4—硒（代）硫酸酯多糖体外给药的免疫药理学研究

４－硒（代）硫酸酯多糖为一含硒有机化合物。体外实验发现，在一定剂量范围能显著增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬活性；促进ＣｏｎＡ、ＬＰＳ、ｒＩＬ－２诱导小鼠脾淋巴细胞增殖反应及双向混合淋巴细胞反应，但对静止淋巴细胞的增殖无刺激作用。     

4－硒（代）硫酸酯多糖体外给药的免疫药理学研究

４－硒（代）硫酸酯多糖为一含硒有机化合物。体外实验发现，在一定剂量范围能显著增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬活性；促进ＣｏｎＡ、ＬＰＳ、ｒＩＬ－２诱导小鼠脾淋巴细胞增殖反应及双向混合淋巴细胞反应，但对静止淋巴细胞的增殖无刺激作用。     

银耳多糖硫酸酯的合成及抗肿瘤作用的研究

目的 合成银耳多糖硫酸酯,考察其体内抗肿瘤活性.方法 采用氯磺酸-吡啶法合成银耳多糖硫酸酯,用肿瘤抑制率评价银耳多糖硫酸酯的抑瘤效果.结果 合成了3个银耳多糖硫酸酯S Ⅰ,SⅡ,SⅢ,硫取代度分别为0.89,0.95,0.99,高效液相色谱测定其相对分子质量分别为84 000,90 000,96 000,银耳多糖硫酸酯S Ⅰ和SⅢ在12 mg·kg-1时对小鼠淋巴瘤的抑制率为59.8%和69.9%,与对照组相比,经统计学处理有显著差异.结论银耳多糖硫酸酯为具有较强抗肿瘤活性的新结构多糖.     

不同硫取代度昆布多糖硫酸酯的合成及理化性质初步研究

目的:对昆布多糖进行不同硫取代度的硫酸酯化修饰,并对其产物的硫酸基含量、糖含量与分子量进行检测,为研究不同硫取代度昆布多糖硫酸酯的生物活性奠定物质基础。方法:采用氯磺酸-吡啶法对昆布多糖进行硫酸化修饰,通过改变硫酸化修饰条件,来制取不同硫酸基取代度的昆布多糖硫酸酯;利用盐酸水解-硫酸钡比浊法测定昆布多糖硫酸酯的硫酸基含量,并通过公式求得其硫取代度;用苯酚-硫酸法测定昆布多糖硫酸酯的多糖含量,并使用HPGPC法测定其分子量。结果:两种不同硫取代度昆布多糖硫酸酯的硫酸基含量分别为37.8%、45.92%,取代度分别为1.07、1.51,糖含量分别为44.52%、37.19%,分子量分别为13000、16000。结论:利用氯磺酸-吡啶法对昆布多糖进行硫酸酯化修饰,该方法可以获取不同取代度产物,酯化率高。     

正交试验优选白芨多糖硫酸酯化工艺的研究

目的优选白芨多糖硫酸酯化的最佳工艺。方法采用氯磺酸-吡啶法合成白芨多糖硫酸酯。以取代度和产物量为指标,采用L9(34)正交设计对试剂比例、反应温度和反应时间进行优选。结果吡啶和氯磺酸比例6∶1,反应温度85℃,反应时间2h为比较适宜的工艺条件。结论白芨多糖硫酸酯化优化的工艺条件方法可行,为进一步扩大试验提供了有价值的参数。     

正交试验优选党参多糖的硫酸化工艺研究

目的 优选党参多糖硫酸化工艺。方法 用氯磺酸-吡啶法对党参多糖进行硫酸化修饰,以取代度和产物得率为指标,用L9(34)正交试验对试剂配比、反应温度、反应时间进行优选,用氯化钡-明胶法测定硫酸基的取代度。结果 试剂配比和反应时间分别对产物得率和取代度的影响最大,氯磺酸与吡啶配比为1∶6时产物得率最高;反应时间为3 h时取代度最高,达1.83;各因素不同水平对产物得率和取代度的影响无显著差异。结论 综合考虑最适宜的修饰条件为氯磺酸与吡啶配比为1∶6、反应温度80 ℃、反应时间3 h。     

昆布多糖硫酸酯化及其结构研究

目的:对昆布多糖进行硫酸酯化,并对产物的纯度与结构进行分析,为研究其生物活性奠定物质基础.方法:利用氯磺酸-吡啶法对昆布多糖进行硫酸酯化,并使用HPLC-ELSD法测定反应产物的纯度与分子量;采用硫酸钡比浊法测定昆布多糖硫酸酯中SO2-4的含量,并利用波谱法研究其结构.结果:昆布多糖硫酸酯的纯度为96%,其分子量为16315,SO2-4含量为41.30%;紫外、红外光谱分析结果均显示硫酸酯化多糖的光谱特征,13C-NMR谱显示多糖的2位羟基为SO2-4的主要取代位置.结论:利用氯磺酸-吡啶法对昆布多糖进行硫酸酯化,该方法所得产物的纯度和酯化率高.     

