MAP4K4在胰腺癌中的表达及增殖功能的研究

目的：检测丝裂原激活蛋白激酶4（MAP4K4）在胰腺癌中的表达及意义,并研究其对胰腺癌细胞增殖功能的影响。方法：检索GEPIA和Oncomine数据库,分析MAP4K4在胰腺癌以及正常胰腺组织中的表达;检索GEPIA和OncoLnc数据库,分析MAP4K4的表达量与胰腺癌患者生存期之间的关系。免疫组化检测MAP4K4在人胰腺癌及癌旁组织中的表达并分析其与胰腺癌患者临床病理参数的相关性以及生存分析。qRT?PCR和Western blot检测MAP4K4在人胰腺癌细胞株中的表达。慢病毒感染人胰腺癌细胞株CFPAC?1和MIA PaCa?2构建MAP4K4过表达及干扰细胞株,CCK?8和克隆形成实验研究其增殖能力变化。结果：GEPIA和Oncomine数据库显示MAP4K4在人胰腺癌中的表达显著高于正常胰腺组织（P＜0.01）。GEPIA和OncoLnc数据库表明胰腺癌中高表达MAP4K4组患者的总体和无病生存期显著低于低表达组患者（P＜0.01）。免疫组化表明MAP4K4在人胰腺癌组织中的表达高于癌旁组织并与肿瘤大小、肿瘤分化相关（P＜0.05）,生存分析提示MAP4K4高表达的胰腺癌患者生存时间显著低于MAP4K4低表达的患者（P＜0.05）。MAP4K4过表达及干扰胰腺癌细胞株构建成功,过表达后胰腺癌细胞株增殖能力明显增加而干扰后显著降低（P＜0.05）。结论：MAP4K4在胰腺癌中表达增高并与预后负相关,且促进胰腺癌细胞增殖。     

PRC1在胰腺癌中的细胞生物学功能及临床意义

目的 探讨细胞质分裂调控蛋白1(PRC1)在胰腺癌组织中的表达、预后及其对胰腺癌细胞系SW1990细胞生物学功能的影响及其相关机制。方法 采用GEPIA数据库分析PRC1在胰腺癌及正常胰腺组织中的表达差异。采用脂质体3000转染质粒或siRNA方法实现对PRC1的过表达及干扰,分别采用CCK-8细胞增殖实验、Transwell细胞侵袭实验、流式细胞术检测PRC1对SW1990细胞增殖能力、侵袭能力及凋亡率的影响。从TCGA获取胰腺癌临床病例资料,统计分析PRC1表达量与胰腺癌患者临床病理特征的关系。STRING数据库分析与PRC1相互作用的蛋白网络。基因集富集分析预测PRC1在胰腺癌中调控的可能信号通路。结果 GEPIA数据库分析结果显示PRC1在胰腺癌组织中的mRNA表达量显著高于正常胰腺组织(P<0.05)。CCK-8细胞增殖实验、Transwell细胞侵袭实验、流式细胞术结果表明,过表达PRC1促进胰腺癌SW1990细胞增殖、侵袭并抑制其凋亡(P<0.01),而沉默PRC1则抑制SW1990细胞增殖、侵袭并诱导其凋亡(P<0.01)。TCGA数据库分析结果显示P...     

TWEAK/Fn14蛋白在胰腺癌组织中的表达

目的 通过检测并比较肿瘤坏死因子样凋亡弱诱导剂（TWEAK）和人成纤维细胞生长因子诱导型14（Fn14）在正常胰腺组织、慢性胰腺炎及胰腺癌组织中的表达,分析探讨TWEAK/Fn14通路在胰腺癌发展过程中的作用。方法 收集在四川大学华西医院胰腺外科行手术治疗、切除的胰腺组织标本,并经病理检察证实,胰腺癌标本50例,慢性胰腺炎标本40例,正常胰腺组织标本30例。采用免疫组化检测胰腺组织中TWEAK和Fn14的表达,并分析TWEAK表达与胰腺癌临床病理特征的关系。结果 TWEAK阳性表达率在胰腺癌为36.0%（18/50）,高于慢性胰腺炎17.5%（7/40）及正常胰腺组织13.3%（4/30）,组间差异有统计学意义（ P<0.05）,表达强度亦为胰腺癌组织＞慢性胰腺炎＞正常胰腺组织（ P<0.05）。Fn14在胰腺癌组织（4.0%）和正常胰腺组织（7.0%）阳性表达率低,胰腺炎组织中未发现阳性表达。TWEAK阳性表达率和高表达率在Ⅱ期患者中随着肿瘤疾病分级增加而增加（ P<0.05）。而各病理分级中,TWEAK阳性表达率、高表达率和EI评分的差异均无统计学意义。结论 TWEAK/Fn14参与了胰腺癌的发生发展过程。TWEAK在胰腺癌中高表达,Fn14呈低表达。     

