HPLC法测定胆木浸膏胶囊中异长春花苷内酰胺的含量

目的 测定胆木浸膏胶囊中异长春花苷内酰胺的含量.方法 采用高效液相色谱法,以Diamonsil ODS(150×4.6mm、粒径5μm)为色谱柱,流动相为乙腈-水-磷酸(30:70:0.1),检测波长为226nm,柱温:室温,流速为1.0mL/min,采用面积外标法.结果 建立了胆木浸膏胶囊中异长春花苷内酰胺的HPLC含量测定方法.线性范围为2.028～10.140μg/ml,平均回收率为98.77%,RSD为1.41%(n=6). 结论该方法稳定、可靠、专属性强,可用于胆木浸膏胶囊中异长春花苷内酰胺的含量测定,为胆木浸膏胶囊的质量控制提供了新方法.     

胆木生物碱成分研究

目的研究胆木Naucleaofficinalis的生物碱成分。方法95%乙醇提取胆木带皮茎枝的化学成分,采用反复硅胶柱色谱、Sephadex LH20凝胶柱色谱和C-18反相硅胶柱色谱分离纯化,通过光谱分析鉴定化合物的结构。结果从醋酸乙酯部位分离得到11个成分,其中9个为吲哚类生物碱,2个喹啉酮类生物碱,分别鉴定为牛眼马钱托林碱(angustoline,Ⅰ)、19-乙氧基牛眼马钱托林碱(19-O-ethylangustoline,Ⅱ)、3-S-3,4-二氢牛眼马钱托林碱(3-S-3,4-dihydroangustoline,Ⅲ)、3-R-3,4-二氢牛眼马钱托林碱(3-R-3,4-dihydroangustoline,Ⅳ)、naucleamide A(Ⅴ)、异长春花苷内酰胺(strictosamide,Ⅵ)、喜果苷(vincosamide,Ⅶ)、6′-异乙酰基长春花苷内酰胺(6′-acetyl-stric-tosamide,Ⅷ)、2′-异乙酰基长春花苷内酰胺(2′-acetyl-strictosamide,Ⅸ)、短小蛇根草苷(pumiloside,Ⅹ)、3-表短小蛇根草苷(3-epi-pumiloside,Ⅺ)。结论化合物Ⅰ~Ⅺ均为首次从该植物中分离得到。     

胆木抗肝癌活性的网络药理学及初步细胞筛选研究

目的：基于网络药理学探究胆木抗肝癌的作用机制，并通过细胞筛选初步验证胆木抗肝癌活性。方法：利用网络药理学筛选胆木与肝癌的共同靶点，构建蛋白互作网络以及进行富集分析及作用机制预测，并将胆木的主要活性成分与核心靶点进行分子对接。利用CCK8、细胞凋亡及PCR等体外细胞实验进行初步验证。结果：经筛选获得胆木活性成分14种，相关的靶点587个，与肝癌靶点映射后共同靶点有288个，主要有TP53、SRC、STAT3等核心靶点。其中异长春花苷内酰胺、短小蛇根草苷、喜果苷等化合物可能是胆木抗肝癌的潜在活性成分，可能通过介导癌症通路、PI3K/Akt和EGFR酪氨酸激酶抑制剂抵抗等信号通路，参与蛋白质磷酸化、凋亡过程的负调控等过程，发挥抗肝癌作用；分子对接结果显示胆木活性成分与肝癌核心靶点产生稳定的结合；体外细胞实验结果表明，胆木中主要成分异长春花苷内酰胺对肝癌细胞具有细胞毒性，抑制肝癌细胞增殖（P<0.001），内在机制是下调肝癌HepG2细胞SRC、STAT3、MAPK3的基因表达（P<0.05），并诱导肝癌细胞凋亡（P<0.001）。结论：本研究初步探讨了胆木活性成分抗肝癌的潜...     

