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相似文献
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1.
[摘 要]目的:建立外源性ANO1稳定高表达的Hep-2细胞株,并观察其对 Hep-2 细胞生物学性状的影响。方法:设计引物,提取头颈鳞癌患者的临床标本DNA,并以其为模板行PCR,得到ANO1基因序列片段,将ANO1片段插入到PSG-5质粒,转染入Hep-2细胞株,将稳定高表达ANO1的Hep-2细胞株设为实验组,空白质粒转染的Hep-2细胞株设为对照组。并利用Western blotting法和免疫荧光实验检测已转染细胞,观察ANO1的表达情况。利用Boyden小室侵袭实验和黏附实验检测Hep-2细胞生物学性状的变化。结果:成功构建含ANO1片段的pSG-5质粒,Western blotting法检测结果显示,各组均出现目的条带,实验组的相对分子质量为100 000处条带明显较浓。间接免疫荧光实验结果显示,稳定高表达ANO1的Hep-2细胞内显现出亮绿色荧光,而空白质粒转染的Hep-2细胞内仅有较暗、较浅的绿色荧光。Boyden小室侵袭实验和黏附实验结果显示,稳定高表达ANO1的Hep-2细胞穿膜细胞百分比和黏附细胞百分比均明显高于对照组,两组结果比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:成功建立了ANO1稳定高表达的Hep-2细胞株,稳定高表达ANO1提高了Hep-2细胞的迁移能力。  相似文献   

2.
目的 研究Mus81过表达对人乳腺癌SKBR3增殖、侵袭和迁移能力的影响.方法 从相应甘油菌中抽提Mus81过表达质粒和阴性对照质粒,通过Lipofectamine@2000脂质体转染人乳腺癌SKBR3细胞.分别利用RT-PCR和Western blot法检测Mus81过表达效果,CCK-8增殖实验检测过表达前后细胞增殖能力变化,Transwell侵袭实验检测过表达前后细胞侵袭能力变化,Transwell迁移实验和细胞划痕实验检测过表达前后细胞迁移能力变化.结果 RT-PCR和Western blot法表明Mus81基因过表达效果良好.Mus81过表达后,增殖实验结果显示实验组细胞增殖速度明显低于对照组(P<0.05).Transwell侵袭实验显示,实验组细胞每高倍视野平均穿膜个数低于对照组(P<0.05).Transwell迁移实验显示,实验组细胞每高倍视野平均穿膜个数同对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05).细胞划痕实验结果显示,实验组划痕愈合率同对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05).结论 Mus81过表达抑制了人乳腺癌SKBR3细胞的增殖,降低了细胞的侵袭能力,但对SKBR3细胞迁移能力没有明显影响.  相似文献   

3.
目的:观察小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)沉默Gankyrin基因对喉鳞癌Hep-2细胞的生物学行为影响?方法:用siRNA沉默喉鳞癌Hep-2细胞中的Gankyrin基因,运用实时定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)及蛋白印迹法(Western blot)技术检测转染前后Gankyrin mRNA及蛋白的表达?采用CCK-8法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期,细胞划痕损伤实验和Transwell小室实验检测细胞迁移能力,Matrigel侵袭实验检测细胞侵袭能力,Western blot检测Gankyrin下调后p53蛋白的表达?结果:qRT-PCR和Western blot结果显示,Gankyrin siRNA组Gankyrin mRNA和蛋白的相对表达量均低于对照siRNA组和未处理组(P < 0.001)?CCK-8法显示Gankyrin siRNA组细胞增殖速度明显下降(P < 0.001)?流式细胞仪检测结果表明,Gankyrin siRNA组细胞凋亡率[(7.70 ± 1.12)%]明显高于对照siRNA组[(2.34 ± 0.32)%]和未处理组[(1.82 ± 0.29)%],差异有统计学意义(P < 0.001);与两对照组相比,Gankyrin siRNA组G1期比例增加,S期比例减少,差异有统计学意义 (P < 0.001)?细胞划痕损伤实验和Transwell小室实验显示Gankyrin siRNA组的细胞迁移能力明显减弱(P < 0.01);Matrigel侵袭实验显示Gankyrin siRNA组细胞侵袭能力与对照siRNA组和未处理组比较,差异无统计学意义(P > 0.05)?Gankyrin表达下调增加了Hep-2细胞中p53蛋白的表达,差异有统计学意义(P < 0.001)?结论:Gankyrin表达下调能抑制Hep-2细胞的增殖和迁移,可能与细胞凋亡?细胞周期改变及p53的表达密切相关?  相似文献   

