中药脊髓康治疗大鼠脊髓损伤的实验研究

目的:观察脊髓康对脊髓损伤大鼠的治疗作用及其作用是否有剂量依赖性,并与强的松进行对照.方法:SD大鼠72只随机分为6组(n=12).造模后脊髓康高、中、低剂量组予脊髓康25、12.5、6.25 g生药/kg体重;强的松组予强的松0.06g/kg体重.正常组及模型组予等量蒸馏水.测定血液及损伤脊髓中IL-10、INF-α、NO、NOS、SOD、MDA含量;全血粘度;损伤脊髓病理学检查.结果:血液中TNF-α含量升高,脊髓康各剂量组相时模型组降低.血液中IL-10水平下降,强的松组和脊髓康各剂量组相对模型组有显著差异.强的松组相对模型组全血比粘度无差异.脊髓康高、中剂量组低于模型组.血液SOD活力下降,MDA、NO和NOS含量升高.脊髓康高、中剂量组SOD活力高于模型组,MDA及NO含量低于模型组.脊髓康各剂量组NOS含量低于模型组.强的松组相对模型组MDA含量下降.SOD活性无明显变化.脊髓损伤部位SOD活力下降,MDA、NO和NOS含量升高.脊髓康高剂量组SOD活力高于模型组.脊髓康高、中剂量组MDA、NOS含量低于模型组.脊髓康各剂量组NO含量低于模型组.强的松组相对模型组MDA含量下降,SOD活性无明显变化.病理结果:脊髓康高剂量组脊髓病变程度较轻.中剂量组较高剂量组稍差.低剂量组白质区水肿.强的松组与高、中剂量组相似.结论:脊髓康能抑制NOS表迭、降低NO含量;能降低MDA含量、提高SOD活性;能改善血液流变学指标;能降低TNF-α水平;能提高IL-10水平;能防止脊髓损伤的继发性改变.促进脊髓组织恢复,促进神经组织再生,高剂量较中剂量疗效更显著.     

“截瘫康”对大鼠急性脊髓损伤（ASCI）的药效学研究

本实验通过大鼠急性脊髓损伤的动物模型，以肌力测定、尿失禁的程度、体重变化、形态学检查和体感诱发电位测定为指标，观察了中药“截瘫康”对急性脊髓损伤的药理作用。结果表明，“截瘫康”对大鼠急性脊髓损伤有明显的治疗作用，其作用存在剂量依赖关系，且明显优于阳性药对照组，表现为肌力恢复的时间早，而且明显；血尿及尿失禁持续的时间短；诱发电位的结果揭示；潜伏期、传导时间及传导速度较对照组及阳性药对照组有明显恢复；形态学资料也与上述实验结果一致。     

Effect of Touch-stimulus on the Expression of C-fos and TrkA in Spinal Cord Following Chronic Constriction Injury of the Sciatic Nerve in Rats

Central sensitization is a key mechanism in thedevelopment and maintenance of the chronic pain.Previous studies show that NGF triggers long last ing plasticity of central nociception, and the specif ic receptor of NGF TrkA is up regulated in thechronic inflammatory pain in the primary sensoryneurons[1], but their mechanisms are not fully un derstood so far. In order to examine the effect ofTrkA on the chronic pain, in this study, the C fosgene was used as a marker of neur…     

Effect of Electroacupuncture at Acupoints of the Governor Vessel on Aquaporin-4 in Rat with Experimental Spinal Cord Injury