海南黎药胆木引种栽培技术研究

胆木是重要的黎族药用植物,经过6年的野生引种栽培技术研究,结果显示,胆木具有较强的适应性和良好的抗逆性,在五指山地区生长良好,大田种植前三年生长年平均胸茎达4.3 cm,以后生长加快,5年生树年平均胸茎7.1 cm;5年生树砍伐测定树干和小枝异长春花苷内酰胺含量分别为1.106%和0.710%;砍伐后萌芽生长能力很强,每株可萌发新芽3条～5条;病害较少,虫害中等;是药用、造林、绿化环境的优质树种。     

UPLC法同时测定胆木中6种成分的含量

建立胆木药材中原儿茶酸、绿原酸、短小舌根草苷、3-表短小舌根、异常春花苷内酰胺和喜果苷同时测定的UPLC方法。采用Acquity BEH C₁₈色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7 μm),乙腈-0.1%甲酸为流动相,梯度洗脱,流速为0.4 mL/min,进样量为2 μL,柱温为40 ℃的色谱条件。在选定的色谱条件下,6种成分均能达到良好分离,并对方法进行了系统的验证。结果表明,线性关系良好(R²>0.999 6),日内、日间精密度RSD≤ 4.05%,加样回收率为96.59%~101.8%。本方法简便、快速、准确,可用于胆木药材的质量控制。     

短小舌根草苷的制备及其在大鼠体内代谢产物的UPLC-QTOF/MS鉴定

通过AB-8大孔吸附树脂对胆木药材水提液进行吸附,用不同比例的乙醇水溶液对其梯度洗脱,通过分离纯化获得纯度较高的短小舌根草苷单体。用UPLC-QTOF/MS分析技术鉴定大鼠灌胃短小舌根草苷后,尿液、粪便以及胆汁中该成分可能的代谢产物。采用全扫描方式采集所有成分准确MS/MS数据,利用MetaboLynx软件分析处理,获得了纯度较高的短小舌根草苷单体并鉴定出了其在大鼠体内的4种代谢产物。     

4个不同产地砂仁中槲皮苷和异槲皮苷含量测定

目的 测定4个不同产地砂仁中槲皮苷和异槲皮苷的含量。方法 采用高效液相色谱(HPLC)法对砂仁中槲皮苷和异槲皮苷含量进行测定,色谱柱为C18柱(250.0 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇∶0.1%磷酸(40∶60),等度洗脱,流速1.0 m L/min,检测波长350 nm,柱温30℃,进样量10μL。结果 槲皮苷回归方程为Y=5.7243X-0.0158,r=0.9993,线性范围为0.0503～0.1410μg,平均回收率为99.63%,RSD为0.63%;异槲皮苷回归方程为Y=5.8766X-0.0469,r=0.9996,线性范围为0.0187～0.1261μg,平均回收率为99.44%,RSD为0.85%。4个不同产地砂仁中槲皮苷和异槲皮苷平均含量高低顺序为:广东阳江阳春市福建漳州长泰县广西宗左宁明县云南西双版纳州。结论 不同产地砂仁药材中槲皮苷和异槲皮苷含量存在一定差异,2种成分的平均含量均以广东阳江阳春市最高,符合砂仁药材的道地性。     

生物技术

147在长春花细胞悬浮培养中细胞分裂素和乙烯通过甲基赤藓醇磷酸盐或萜类途径调控吲哚生物碱的产生〔英〕/Papon N…∥Planta Med.-2005,71(6).-572~574长春花Catharanthus roseus(L.)G.Don中的萜吲哚生物碱(TIAs)共同的母体化合物是异胡豆苷(strictosidine),而异胡豆苷由色胺和断马钱子苷(secologanin)立体定向缩合而成。由色氨酸脱羧酶(TDC)形成的1-色氨酸经过脱羧形成色胺;而断马钱子苷通过萜类途径由异戊烯基二磷酸(IPP)衍生而来。在IPP存在情况下,TIA主要是通过(选择的)甲基赤藓醇磷酸盐(MEP)途径,在质体中合成,而不是通过…     

不同产地白芍HPLC指纹图谱及芍药苷和芍药内酯苷含量的比较研究

目的 建立湘白芍、毫白芍与抗白芍HPLC指纹图谱分析方法,并对3种不同产地药材进行主要化学成分的比较.方法 采用HPLC对11批白芍样品进行指纹图谱分析,并测定了主要化学成分芍药苷和芍药内酯苷的含量.结果 所建立的方法精密度、稳定性和重现性良好;11批白芍样品的指纹图谱有8个共有峰.结论 通过建立白芍指纹图谱的定性、芍药苷及芍药内酯苷的定量,为白芍的质量控制提供了更为全面的方法.     