p14ARF与p53抑癌基因对胰腺癌生物学行为的影响

目的 探讨胰腺癌组织中p14^ARF、p53的表达与胰腺癌生物学行为的关系,为胰腺癌的基因干预治疗提供理论依据。方法 免疫组织化学Envision改良法、ABC免疫组化法检测10例正常胰腺组织、42例胰腺癌组织中p14^ARF、p53蛋白的表达。结果 正常胰腺组织中p14^ARF的表达率为90％,胰腺癌组织中为35．7％;正常胰腺组织中p53的表达率为0,胰腺癌组织中为45．2％。胰腺癌组织中p14^ARF、p53的表达与胰腺癌肿块的大小、淋巴结转移率、病理分级、临床分期等相关,而与肿块的局部浸润无关。结论 抑癌基因p14^ARF、p53与胰腺癌的发生、发展有着密切的关系,可以作为基因干预治疗胰腺癌的一个理论依据。     

增殖细胞核抗原和微血管密度在胰腺癌中的表达及意义

目的 通过检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)蛋白及微血管密度(microvessel density, MVD)在胰腺癌中的表达,探讨其临床意义.方法 应用链霉菌抗生物素过氧化酶(streptavidin-peroxidase, SP)免疫组化法对32例原发性胰腺导管腺癌、12例正常胰腺组织进行PCNA蛋白和MVD检测.结果 PCNA蛋白在原发性胰腺导管腺癌、正常胰腺组织均表达,其分化指数PI值(proliferation index)分别为30.26±14.23和21.63±6.76,两组比较差异有显著性(P＜0.05);MVD值在两组分别为32.17±3.42和15.42±3.28, 两组比较差异有显著性(P＜0.05).PCNA蛋白表达在组织学高、中分化、临床Ⅰ～Ⅱ期及无淋巴结转移组显著低于组织学低分化、临床Ⅲ～Ⅳ期及有淋巴结转移组(P＜0.05).结论 PCNA蛋白能较好地反映胰腺癌的恶性程度和增生活性,MVD与转移和预后有关.     

RAB10对胰腺癌细胞生物学功能的影响及临床意义

目的 研究RAS癌基因家族成员RAB10在胰腺癌中的表达情况及其对人胰腺癌细胞系SW1990细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。方法 利用癌症基因数据库GEPIA和TCGA中胰腺癌的数据分析RAB10 mRNA在胰腺癌组织中的表达;Cox回归分析RAB10 mRNA表达水平与胰腺癌患者预后关系;靶向RAB10的小干扰RNA(RAB10-siRNA)作为沉默组、构建过表达RAB10质粒(RAB10-OE)作为过表达组;使用Q-PCR检测沉默及过表达效果;Western blot实验检测蛋白表达水平;EdU细胞增殖实验、划痕实验、Transwell实验、流式细胞实验分别分析RAB10对SW1990增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。结果 胰腺癌组织中RAB10 mRNA的表达量明显高于正常胰腺组织(P<0.05);EdU细胞增殖实验结果显示,RAB10-OE组的SW1990细胞的增殖率明显高于对照组,RAB10-siRNA组SW1990细胞的增殖率低于对照组(P<0.05);Transwell实验和划痕实验结果显示,RAB10-OE组细胞侵袭率及迁移率均高于对照组,RAB10-siR...     

