益肾活血汤对血瘀症大鼠红细胞膜流动性的影响

“益肾活血汤”治疗血瘀症腹部炎性疾病已在临床和动物实验中取得肯定疗效^[1].近年来的一些研究表明,血瘀症时红细胞膜流动性降低,而红细胞膜的流动性又可影响膜的通透性、变形性、脆性、物质运输、酶的活性等.为了从细胞水平探讨“益肾活血汤”的作用原理,笔者观察了其对红细胞膜流动性的影响.     

人肺腺癌细胞膜钾通道特性研究

目的 研究人肺腺癌细胞系A-549细胞膜离子通道特性.方法 采用膜片钳技术全细胞记录方式检测A-549细胞膜离子通道的特性.结果 人肺腺癌细胞系A-549细胞获得稳定的高阻封接的最佳培养时间是细胞传代培养48 h,细胞膜跨膜离子电流具有电压依赖性,在500 ms内不失活,其翻转电位为-70～-80 mV,与细胞膜K 电流的平衡电位相一致.该细胞平均膜电容为(15.13±1.02) pF,TP为 110 mV时细胞膜跨膜通道的电流密度为(48.73±8.58) pA/pF.TP为-40～ 110 mV时,细胞膜跨膜通道激活时间常数为12.57～3.14 ms.该跨膜电流能被钾通道阻断剂TEA和CsCl所阻断,表明该跨膜离子电流为K 电流.结论 在人肺腺癌细胞系A-549细胞膜上存在一种类似于神经元和肌肉细胞膜上的延迟整流性K 通道.     

铜绿假单胞菌体外粘附肠上皮细胞对其细胞膜生物特性的影响

目的 探索铜绿假单孢菌粘附肠上皮细胞后细胞膜生物特性的变化规律及可能的机制。方法 采用体外肠上皮细胞培养模型，研究绿脓杆菌粘附后对肠上皮细胞活力、细胞膜磷脂酶A2、细胞内钙、细胞膜磷脂成分、膜流动性的影响。结果 细菌粘附后3h肠上皮细胞活力明显下降，PLA2活性增高，细胞内钙离子浓度增加，肠上皮细胞膜荧光偏振度、微粘度和分子排列有序性系数即出现增加，膜流动性降低，细胞膜磷脂含量降低，磷脂酶肌醇（PI）、磷脂酰胆碱（PC）含量逐渐降低。结论 绿脓杆菌粘附后肠上皮细胞胞内钙超载所导致的膜PLA2活化以及肠上皮细胞膜磷脂降解是导致膜流动性降低的根本原因。     

空调生存环境对豚鼠红细胞膜脂质变化的影响

目的通过动物实验,研究空调环境对机体红细胞膜脂质成分的影响,为进一步研究空调环境对红细胞变形性的影响提供实验依据。方法采用豚鼠作为实验动物。实验分两组,每组12只。对照组:豚鼠在通风房间中自由饮水和进食,喂养15 天。实验组:豚鼠在温度为22℃空调房间内饲养15天。15天后,用心脏穿刺法采集豚鼠血液5ml,肝素抗凝,分离红细胞制备红细胞膜悬液。用UV265紫外分光光度计测定红细胞膜胆固醇及磷脂的含量。结果空调环境下豚鼠红细胞膜中胆固醇含量比正常对照组显著增高(P<0．01),而磷脂含量比对照组显著降低(P<0．01)且胆固醇／磷脂也有显著差异(P<0．01)。结论空调环境能改变红细胞膜的脂质成分,从而影响红细胞变形性。     

电针内关穴对急性心肌缺血大鼠红细胞膜流动性的影响

大量研究表明细胞膜的各种重要功能,如能量转换、物质转运、信息传递等,都与细胞膜的流动性密切相关［１］。膜的适度的流动性是维持细胞正常功能的必要条件。因此,在许多疾病中,都会损伤细胞,从而使红细胞膜的流动性低于正常［２］。所以,观察红细胞膜流动性的改变...     