This study is to investigate the effects of electroacupuncture at acupoints of the Governor Vessel（GV） on aquaporin-4 （AQP-4） expression and on functions of the hind limbs in the rat of spinal cord injury. The functions of the hind limbs were detected with BBB scale on the ld, 3d, 7d and 21d after the spinal cord injury, respectively, and AQP-4 expression in the spinal cord was determined with immunohistochemical method and analyzed quantitatively with image analyzer. The results indicated that on the ld after the spinal cord injury, increased AQP-4 expression can be seen significantly in both the gray matter and the white matter of the injured spinal cord, and it reached the peaks on the 3d after the spinal cord injury in both the electroacupuncture group and the spinal cord injury group. However, AQP-4 express was significantly decreased in the electroacupuncture group as compared with that in the control group on 7d, 14d and 21d （P〈0.05 or P〈0.01）. The decrease of AQP-4 expression almost went with the improvement of the neurological function, which suggested that electroacupuncture at the acupoints of the Governor Vessel can inhibit edema of the spinal cord to alleviate the secondary spinal cord injury by means of decreasing the AQP-4 expression after the spinal cord injury, so as to protect the residual normal spinal cord tissues and promote the rebuilding of nervous tissues.     

Many Questions on Spinal Cord Injury

脊髓损伤是临床常见多发病. 目前，脊髓损伤的修复治疗仍是临床所面临的一大难题. 笔者对脊髓损伤后的变化过程、研究现状、损伤修复中存在的问题及解决这些问题的方向进行了初步探讨.     

Alteration of Excitatory Amino Acid in Experimental Spinal Cord Injury in Rats

Objective To detect the effect of excitatory ammo add (EAA) in the secondary damage following spinal cord injury (SCI). Methods Glutamate (Glu) and Aspartate (Asp) on the injury site (T8) were studied using a rat SCI model induced by Allen's weight drop method (10g×2. 5cm). The result suggested that Asp and Glu were significantly increased in 10 mm. Results Glu was significantly decreased from 2 h to 24 h,while Asp was a tittle reduced in 2 h,and slightly rose in 4 h as compared with Control Group. Though elevated in 8 h,it dropped again in 24h as compared with Control Group. Conclusion The result indicates that the rise of EAA following SCI could be the cause of the secondary spinal cord damage.     

Effects of Nerve Growth Factor on Bcl—2 Protein af—ter Spinal Cord Injury in Rats

Ａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｓａｐｒｏｃｅｓｓｏｆｃｅｌｌ”ｓｕｉｃｉｄｅ”ｉｎｗｈｉｃｈｔｈｅｃｅｌｌａｃｔｉｖｅｌｙｋｉｌｌｓｉｔｓｅｌｆａｔａｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉ ｃａｌｏｒｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｃｏｎｄｉｔｉｏｎｏｃｃｕｒｒｉｎｇｉｎｉｎｊｕｒｅｄｓｐｉｎａｌｃｏｒｄ .Ｔｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆｎｅｒｖｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ(ＮＧＦ)ｏｎｉｎｊｕｒｅｄｓｐｉｎａｌｃｏｒｄ ,ｔｈｅｃｈａｎｇｅｓｏｆｔｈｅｂｃｌ 2ｐｒｏｔｅｉｎｗｅｒｅｍｅａ ｓｕｒｅｄｂ…     

Effect of Jinguo Weikang Capsule （金果胃康胶囊） on Proto-oncogene Expression of Gastric Mucosa in Rats with Gastric Precancerous Lesions

Objective： To study the effect of Jinguo Weikang Capsule （金果暖康胶囊, JWC） on the gene expression of H-ras, epidermal growth factor receptor （EGFR）, P53 and C-myc of the gastric mucosa in rats with gastric precancerous lesions, and to investigate the action mechanism of JWC on gastric precancerous lesions. Methods： A rat model with paratypical proliferation of the gastric epithelium mucosa was established by using ^60Co irradiation. Rats were divided into the normal group, model group, high-, medium-, low-dose JWC treatment groups, and the vitacoenzyme control group, and were treated for 30 days. The expression of H-ras, EGFR, P53 and C-myc genes of the gastric mucosa was detected by using immunohistochemical methods. Results： The expression and over-expression rates of H-ras, EGFR, P53 and C-myc gene in the high- and medium-dose JWC treatment groups were significantly lower （P〈0.05） as compared with those of the model group. Conclusion： JWC can inhibit the expression of the H-ras, EGFR, P53 and C-myc genes expression of the gastric mucosa in rats, which may be one of mechanisms involved in suppressing or reversing gastric carcinogenesis.     