增殖细胞核抗原和P16蛋白在胰腺癌中的表达

目的 :探讨增殖细胞核抗原 (PCNA)、P16蛋白在胰腺癌中表达的相关性及其与预后的关系。方法 :应用免疫组化 LSAB法检测 2 8例胰腺癌组织PCNA和 P16蛋白的表达。结果 :胰腺癌组织 PCNA表达阳性率为 85 .9% ,P16蛋白表达阳性率为 5 3.6 % ,两者表达呈明显负相关 ,且分别与肿瘤分化程度及病人术后生存期有显著关系。结论 :P16蛋白表达与增殖指数 (PI)间有显著负相关关系 ,两者综合指标对判断患者预后有一定意义。     

胰腺癌微血管密度和p14蛋白表达及其发生、发展的相关实验研究

目的：探讨胰腺癌组织微血管密度、p14^ARF表达对胰腺癌发生、发展的影响。方法：用免疫组织化学Envision改良法检测10例正常胰腺组织、42例胰腺癌组织中p14^ARF蛋白的表达；以Ⅶ因子相关抗原(FVⅢ—RAg)标记血管内皮细胞，采用ABC免疫组化法检测10例正常胰腺组织、42例胰腺癌组织中微血管密度。结果：正常胰腺组织中p14^ARF的表达率为90％，胰腺癌组织中为35．7％(P＜0．01)；胰腺癌组织的平均微血管密度与正常对照组之间差异有显著性(P＜0．01)；胰腺癌临床Ⅲ、Ⅳ期的平均微血管密度明显高于Ⅰ、Ⅱ期(P＜0．05)：淋巴结有转移的胰腺癌平均测血管密度明显高于淋巴结无转移组(P＜0．05)；胰腺癌组织中p14^ARF蛋白阳性表达的平均微血管密度低于p14^ARF蛋白阴性表达的胰腺癌组织，差异有显著性(P＜0．05)，胰腺癌组织的平均微血管密度与组织学分级、癌的浸润范围及肿块大小无关(P＞0．05)。结论：微血管密度、p14^ARF与胰腺癌的发生、发展存在着密切关系。     

MMP14在胰腺癌中的表达及其与肿瘤免疫微环境特征的相关性研究

目的 ·探究基质金属蛋白酶14(matrix metalloproteinase 14,MMP14)在胰腺癌组织中的表达及其与临床特征的相关性,并分析其与胰腺癌肿瘤免疫微环境特征的相关性.方法 ·通过GEPIA(Gene Expression Profiling Interactive Analysis)数据平台分析M...     

MMP-9在胰腺癌中的表达及意义

目的:探讨MMP-9在胰腺癌发生、发展及转移过程中的意义。方法:采用免疫组织化学S-P法,检测MMP-9在53例胰腺癌组织(胰腺癌组)及10例正常胰腺组织(对照组)中的表达,并与临床病理学资料进行分析比较。结果:胰腺癌组织中MMP-9的阳性表达明显高于正常胰腺组织(P0.05)。MMP-9的表达与胰腺癌的临床分期及淋巴结有无转移有关(P0.05)。结论:胰腺癌组织中MMP-9的表达与淋巴结转移及临床分期相关。     

人胰腺癌组织中Survivin和P53的表达

目的:探讨人胰腺癌组织中Survivin和P53的表达及意义.方法:应用免疫组织化学SP法检测33例人胰腺导管腺癌、12例癌旁正常胰腺组织和10例良性胰腺疾病组织中Survivin、P53的表达.结果:胰腺癌组织中Survivin阳性表达率为29/33,高于正常胰腺组织5/12及良性疾病组织0/10(P＜0.05);胰腺癌组织中P53阳性表达率为17/33,高于正常胰腺组织0/12及良性疾病组织0/10(P＜0.05).胰腺癌组织中P53和Survivin表达有相关性(P=0.044).结论:Survivin的过表达可能与胰腺癌的发生有关,且与P53表达密切相关,2者协同参与了胰腺癌的发生、发展.     

Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶4在胰腺导管腺癌中的表达及其与E-cadherin的相关性研究

目的 探讨Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶4(TMPRsS4)和上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)在胰腺导管腺癌组织中的表达及两者相关性以及其临床意义.方法 Western blot法检测16例胰腺导管腺癌和配对癌旁组织TMPRSS4和E-cadherin蛋白表达情况;免疫组织化学方法检测54例胰腺导管腺癌标本和4例正常胰腺组织中TMPRSS4和E-cadherin蛋白表达情况.结果 胰腺导管腺癌组织TMPRSS4蛋白表达明显高于配对癌旁组织,E-cadhefin蛋白表达癌旁组织明显高于癌组织(P<0.01);TMPRSS4蛋白阳性表达和E-ca&herin表达缺失与胰腺导管腺癌分化程度、淋巴结移、临床分期相关(P<0.05):TMPRSS4和E-cadherin蛋白表达呈负相关(r=-0.419,P=0.002).结论 TMPRSS4及E-cadherin在胰腺导管腺癌中的表达缺失与肿瘤恶性程度密切相关,联合检测2种蛋白有助于提高胰腺癌恶性程度的判断.     