刀豆素在大鼠心肌膜损伤和脂质体抗膜损伤中的反应性变化

应用刀豆素检测了大鼠乳鼠培养的心肌细胞膜损伤和膜保护的变化。结果表明，心肌缺血性膜损伤时细胞表面刀豆素呈阴性反应，而大豆磷脂脂质体的缺血心肌保护组呈阳性反应。     

Rh123、FDA荧光法测定超声作用对大肠杆菌细胞膜的影响

目的研究大肠杆细胞经超声处理后细胞膜通透性和细胞膜电位的变化。方法应用二乙酸荧光素(FDA)、罗丹明123(Rh123)染色,通过荧光分光光度计检测FDA、Rh123荧光强度的变化,观察大肠杆菌细胞经25 kHz、300 W超声处理后细胞膜通透性和细胞膜电位的变化。结果大肠杆菌细胞经25 kHz 300W超声处理,随处理时间延长,FDA、Rh123都降低。在90 s内,超声处理对细胞存活率影响不明显,膜电位降低26.7%,膜通透性增加33.3%。结论大肠杆菌经一定超声处理后膜通透性增加,膜电位降低。     

温度对红细胞变形性的影响

用激光衍射仪测定高粘度高切变流场中不同温度时红细胞的变形指数。结果表明，在各种切变率下红细胞的变形性均受温度的影响。低切变率时，温度主要影响红细胞膜的变形性；高切变率时，温度主要影响红细胞的几何形状及其内粘度。红细胞变形性最佳温度约２９℃，温度高于４０℃，红细胞的变形性迅速下降，说明红细胞膜刚性增强，粘弹性下降。     

轮状病毒VP7基因修饰载体的构建及其在Hela细胞中的表达

目的 :对轮状病毒 SA1 1株 VP7基因进行修饰 ,使其表达后锚定于宿主细胞膜表面 ,同时构建一个可使目的蛋白分泌或跨膜表达的载体。方法 :用 PCR的方法把 VP7天然信号肽替换为流感病毒血凝素信号肽。然后 ,在基因下游添加流感病毒血凝素跨膜区编码序列 ,从而构建在宿主细胞表面表达的轮状病毒 SA1 1 VP7基因。利用遗传密码简并性在信号肽序列 3′端和跨膜区 5′端分别引入 Sty 和 Eco RV限制性内切酶识别位点 ,从而实现分泌 /跨膜基因修饰载体的构建。把野生型和跨膜型 VP7基因分别克隆入 pc DNA3哺乳动物细胞表达载体 ,转染 Hela细胞 ,得到稳定表达两种 VP7基因的细胞系。对外源基因在细胞染色体上的整合情况以及基因表达情况进行检测。结果 :酶切鉴定和 DNA序列分析表明膜锚定型 VP7基因和分泌 /跨膜基因修饰载体的构建正确。PCR和免疫荧光实验证明 ,VP7基因已经整合进入宿主细胞染色体 ,野生型和膜锚定型 VP7基因表达后分别定位于宿主细胞质和细胞膜。结论 :成功地构建了可在细胞膜表面锚定表达的 VP7基因 ,为进一步研究轮状病毒基因工程疫苗奠定了基础。新型分泌 /跨膜基因修饰载体为研究蛋白合成后加工和提高其免疫原性提供了有力的工具。     

采用FRAP技术研究细胞膜分子侧向运动在细胞癌变和“逆转”中的调控机理

细胞膜领域的研究,自70年代以后一个根本性变革就是从静态研究转向动态性研究。细胞膜分子的二维运动不仅仅是细胞二维信息传递的决定者,而且潜有代谢通道,能量通道等。膜分子的运动状态,借助动力学分析可探讨在细胞生长、分化过程的膜结构、膜功能的关系,特别     

