院治疗170例HBV感染慢性肝病患者作为研究对象,根据临床诊断分为：慢性HBV携带(ASC)组35例、慢性乙型肝炎(CHB)组80例、乙型肝炎肝硬化(LC)组30例及肝癌(HCC)组25例,其中CHB组根据病情程度再分为轻度25例、中度30例、重度25例。另选择同期健康体检者30例作为对照组。实时荧光定量PCR法测定血清microRNA-29含量。应用Pearson相关分析血清microRNA-29表达水平与血清ALT、HBsAg、HBV DNA以及AFP水平的相关性。结果：各组患者血清microRNA-29相对表达量存在差异,HC组及ASC组&gt; CHB组&gt; LC组&gt;HCC组(P均&lt;0.05);在CHB组的三个亚组也存在差异,重度&gt;中度&gt;轻度(P均&lt;0.05)。应用Pearson相关分析,CHB组与LC组患者血清microRNA-29相对表达量与血清HBV DNA以及HBsAg水平呈负性相关(P均&lt;0.05);HCC组患者血清microRNA-29相对表达量与AFP血清水平呈负相关(r=-0.817,P=0.013);ASC组、CHB组、LC组及HCC组血清microRNA-29相对表达量与血清ALT水平均无相关关系(P均&gt;0.05)。结论：血清microRNA-29的表达水平与CHB的肝损伤及HCC发生有关。 【关键词】微小RNA-29;肝炎,乙型,慢性;临床价值     

HBV相关性肝病患者外周血PBMCs表面Tim-3、PD-1表达水平检测及意义

目的 分析乙型肝炎病毒（HBV）感染后相关肝病患者外周血单个核细胞（PBMCs）表面T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3（Tim-3）、程序性死亡受体-1（PD-1）表达水平变化及意义。方法 选取2017年 1～12月川北医学院附属医院HBV携带者20例,慢性乙型肝炎（CHB）患者30例,重型乙型肝炎患者20例,乙肝肝硬化患者30例,肝细胞癌患者20例,以同期20例健康体检者作为健康对照组。检测各研究对象外周血PBMCs表面Tim-3、PD-1表达水平。结果 PBMCs表面Tim-3、PD-1表达水平在健康对照组最低,与HBV携带组比较差异无统计学意义（P?>0.05）,随着病情加重,PBMCs表面Tim-3、PD-1表达水平逐渐升高,在重型乙型肝炎组、肝细胞癌组最高,各组患者PBMCs表面Tim-3、PD-1表达水平与健康对照组、HBV携带者组比较,差异有统计学意义（P?<0.05）;HBV感染患者PBMCs表面Tim-3、PD-1表达水平与HBV DNA载量呈负相关（r?=-0.431和-0.422,均P?<0.05）,与ALT、AST水平呈正相关（r?=0.214、0.325、0.234和0.354,均P?<0.05）;HBV感染患者总体PBMCs表面Tim-3的表达水平与PD-1表达量呈正相关（r?=0.967,P?<0.05）。结论 免疫负性调节因子Tim-3、PD-1与HBV相关性肝病患者肝组织炎症及纤维化发生相关,对Tim-3、PD-1水平调节可能为其临床免疫治疗提供新思路。     