Effect of Bushenantai Recipe on the Expression of Endometrial LIF in Mice with Embryonic Implantation Dysfunction

In order to observe the effect of Bushenantai recipe on the expression of endometrial leukemia-inhibitory factor （LIF） in mice with embryonic implantation dysfunction （EID）, 120 Kunming mice post coition were randomized into three groups： normal control group, model group and traditional Chinese medicine group （TCM group） （n=40 in each group）. Uterus was collected on the pregnancy day （Pd） 4, 5, 6 after an intravenous injection of Evan＇s blue. The endometrium was dyed by Evan＇s blue and the mean points of response were observed on Pd 5. The expression of LIF mRNA and protein was detected by RT-PCR and immunohistochemistry respectively and analyzed statistically by image system. The results showed that the number of implantation sites in model group was remarkably less than in normal control group and TCM group. There was no significant difference between normal control group and TCM group. The expression of LIF mRNA and protein in model group was delayed. Bushenantai recipe could increase the expression of LIF mRNA and protein in endometria of mice with EID. It was suggested that Bushenantai recipe could improve embryo implantation of mice with EID by promoting the endometrial LIF expression and endometrial decidualization.     

Effect of Acupuncture on Free Radicals in Rats with Early Experimental Spinal Cord Injury

Effect of acupuncture on free radicals after spinal cord injury was observed in rats with experimentalspinal cord injury(SCI).Results indicated that within 24 hours after SCI malondialdehyde(MDA)increased progressively,2 hours after SCI it reached the peak;and the superoxide dismutase(SOD)activity decreased significantly at the same hours,the decrease being the most marked 2-6 hours afterSCI.The MDA content in the acupuncture group was significantly lower(P<0.05)and the SOD activityhigher(P<0.01)than that of the control group respectively.It is suggested that acupuncture inhibitsproduction of MDA and increases the SOD activity.     

急性颈椎脊髓损伤并发呼吸功能障碍的早期救治

目的探讨急性颈椎脊髓损伤并发呼吸功能障碍的临床特点及早期有效的治疗措施。方法回顾性分析105例急性颈椎脊髓损伤患者的临床资料,分析患者入院时的呼吸模式、血气分析指标,判断患者脊髓损伤平面,以ASIA评分评价瘫痪程度,根据患者颈椎损伤情况及呼吸功能状况行颈部牵引制动、气管切开及呼吸机辅助呼吸、加强翻身拍背及支气管镜吸痰、抗感染、颈椎前后路减压植骨内固定手术等治疗措施。结果出现呼吸功能障碍97例,其中严重呼吸衰竭行气管切开、呼吸机辅助呼吸34例,单纯气管切开48例,15例未气管切开、仅行吸氧及支气管镜吸痰治疗。2例死亡,其中1例肺部严重感染,1例颅脑外伤合并纵隔血肿等多发伤。气管切开、呼吸机辅助呼吸患者全部脱机封管成功。结论急性颈椎脊髓损伤患者应早期进行呼吸功能评估,采用气管切开等进行有效的呼吸道管理,调整患者营养状态并加强抗感染,必要时行颈椎手术等综合治疗。     