刺五加提取物中五加苷B、E含量的RP-HPLC测定方法的改进

刺五加提取物是从五加科植物刺五加 Acan-thopanax senticosus( Rupr.et Maxim.) Harms的干燥根及根茎中提取的有效成分经喷雾干燥而得 ,其中主要含有各种苷类如五加苷 B,E(又分别称为丁香苷和紫丁香树脂苷 )及多种木脂素类、异秦皮啶和黄酮类成分 [1] 。关于五加苷 B的测定已有文献报道 [1～ 3 ] ,笔者也曾采用 RP- HPLC法对五加苷 B,E的含量进行了测定 ,但有些样品中五加苷 B存在分离不完全的情况 [4]。为了准确地测定刺五加提取物中五加苷 B、E的含量 ,我们对该方法进行了改进和研究 ,采用梯度方法对五加苷 B、E的含量进行了测定…     

LC—MS／MS测定乌头属中药中8个生物碱含量

目的：建立LC-MS／MS测定乌头属中药8种生物碱含量的方法。方法：以甲醇-水（水相含0．1％甲酸和2．5mM醋酸铵溶液）为流动相,C18柱分离,采用ESI（＋）源,MRM监测,对制川乌、制草乌、制附子药材饮片中的双酯型生物碱（乌头碱、新鸟头碱、次乌头碱）,单酯型生物碱（苯甲酰乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱）,胺醇型生物碱（乌头原碱、新鸟头原碱）进行含量测定。结果：上述8种生物碱的线性关系良好,精密度、重复性的RSD都低于6％,加样回收率为95．77％-101．90％。结论：该方法简便、快速、精密度高、重复性好,可应用于乌头属中药的质量控制。     

紫外分光光度法测定藏药小檗皮中总生物碱的含量

目的:建立藏药小檗皮中总生物碱的含量测定方法,为其质量控制提供科学依据。方法:以盐酸小檗碱为对照品,采用紫外分光光度法测定不同来源小檗皮药材中总生物碱的含量。结果:小檗皮总生物碱在2.376~8.712μg/m L范围内线性关系良好,加样回收率为96.89%,RSD为1.08%。不同来源小檗皮药材的总生物碱含量在38.46~86.33 mg/g之间,平均含量为58.58 mg/g。结论:该方法简便、准确、重复性好,可用于小檗皮药材的质量控制和评价。     

附子中双酯型、单酯型、非酯型生物碱对佐剂性关节炎作用的实验研究

[目的]明确附子中双酯型生物碱、单酯型生物碱及非酯型生物碱对佐剂性关节炎大鼠血清一氧化氮（NO）、肿瘤坏死因子（TNF-α）水平及足趾容积变化的影响,初步明确其治疗佐剂性关节炎的药效物质。[方法]雄性wistar大鼠,左后足趾皮内一次性注射弗氏完全佐剂（FCA）0.1mL/只造模,2W后,取造模成功的大鼠,随机分为模型组、单酯型生物碱组、双酯型生物碱组及非酯型生物碱组,各给药组灌胃给予相应生物碱药液,给药2W后,检测血清中NO及TNF-α含量,造模及给药期间同时记录体重及足趾容积变化情况。[结果]与正常组比较,模型组与各给药组大鼠体重增长均受到抑制（P〈0.05）;与模型组比较,各给药组血清中NO、TNF-α含量亦显著性降低（P〈0.01）,单酯型组及非酯型组在降低NO作用上较双酯型明显（P〈0.05）;且各给药组大鼠的足趾容积显著降低（P〈0.01）,其中单酯型组效果更为明显。[结论]附子中单酯型、双酯型及非酯型生物碱对大鼠佐剂性关节炎有良好的治疗作用,其中单酯型生物碱的治疗作用更为明显。     