HBV感染患者外周血T细胞PD-1基因表达水平的变化与意义

目的:分析HBV感染不同阶段患者外周血T淋巴细胞中PD-1(program death factor-1)分子的基因定量表达情况,探讨PD-1表达水平与血清学指标的相关性。方法:采集并筛选HLA-A2阳性的31例慢性乙型肝炎(CHB)患者、9例急性恢复期乙型肝炎患者(AHB)、15例乙肝相关性肝硬化患者(LC)和10例健康献血者的外周血,实时荧光定量PCR分析总T细胞内PD-1的mRNA水平,同时测定其配体PD-L1、PD-L2在外周血单个核细胞(PBMCs)中的表达量;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HBV血清标记物水平,荧光定量PCR检测血清HBV DNA载量,同时进行肝功能检测。结果:以各基因在正常对照组的定量表达水平为基础值,HBeAg阳性CHB组T细胞内PD-1和PBMCs内PD-L1的mRNA表达水平明显升高,与HBeAg阴性CHB组和AHB组比较均有显著性差异,但与LC组比较无统计学意义(P>0.05)。外周血PBMCs内PD-L2的mRNA水平在各实验组中无明显差异(P均>0.05)。在所有检测的CHB患者中,外周血T细胞内PD-1表达水平在高病毒载量组(HBV DNA≥107拷贝/ml)明显高于低病毒载量组(HBV DNA<107拷贝/ml)和正常对照组,且与血清HBV病毒载量成正相关(r=0.41,P<0.01),但与血清ALT水平无明显相关性。结论:外周血T细胞中PD-1基因水平在慢性乙型肝炎患者组,尤其是在HBeAg阳性组和高病毒载量组明显上调,提示T细胞高表达的PD-1可能通过与其配体PD-L1作用而抑制T细胞免疫应答,并导致病毒持续感染。     

乙肝相关疾病患者IL-6 、IL-8与血清HBVDNA、ALT分析

目的:探讨乙肝相关疾病患者血清中IL-6及IL-8水平变化及其与乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBVDNA)载量/血清谷丙转氨酶(ALT)的相关性.方法:采用ELISA法检测慢性乙型肝炎(CHB)29例、乙肝后肝硬化31例、原发性肝癌(PHC)33例患者及正常对照30例血清中IL-6、IL-8的水平;并采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测上述研究对象血清的HBVDNA的含量.结果:CHB、乙肝后肝硬化及PHC患者血清IL-6、IL-8水平均显著高于对照组(P<0.01),但3组之间比较无明显差异;HBVDNA的载量与IL-6(r=0.73)、IL-8(r=0.59)的含量呈正相关关系;ALT水平与IL-6(r=0.81)、IL-8(r=0.63)呈正相关关系.结论:乙肝相关疾病患者存在着免疫调节的紊乱,IL-6、IL-8在其中起着重要的作用,IL-6、IL-8与HBVDNA载量及ALT水平的相关关系提示其有望成为判断慢性肝病炎症变化和抗病毒治疗的新指标.     

Th22细胞、白细胞介素-22在乙型肝炎病毒相关原发性肝癌中的表达及意义

目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)相关原发性肝癌(HCC)患者Th22细胞以及特征性细胞因子白细胞介素(IL)-22表达水平的变化.方法 选择HBV-HCC患者(HCC组)32例,HBV-肝硬化(LC)患者(LC组)24例作为研究对象,采用流式细胞检测方法检测外周血Th22细胞的表达频数;同时选择15例健康者作为对照组.选择外科手术切除HBV-HCC、癌旁LC组织标本24份,采用免疫组化方法检测肝组织中IL-22的表达情况.结果 HCC组患者外周血Th22细胞表达频数为(6.95±2.73)%;LC组患者为(4.80±2.01)%;对照组为(1.74±0.94)%,3组间相比,差异有统计学意义(F=28.434,P=0.000);HCC组高于LC组和对照组(P=0.001、0.000);LC组患者高于对照组(P=0.000).HBV-HCC组织中IL-22表达阳性细胞数为(110.2±32.4)个/高倍视野;癌旁LC组织中为(61.3±22.4)个/高倍视野,差异有统计学意义(t=6.082,P=0.000).结论 Th22细胞及特征性细胞因子IL-22在HBV-HCC发生、发展过程中起到一定的作用.     

