益气养阴活血方对糖尿病大鼠肝脏病理及肝脏miRNA-126表达水平的影响

[目的]通过观察益气养阴活血方对大鼠肝脏组织miRNA-126的含量的影响,探讨其改善糖尿病大鼠胰岛素抵抗(IR)的作用机制。[方法]12周龄Wistar雄性大鼠60只,随机分组,其中空白组10只,实验组50只。采用高脂饮食加小剂量链尿佐菌素(STZ)诱导形成2型糖尿病大鼠模型,造模成功后,50只糖尿病组大鼠随机分5组,空白组10只、模型组10只予生理盐水,津力达组10只予津力达颗粒、益气养阴活血方大、中、小剂量组各10只,予相应剂量中药灌服,干预4周,常规取血测定血糖、糖化血清蛋白GSP、空腹胰岛素水平等生化指标,取大鼠肝脏切片,HE染色,光镜下观察病理改变;再取一部分肝脏组织,运用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)技术,进行miRNA-126含量的测定。[结果]益气养阴活血方中、高剂量组和津力达组的大鼠体质量明显降低;益气养阴活血方各剂量和津力达颗粒均可降低大鼠空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2 h BG)、GSP;其中益气养阴活血方中剂量效果优于津力达颗粒;益气养阴活血方各剂量组和津力达颗粒均可减轻大鼠肝脏组织病理损害,其中中剂量组效果最为明显。益气养阴活血方各剂量和津力达颗粒均可降低肝脏组织miRNA-126的表达,其中中剂量组效果更明显,优于津力达组。[结论]益气养阴活血方能够改善2型糖尿病大鼠血糖代谢紊乱,可改善肝脏的病理损害,其机制可能与降低肝脏中miRNA-126的含量有关。     

运动对1型糖尿病大鼠心肌细胞中磷酸受纳蛋白表达的影响

目的观察运动对1型糖尿病大鼠心肌细胞中磷酸受纳蛋白（PLB）表达影响及其意义。方法40只健康SD大鼠随机分为正常对照组、运动对照组、糖尿病组及糖尿病＋运动组4组,每组10只。糖尿病大鼠模型复制成功后第4天开始跑台运动,于运动第4周末心脏采血收集血清,放射免疫法测定血清胰岛素水平,RT—PCR和Western-blotting法检测心肌细胞中磷酸受纳蛋白的表达。结果与正常对照组比较,糖尿病组血糖、糖化血清蛋白水平升高（P〈0．01）,血清胰岛素水平降低（P〈0．01）,心肌细胞PLB mRNA和蛋白表达无显著变化（P〉0．05）,糖尿病＋运动组血糖及糖化血清蛋白水平均升高（均P〈0．01）,心肌细胞中PLB mRNA和蛋白表达上调（P〈0．01）。与糖尿病组比较,糖尿病＋运动组血糖及糖化血清蛋白水平均降低（均P〈0．05）,PLB mRNA和PLB蛋白表达水平均升高（均P〈0．05）。结论运动对1型糖尿病大鼠心肌损伤有防治作用,其机制与运动能上调PLB基因表达可能有关。     

益气养阴活血法对糖尿病合并脑缺血大鼠海马脑源性神经营养因子表达及空间学习记忆的影响

目的观察益气养阴活血法对糖尿病合并脑缺血大鼠空间学习记忆能力及脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)表达的影响,并运用工具药(BDNF的Trk受体抑制剂)证实BDNF通路在其中的作用。方法将大鼠分为假手术组、模型对照组(糖尿病合并脑缺血伴气阴两虚、瘀血阻络证)、益气养阴活血组、益气养阴活血+K252a组、益气活血组,每组20只,选用具有益气养阴活血作用的人参、川芎、玉竹、黄精组合,运用免疫组织化学法和Morris水迷宫实验观察益气养阴活血药对糖尿病合并脑缺血模型大鼠空间学习记忆的作用及对BDNF表达的影响。结果与模型对照组比较,益气养阴活血药物和益气活血药物均可以明显增加糖尿病合并脑缺血大鼠海马齿状回BDNF的表达(P0.01),益气养阴活血药物显著缩短模型大鼠找到水下平台的潜伏期(P0.01),益气养阴活血药物和益气活血药物均显著延长大鼠在原水下平台的停留时间(P0.05,或P0.01),其中益气养阴活血药物效果优于益气活血药物(P0.05)。侧脑室注射K252a可以阻断益气养阴活血药物促进模型大鼠的空间记忆能力的恢复(P0.01)。结论益气养阴活血药物可能通过促进模型大鼠海马齿状回BDNF的表达而改善空间记忆功能。     