莱菔硫烷对小鼠脊髓损伤后后肢功能的作用

目的 观察莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对小鼠脊髓损伤后炎症反应、胶质瘢痕、轴突再生的干预作用,探讨其在脊髓损伤中的作用机制.方法 雌性ICR小鼠66只,按随机数字表法分为4组:假手术组(n=12)、单纯损伤组(n=18)、莱菔硫烷组[5 mg/(kg·d)SFN,ip,n=18]、溶剂对照组(等体积玉米油腹腔注射,n=18).假手术组仅咬除椎板,余各组行脊髓夹伤术,制备脊髓夹伤模型.建模后1、7、14、21、28 d进行小鼠后肢运动功能评分(BMS评分);Western blot检测建模后7d各损伤组小鼠脊髓GFAP、CSPG、P65表达情况,28 d后各损伤组GAP-43表达情况;ELISA检测建模后7d各组小鼠脊髓TNF-α、IL-1β表达情况;免疫荧光染色观察建模后7d各损伤组小鼠脊髓GFAP、CSPG、P65表达情况.结果 假手术组BMS评分9分,各脊髓损伤组术后后肢运动功能均有不同程度恢复,术后28 d时单纯损伤组评分为(2.17±0.41)分,溶剂对照组(2.33±0.52)分,莱菔硫烷组(3.33±0.52)分,后者与前二者比较差异有统计学意义(P＜0.05).术后7d行免疫荧光染色可见各脊髓损伤组星形胶质细胞活化,GFAP、CSPG、P65表达增加,单纯损伤组与溶剂对照组较莱菔硫烷组更明显.术后7d莱菔硫烷组GFAP、CSPG、P65蛋白相对表达量均较单纯损伤组与溶剂对照组低(P＜0.05),术后28 d莱菔硫烷组GAP-43蛋白相对表达量较单纯损伤组与溶剂对照组明显增加(P＜0.05).建模后7d,莱菔硫烷组小鼠脊髓TNF-α、IL-1β表达较其余损伤组明显降低(P＜0.05).结论 莱菔硫烷可减轻小鼠脊髓损伤后炎症反应,抑制胶质瘢痕形成,促进轴突再生,改善后肢运动功能.     

补阳还五汤联合针刺疗法对不完全脊髓损伤后运动障碍患者的疗效

【摘要】 目的 探讨分析补阳还五汤联合针刺疗法对不完全脊髓损伤后运动障碍患者的疗效。方法 选取2015年10月~2017年12月于我院治疗的不完全脊髓损伤患者74例,随机分为随机组和对照组两组。对照组采用常规药物进行治疗,研究组在对照组治疗基础上采用补阳还五汤联合针刺疗法治疗,比较两组患者的治疗效果,观察记录两组患者的ADL评分、各项功能评分差值及步行能力评分、疼痛评分（VAS）等指标。结果 研究组的临床疗效显著优于对照组(P＜005);与治疗前相比,两组患者各项功能评分差值及步行能力评分明显升高(P＜005),且研究组步行能力等各项指标均显著高于对照组(P＜005);研究组疼痛评分（ADL）显著高于对照组(P＜005);研究组治疗后 VAS评分明显低于对照组( P＜005)。结论 在不完全脊髓损伤后运动障碍治疗过程当中,补阳还五汤联合针刺疗法的治疗效果理想,可在临床推广应用。     

针刺对大鼠脊髓损伤后脊髓前角运动神经元功能的影响

目的探讨针刺对脊髓损伤(SCI)大鼠前角运动神经元功能恢复的影响。方法成年雄性SD大鼠60只,改良Allen法压迫致伤T8、T9,随机分为实验组和对照组,伤后分别给予电针刺激大鼠双下肢足三里和悬钟、伏兔和三阴交穴,取治疗2,4,6周伤段脊髓进行PCR扩增和组织切片。利用RT-PCR技术检测伤区脊髓胶质源性神经营养因子(GDNF)mRNA基因体内表达的变化;应用尼氏染色、酶组织化学染色方法观察大鼠SCI后伤区脊髓前角运动神经元存活的数目和乙酰胆碱酯酶(AChE)的变化;采用斜板试验和BBB评分法观察大鼠后肢运动功能恢复情况。结果实验组较对照组AChE活性显著增加(P<0.01);实验组脊髓前角大、中型神经元的数目较对照组明显增加(P<0.05);实验组GDNF mRNA基因体内表达较对照组明显增加(P<0.01);大鼠SCI 3周后针刺治疗组后肢运动功能评分均明显高于对照组(P<0.05)。结论针刺治疗对脊髓损伤后前角运动神经元的功能恢复有一定的促进作用。     