hOGG1和PARP在原发性肝癌组织中的表达及意义

目的 检测DNA修复酶hOGG1及PARP在原发性肝癌及肝硬化组织中的表达,探讨hOGG1和PARP在HCC和肝硬化组织中的表达特点及其与临床病理的关系.方法 应用EnVision免疫组化法检测41例非HCC正常肝组织、99例HCC组织、51例HCC癌旁肝硬化组织中hOGG1和PARP表达情况.结果 在HCC组织中hOGG1和PARP在细胞核与细胞质中均有表达,其中hOGG1细胞核阳性分度在正常组、肝硬化组、HCC组之间依次增高(P＜0.001);PARP细胞核阳性分度在正常组、肝硬化组、HCC组之同依次降低(P＜0.001).多因素分析显示:hOGG1蛋白在细胞核表达与ALT有关(相对危险度为1.022,P=0.041),hOGG1蛋白在细胞浆表达与总胆红素有关(相对危险度为1.155,P=0.018),PARP蛋白在细胞浆表达与外周血白细胞数(相对危险度为0.757,P=0.037)有关.结论 在HCC发生过程中hOGG1蛋白在肝细胞核中的表达可能随着病程进展而增强,PARP蛋白在肝细胞核中的表达可能随着病程进展而降低,可能反应了从肝硬化到肝癌进程中肝细胞内氧化应激状态的改变.     

结肠腺癌中MMP-14和VEGF的表达及意义

目的:检测结肠腺癌中基质金属蛋白酶-14(MMP-14)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达,探讨MMP-14和VEGF在不同临床病理特征中的意义.方法:本实验以89例结肠腺癌新鲜标本作为观察组,89例正常新鲜结肠黏膜组织作为对照组,采用流式细胞技术检测两组中MMP-14和VEGF的表达,观察MMP-14和VEGF的表...     

IQ结构域GTP酶激活蛋白1在胰腺癌中表达及与预后的相关性研究

目的检测胰腺癌组织中IQ结构域GTP酶激活蛋白1（IQGAP1）的表达与临床病理特征及与预后的关系。方法采用免疫组织化学法检测66例胰腺癌组织和49例癌旁组织中IQGAP1的表达情况，分析IQGAP1与胰腺癌临床病理特征及其与预后的相关性。结果胰腺癌组织和癌旁组织中IQGAP1 的阳性表达率分别为63.636%和12.245%，胰腺癌组织高于癌旁组织（P <0.05）；IQGAP1的表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移有关（P <0.05），与患者年龄、性别、肿瘤部位、大小、神经浸润及临床分期差异无统计学意义（P >0.05）。IQGAP1 阳性患者的总生存期短于IQGAP1 阴性患者（P =0.002），Cox 多因素分析显示IQGAP1 阳性表达是独立预后危险因素（HR=2.128，95%CI=1.127，4.019，P=0.020）。结论 胰腺癌组织中高表达的IQGAP1可能参与胰腺癌的发生、发展及转移过程，并可作为判断胰腺癌预后的重要指标。     

PARP9促进肺腺癌细胞的迁移和侵袭

目的 探究聚(ADP-核糖)聚合酶9[poly(ADP-ribose)polymerase 9,PARP9]在肺腺癌组织中的表达、预后及其对肺腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响。方法 通过UALCAN数据库、GEO数据库和72例配对肺腺癌组织样本的免疫组化染色结果,分析PARP9在肺腺癌组织中的表达、预后以及与肺腺癌患者临床病理特征的相关性。利用CRISPR/Cas9在肺腺癌细胞H1299和A549中敲除PARP9基因,通过慢病毒感染在PARP9缺陷的A549细胞中恢复表达PARP9,使用Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力的改变。结果 数据库分析与免疫组化染色结果表明,与正常肺组织相比,PARP9在肺腺癌组织中的mRNA和蛋白质水平均显著提高(P<0.05)。PARP9高表达的肺腺癌患者总体生存期更短,且PARP9表达与肺腺癌患者的临床分期与淋巴结转移相关(P<0.05)。PARP9缺陷显著抑制H1299和A549细胞的迁移和侵袭能力,恢复表达PARP9可以逆转该表型(P<0.05)。结论 PARP9在肺腺癌中高表达,高表达PARP9的肺腺癌患者预后不良,PARP9可促进肺腺癌细胞的迁移和侵袭,提示其可能是肺腺癌的一个重要原癌基因。     