槲皮素对糖尿病大鼠心肌非酶糖基化及细胞凋亡的影响

目的 观察槲皮素(quercertin,Que)对糖尿病大鼠心肌非酶糖基化及细胞凋亡、凋亡相关基因Caspase-3表达的影响,探讨槲皮素对糖尿病心肌的保护作用及机制.方法 16只健康雄性SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素诱发糖尿病模型,随机分为糖尿病组(DM)和槲皮素治疗组(Que).同时设立正常对照组(NC)8只.治疗组灌胃给予槲皮素100 mg/kg,每天1次,共8周.分别测定各组大鼠血糖、血清果糖胺(FMN)、心肌AGEs 含量;TUNEL法检测心肌细胞凋亡,免疫组织化学法检测心肌Caspase-3蛋白表达.结果 与正常对照组相比,糖尿病大鼠血糖、血清果糖胺(FMN)及心肌AGEs含量均明显升高(P＜0.01);Caspase-3蛋白表达显著增强(P＜0.01),心肌细胞凋亡数明显增多(P＜0.01);与糖尿病组相比,槲皮素治疗组大鼠血糖、血清果糖胺(FMN)含量无明显改变(P＞>0.05),心肌AGEs含量明显降低(P＜0.01);Caspase-3蛋白表达减弱(P＜0.01),心肌凋亡细胞数减少(P＜0.05).结论 槲皮素可通过抑制糖尿病大鼠心肌组织非酶糖化,下调Caspase-3表达,减少心肌细胞凋亡,发挥心肌保护作用.     

益气养阴活血法对糖尿病模型大鼠血清核因子-kB的影响

目的观察益气养阴活血法对糖尿病模型大鼠血清NF-kB的影响。方法取大鼠55只,分为5组,除正常对照组外,其余组给予高脂饲料,按30mg/kg给大鼠腹腔单次注射链脲佐菌素(STZ)溶液1次,造模成功后除模型组和正常对照组外,各组连续灌胃药物4周,取血测定血糖、NF-kB,监测尿白蛋白、肾重量。结果造模后NF-kB的表达明显升高,与正常组比较有十分显著性差异(P0.01)。给予丹蛭降糖方灌胃后,NF-kB的高表达较模型组明显降低(P0.01),尿微量白蛋白排泄显著下降(P0.05),血糖与治疗前比较明显降低(P0.01)。结论具有益气养阴活血作用的丹蛭降糖胶囊可控制NF-kB的高表达,减少尿白蛋白的排泄,降低血糖。     

苦瓜总皂苷对2型糖尿病大鼠心肌脂联素受体1表达及心功能的影响

目的 探讨苦瓜总皂苷对2型糖尿病大鼠心功能及心肌组织中脂联素受体1 (AdipoR1)表达的影响.方法 60只雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组以及苦瓜总皂苷治疗组,模型建立成功后,苦瓜总皂苷治疗组给予苦瓜总皂苷(20 mg/kg.d)灌胃治疗,对照组和模型组给予等量生理盐水灌胃,分别于治疗4、8周后处死大鼠各半,测定血糖、胰岛素、血脂以及心功能,HE染色检测心脏病理学,RT-PCR以及Western Blot检测心脏组织中AdipoR1 mRNA和蛋白的表达.结果 造模成功后,糖尿病组大鼠血糖、血脂(TG、TC和FFA)以及心功能指标(CK、CK-MB、LDH和HBDH)明显升高(P＜0.05),胰岛素含量明显降低(P.05),治疗4周后,除胰岛素明显升高外(P＜0.05),各生化指标均明显下降(P＜0.05),治疗8周后进一步改善;HE染色可见,糖尿病大鼠心脏有轻微的损伤,苦瓜总皂苷对其有一定的调节作用;造模成功后模型组心肌AdipoR1 mRNA水平和蛋白表达相较于正常组明显升高(P.05),苦瓜总皂苷治疗后其AdipoR1表达显著降低(P＜0.05).结论 苦瓜总皂苷可通过降低2型糖尿病大鼠心脏组织中AdipoR1的表达,调节血脂,改善心脏功能,最终保护心肌细胞.     