肉苁蓉多糖的纯化及其对T细胞功能调节的研究

研究肉苁蓉主要成分之—─—多糖对小鼠胸腺T细胞的功能调节。方法：采用沉淀法获肉苁蓉粗多糖，以DEAE－SephadexA－50和SephacrylS－200柱层析，获得肉苁蓉多糖（CDPS）。再采用噻唑蓝比色法（MTT）观察CDPS对小鼠脾、胸腺淋巴细胞增殖反应的影响及对正常小鼠脾淋巴细胞分泌IL－2的影响。结果：CDPS纯化后经SephacrylS－200鉴定为单一对称峰。CDPS体外实验，在12．5～200μg／ml浓度范围内，有单独和协同ConA、PHA促进小鼠胸腺淋巴细胞增殖的作用（P＜0．01）。CDPS在100μg／ml浓度时，能显著提高小鼠脾淋巴细胞分泌IL－2的能力．其IL－2活性明显高于对照组（P＜0．01）。结论：肉苁蓉多糖能增加小鼠脾、胸腺淋巴细胞的增殖反应，且与ConA、PHA有协同刺激小鼠胸腺淋巴细胞增殖的作用；并能显著提高小鼠脾脏T淋巴细胞分泌IL－2。     

淫羊藿多糖硫酸化修饰条件的优化

目的 优化淫羊藿多糖硫酸化修饰的最佳条件.方法 采用氯磺酸-吡啶法.以硫酸基取代度和糖的质量分数为指标,采用L9(34)正交试验对反应温度、试剂配比和反应时间进行优选.结果 反应温度对修饰的影响最大,适宜的修饰条件为反应温度80℃,氯磺酸与吡啶的体积比在1:8～1:10,反应时间2～3h.结论 采用优化的条件对淫羊藿多糖进行硫酸化修饰可以获得理想的硫酸化淫羊藿多糖.     

正交实验优选土茯苓多糖的硫酸化工艺研究及修饰产物抗肿瘤活性测定

【目的】优选土茯苓多糖硫酸化修饰的最佳条件,探讨硫酸化修饰提高土茯苓多糖活性的可能性。【方法】采用氯磺酸—吡啶法对纯化的土茯苓多糖进行硫酸化修饰,以产率、硫酸基取代度、糖含量作为考察指标,用L9(34)正交实验设计对反应时间、反应温度和氯磺酸—吡啶配比3个因素进行优化,用氯化钡—明胶法测定硫酸基的取代度(DS),用硫酸—苯酚法测定糖含量,红外光谱测定其结构,并用噻唑蓝(MTT)比色法检测正交试验中的各种硫酸化后多糖产物对肿瘤细胞Hep G2和MCF-7增殖活性的影响。【结果】土茯苓多糖采用氯磺酸—吡啶法进行硫酸化修饰的最佳条件为反应时间4.5 h,反应温度60℃和试剂配比为1∶6;MTT结果显示:硫酸化后的多糖产物对肿瘤细胞Hep G2和MCF-7具有一定的抑制增殖作用,并与浓度呈依赖性关系。【结论】氯磺酸—吡啶法对土茯苓多糖进行硫酸化修饰是可行的,且硫酸化修饰能提高土茯苓多糖的抗肿瘤活性。     