4.
目的:探讨转移相关基因2(MTA2)对喉癌细胞系Hep-2的增殖、迁移和侵袭的影响。方法:通过针对MTA2基因的小干扰RNA(siRNA-MTA2)对MTA2基因表达进行下调,采用RT-PCR和Transwell检测转染,作为实验组,对照组转染阴性对照(sicontrol),通过MTT、细胞划痕实验和Transwell法分别检测MTA2对Hep-2的增殖、迁移和侵袭的影响。结果:实验组MTA2mRNA和蛋白表达水平明显低于对照组(P<0.05),实验组培养7d和9d时细胞增殖能力明显低于对照组(P<0.05),实验组细胞迁移能力和细胞侵袭能力明显低于对照组(P<0.05)。结论:MTA2与喉癌细胞系Hep-2细胞增殖、迁移和侵袭密切相关,有望成为治疗喉癌的靶点。  相似文献   

5.
目的探讨芦荟大黄素对人子宫内膜癌细胞HEC-1-B迁移和侵袭的影响。方法 HEC-1-B细胞培养后分对照组及实验组,对照组细胞不进行任何处理,实验组用芦荟大黄素(30μmol/L)作用24 h。应用细胞划痕实验测芦荟大黄素对HEC-1-B细胞迁移的影响;应用Transwell小室实验检测芦荟大黄素对HEC-1-B细胞侵袭的影响。结果与对照组相比,实验组24 h后划痕宽度明显大于对照组的划痕宽度。实验组24 h后的透膜细胞数明显减少。结论芦荟大黄素可抑制人子宫内膜癌细胞的迁移与侵袭。  相似文献   

6.
目的: 探讨慢病毒靶向介导技术沉默P27RF-Rho基因,阐述其对肝癌细胞侵袭性的影响。方法: 构建P27RF-Rho RNAi慢病毒。慢病毒感染肝癌细胞BEL7402。实验分为P27RF-Rho-siRNA实验组、Scramble-siRNA阴性对照组和BEL7402空白对照组。Western bloting法检测P27RF-Rho基因沉默效果及肝癌相关蛋白RhoA、RhoC、VEGF、P53和PTEN表达水平;明胶酶谱分析肿瘤侵袭相关基质金属蛋白酶(MMPs)活性;细胞划痕和体外Transwell小室侵袭实验比对细胞迁移和侵袭能力的改变。结果: Western blotting法检测,P27RF-Rho-siRNA实验组BEL7402中P27RF-Rho、RhoA、RhoC和VEGF蛋白表达水平明显低于2个对照组(P<0.05),P53和PTEN表达水平高于2个对照组(P<0.05)。明胶酶谱,P27RF-Rho-siRNA实验组MMPs活性明显降低(P<0.01)。划痕实验,P27RF-Rho-siRNA实验组细胞迁移距离明显低于2个对照组(P<0.01)。实验组穿过Transwell小室的平均细胞数明显少于2个对照组(P<0.01)。结论: 沉默P27RF-Rho基因可以降低肝癌细胞BEL7402的侵袭和迁移能力。  相似文献   

7.
曾艳  薛伶俐  方川  程维  李雅冬 《重庆医学》2021,50(6):922-926
目的 检测微管蛋白酪氨酸连接酶类似物12(TTLL12)过表达对人舌磷癌SCC-25细胞株生物学特性的影响.方法 建立TTLL12稳定过表达的SCC-25细胞株,采用间接免疫荧光法和Western blot检测TTLL12在SCC-25细胞内的分布,MTT检测沉默TTLL12对SCC-25细胞生长的影响,Boyden小室侵袭试验检测沉默TTLL12对SCC-25细胞侵袭的影响,采用SPSS10.0软件包对数据进行统计学分析.结果 间接免疫荧光法和Western blot结果均显示TTLL12在细胞质、细胞核及细胞核膜均有分布.间接免疫荧光法结果显示α微管蛋白(α-tubulin)的分布与TTLL12重合.MTT实验结果显示沉默组(沉默TTLL12基因的SCC-25细胞)的SCC-25细胞生长较对照组(未作任何处理的SCC-25细胞)受到明显抑制(P<0.05).Boyden小室侵袭实验结果显示沉默组的穿膜细胞百分比明显小于对照组(P<0.05).结论 沉默TTLL12可有效抑制SCC-25细胞的生长和侵袭能力.  相似文献   