舒洛地特调控miR-27a介导自噬调控糖尿病肾病足细胞损伤机制研究

目的分析舒洛地特调控微小RNA-27a(miR-27a)介导自噬调控糖尿病肾病足细胞损伤的机制。方法选取45只中15只大鼠作为正常组不做任何处理,其余大鼠建立糖尿病肾病大鼠模型,随机分为模型组、舒洛地特组各15只。舒洛地特组大鼠给予舒洛地特肌内注射,正常组和模型组给予等体积生理盐水肌内注射。观察各组大鼠病理组织学变化,血糖、血脂和肾功能指标、足细胞自噬体情况、凋亡率,足细胞特异性蛋白Nephrin、Desmin、GPR124及miR-27a、AMPK-mTOR信号通路蛋白表达量。结果舒洛地特组血糖、血脂和肾功能指标、足细胞凋亡率、Desmin、miR-27a、AMPK-mTOR信号通路蛋白表达量均低于模型组,差异有统计学意义(P0.05)。舒洛地特组足细胞自噬体数量、Nephrin、GPR124蛋白表达量均高于模型组,差异有统计学意义(P0.05)。结论舒洛地特可通过下调miR-27a介导AMPK、mTOR、Bax蛋白表达量降低,进而抑制AMPK-mTOR信号通路,促进糖尿病肾病足细胞自噬、抑制糖尿病肾病足细胞凋亡、减轻糖尿病肾病足细胞损伤。     

加味生脉补心丹对防治2型糖尿病大鼠心肌损害的影响

目的 观察加味生脉补心丹对2型糖尿病大鼠模型血糖及心肌组织结构的影响,初步探讨加味生脉补心丹对耱尿病心肌纤维化和肥大的防治作用.方法 40只SD大鼠随机分为空白组7只,实验组33只,通过高糖高脂饲料+小剂量STZ构建2型糖尿病大鼠模型.将成模后的实验组大鼠随机分为模型组、补心丹(BXD)组和罗格列酮(RSG)组各11只,BXD组以浓缩后加味生脉补心丹汤剂灌胃;RSG组按照罗格列酮钠溶液灌胃.给药8周后测各组大鼠空腹血糖,并处死取材,光镜观察心肌组织变化,Masson染色观察纤维沉积情况,免疫组化法观察Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白和沉默信息调节因子3(Sirt3)蛋白的表达.结果 成模时各实验组空腹血糖(FPG)均较空白组升高(P＜0.05),造模成功.治疗完成时,RSG组、BXD组FPG均较模型组下降(P＜0.05),RSG组FPG较BXD组更低(P＜0.05).模型组心肌组织破坏严重,胶原纤维含量增多,RSG组和BXD组心肌组织破坏程度较轻,胶原纤维含量较少.模型组Ⅰ、Ⅲ型胶原和Sirt3的表达明显高于其他组(P＜0.05).BXD组Ⅲ型胶原的表达明显高于空白组(P＜0.05).RSG组Sirt3的表达显著高于BXD组(P＜0.05).结论 加味生脉补心丹能够明显降低2型糖尿病大鼠的血糖,并能够明显减轻心肌纤维化、肥大的程度,延缓糖尿病所致心肌病的进程.     

Bcl-2和Bnip-3在糖尿病性心肌病大鼠心肌细胞中的表达

目的探讨细胞凋亡因子Bcl-2、Bnip-3在实验性糖尿病性心肌病大鼠心肌细胞中的表达情况。方法选取8周龄Sprague-Dawley大鼠30只,随机分为对照组和模型组。对照组大鼠腹腔注射枸橼酸缓冲液,模型组大鼠一次性腹腔注射链脲佐菌素溶液建立糖尿病模型,继续饲养12周,自然形成糖尿病性心肌病模型;然后处死2组大鼠,取血测定血糖、血脂,取心脏称质量计算心脏质量指数,切取心肌组织电镜观察心肌超微结构变化,并测定乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)水平,免疫组织化学法测定心肌细胞Bcl-2、Bnip-3的表达。结果模型组大鼠血糖、三酰甘油、胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、心肌酶及心肌形态学改变均符合糖尿病性心肌病表现。模型组大鼠心肌细胞中Bcl-2的表达明显低于对照组(P<0.01),Bnip-3的表达明显高于对照组(P<0.01)。结论细胞凋亡因子Bcl-2和Bnip-3可能参与了糖尿病性心肌病的心肌细胞凋亡过程。     