慢性HBV感染者外周血单个核细胞中miR-194-5p和MagT1表达水平检测及其意义

目的：检测慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染者外周血单个核细胞（PBMCs）中miR-194-5p和镁离子（Mg²⁺）转运蛋白1（MagT1）表达水平,阐明其可能的临床意义。方法：收集40例健康体检者（健康对照组）、40例HBV携带者（HBV携带组）、40例轻中度慢性乙型肝炎（轻中度CHB组）和40例重度慢性乙型肝炎（重度CHB组）患者的临床资料。采集各组研究对象外周血并利用Ficoll-Hypaque密度梯度离心法分离PBMCs,采用RT-PCR法检测各组研究对象PBMCs中miR-194-5p及MagT1 mRNA表达水平,Western blotting法检测各组研究对象PBMCs中MagT1蛋白表达水平,检测各组研究对象外周血和PBMCs中Mg⁺水平,流式细胞术检测各组研究对象PBMCs中CD8+T淋巴细胞表面分子程序性死亡受体1（PD-1）和自然杀伤细胞受体2群D分子（NKG2D）表达水平。在293T细胞中分别转染miR-194-5p mimic质粒（miR-194-5p mimic组）和miR-NC质粒（miR-NC组）,应用双荧光素酶报告基因实验检测2组293T细胞中荧光素酶活性。结果：与健康对照组比较,HBV携带组、轻中度CHB组和重度CHB组患者PBMCs中MagT1 mRNA和蛋白表达水平、Mg²⁺水平及CD8+T淋巴细胞表面分子NKG2D表达水平均明显降低（P<0.05）,miR-194-5p mRNA及CD8+T淋巴细胞表面分子PD-1表达水平升高（P<0.05）。与HBV携带组和轻中度CHB组比较,重度CHB组患者PBMCs中MagT1 mRNA和蛋白表达水平、Mg²⁺水平及CD8+T淋巴细胞表面分子NKG2D表达水平均降低（P<0.05）,miR-194-5p mRNA及CD8+T细胞表面分子PD-1表达水平降低（P<0.05）。与HBV携带组比较,轻中度CHB组患者PBMCs中MagT1 mRNA和蛋白表达水平、Mg²⁺水平及CD8+T淋巴细胞表面分子NKG2D表达水平降低（P<0.05）,miR-194-5p mRNA及CD8+T淋巴细胞表面分子PD-1表达水平升高（P<0.05）。双荧光素酶报告基因实验,MagT1是miR-194-5p靶基因。结论：miR-194-5p可能通过靶向下调MagT1表达,引起MagT1介导的Mg²⁺内流障碍,造成CD8+T淋巴细胞免疫活性降低,导致乙型肝炎慢性发展。     

乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群比例和Th1/Th2细胞因子水平检测及其临床意义

目的：研究各型乙型肝炎患者和健康者外周血T淋巴细胞亚群和Th1/Th2细胞因子水平变及其临床意义,为诊断、治疗疾病提供实验依据。方法：采用流式细胞仪检测34例乙型肝炎患者（其中慢性乙型肝炎中度组14例,慢性乙型肝炎重度组7例,重型乙型肝炎组8例,急性乙型肝炎组5例）和20例健康对照者(对照组)的外周血CD3+、CD4+和CD8+T细胞占淋巴细胞的比率;采用酶联免疫吸附技术（ELISA）夹心法检测研究对象血清中IL-2、IL-4及IFN-γ水平的变化。结果：对照组比较,急性乙型肝炎患者外周血CD3+、CD4+T淋巴细胞、血清IL-2、IFN-γ水平明显升高（P<0.05）;重型乙型肝炎患者CD3+、CD8+T淋巴细胞数量下降（P<0.05）,IFN-γ水平升高（P<0.05）;慢性乙型肝炎患者的IL-4和IFN-γ水平明显升高（P<0.05）。结论：Th1细胞因子在乙型肝炎病毒(HBV)感染的疾病发展中可能起一定的作用,HBV感染慢性化可能与Th2细胞因子增高有关。     