8.
[目的] 研究补肺汤对骨肉瘤细胞增殖及侵袭的影响,探讨补肺汤对骨肉瘤的防治作用及其潜在机制。 [方法] 将大鼠骨肉瘤细胞UMR-106分为对照组,补肺汤低、中、高浓度组,对照组加入洛斯维尔帕克纪念研究所(Roswell Park Memorial Institute,RPMI)1640培养液进行培养,补肺汤低、中、高浓度组分别加入不同浓度的补肺汤进行培养。采用噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法检测细胞增殖率,划痕实验、Transwell实验探究细胞迁移能力,免疫印迹、实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,Real-time qPCR)检测磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)的蛋白及mRNA表达。[结果] 与对照组比较,补肺汤各浓度组细胞增殖率明显下降(P<0.001,P<0.0001);中、高浓度组细胞迁移数量明显减少(P<0.0001);中、高浓度组穿过小室细胞数量明显减少(P<0.0001);中、高浓度组AKT、mTOR 蛋白和mRNA相对表达量均明显下调(P<0.05,P<0.01,P<0.001,P<0.0001)。 [结论] 补肺汤具有较好的抗骨肉瘤细胞增殖迁移能力,其可能通过干预PI3K/AKT/mTOR信号通路发挥抗肿瘤作用。  相似文献   

9.
目的 观察不同浓度苯噻啶(Pizotifen)对人肺腺癌A549和PC9细胞增殖、迁移与侵袭能力的影响,并初步探究其机制。方法 取对数生长期的A549和PC9细胞,分为对照组(细胞对照组为培养基直接作用于细胞,溶剂对照组为含有0.1%DMSO的培养基作用于细胞)和实验组(浓度分别为10、20、30、40μmol/L的苯噻啶作用于细胞)。CCK-8法检测人肺腺癌细胞的增殖能力,划痕实验和Transwell迁移实验检测其迁移能力,Transwell侵袭实验检测其侵袭能力,ELISA法检测Wnt3a/β-catenin信号通路蛋白、上皮-间质转化(EMT)相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cad)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达水平。结果 与溶剂对照组相比:CCK-8结果显示,实验组A549和PC9细胞活力降低,出现不同程度的增殖抑制现象,在20、30、40μmol/L浓度组有一定的时间依赖性(P<0.05);划痕实验结果表明,实验组划痕愈合率小于对照组,苯噻啶浓度越高,划痕愈合率越低(P<0.05);Transwell迁移和侵袭实验结果显示,实验组穿过小室的肺腺癌细胞数量明显低...  相似文献   

10.
目的探讨Calphostin C对高转移乳腺癌MDA-MB-435S细胞侵袭能力的抑制作用。方法高转移乳腺癌MDA-MB-435S细胞系购于中国医学科学院上海细胞库,通过划痕实验、Transwell迁移实验、Transwell侵袭实验及细胞黏附实验观察Calphostin C对MDA-MB-435S细胞侵袭能力的影响。结果划痕实验结果显示,与对照组比较,实验组MDA-MB-435S细胞伤口愈合显著减慢,对照组细胞伤口24 h基本愈合,而实验组细胞伤口24 h仍未愈合。Transwell迁移和侵袭实验结果显示,实验组MDA-MB-435S细胞迁移、侵袭并穿过Transwell小室底膜的细胞数显著少于对照组(P<0.05)。细胞黏附实验结果显示,与对照组比较,实验组MDA-MB-435S细胞与纤维连接蛋白的黏附性显著降低(P<0.05)。结论 Calphostin C可显著抑制高转移乳腺癌MDA-MB-435S细胞的侵袭能力。  相似文献   