α-硫辛酸对Ⅱ型糖尿病大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的 探讨α-硫辛酸对Ⅱ型糖尿病心肌细胞凋亡的影响.方法 SD大鼠随机分为5组:正常对照组,糖尿病模型组,α-硫辛酸低,中,高量剂量组(n=8).对照组大鼠给予普通饮食,实验组大鼠给予高脂高糖饮食1个月后腹腔注射小剂量的链尿佐菌素30 mg/kg,建立Ⅱ型糖尿病模型[1].α-硫辛酸低,中,高量剂量组,并分别按15、30、60 mg/(kg·d)灌胃12周.检测血糖及血脂;测定超氧化物歧化酶(SOD)及谷光胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性,原位末端转移酶标记技术(TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)检测细胞凋亡.结果 与对照组比较,糖尿病模型组大鼠血糖及甘油三脂(TG)、胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)明显增高(P＜0.01),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)明显降低(P＜0.01),血清和心肌组织中的SOD,和GSH-PX的活性降低,心肌细胞凋亡率增加.与糖尿病模型组比较,α-硫辛酸干预组各指标得到改善.尤以中剂量组改善最明显,血糖及TG,TC,LDL-C明显降低(P＜ 0.05),HDL-C显著提高(P＜0.05);SOD和GSH-PX的活性有所改善,细胞凋亡率减少(P＜0.05).结论 α-硫辛酸对Ⅱ型糖尿病大鼠心肌组织具有保护作用,其机制可能与其降低血糖,血脂水平,抑制氧化应激,进而降低细胞凋亡率有关.     

蒙药嘎日迪散对溃疡性结肠炎大鼠Th1细胞和Th17细胞的影响

目的探讨蒙药嘎日迪散对溃疡性结肠炎(UC)大鼠Th1细胞和Th17细胞的影响。方法将Wistar大鼠随机分为正常组、UC模型组、嘎日迪散低剂量组、嘎日迪散中剂量组、嘎日迪散高剂量组、柳氮磺吡啶组和补脾益肠丸组,采用免疫法加2,4,6-三硝基苯磺酸乙醇诱导UC模型。嘎日迪散低、中、高剂量组(1.76、3.51、7.02 g/kg),柳氮磺吡啶组(0.36 g/kg)和补脾益肠丸组(1.62g/kg)分别灌胃相应药物4周后,取外周血检测指标。采用流式细胞术观察全血中Th1细胞/Th17细胞(Th1/Th17),ELISA法检测血清中转化生长因子β(TGF-β)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素17(IL-17)、干扰素γ(IFN-γ)的含量。结果嘎日迪散中、低剂量和柳氮磺吡啶能显著降低UC大鼠血清中TGF-β,各药物均能显著降低UC大鼠血清中IL-6、IL-17的含量(P0.05)、升高IFN-γ的含量(P0.05),升高Th1/Th17值(P0.05)。结论嘎日迪散调节UC大鼠体内Th0细胞的分化方向,恢复Th1/Th17的平衡可能是其治疗UC的机制之一。     