MicroRNA-92a 对大鼠脊髓损伤后 运动功能恢复的影响

目的 分析microRNA-92a（miR-92a）对脊髓损伤大鼠运动功能恢复的影响及可能的作用机 制。方法 第一步,复制大鼠脊髓损伤模型,将30 只大鼠分为假手术组和脊髓损伤组,筛选目标miRNA。 第二步,分析miR-92a 对脊髓损伤大鼠的影响,将剩余54 只大鼠分为假手术组、对照组（脊髓损伤+miR- 92a mimics negative control）和实验组（脊髓损伤+miR-92a mimics）。采用BBB 评分评估大鼠运动功能, TUNEL 染色检测细胞凋亡,qRT-PCR 和Western blotting 检测相关基因和蛋白的表达,双荧光素酶验证人 第10 号染色体缺失的磷酸酶（PTEN）与miR-92a 的靶向关系。结果 ①脊髓损伤组与假手术组大鼠第1、 3、7、14、21 和28 天的BBB 评分在不同时间、不同组间及变化趋势上有差异（P <0.05）,假手术组BBB 评 分高于脊髓损伤组（P <0.05）。脊髓损伤组与假手术组大鼠细胞凋亡率、Caspase-3、Bax、Bcl-2 比较,差异 有统计学意义（P <0.05）。脊髓损伤组与假手术组大鼠miR-92a、miR-132、miR-128、miR-107、miR- 202、miR-451、miR-17 表达水平比较,差异有统计学意义（P <0.05）。②假手术组、对照组、实验组大鼠 第7、14 和28 天的miR-92a 表达水平在不同时间、不同组间及变化趋势上有差异（P <0.05）,实验组miR- 92a 表达水平最高（P <0.05）。假手术组、对照组、实验组大鼠第1、3、7、14、21 和28 天BBB 评分在不同 时间、不同组间及变化趋势上有差异（P <0.05）,假手术组BBB 评分最高（P <0.05）。3 组大鼠细胞凋亡率、 Caspase-3、Bax、Bcl-2 比较,差异有统计学意义（P <0.05）。③对照组与实验组大鼠PTEN-WT 荧光活性比较, 差异有统计学意义（P <0.05）;两组PTEN-MUT 荧光活性比较,差异无统计学意义（P >0.05）。对照组与实 验组大鼠PTEN mRNA 和蛋白相对表达量比较,差异有统计学意义（P <0.05）。PTEN 与miR-92a 表达水平 呈负相关（P <0.05）。结论 大鼠脊髓损伤后miR-92a 表达下调。过表达miR-92a 可促进大鼠运动功能恢复, 抑制细胞凋亡。     

GDNF基因体内转染对大鼠脊髓损伤后轴突再生的影响

目的：研究脂质体介导的胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）基因在大 鼠损伤脊髓内的表达,观察外源性GDNF对损伤脊髓轴突再生的作用。方法：利用Nystrom法制备大鼠胸髓压迫损伤模型。以直接注射法将脂质体DC－Chol和重组质粒pEGFP－GDNF cDNA混合后注入大鼠损伤脊髓。采用RT－PCR技术和荧光显微镜检测GDNF基因转染后的体内表达,并通过辣根过氧化酶（HRP）顺行追踪技术和神经微丝（NF）、胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）免疫组化活性的变化来评价GDNF基因转染对轴突再生的影响。结果：经脂质体DC－Chol介导GDNF基因可有效地转染脊髓组织 中并得到表达。GDNF转基因4周后可明显增加NF阳性轴突数目,促进皮质脊髓束再生并通过损伤区。结论：外源性GDNF在损伤区局部高表达具有神经损伤保护作用,提示阳离子脂质体介导GDNF体内转基因治疗创伤性脊髓损伤的方法是可行的。     