11.
目的:研究miR-200c对乳腺癌MDA-MB-231细胞和BT-549细胞迁移能力及增殖能力的影响,阐明miR-200c抑制三阴性乳腺癌上皮间质转化(EMT)的相关机制。方法:选取三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231和BT-549,对其进行瞬时转染,分为空白对照组、阴性对照组(转染negative control/Lipo2000)、试剂对照组(转染Lipo2000)和实验组(转染miR-200c mimic/Lipo2000);利用RT-PCR和Western blotting法分别检测vimentin及β-catenin mRNA和蛋白表达水平;采用CCK8实验和划痕实验分别检测细胞增殖能力和迁移能力。结果:RT-PCR法和Westernblotting法检测,实验组细胞中vimentin和β-catenin mRNA和蛋白表达水平降低,与空白对照组、阴性对照组和试剂对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。CCK8法检测,实验组细胞增殖低于阴性对照组和试剂对照组(P<0.05)。划痕实验,实验组细胞划痕宽度恢复率低于阴性对照组和试剂对照组(P<0.05)。结论:miR-200c通过调节MDA-MB-231和BT-549中β-catenin、vimentin的mRNA和蛋白表达量、降低细胞的迁移和增殖能力,进而抑制三阴性乳腺癌EMT。  相似文献   

12.
目的 探讨下调泛素样含PHD和环指域1(ubiquitin-like protein containing PHD and RING finger domains 1,UHRF1)基因在喉癌Hep-2细胞中的表达后对其增殖,凋亡,侵袭迁移能力的影响.方法 实验分为空白组,阴性对照组和干扰组.利用UHRFl-siRNA干扰UHRF1在喉癌Hep-2细胞中的表达,采用qRT-PCR、Western blot检测UHRF1的表达变化.采用MTT法、流式细胞术、Transwell实验检测下调UHRF1表达后Hep-2细胞的增殖、凋亡、侵袭、迁移能力的变化.Western blot检测下调UHRF1表达后Hep-2细胞内Bax、Bcl-2、MMP-2、MMP-9蛋白表达的变化情况.结果 与空白组和阴性对照组相比干扰组下调UHRF1的表达后可明显抑制喉癌Hep-2细胞的增殖能力(P <0.001).空白组,阴性对照组,干扰组凋亡率分别为(5.47±2.77)%,(3.95±0.66)%,(18.95±1.10)%,干扰组凋亡率明显提高(P <0.001).空白组,阴性对照,干扰组每视野侵袭细胞数分别为(213.7 ±13.1),(221.3±10.3),(97.7±7.5),干扰组侵袭细胞数明显降低(P<0.001).空白组,阴性对照,干扰组每视野迁移细胞数分别为(230.7±5.5),(222.7±11.2),(111.7±7.6),干扰组迁移细胞数明显降低(P <0.001).干扰组细胞Bax蛋白表达上调(P <0.001),Bcl-2蛋白表达下调(P <0.001),MMP-2蛋白、MMP-9蛋白表达下调(P <0.001).结论 在喉癌Hep-2细胞中下调UHRF1的表达后可明显抑制细胞的增殖,促进细胞凋亡,抑制细胞的侵袭迁移能力.  相似文献   

13.
目的:探讨胶质瘤相关癌基因1(Gli1)在胃癌组织中的表达,阐明Gli1基因对胃癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法:收集95例胃癌患者胃癌组织和癌旁组织,RT-qPCR法检测胃癌组织和癌旁组织中Gli1mRNA表达水平,免疫组织化学法检测胃癌组织和癌旁组织中Gli1蛋白表达水平。以人胃癌细胞株MKN28、BGC823和SGC7901为研究对象,胃永生化上皮细胞株GES-1作为对照,RT-qPCR法检测各细胞株中Gli1mRNA表达水平。将Gli1-siRNA转染BGC823细胞后,实验分为对照组、con-siRNA组和Gli1-siRNA组;RT-qPCR法检测各组细胞中Gli1mRNA表达水平,CCK-8检测细胞增殖情况,Transwell小室检测细胞迁移能力,Western blotting法检测各组细胞P27、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白的表达水平。结果:胃癌组织中Gli1mRNA表达水平和蛋白阳性表达率明显高于癌旁组织(t=27.606,P<0.01;χ2=54.782,P<0.01)。在GES-1、MKN28、SGC7901和BGC823细胞中Gli1mRNA表达水平比较差异有统计学意义(F=86.341,P<0.01)。Gli1-siRNA组Gli1mRNA表达水平明显低于对照组和con-siRNA组(F=48.322,P<0.01)。Gli1-siRNA组胃癌细胞增殖率明显低于对照组和con-siRNA组(F=54.428,P<0.01)。Gli1-siRNA组胃癌细胞的迁移数低于对照组和con-siRNA组(F=257.788,P<0.01)。与对照组比较,con-siRNA组细胞中P27、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平差异均无统计学意义(P>0.05);与con-siRNA组比较,Gli1-siRNA组细胞中P27蛋白表达水平明显升高(t=-3.776,P=0.020),MMP-2和MMP-9蛋白表达水平明显降低(t=3.479,P=0.025;t=5.487,P=0.005)。结论:Gli1在胃癌组织表达水平高于癌旁组织,抑制Gli1基因的表达能抑制胃癌细胞增殖和迁移能力。  相似文献   