黄芪莪术联合5-氟尿嘧啶对CT26.WT原位移植瘤小鼠CXCL10/CXCR3轴和CCL3/CCR5轴表达的影响

目的探讨黄芪莪术配伍联合5-氟尿嘧啶(5-FU)治疗结肠癌的作用机制。方法采用1只BALB/c雄性小鼠作为种鼠,生成原位瘤体,80只BALB/c雄性小鼠采用移植种鼠瘤体的方法建立CT26.WT原位移植瘤小鼠模型。将80只BALB/c雄性小鼠随机分为模型组、5-FU组(25 mg/kg)、黄芪莪术高剂量组(12 g/kg)、黄芪莪术中剂量组(6 g/kg)、黄芪莪术低剂量组(3 g/kg)、联合高剂量组(12 g/kg+25 mg/kg)、联合中剂量组(6 g/kg+25 mg/kg)、联合低剂量组(3 g/kg+25 mg/kg),每组10只,连续给药3周。处死小鼠取肿瘤组织,计算抑瘤率。采用Western blot和Real-time PCR法分别检测各组小鼠肿瘤组织、淋巴组织和肝脏组织中CXC趋化因子配体10(CXCL10)、CXC趋化因子受体3(CXCR3)、C-C趋化因子配体3(CCL3)、C-C趋化因子受体5(CCR5)蛋白和mRNA表达。结果与模型组比较,各给药组的抑瘤率均升高(P<0.01)。与5-FU组比较,黄芪莪术高、中、低剂量组,联合高、中、低剂量组抑瘤率均降低(P<0.01)。与黄芪莪术高剂量组比较,联合高剂量组抑瘤率升高(P<0.01),黄芪莪术低剂量组抑瘤率降低(P<0.01)。与黄芪莪术中剂量组比较,黄芪莪术低剂量组抑瘤率降低(P<0.01),联合中剂量组抑瘤率升高(P<0.01)。与联合高剂量组比较,联合中剂量抑瘤率升高(P<0.01)。与联合中剂量组比较,联合低剂量组抑瘤率降低(P<0.01)。与联合低剂量组比较,黄芪莪术低剂量组抑瘤率降低(P<0.01)。与模型组比较,各给药组均能下调CXCL10、CXCR3、CCL3、CCR5的mRNA及蛋白的表达(P<0.01)。与5-FU组比较,黄芪莪术中、低剂量组CXCL10、CXCR3、CCL3、CCR5的mRNA及蛋白表达均升高(P<0.05,P<0.01);联合高、中、低剂量组的CXCL10、CXCR3、CCL3、CCR5的mRNA及蛋白表达均降低(P<0.01);黄芪莪术高剂量组原位瘤、淋巴结、肝组织中CCL3及肝组织中CCR5的蛋白表达升高(P<0.01),黄芪莪术高剂量组CXCL10、CXCR3的mRNA表达升高(P<0.05,P<0.01)。与黄芪莪术高剂量组比较,联合高剂量组趋化因子及受体的mRNA及蛋白的表达降低(P<0.05);黄芪莪术中、低剂量组原位瘤、淋巴结中趋化因子及受体的蛋白表达升高(P<0.05),肝组织中CXCL10、CXCR3、CCR5的蛋白表达升高(P<0.05);黄芪莪术低剂量组的趋化因子及受体的mRNA表达升高(P<0.05);黄芪莪术中剂量组CXCR3、CCL3、CCR5的mRNA表达升高(P<0.05)。与黄芪莪术中剂量组比较,联合中剂量组的趋化因子及受体的mRNA及蛋白的表达降低(P<0.05);黄芪莪术低剂量组原位瘤中趋化因子及受体的蛋白的表达升高(P<0.05),淋巴结中CXCL10、CCL3的蛋白表达升高(P<0.05),肝组织中CXCL10、CCR5的蛋白表达升高(P<0.05);黄芪莪术低剂量组CXCL10、CCL3 mRNA表达升高(P<0.05)。与联合高剂量组比较,联合低剂量组趋化因子及受体的mRNA及蛋白表达升高(P<0.05),联合中剂量组原位瘤CCL3、CXCL10的蛋白表达升高(P<0.05),淋巴结CCR5、CXCL10、CXCR3的蛋白表达升高(P<0.05),肝组织中CXCL10、CXCR3的蛋白表达升高(P<0.05),联合中剂量组CXCR3 mRNA表达升高(P<0.05)。与联合中剂量组比较,联合低剂量组原位瘤CXCL10、CXCR3、CCR5的蛋白表达升高(P<0.05),淋巴结CXCL10、CXCR3的蛋白表达升高(P<0.05),肝组织CXCR3、CCR5的蛋白表达升高(P<0.05),联合低剂量组中CXCR3、CCL3的mRNA表达升高(P<0.05)。与联合低剂量组比较,黄芪莪术低剂量组趋化因子及受体的mRNA及蛋白表达升高(P<0.05)。结论黄芪、莪术配伍能够抑制CT26.WT原位移植瘤增殖,且联合5-FU具有增效之功,其治疗结肠癌机制可能与下调CXCL10/CXCR3轴、CCL3/CCR5轴mRNA及蛋白的表达有关。     