Prognostic Impact of Cell Division Cycle Associated 2 Expression on Pancreatic Ductal Adenocarcinoma

Objective To examine the expression of cell division cycle associated 2 (CDCA 2) in pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) and investigate its role in prognosis of PDAC patients. Methods This retrospective study included 155 PDAC patients who underwent surgical treatment and complete post-operative follow-up. Clinicopathologic data were collected through clinical database. Tissue microarray was constructed and immunohistochemistry was performed to detect CDCA2 expression in the PDAC tumor tissues and adjacent non-tumor tissues. Clinicopathological characteristics between high and low CDCA2 expression were compared. Correlation of CDCA2 expressions with patients’ survival was analyzed using Kaplan-Meier method and Cox regression analysis. Results Expression of CDCA2 in PDAC cells was significantly higher than that in adjacent non-tumor tissues (U=4056.5,P<0.001). Univariate analysis showed that CDCA2 expression [hazard ratio (HR)=1.574, 95% confidence interval (CI)=1.014-2.443,P=0.043] and node metastasis (HR=1.704, 95%CI=1.183-2.454, P=0.004) were significantly associated with prognosis. Cox regression analysis showed CDCA2 expression was not an independent prognostic risk factor (HR=1.418, 95%CI=0.897-2.242,P=0.135) for PDCA patients. Stratification survival analysis demonstrated CDCA2 expression as an independent prognostic risk factor in male patients (HR=2.554, 95%CI=1.446-4.511,P=0.003) or in non-perineural invasion patients (HR=2.290, 95%CI=1.146-4.577,P=0.012). Conclusions CDCA2 is highly expressed in PDAC tumor tissue. Although CDCA2 is not an independent prognostic risk factor for PDAC patients, it might be used to help predict prognosis of male or non-perineural invasion patients of PDAC.     

microRNA218在胶质瘤的表达水平及对胶质瘤细胞生物学功能的影响

目的 探讨microRNA218在胶质瘤中的表达水平及对胶质瘤细胞生物学功能的影响.方法 收集人脑胶质瘤标本,运用qRT-PCR检测microRNA表达水平,并将其与胶质瘤病理分级进行相关性分析.采用CCK-8细胞计数法检测胶质瘤细胞活力.结果 microRNA218在胶质瘤中的表达显著下调,并与病理分级呈负相关.microRNA218在胶质瘤细胞中过表达后,细胞的存活率显著降低.结论 microRNA218表达水平与胶质瘤病理分级呈负相关,microRNA218在胶质瘤细胞增殖过程中发挥了重要作用,为了解胶质瘤的发生发展机制研究提供了新的依据.     

MMP-14 mRNA在胃腺癌中的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶-14(MMP-14)mRNA在胃腺癌发生、发展及转移中的作用。方法以56例胃腺癌标本作为观察组,30例正常胃黏膜组织作为对照组,采用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测MMP-14mRNA的表达及其与胃癌不同临床病理特征之间的关系,并探讨其预后价值。结果 MMP-14mRNA在胃腺癌中的表达明显高于正常胃黏膜组织,MMP-14mRNA在胃癌不同浸润深度、不同分化程度、有无淋巴结转移及不同临床分期的表达比较差异有统计学意义(P<0.05)。经生存分析,胃腺癌中MMP-14mRNA表达与患者预后相关。结论 MMP-14mRNA在胃腺癌中高表达,MMP-14mR-NA在胃腺癌的发生、发展中可能具有重要作用,术后检测MMP-14mRNA可能对判断胃腺癌的预后有重要价值。     

氨基酸转运蛋白SLC6A14在大肠癌中的表达特征及其促癌功能研究

目的 研究氨基酸转运蛋白SLC6A14在大肠癌中的表达特征及其促进大肠癌细胞生长的作用.方法 采用实时定量荧光PCR(real-time PCR)检测35对大肠癌及癌旁组织中SLC6A14 mRNA的表达水平;Western印迹法检测SLC6A14在大肠癌细胞株HT-29和SW620中的蛋白表达;免疫组化法检测108例...