14.
目的: 探讨丝氨酸/苏氨酸激酶 15(STK15)在头颈鳞状细胞癌(鳞癌)组织中的表达及其与各临床病理特征的关系,阐明沉默STK15对人喉癌Hep-2细胞株生物学的影响。方法: 采用免疫组织化学方法检测头颈鳞癌组织中STK15蛋白表达;采用慢病毒沉默STK15,获得稳定转染细胞株;实验分为对照组(PLKO.1-puro-siRNA)和实验组(PLKO.1-puro-siSTK15),采用Western blotting法、RT-PCR 法、MTT法、侵袭实验和免疫荧光法检测沉默STK15对Hep-2细胞中STK15蛋白和STK15 mRNA表达水平、细胞增殖活性、穿膜细胞百分比和中心体数量的影响。结果: 免疫组织化学检测,STK15蛋白在头颈鳞癌组织中的表达率为64.96%,STK15蛋白表达与头颈鳞癌的TNM分期和预后有密切关联(P<0.05)。Western blotting法检测,实验组STK15蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。RT-PCR检测,实验组STK15 mRNA表达水平明显降低(P<0.05)。MTT法检测,实验组细胞增殖活性明显低于对照组 (P<0.05)。侵袭实验,实验组穿膜细胞百分比明显低于对照组 (P<0.05)。免疫荧光检测,实验组中心体数目明显低于对照组 (P<0.05)。结论: STK15蛋白表达与头颈鳞癌的发展和预后密切关联,沉默STK15可降低Hep-2细胞的生长速度和迁移能力,提示STK15可作为头颈鳞癌的治疗靶点和预后标志物。  相似文献   

15.
目的 探讨重组慢病毒介导的基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)基因同时沉默对喉鳞癌侵袭生长的抑制作用.方法 采用核糖核酸(RNA)干扰技术,运用MMP-2和MMP-9基因小于扰RNA(siRNA)的重组慢病毒(MMP-2-RNAi-lentivirus,MMP-9-RNAi-lentivirus)共同转导喉鳞癌Hep-2细胞,并运用逆转录聚合酶链反应方法(RT-PCR)检测Hep-2细胞MMP-2和MMP-9基因的表达.通过Boyden小室实验观察MMP-2-RNAi-lentivirus和MMP-9-RNAi-lentivirus重组慢病毒转导对喉癌细胞侵袭能力的影响.构建喉癌移植瘤模型,将MMP-2-RNAi-lentivirus和MMP-9-RNAi-lentivirus重组慢病毒瘤内注射,观察抑瘤效果.运用免疫组化方法检测移植瘤中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,评估其对细胞增殖的影响.结果 重组慢病毒MMP-2-RNAi-lentivirus和MMP-9-RNAi-lentivirus能高效地转导入靶细胞.RT-PCR检测显示,转导后的Hep-2细胞中MMP-2和MMP-9表达阴性.侵袭实验显示,实验组Hep-2细胞中穿过人工基底膜的细胞数为(14±4)个,明显少于空载体对照组的(32±6)个(P<0.01).体内实验显示,MMP-2-RNAi-lentivirus和MMP-9-RNAi-lentivirus重组慢病毒瘤内注射后,裸鼠移植瘤平均重量和平均体积明显小于对照组,抑瘤率为46.59%,PCNA指数也明显降低.结论 慢病毒介导的MMP-2和MMP-9基因共同沉默能有效的抑制喉癌的侵袭,生长及增殖.  相似文献   