汉防己甲素降低大鼠血尿酸水平的机制研究

目的 探讨汉防己甲素对高尿酸血症大鼠血尿酸（uric acid,UA）的影响。方法 将40只SPF级别雄性大鼠按照随机数字表法分成空白对照组、高尿酸血症模型组、别嘌醇模型组、汉防己甲素低剂量模型组和汉防己甲素高剂量模型组,每组8只。用腺嘌呤（200mg/kg）与氧嗪酸钾（250mg/kg）联合饲喂酵母饲料（10g/kg）的方法构建高尿酸血症的大鼠模型,空白对照组喂普通饲料。造模成功后,从第8天起,每天下午给予别嘌呤模型组大鼠灌胃别嘌呤醇（40mg/kg）,汉防己甲素低剂量模型组、汉防己甲素高剂量模型组分别灌胃16mg/kg和32mg/kg汉防己甲素,空白对照组与高尿酸血症模型组灌胃同等体积的生理盐水。给药后每周采集大鼠血液检测UA、血肌酐（serum creatinine,Scr）及血尿素氮（blood uric nitrogen,BUN）水平,处死后取肝脏检测黄嘌呤氧化酶（xanthine oxidase,XOD）和腺苷脱氨酶（adenosine deaminase,ADA）活性。结果 干预1周时,除空白对照组外,各组UA水平均显著升高（P<0.05）,造模成功。与高尿酸血症模型组相比,干预2周、3周、4周时,低剂量汉防己甲素组的UA、Scr和BUN水平差异均无统计学意义（P>0.05）;干预4周时,高剂量汉防己甲素模型组的UA水平显著降低（P<0.05）。干预3周、4周时,高剂量汉防己甲素模型组Scr水平均显著降低（P<0.05）,干预2周时,高剂量汉防己甲素模型组的BUN水平显著降低（P<0.05）。与高尿酸血症模型组相比,高剂量汉防己甲素模型组XOD活性显著降低（P<0.05）,低剂量汉防己甲素模型组、高剂量汉防己甲素模型组ADA活性均显著降低,差异无统计学意义（P>0.05）。结论 汉防己甲素对高尿酸血症大鼠有改善效果,可能的机制是其对黄嘌呤氧化酶活性的抑制,但其具体作用机制有待进一步研究。     

枳葛解酒保肝方对酒精性肝损伤大鼠SOD、MDA、GSH的影响

目的研究枳葛解酒保肝方对酒精性肝损伤大鼠肝脏的保护机制。方法选择雄性Wistar大鼠180只,随机分为空白组、模型组、阳性药组(0.36 g/kg)和枳葛解酒保肝方高、中、低剂量(18、9、1.8 g/kg)组。以浓度为50%的无水乙醇(以蒸馏水稀释)灌胃6周,建立大鼠酒精性肝损伤模型,以复方蛋氨酸胆碱片为阳性药,各给药组分别给予相应药物干预。检测血清及肝组织中丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)含量,血清超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果模型组大鼠血液中SOD的活性明显低于空白组,肝组织和血液中MDA、GSH含量明显高于空白组(P0.01)。与模型组相比,枳葛解酒保肝方中剂量组能明显提高大鼠血清GSH含量(P0.05)、提高SOD活力(P0.01)和降低肝组织中MDA含量(P0.01);枳葛解酒保肝方高剂量组能明显降低大鼠肝组织MDA含量(P0.01)及提高GSH含量(P0.01);枳葛解酒保肝方低剂量组能降低大鼠血清MDA含量(P0.01)。结论枳葛解酒保肝方具有一定的增强SOD、GSH等内源性抗氧化酶的抗氧化能力,抑制自由基介导的脂质过氧化反应对肝脏损伤的作用。     

补阳还五汤防治特发性肺纤维化的作用及机制探讨

目的探讨补阳还五汤治疗博莱霉素致大鼠特发性肺纤维化药效学作用机制。方法将SD雄性大鼠144只随机分为空白组、博莱霉素组、强的松组(0.004 2 g/kg)和补阳还五汤大、中、小剂量(27.32、13.66、6.83 g/kg)组,每组24只。除空白组外其余各组均采用一次性气管注射博莱霉素法诱导肺纤维化模型。造模后24 h给予相应药物,分别于第7、14、28天随机抽取各组8只大鼠进行股动脉放血处死,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织,采用HE染色法观察肺组织肺泡炎程度,酶联免疫法(ELISA法)检测BALF中早期炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和晚期炎性因子高迁移率族蛋白1(HMGB1)的水平。结果与空白组比较,博莱霉素组肺泡隔纤维增生灶增多,肺实质结构破坏,各时间点博莱霉素组大鼠BALF中TNF-α、IL-1β、HMGB1含量升高(P0.05);与博莱霉素组比较,补阳还五汤大、中、小剂量组肺泡炎均有不同程度的改善,补阳还五汤各剂量组均能降低大鼠BALF中TNF-α、IL-1β、HMGB1含量。结论补阳还五汤能够有效降低博莱霉素所致的肺纤维化大鼠BALF炎性指标IL-1β、TNF-α、HMGB1的浓度,改善肺泡炎症,进而抑制肺纤维化。     