3,6-(二甲氨基)-二苯骈碘杂六环葡萄糖酸盐对AGEP引起的大鼠主动脉平滑肌细胞增殖及牛主动脉内皮细胞内皮素和一氧化氮改变的影响

目的 :观察 3 ,6 (二甲氨基 ) 二苯骈碘杂六环葡萄糖酸盐对AGEP引起的大鼠主动脉平滑肌细胞增殖及牛主动脉内皮细胞内皮素和一氧化氮改变的影响。方法 :采用牛血清白蛋白 (BSA)与不同浓度葡萄糖 (0 ,2 0 ,5 0 ,80mmol·L-1)体外孵育制备糖基化终产物 (AGEP) ,应用 [3 H] TdR掺入法和MTT比色法观察I-93对重度糖化的AGEP诱导的大鼠主动脉平滑肌细胞 (ASMC)增殖的影响 ;应用放射免疫技术及Greiss法观察I -93对AGEP引起的牛主动脉内皮细胞 (BAEC)释放内皮素 1(ET 1)和一氧化氮 (NO)的影响。结果 :I-93 10 -7～ 10 -5mol·L-1能明显抑制AGEP引起的ASMC增殖 ,其 [3 H] TdR掺入量和MTT比色法的最大抑制率分别为79 .4%和 44 .2 %。随AGEP糖浓度的增加 (2 0～ 80mmol·L-1) ,BAEC培养液中ET 1含量亦逐渐上升 [(4 93± 63 )～ (779± 10 5 )ng·L-1] ,I -93 10 -7～ 10 -5mol·L-1能明显抑制重度糖化的AGEP促进ET 1释放的作用 ;I -93对AGEP灭活NO的作用有剂量依赖性抑制效应。结论 :I -93有抑制ASMC增殖的作用 ;对AGEP诱导的BAEC释放ET 1和NO间平衡失调有调节作用 ,在防治阻塞性血管疾病方面I -93具有潜在的应用价值     

不同干燥方法对当归质量影响研究

目的研究不同干燥方法对当归质量的影响。方法将鲜当归分别采用热风和传统熏干2种方法进行干燥,采用性状、薄层色谱进行定性鉴别,以挥发油、阿魏酸、醇溶性浸出物的含量为观察指标,按照2010版《中国药典》的方法,分别测定其有效成分的含量。结果不同干燥方法对当归挥发油、阿魏酸的含量存在一定差异,醇溶性浸出物的差异不明显。综合评价热风干燥优于传统熏干法。结论 当归的产地加工干燥以热风干燥为佳,既降低劳动强度、节省干燥时间,又可减少有效成分含量的损失。     

RP-HPLC法测定西红花甙提取物中西红花甙-1和西红花甙-2的含量

目的 :建立反相高效液相色谱测定西红花甙提取物中西红花甙 1和西红花甙 2含量的方法。方法 :采用No va PakC18(4μm ,15 0mm× 3 .9mm)色谱柱 ,流动相甲醇 水 (5 5∶45 ) ,流速 1ml·min-1,检测波长 440nm。结果 :西红花甙 1对照品的线性范围为 0 .0 3～ 0 .3 0g·L-1,r=0 .9999,平均加样回收率为 10 0 .2 1% ,RSD =0 .3 8% ;西红花甙 2对照品的线性范围为 0 .0 5～ 0 .3 0g·L-1,r =0 .9999,平均加样回收率为 99.78% ,RSD =0 .42 %。结论 :采用反相高效液相色谱法测定西红花提取物中西红花甙 1和西红花甙 2含量 ,操作简便、结果准确     

当归注射液对小鼠多能造血干细胞(CFU-s)的影响

我们采用脾集落法,观察了当归注射液对615小鼠多能造血干细胞的作用。资料表明,当归注射液对小鼠CFU-s似无明显影响;结合其它学者的工作,提示当归可能作用于红系祖细胞。     

柴胡多糖硫酸化修饰条件的优化及其修饰前后抗氧化能力比较

目的：探讨硫酸化修饰柴胡多糖（BCP）的影响因素，阐明硫酸化柴胡多糖（S-BCP）抗氧化能力提升的可能机制。方法：利用氯磺酸-吡啶法对BCP进行了硫酸化修饰。通过调节氯磺酸与吡啶的体积比（1：2、1：4和1：8），观察S-BCP的取代度（DS）；应用红外（IR）光谱初步分析BCP和S-BCP的结构，扫描电子显微镜（SEM）下观察分析BCP和S-BCP的表面形态表现。基于1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基的清除能力建立抗氧化模型，实验分为阳性对照组、BCP组和S-BCP组，检测各组DPPH自由基的清除率。结果：当氯磺酸与吡啶的体积比为1：4、反应时间为2 h、反应温度为60℃时，制得S-BCP的含硫百分率最大值为18.62%，DS最大值为2.32。与BCP组比较，各剂量S-BCP组DPPH自由基的清除率升高（P<0.05）。结论：氯磺酸与吡啶的体积比影响S-BCP的DS值，BCP经硫酸化修饰后通过改变多糖的理化性质和空间构象而提升其抗氧化能力。     