膜蛋白配体对红细胞膜机械稳定性的影响

目的：研究伴刀豆蛋白（Concanavalin A，ConA）对红细胞膜机械稳定性的影响，以此探讨配体与受体相互作用对红细胞膜力学性质的作用。方法：利用电子自旋共振技术（Electron Spin Resonance，ESR）测量经不同浓度ConA处理后的红细胞膜的ESR波谱，同时还采用剪切流场的方法测量了经ConA作用后的红细胞膜机械稳定性。结果：经ConA处理后的红细胞膜蛋白分子构像趋于收缩，膜切向机械稳定性明显下降。结论：ConA作为一种配体与其膜受体Band3蛋白相结合，影响了膜蛋白分子构像，进而导致整个红细胞膜机械稳定性发生改变。     

凝集素受体在神经管缺陷发生中作用的研究

雌性金黄地鼠交配后第８天灌服维生素Ａ酸８０ｍｇ／ｋｇ，于给药后不同时间剖腹取胎，石蜡包埋、切片，用刀豆凝集素、麦胚凝集素、花生凝集素和荆豆凝集素为分子探针作亲合细胞化学染色，对神经上皮及其基膜、脊索和神经管周围间充质的相应糖基即凝集素受体进行定性、定位和半定量观察。结果显示，实验组各组胚胎的凝集素染色与正常对照组相比，刀豆凝集素和花生凝集素染色显著增强，而麦胚凝集素和荆豆凝集素染色差异无显著性。说明在神经管形成过程中，过量维生素Ａ酸可使神经上皮细胞表面的刀豆凝集素和花生凝集素的受体糖蛋白异常增多，破坏了细胞粘着和基质粘着之间的协调关系，干扰了神经上皮的增殖和迁移过程，导致了神经管缺陷的发生。     

HL-60细胞诱分化及细胞膜恶性标志逆转的实验研究

本文采用荧光偏振技术和受体荧光定量测定法,动态观察DMSO(二甲亚砜)体外诱导人急性早幼粒白血病细胞系(HL-60细胞)沿粒系统成熟分化过程中细胞膜流动性及膜ConA受体结合量的改变,还测定Molt4和Raji淋巴瘤细胞膜的相应变化.结果表明,随分化细胞百分率增加膜流动性和ConA受体结合量降低,呈现有意义的逆转改变(P<0.01).二株淋巴瘤细胞膜的流动性和ConA受体结合量均明显高于正常淋巴细胞。实验结果证实了膜流动性增高及ConA受体结合量增加是HL-60细胞的膜表型特征,并能随恶性细胞的诱导分化而逆转。     

肺巨噬细胞膜ConA受体的电镜观察

本实验先将刀豆素A(ConA),结合在肺巨噬细胞膜上的ConA受体,再用辣根过氧化物酶)HRP)结合ConA,用3-3二氨基联苯胺(DAB)酶底物结合HRP,从而在肺巨噬细胞膜表面可显现ConA受体结合ConA所形成的密集的颗粒状反应物。利用这种电镜组化技术,制备标本,观察肺巨噬细胞膜ConA受体的存在及分布,并对ConA受体与吞噬作用及抗感染免疫的关系进行了讨论。     

乌拉坦对小鼠胚胎肝细胞发育分化的影响

用伴刀豆凝集素(ConA)-辣根过氧化物酶(HRP)定位技术观察乌拉坦经胎盘对胚胎鼠及新生鼠肝细胞ConA受体分布变化的影响。结果显示:(1)13～15 d胚胎肝细胞ConA受体主要分布于细胞膜及核膜;17～19 d胚胎肝细胞胞膜ConA受体增多,核膜受体消失,胞浆出现ConA受体;3～14 d新生鼠ConA受体主要分布于胞浆,胞膜和核膜的ConA受体基本消失。(2)用乌拉坦后可减慢胞膜上ConA受体的消失,延迟胞浆ConA受体的出现,尤其对11～15 d胚胎作用最为明显。提示正常胚胎肝细胞ConA受体分布随肝细胞成熟呈规律性变化;乌拉坦可能在分子水平干扰了胚胎肝细胞的正常发育与分化。     