黄芪提取物对急性肺栓塞兔模型肺组织p38-MAPK通路表达的影响

目的探究黄芪提取物对急性肺栓塞兔模型肺组织p38-MAPK通路表达的影响。方法取75只雄性日本大耳白兔,采用随机数字表法分为:空白对照组,模型组,低、中、高剂量黄芪提取物组,每组15只。除空白对照组外各组采用自体血栓回输法建立急性肺栓塞模型,低、中、高剂量黄芪提取物组分别腹腔注射20 g/kg、40 g/kg和60 g/kg的黄芪提取物,1次/d,连续注射1周。分别于造模前和治疗后检测各组大耳兔中心静脉压(central venous pressure,CVP)及肺动脉平均压(pulmonary arterial mean pressure,PAMP);采用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)和实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)检测各组血清及肺组织血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)水平;采用ELASA法检测各组血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)和白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)含量水平;苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察大耳白兔肺组织病理学变化;采用蛋白质印迹法检测p-p38 MAPK蛋白表达水平。结果HE染色观察发现,模型组大耳白兔出现明显的血栓,且炎性细胞浸润较多,肺小静脉扩张;黄芪提取物各组无血栓且炎性浸润显著改善,肺小静脉基本无扩张。各组造模前肺血流动力学指标差异均无统计学意义(P>0.05);与空白对照组比较,模型组CVP,PAMP,血清VEGF、b FGF和肺组织VEGF mRNA、b FGF mRNA,TNF-α、p-p38 MAPK蛋白相对表达均显著升高(P<0.05),血清IL-4、IL-1β水平均显著降低(P<0.05);与模型组比较,黄芪提取物各组CVP、PAMP、TNF-α和p-p38-MAPK蛋白表达显著降低(P<0.05),且随着黄芪提取物剂量增加而降低(P<0.05);血清VEGF、b FGF和肺组织VEGF mRNA、b FGF mRNA、IL-4、IL-1β显著升高(P<0.05),且随着黄芪提取物剂量增加而升高(P<0.05)。结论黄芪提取物可以通过抑制p38-MAPK通路减少下游炎症相关因子的表达达到治疗急性肺栓塞的效果。     

血清miR-133a在脓毒症心肌损伤患者诊断及预后评估中的临床价值

目的探讨miR-133a在脓毒症心肌损伤患者临床诊断及预后评估中的价值。方法选取脓毒症心肌损伤患者50例作为研究对象（观察组）,根据入住ICU 28 d内是否存活,分为存活组（30例）及死亡组（20例）。另选取该院体检中心健康体检者25例作为对照组;收集其临床资料及相关观察指标,检测患者入组后第24、48、72小时患者血清心肌肌钙蛋白Ｉ（cTnI）、CK-MB,计算急性生理学与慢性健康状况评分系统 Ⅱ（APACHEⅡ评分）及序贯器官衰竭评分（SOFA评分）,运用实时荧光定量多聚核苷酸链式反应技术（qRT-PCR）检测所有受试者血清miR-133a的表达水平,分析其与cTnI、APACHEⅡ评分的相关性,分析血清miR-133a在脓毒症心肌损伤患者诊断及预后评估中的价值。结果观察组与对照组在性别、年龄、体质指数方面差异无统计学意义（P>0.05）。与对照组相比,观察组心率、平均动脉压、WBC、乳酸、cTnI、CK-MB、BNP、APACHEⅡ评分、SOFA评分均明显升高（P<0.05）。观察组血清miR-133a表达水平与对照组相比明显升高,差异有统计学意义（P<0.05）。在入组24、48、72 h时,死亡组患者的cTnI、CK-MB浓度以及APACHEⅡ评分、SOFA评分、miR-133a表达水平均明显高于存活组,差异有统计学意义（P<0.05）,各个时间点检测的miR-133a表达水平和cTnI含量以及APACHEⅡ评分均呈显著正相关,差异有统计学意义（P<0.05）。乳酸、APACHEⅡ评分、cTnI、miR-133a表达水平等因素是脓毒症心肌损伤患者预后的影响因素（P<0.05）。结论脓毒症心肌损伤患者血清miR-133表达水平与cTnI及APACHE Ⅱ评分相关性好,可以作为诊断脓毒症心肌损伤的潜在生物学标记物,对预测疾病严重程度及预后有一定的临床价值。     