16.
目的 探讨内皮素3(endothelin 3,EDN3)基因对结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力的影响及其相关机制.方法 实时荧光定量PCR检测EDN3 mRNA在人结直肠癌组织及对应癌旁组织中的表达情况,半定量PCR检测EDN3及内皮素受体B(endothelin receptor B,EDNRB) mRNA在结直肠癌细胞(CaC02、LoVo、HT-29)中的表达情况.将包装过载体pCDH-CMV-MCS-EFl-Puro-EDN3的病毒感染至结直肠癌细胞LoVo,MTS、克隆形成法、划痕法、Transwell检测EDN3对细胞增殖、克隆、迁移和侵袭能力的改变.Western blot检测LoVo中p-ERK1/2和t-ERK 1/2蛋白改变.结果 EDN3在人结直肠癌组织和细胞中表达降低.表达EDN3基因的重组载体成功感染至LoVo细胞.MTS和克隆实验结果显示,实验组和对照组细胞增殖和克隆形成差异无统计学意义(P>0.05),划痕实验和Transwell实验提示实验组细胞迁移和侵袭能力明显低于对照组(P<0.01).Western blot检测结果显示磷酸化的ERK1/2蛋白表达下降(P<0.01).结论 EDN3在结直肠癌组织和细胞中表达降低,过表达EDN3能抑制结直肠癌LoVo细胞的迁移和侵袭能力,其机制可能与ERK1/2信号通路有关.  相似文献   

17.
目的:探究M2型巨噬细胞来源的外泌体(M2exos)对成纤维细胞增殖、迁移的影响。方法:极化RAW264.7细胞并收集M2型巨噬细胞上清,提取并鉴定M2exos。通过免疫荧光观察L929真皮成纤维细胞对M2exos的摄取情况,设对照组和M2exos组,通过CCK-8、细胞划痕实验分别观察在0、24、48、72 h对成纤维细胞的增殖和迁移作用。建立皮肤创口模型,随机将12只C57BL/6J小鼠分为PBS组和M2exos组。两组分别注射200 μL PBS、M2exos(500 μg/mL),在第1、4、7天观察、拍摄记录,并取材进行HE染色。结果:成功极化得到M2型巨噬细胞,提取和鉴定了M2exos。与对照组相比,M2exos组在48、72 h对成纤维细胞具有促进增殖(t=26.73,P<0.000 1;t=6.648,P<0.01)、迁移(t=5.196,P<0.05;t=22.00,P<0.000 1)作用。对C57BL/6J小鼠的研究显示,与PBS组相比,在第4、7天时M2exos组创面显著缩小(t=32.80、 51.16,均P<0.000 1)。结论:M2exos通过促进成纤维细胞增殖和迁移,对小鼠创面愈合有显著的促进作用。  相似文献   

18.
目的 探讨靶向沉默Rictor表达对肝癌细胞增殖、迁移和增殖的影响。方法 采用LipofectamineTM2000向SMMC-7721和Hep3B细胞转染成功构建靶向沉默Rictor表达的siRNA载体片段(沉默组)或无义siRNA片段(对照组),转染48 h后采用QPCR检测Rictor mRNA水平,以Western blotting检测Rictor、p-Akt、细胞周期蛋白和EMT相关蛋白的表达情况。MTT实验、EdU增殖实验、Transwell实验和Boyden实验分别检测肝癌细胞的增殖、迁移和增殖能力。结果 转染48 h后,沉默组细胞的Rictor mRNA蛋白水平大部分都低于对照组细胞;沉默组细胞的增殖、迁移、侵袭能力均低于对照组细胞,差异有统计学意义(P<0.01)。MTT实验及EdU增殖实验表明,两组肝癌细胞在沉默Rictor表达后增殖减慢、S期细胞比例明显减少(P均<0.01);Transwell实验和Boyden实验表明,两组肝癌细胞在沉默Rictor表达后穿膜细胞数显著减少(P均<0.01)。结论 Rictor基因在肝癌细胞中起到癌基因的作用,沉默Rictor的表达抑制肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭的过程,可能与下调p-Akt、CCND1和N-cadherin、ZEB1、Vimentin蛋白表达,上调E-cadherin,P21和P27蛋白表达有关。  相似文献   

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