首页 | 本学科首页   官方微博 | 高级检索  
相似文献
 共查询到20条相似文献,搜索用时 109 毫秒
1.
目的 分离纯化枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis ZY-1)溶栓酶,探讨该酶的理化性质.方法 枯草芽孢杆菌培养,利用(NH4)2SO4沉淀、Sephadex G-100柱层析对该酶发酵液进行分离纯化,利用四肽底物Sue-Ala-Ala-Pro-Phe-PNA作为底物,研究酶的理化性质.结果 经发酵并纯化后获得的酶液其比活高达26 400 U/mg,酶反应最适温度45℃,最适pH 8.0.且具有较好的热稳定性.结论 枯草芽孢杆菌溶栓酶具有溶血栓作用.  相似文献   

2.
丙酮、乙醇和苯丙氨酸是大肠杆菌青霉素酰化酶的竞争性抑制剂,分别抑制模拟底物3-苯乙酰胺基6-硝基苯甲酸水解的活力。青霉素酰化酶粗酶液经硫酸铵盐析,pH5沉淀,SE-Sephadex C50层析,苯丙氨酸-Sepharose 4B疏水层析和DEAE-Sephadex A25层析可得纯酶,聚丙烯酰胺凝胶梯度电泳呈现一条带,比活为27.5u/mg蛋白。纯化总活力回收率为28.1%。青霉素酰化酶分子量约为90000,有两个亚基,分子量分别为70000和20000,其最适温度为40℃,最适pH为8.0,催化青霉素G水解的米氏常数为2.94mmol/L。  相似文献   

3.
目的了解地衣芽孢杆菌菌体细胞中γ-谷氨酰转肽酶的一些基础酶学性质。方法采用溶菌酶法破碎细胞壁,经硫酸铵沉淀后透析得到粗酶后,采用紫外分光光度法测定该酶的酶活力。结果该酶在25~35℃的温度范围有很好的耐受性,在碱性条件下保持一定的活性,最适反应温度为45℃,最适反应pH值为8.0,Ca2+、Mg2+等金属离子在适当浓度时对酶活性有促进作用。结论本实验为利用该酶转化生产茶氨酸提供了依据。  相似文献   

4.
目的:建立一种高效的福寿螺纤溶酶(ACFE)分离纯化技术,并研究其理化性质.方法:福寿螺经组织匀浆、缓冲液抽提与选择性热变性,再经大豆胰蛋白酶抑制剂耦联的Sepharose 4B亲和层析、DEAE-Sephacel离子交换层析与羟基磷灰石亲和层析.结果:分离纯化得到一种均一的ACFE成分,其分子量为32 kD,pI为3.6,最适pH在9.5~11.0之间,该酶热稳定性强,能抗4 mol/L脲处理;其具有水解合成底物S-2288和Chromozym P的活性,活性受Zn2 、Cu2 等抑制,受对氨基磺酸氟(PMSF)抑制,但不受对羟甲基苯磺酸(PHMB)影响.结论:首次从福寿螺体内分离纯化得到ACFE.  相似文献   

5.
采用DEAE-Sepharose阴离子交换层析和Butyl-Sepharose CL 4B疏水层析,从重组大肠杆菌DH5a菌体中分离纯化得到粪产碱杆菌青霉素G酰化酶(AfPGA).经纯化,AfPGA纯度较粗酶提高50.6倍、比活达到212.7 U/mg,经HPLC测定纯度为92.8%,收率为78%.理化性质分析表明:AfPGA含有2个亚基(α亚基和β亚基,其Mw分别为2.90×104和5.92×104;AfP-GA等电点约为7.9~8.0,最适pH约为10.0,并在pH>7.0时表现出了稳定的催化活力.  相似文献   