慢性乙型肝炎病毒感染者血清TNF-α和IFN-γ水平分析

目的：分析不同临床阶段的慢性HBV感染者血清TNF-α和IFN-γ水平差异,探讨其水平差异与慢性HBV感染结局的关系。方法：选择慢性乙型肝炎（CHB）87例,乙型肝炎肝硬化（LC）38例,HBV相关肝细胞癌（HCC）34例,应用ELISA法分别检测其血清IFN-γ和TNF-α水平。结果：在所观察的3组中,TNF-α水平均有明显升高,其中LC组和HCC组均显著高于CHB组（P〈0.001）,但LC组和HCC组间无显著性差异;而CHB、LC和HCC3组间血清IFN-γ水平无显著性差异（P=0.208）。结论：血清TNF-α水平可能与慢性HBV感染的结局相关,而IFN-γ水平与慢性HBV感染结局无明显相关性。     

CD137表达与慢性乙型肝炎患者肝脏免疫病理损伤程度的相关性研究

目的：：探讨CD137表达与慢性乙型肝炎( chronic hepatitis B,CHB)患者肝脏免疫病理损伤程度的相关性。方法：采用ELISA法检测受试者外周血中CD137L的水平;免疫荧光法检测肝组织中CD137的表达;Western blot法检测肝组织中CD137和CD28蛋白水平表达;荧光定量PCR检测肝组织中CD137和CD28 mRNA的表达。结果：重度CHB组患者血清CD137L的表达水平均明显高于健康对照组、轻度和中度CHB组患者(P<0.01)。肝组织中CD28 mRNA在中度CHB组和重度CHB组患者的表达水平均较健康对照组及轻度CHB组患者明显升高(P<0.01)。重度CHB组患者CD137 mRNA表达水平均较健康对照组、轻度CHB组和中度CHB组患者显著升高(P<0.01)。肝组织中CD28蛋白在中度CHB组和重度CHB组患者的表达水平均较健康对照组及轻度CHB组患者明显升高(P<0.01)。重度CHB组患者CD137蛋白表达水平均较健康对照组、轻度CHB组和中度CHB组患者中CD137蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。结论：CD137的活化参与CHB患者肝组织免疫病理损伤过程,与其损伤程度有相关性。     

不同HBV感染自然史状态及肝硬化患者抗-HBc水平及其临床意义

目的 研究慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染不同自然史状态及肝硬化患者血清乙型肝炎病毒核心抗体(抗-HBc)水平及其用于自然史状态区别诊断的临床价值.方法 纳入2015年3月至2016年6月就诊的慢性HBV感染患者160例,根据自然史状态分为免疫耐受组(n=43)、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)阳性慢性乙型肝炎(CHB)组(n=37)、非活动携带组(n=39)及HBeAg阴性CHB组(n=41),同时纳入HBeAg阳性(n=44)及阴性肝硬化患者(n=46).收集患者一般情况,检测血清乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、HBeAg、抗-HBc、HBV DNA载量及HBV基因型.分析抗-HBc与临床指标的相关性及其用于自然史状态区别诊断的价值.结果 不同自然史状态抗-HBc由高至低为:HBeAg阳性CHB组(4.22±0.68)log10 IU/mL、HBeAg阴性CHB组(3.89±0.88)log10 IU/mL、非活动携带组(3.07±0.68)log10 IU/mL及免疫耐受组(2.88±0.82)log10 IU/mL.HBeAg阳性及阴性肝硬化患者抗-HBc分别为(3.04±0.82)、(3.15±0.86)log10 IU/mL.HBeAg阳性CHB组抗-HBc与ALT(r=0.353,P=0.032)及AST(r=0.421,P=0.009)呈正相关;HBeAg阴性CHB组抗-HBc与HBV DNA(r=0.343,P=0.028)、ALT(r=0.458,P=0.003)及AST(r=0.495,P=0.001)呈正相关.抗-HBc区别诊断免疫耐受状态及HBeAg阳性CHB的AUC为0.903,区别非活动携带状态及HBeAg阴性CHB的AUC为0.833.结论 不同慢性HBV感染自然史状态下血清抗-HBc水平存在明显差异,且抗-HBc可用于慢性HBV感染自然史状态的区别诊断,诊断价值高于HBsAg水平.     