急性颈髓损伤后低钠血症的治疗及相关因素分析

目的 探讨急性颈髓损伤后低钠血症的治疗及相关因素。方法 回顾性分析1998～2004年收治的112例急性颈髓损伤患者临床资料，探讨其治疗方法，并对可能影响低钠血症的相关因素进行统计学分析。结果 本组急性颈髓损伤后低钠血症的发生率为79．4％，其发生与脊髓损伤程度、损伤平面、是否有并发症等有关。结论 在治疗脊髓损伤同时，应注意低钠血症发生的相关因素，做到早发现、早治疗；根据不同低钠血症原因，采取不同方法治疗。     

神经肌肉本体感觉促进疗法在胸椎骨折致脊髓损伤患者术后康复治疗中应用

目的 :观察神经肌肉本体感觉促进疗法在胸椎骨折致脊髓损伤患者术后康复治疗中应用疗效.方法 :选取2012年5月~2015年3月我院骨外科收治的86例胸椎骨折合并脊髓损伤患者为研究对象,患者入院时间顺序随机分为观察组和对照组,每组43例,对照组患者采用高压氧辅助治疗、中医针灸治疗、常规运动治疗等常规康复训练治疗,观察组患者在对照组基础上采用PNF治疗,观察比较两组患者治疗前后脊髓损伤Frankel分级、感觉评分、运动评分、改良巴氏指数评分、功能独立性(FIM)评分和脊髓独立性(SCIMⅢ)评分.结果 :治疗后两组患者脊髓损伤Frankel分级差异显著,观察组患者改善程度明显优于对照组,差异具有统计学意义.治疗前两组患者运动评分、感觉评分、MBI评分、SCIMⅢ评分和FIM评分差异不明显,治疗后两组以上评分较治疗前明显提高,且观察组明显高于对照组,差异具有统计学意义.结论 :神经肌肉本体感觉促进疗法联合常规康复疗法治疗胸椎骨折致脊髓损伤患者,在提高患者日常生活能力和改善患者肢体运动功能方面显优于单独常规康复治疗,值得临床推广使用.     

硫酸软骨素酶ABC对大鼠脊髓损伤后神经元修复的影响

目的探讨硫酸软骨素酶ABC（ChABC）对脊髓损伤后神经元修复的影响。方法SD大鼠72只,雌雄不限,随机分为假手术组、生理盐水对照组和ChABC治疗组,采用Allen法打击大鼠胸10脊髓损伤模型,分别在伤后即刻和随后每天1次连续1周蛛网膜下注射生理盐水和ChABC。在伤后第1天,第1、2、4周应用免疫组化检测各组组织切片中NF200的变化,尼氏染色观测各组脊髓切片中尼氏体和神经元的改变,BBB评分检测损伤的后肢运动恢复情况。结果大鼠脊髓损伤后1d和1周给药组NF200着色面积、Nissl染色阳性细胞和BBB评分与生理盐水组比较差异无统计学意义。在2、4周,治疗组要显著优于生理盐水组（P〈0.05）。结论ChABC能促进大鼠脊髓损伤后神经元的修复,提高后肢运动功能的恢复。     

脊髓损伤早期一氧化氮代谢变化及其对脊髓神经功能影响的实验研究

目的探讨脊髓损伤早期NO的代谢变化情况及其与脊髓神经功能的关系。方法以大白鼠为实验动物，用Alien’s打击器打击骨髓，建立中度及重度脊髓损伤模型，测量脊髓损伤后4h、12h、24h、3d、1周、2周脊髓损伤局部及血清中NO含量，并观察NO含量变化与脊髓运动神经功能恢复情况之间的关系。结果脊髓损伤后血清NO含量无明显变化，而损伤脊髓局部的NO含量在伤后4h已明显增高，在24h后达到高峰并持续2周以上，在中度脊髓损伤情况下，脊髓运动神经功能自然逐步恢复，在重度脊髓损伤情况下，脊髓运动神经功能不能恢复，而这两种脊髓损伤情况下，伤后早期损伤局部的NO含量变化情况相似。结论脊髓损伤后，NO的代谢变化表现为损伤局部NO含量迅速升高，伤后早期损伤局部NO含量迅速升高不是脊髓继发损伤的原因。