清脑宣窍方有效组分对缺血性脑中风大鼠血脑屏障上P-糖蛋白表达的影响

目的比较正常及缺血损伤时大鼠血脑屏障上转运蛋白中P-糖蛋白(P-gp)时征表达及清脑宣窍方有效组分对其表达的影响。方法线栓法制备缺血性脑中风大鼠模型,按照不同再灌注时间,模型组再分为0、0.51、、26、、122、4 h,采用免疫组织化学法观察正常组与模型组大鼠脑皮质及海马缺血区P-gp的表达。除假手术组外,缺血动物于术后1 d,随机分为模型组、清脑宣窍方有效组分高、中、低剂量组、维拉帕米组,并于造模后1～5 d灌胃给予相应药物。末次给药后,处死动物,取材,检测大鼠脑皮质及海马区P-gp的表达。结果免疫组织化学染色结果显示,正常组与模型组大鼠脑皮质及海马缺血区均可见P-gp阳性染色。免疫组化半定量分析表明,与正常组比较,不同再灌注时间模型组P-gp表达量均有显著性差异(P<0.05),皮质及海马缺血区P-gp表达量均降低;与模型组比较,清脑宣窍方有效组分各剂量组及维拉帕米组对缺血性脑中风大鼠脑皮质及海马区P-gp表达量明显降低(P<0.05)。结论在缺血性脑中风病理状态下,大鼠脑血脑屏障上转运蛋白P-gp存在一定的时征表达,而且从一定程度上反映了特定病理状态下由于蛋白表达的改变而引起的血脑屏障通透性的变化。清脑宣窍方有效组分对缺血性脑中风大鼠脑皮质及海马缺血区P-gp表达具有显著的抑制作用。     

Effects of Wenxiao Ⅱ Decoction on the expression of MCP-1 and VCAM-1 in atherosclerotic rabbits

OBJECTIVE:To observe the effects of different doses of Wenxiao Ⅱ Decoction on the expression of monocyte chemoattractant protein-1(MCP-1) and vascular cell adhesion molecule-1(VCAM-1) in an experimental model of atherosclerosis in rabbits and to explore the mechanism by which it alleviates atherosclerosis.METHODS:Sixty 3-4 month-old New Zealand rabbits of both sexes were randomly divided into six groups:simvastain;model;blank;and high-dose,mid-dose,and low-dose Wenxiao Ⅱ Decoction groups.Except for those in the blank group,all rabbits were fed a high-cholesterol diet.Carotid atherosclerosis was established by balloon-induced injury to the endothelium of the carotid artery in conjunction with consumption of a high-cholesterol diet.After 8 weeks,all rabbits were killed to evaluate the expression of MCP-1 and VCAM-1 by immunohistochemical staining.RESULTS:Expressions of MCP-1 and VCAM-1 were significantly decreased in all groups except the blank group compared with the model group(P<0.05).When compared with the simvastain group only variation of MCP-1 expression in low-dose group was not appreciable,and the differences were indistinct(P<0.05).When comparing among Wenxiao Ⅱ Decoction groups,MCP-1 expression in the mid-and high-dose groups was significantly lower than that seen in the low-dose group(P<0.01),but there were no differences among three dosage groups with respect to VCAM-1 expression(P>0.05).CONCLUSION:These data suggested that high,mid,and low doses of Wenxiao Ⅱ Decoction can inhibit the expression of MCP-1 and VCAM-1,which may prevent the formation of or stabilize atherosclerotic plaques.There may be a direct relationship between the dosage of Wenxiao Ⅱ Decoction and its therapeutic efficacy.     

线叶金雀花对小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察南非特有植物线叶金雀花对小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法将小鼠随机分为对照组,脑缺血再灌注损伤组,线叶金雀花低剂量组(2.8 g/kg)、中剂量组(5.6 g/kg)、高剂量组(11.2 g/kg)。造模前预防性灌胃给药7 d,每日1次,对照组及脑缺血再灌注组给予等体积的蒸馏水。给药1周后,采用小鼠大脑中动脉栓塞法(MCAO)制备模型,模型制备成功后继续按上述方式灌胃给药7 d。通过2,3,5一氯化三苯基四氮唑(TTC)染色,观察线叶金雀花对脑损伤梗死体积的影响;通过神经功能评分实验、平衡木实验、Morris水迷宫实验、转角实验等,观察线叶金雀花对运动、认知、感觉等功能的影响;通过检测脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、丙二醛(MDA)含量,观察药物对脑损伤以后氧化还原状态的影响;通过检测脑组织中白介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)含量,观察药物对脑损伤以后炎症状态的影响。结果与脑缺血再灌注损伤组相比,线叶金雀花组小鼠脑梗死体积显著减少(P0.05),平衡木得分显著降低(P0.01),转角向非损伤侧次数显著减少(P0.01),脑组织TNF-α含量、IL-1β含量与ICAM-1含量显著降低(P0.01或P0.05)。结论线叶金雀花对小鼠脑缺血再灌注损伤有一定保护作用,其作用可能与减少脑组织炎症因子有一定关系。