成纤维细胞激活蛋白与慢性乙型肝炎相关性肝病的关系

目的 通过比较乙型肝炎(乙肝)相关性肝癌、乙肝肝硬化以及慢性乙肝患者肝组织中成纤维细胞激活蛋白(FAP)水平,探讨FAP在乙肝相关性慢性肝脏疾病的表达差异及其意义.方法 收集47例乙肝相关性肝癌、29例乙肝肝硬化(S4期)、22例慢性乙肝(S1～S3期)及17例因良性病变行肝切除术的肝组织,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测其中FAP的表达情况;采用酶联免疫吸附(ELISA)方法检测组织及血清中FAP蛋白表达水平.结果 在肝癌、肝硬化、肝炎以及对照组肝组织中,FAP mRNA表达的差异倍数值分别是4.73±1.60、1.86±1.04、0.98±0.80及1.00±0.00,四者比较差异有统计学意义(F=7.156,P=0.000);ELISA结果显示FAP蛋白在肝癌患者组织中1μg总蛋白平均含量为(1 288.28±695.82) pg/mL,而肝硬化组织为(1 176.11±677.43) pg/mL,肝炎组织为(1 044.58±389.48) pg/mL,对照组为(848.70±540.74)pg/mL,差异有统计学意义(F=3.004,P=0.034).结论 FAP在肝炎、肝硬化、肝癌以及对照组的mRNA及蛋白表达水平存在差异,随着疾病的进展,FAP呈渐进性表达.     

慢性乙型肝炎患者外周血Th17/Treg和Th1免疫失衡研究

目的：探讨Th17、Treg和Th1细胞免疫失衡在慢性乙型肝炎（CHB）发病中的作用。方法：采用荧光定量PCR检测慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞（PBMCs）中Th17、Treg和Th1细胞的特异性转录因子RORC、Foxp3和T-bet的mRNA表达,ELISA分析CHB患者PBMCs培养上清液中白细胞介素（IL）-17、IL-21和血清IL-6、IL-1β的水平,PCR检测外周血HBV DNA;生化分析仪检测谷丙转氨酶（ALT）。结果：与正常对照组相比,CHB患者PBMCs中RORC mRNA、IL-17、IL-21水平明显升高（P〈0.01）;RORC mRNA与ALT呈正相关,与T-bet mRNA呈负相关;T-betmRNA与ALT呈负相关,外周血中IL-6、IL-1β水平也明显增高（P〈0.01）;Foxp3 mRNA与HBV DNA正相关。结论：Th17和Treg、Th1细胞免疫功能失衡与CHB病情密切相关。     

慢性肝病与HBVBCP变异、IL-10、IL-12、TNF-α及IFN-γ关系研究

目的：探讨不同临床类型慢性肝病与HBVBCP变异及IL-10、IL-12、TNF-α和IFN-γ关系。方法：以176例HBV感染慢性感染者（慢性乙型病毒性肝炎轻、中、重度,肝炎肝硬化,慢性重型肝炎和原发性肝癌）作为研究对象。采用PCR微板核酸杂交结合ELISA检测显示技术,对患者血清进行检测HBVBCP区核苷酸（nt）1762碱基A→T和1764G→A联合突变;采用双抗体夹心ELISA检测技术,检测IL-10、IL-12、TNF-α和IFN-γ水平。结果：BCP变异与不同临床类型肝病呈正相关（r=0.259,P=0.001）。IL-12、TNF-α和IFN-γ的水平除了慢性肝炎中度组外,其余各组与慢性肝炎轻度组间的比较有显著差异（P〈0.05）。而IL-10水平比较在慢性肝炎轻度组与其他组间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：BCP变异与慢性感染的不同临床类型呈正相关,随着病情的加重BCP变异的阳性率有随之增高趋势。IL-12、TNF-α和IFN-γ在HBV感染不同临床类型肝病中可能起到主要作用。