当归红芪超滤物抗辐射致心肌细胞损伤的作用及机制

目的探讨当归红芪超滤物抗辐射致乳鼠心肌细胞损伤的作用及其可能机制。方法用X线照射Wistar乳鼠原代培养的心肌细胞建立辐射损伤模型,用不同浓度的当归红芪超滤物进行干预,实验分正常对照组、辐射损伤模型组、当归红芪超滤物不同浓度(3、6、9 mg·mL-1)干预组(UFE-AH)。MTT法检测各组心肌细胞的存活率,2,4二硝基苯肼显色法检测各组细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)的含量,黄嘌呤氧化酶法测定各组细胞内超氧化物歧化酶(SOD)的活性,免疫组化法观测各组细胞Bax的表达,蛋白印迹半定量测定各组细胞Bax蛋白的表达。结果与辐射损伤模型组比较,当归红芪超滤物各干预组心肌细胞存活率明显升高,LDH含量显著降低(P0.05),SOD活性显著提高(P0.05),Bax表达显著降低(P0.05)。结论当归红芪超滤物具有拮抗辐射致心肌细胞损伤的作用,其机制与清除自由基有关。     

原发性青光眼患者血浆血管紧张素Ⅰ，Ⅱ、醛固酮及心钠素含量的测定

目的　探讨原发性青光眼患者血浆中血管紧张素 , 、醛固酮及心钠素的含量 .方法　采用放射免疫分析法检测了 2 8例原发性青光眼 (急性闭角型、慢性闭角型、慢性单纯型 )患者血浆血管紧张素 , 、醛固酮及心钠素的含量 ,并与 10例非青光眼者作对照 .结果　青光眼组患者血浆心钠素水平明显高于对照组 ,对照组为 (2 38.0 0± 186 .7)μg·L- 1 ,急闭青 (发作期 )、慢闭青和慢开青分别为 (5 2 7.5 6±2 17.17) μg· L- 1 、 (4 13.6 2± 2 0 9.94) μg· L- 1 和 (4 0 4.0 0±196 .5 3) μg· L- 1 (P<0 .0 5 ) ;急性闭角型青光眼患者血浆血管紧张素 含量明显低于对照组 ,对照组为 (2 .39± 1.0 5 )μg· L- 1 ,急闭青 (发作期 )为 (1.19± 1.0 2 )μg· L- 1 (P<0 .0 5 ) .其他组与对照组相比无明显改变 .结论　提示血浆心钠素水平的改变与青光眼存在密切关系 ;血浆肾素 -血管紧张素与青光眼是否存在某种联系有待进一步探讨     

当归多糖对人粒单系祖细胞和粒系白血病细胞株增殖分化的实验研究

目的：研究当归多糖(APS)对人粒单系造血祖细胞(CFU—GM)和急性早幼粒白血病细胞株(HL-60)增殖分化的影响。方法：采用造血细胞体外培养，形态学观察，流式细胞术和免疫细胞化学等实验血液学技术。结果：APS对正常CFU-GM的体外增殖有显著刺激作用；而对HL-60细胞的增殖却有明显的抑制作用；APS可能通过阻止HL-60细胞从静止期进入增殖周期，抑制DNA的合成等途径来抑制细胞增殖；APS可能诱导HL-60细胞发生凋亡。结论：APS有可能成为既能促进正常造血，又能抑制白血病等肿瘤细胞增殖，并诱导其凋亡或分化的天然诱导剂。     

藏药结血蒿水提物的免疫抑制作用研究

目的研究结血蒿水提取物（AV-ext）对小鼠免疫反应的抑制作用。方法运用淋巴细胞增殖反应、混合淋巴细胞反应观察AV-ext体外应用和口服给药对小鼠脾细胞增殖的影响；运用小鼠脾细胞增殖试验，观察AV-ext体外应用对小鼠活化脾细胞分泌IL-2的影响；用明胶酶谱法和粘附分析法，观察AV-ext对小鼠活化T淋巴细胞移动和粘附能力的影响。结果AV-ext在1μg／mL-100μg／mL剂量范围内对脾细胞无明显的细胞毒性，但对刀豆蛋白A（ConA）诱导的小鼠脾细胞增殖反应、混合淋巴细胞反应具有明显的抑制作用，对小鼠活化脾细胞分泌IL-2、小鼠活化T淋巴细胞分泌基质金属蛋白酶9（MMP-9）及粘附能力有显著的抑制作用；连续7d每日口服给予150mg／kg和300mg／kg的AV-ext，能明显抑制小鼠脾细胞增殖及活化脾细胞分泌MMP-9。结论AV-ext能显著抑制小鼠的细胞免疫反应。     

当归提取物的鉴定及镇痛活性观察

目的鉴定当归提取物的主要化学成分,并观察其镇痛作用。方法采用Molish反应和FeMing实验反应对当归提取物进行鉴定,苯酚一硫酸法测定其糖含量;采用小鼠扭体法和热板法观察当归提取物的镇痛作用。结果当归提取物的主要成分为多糖,其糖含量为81．4％,此提取物可明显抑制醋酸所致小鼠扭体反应,提高小鼠痛觉反应的痛阈。结论此当归提取物主要成分为多糖,具有明显的镇痛作用。