缺血再灌注后幼狗心肌细胞膜系统的超微结构变化

应用冷冻蚀刻技术及细胞化学方法，在透射电镜观察下，探讨结合在心肌细胞膜上的糖蛋白与能量代谢的关系，从细胞和分子水平来研究糖蛋白的定位、定性、结构与功能的改变．观察三磷酸腺苷 氯化镁对缺氧缺糖后再给氧给糖幼狗心肌细胞超微结构的影响，进一步阐明心肌缺血再灌注损伤的发生机理．     

Band3蛋白与配体ConA结合对红细胞膜粘弹性的影响

目的；研究红细胞膜蛋白Ｂａｎｄ３与其配体ＣｏｎＡ结合后对红细胞膜粘弹性的影响。方法：测量经ＣｏｎＡ作用后的红细胞在ｃ＝０轨道上的小变形指数，红细胞变形恢复半衰减时间，以及红细胞膜蛋白强弱固定比。结果；红细胞膜粘度及弹性均发生显著改变，且呈现明显的量效关系。     

THE CHANGES OF DEFORMABILITY OF ERYTHROCYTES AND 2.3-DPG IN RED BLOOD CELL AND BLOOD IN PATIENTS WITH CORONARY ARTERY STENOSIS

The purpose of this paper is to study the changes of deformabilityof erythrocytes and 2.3-DPG(2.3-diphosphoglycerate acid)in the patients with coro-nary artery stenosis and the effects of some factors on them.It is showed that:de-formability of crythrocyte and 2.3-DPG were inversely proportional to the degreeof the lesions of coronary vessels(P<0.01);there was a significant decrease of de-formability of erythrocytes after using contract agents(P<0.01);Salvia increaseddeformability and 2.3-DPG significantly(P<0.01).In conclusion,our data suggestthat the possible existence of microcirculation dysfunction in coronary artery dis-eases with parallelism to the impairement deformability of erythrocytcs and Salviabca good drug to action in deformability and 2.3 DPG in patients.     

实验性急性心肌梗塞的血液流变学变化

为探讨急性心肌梗塞（ＡＭＩ）后的血液流变学变化，用２０只杂种家兔造成实验性ＡＭＩ模型，于６０ｍｉｎ后采血测定各血液流变学指标，发现中、低切血液粘度和红细胞聚集性明显增加，红细胞变形能力下降，但所有这些变化均继发于ＡＭＩ，其机理有待进一步探讨     

海风藤酮对小鼠抗着床作用的细胞化学和电镜观察

目的观察海风藤酮对小鼠的抗着床作用及其细胞化学和超微结构的变化。②方法向妊娠第２天小鼠子宫角内注射不同剂量的海风藤酮,于妊娠第８天和第１０天观察其对滋养层细胞的刀豆凝集素（ＣｏｎＡ）受体和麦胚凝集素（ＷＧＡ）受体表达,以及对滋养层细胞和子宫蜕膜细胞超微结构的影响。③结果随着海风藤酮剂量增大,滋养层细胞的ＷＧＡ和ＣｏｎＡ受体的阳性反应减弱,以ＷＧＡ受体的改变更明显。电镜所见,实验组绒毛浅层滋养层细胞胞浆电子密度低,核固缩;深层滋养层细胞溶酶体增多,见髓样小体,子宫蜕膜的大蜕膜细胞胞浆溶酶体增多,胞浆空泡化,核膜溶解。④结论海风藤酮可使小鼠胚胎滋养细胞的ＷＧＡ和ＣｏｎＡ受体糖蛋白减少,从而干扰了细胞之间的识别黏附,破坏了胚胎正常生长和发育的内环境,抑制着床过程。