HPLC-MS法同时测定钩藤药材中四种生物碱含量

目的:建立钩藤药材中四种生物碱的高效液相色谱-质谱联用含量测定方法。方法:色谱条件:HaloC_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.7μm),1%乙酸-水(氨水调pH=5.5)-甲醇-乙腈为流动相,梯度洗脱,流量0.3 mL·min~(-1),柱温35℃。质谱条件:电喷雾离子源,正离子检测方式,多反应监测模式,干燥气温度350℃,干燥气流量9 L·min~(-1),雾化器压力35 psi,毛细管电压4 000 V。结果:钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱和异去氢钩藤碱含量分别为355.5μg·g~(-1)、143.9μg·g~(-1)、93.3μg·g~(-1)、202.7μg·g~(-1)。结论:该方法结果准确,重现性好,可用于测定钩藤药材中的生物碱含量。     

苦参生物碱的高速逆流色谱法制备研究--色谱参数和仪器参数的最佳化

应用新型的液液分配技术－高速逆流色谱法（Ｈｉｇｈ Ｓｐｅｅｄ Ｃｏｕｎｔｅｒ－ｃｕｒｒｅｎｔ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ,ＨＳＣＣＣ）对苦参生物碱类成分的分离制备进行探讨。选用氯仿－磷酸－磷酸钠缓冲液（ｐＨ６．２０）溶剂系统,经正交试验确定了ＨＳＣＣＣ的最佳运行参数。将苦参粗提物分离得到６个固态收集物,经ＴＬＣ４种不同展开系统证实其中有一个为单一组分。实验表明,ＨＳＣＣＣ法是一种高效、简便的分离制备中草药有效成分纯品的新方法。     

正交试验优选雷公藤药材生物碱的提取工艺

目的：建立雷公藤药材生物碱的最佳提取工艺.方法：以雷公藤总生物碱、雷公藤吉碱、雷公藤次碱和浸膏得率为指标,采用正交设计优选提取工艺参数.结果：最佳工艺条件：药材提取前浸泡1h,分别用12、10倍量的80％乙醇回流提取2次,每次1h,调pH为4.结论：此工艺合理可行,适用于雷公藤药材生物碱的提取.     

HPLC法测定万氏牛黄清心丸中小檗碱型生物碱的含量

用ＨＰＬＣ法分离并测定了万氏牛黄清心丸中小檗碱、巴马汀、药根碱和黄连碱的含量。采用硅胶色谱柱，以无水乙醇－３％三乙胺（９２∶８）为流动相，检测波长３４５ｎｍ。实验结果表明样品中各组份的分离度好，四种生物碱的标准曲线的相关系数分别为０．９９９９，０．９９９８，０．９９９６和０．９９９４，回收率分别为９９．６９％±１．２０％，９８．３８％±１．５４％，９５．２７％±１．８３％和９６．３２％±２．０１％。与药典方法比较，更加简便、准确。     

酸性染料比色法测定黄连中总生物碱的含量

目的：探讨黄连中总生物碱含量的测定方法。方法：采用酸性染料比色法测定黄连中总生物碱的含量。结果：盐酸小檗碱在4.176～16.68μg/ml范围内呈线性关系,相关系数为0.9997,平均加样回收率为100.1%,RSD为1.84%,测得黄连中总生物碱含量为0.1125 g/g。结论：本含量测定方法操作简单,灵敏度高,准确性好,重现性好,可用于测定黄连总生物碱的含量。     

苦地丁生物碱的化学成分

目的:研究苦地丁的生物碱成分。方法:采用色谱法进行单体化合物的分离纯化,通过理化性质和波谱数据鉴定化合物结构。结果:从苦地丁中分离并鉴定出16种生物碱,分别为:紫堇灵、coryincine、二氢血根碱、( )-13-表紫堇灵、四氢紫堇萨明、四氢黄连碱、6,7-methylenedioxy-2-(6-acetyl-2,3-methylenedioxybenzyl)-1(2H)-isoquinolinone、N-反式-阿魏酰基酪胺、普托品、紫堇萨明、去氢碎叶紫堇碱、黄连碱、氧化血根碱、去甲血根碱、6-丙酮基二氢血根碱s、pallidamine。结论:N-反式-阿魏酰基酪胺为首次从紫堇属植物中分得;coryincine、紫堇萨明、去氢碎叶紫堇碱、黄连碱、氧化血根碱、去甲血根碱、6-丙酮基二氢血根碱s、pallidamine为首次从苦地丁中分得。