6.
目的 建立pNPG法测定马蓝叶中β-葡萄糖苷酶的活性,研究马蓝叶中β-葡萄糖苷酶的基本酶学性质,为进一步阐明青黛炮制原理提供依据。方法 采用pNPG法考察马蓝叶中β-葡萄糖苷酶活性测定的最佳条件。结果 最适反应条件为总反应体积1 mL,反应时间45 min,底物pNPG体积0.2 mL,浓度25 mmol/L,缓冲液pH值6,反应温度55 ℃。在此条件下研究马蓝叶的粗酶液中β-葡萄糖苷酶的基本酶学性质,结果表明该酶在30~60 ℃热稳定性较差。该酶在pH 5.0~ 7.0比较稳定,而在酸性条件下酶活下降较快,酶的pH值稳定性范围较窄。酶在4 ℃下的保存稳定性较好。结论 确定了测定马蓝叶中β-葡萄糖苷酶活性的最佳条件,探索了马蓝叶中β-葡萄糖苷酶的酶学性质,该酶的热稳定性、pH值稳定性和保存稳定性的研究为青黛炮制原理的研究奠定了理论依据。  相似文献   

7.
目的:从新阿波罗栖热袍菌Thermotoga neapolitana (DSM 4359)中克隆葡萄糖苷酶基因,并将其转化进大肠杆菌中进行体外表达,研究重组酶的酶学性质。方法:以Thermotoga neapolitana基因组DNA为模板,根据该基因序列设计引物,采用PCR法扩增出葡萄糖苷酶基因,将其连接到pET-28a(+)载体上,转化入E.coli BL21 (DE3 )宿主菌中。经IPTG诱导体外高效表达。研究重组酶的最适反应温度、pH值和底物特异性。结果:PCR扩增得到825 bp的片段,编码274个氨基酸,并连接到载体pET-28a(+)上,成功转化到宿主菌中,并在体外进行了高效表达。丙烯酰胺凝胶电泳,目标蛋白相对分子质量约为63 000。重组酶的最适反应温度为75℃,在70℃~85℃范围内仍保持60%以上活力。最适反应pH值为5.0,在pH 3.0~6.0范围内仍能保持70%以上活力。最适底物为海藻糖,其次为龙胆二糖,其他糖苷键连接的二糖的活力均很低或没有活力。结论: Thermotoga neapolitana (DSM 4359)中葡萄糖苷酶基因成功克隆并表达于大肠杆菌中。葡萄糖苷酶能特异性水解α- (1→1)糖苷键。  相似文献   

8.
目的 测定亳菊花中β-葡萄糖苷酶的活性,研究亳菊花中β-葡萄糖苷酶的基本酶学性质。方法 采用对硝基苯酚-β-D葡萄糖苷(4-nitrophenyl-β-D-glucopyranoside,pNPG)法考察亳菊花中β-葡萄糖苷酶活性测定的最佳条件及其酶学性质。结果 当0.2 mL酶液、20 mmol/L pNPG 0.2 mL、0.6 mL pH值为4.0的柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液在温度为50 ℃的水浴中反应45 min时,酶活性最高。在此条件下对亳菊花的粗酶液中β-葡萄糖苷酶的基本酶学性质进行初步研究,结果表明该酶在30~50 ℃时,随着温度升高,酶活力有上升趋势,其热稳定性较好;pH值在3.2~5.4之间时,相对酶活性均在80%以上;酶在4 ℃下的保存稳定性较好。结论 本研究所测定的亳菊花中β-葡萄糖苷酶活性的最佳条件及酶学性质可为亳菊花炮制原理研究奠定基础。  相似文献   

9.
目的:从fao基因转化的E.coli BL21/DE3菌分离纯化重组酿酒酵母长链脂肪酸醇氧化酶,并对其理化性质进行研究。方法:应用硫酸铵分级沉淀、phenyl-sepharose HR5/5层析等方法分离纯化长链脂肪酸醇氧化酶,应用SDS-PAGE电泳测定其相对分子量,并对其Km、酸碱稳定性及其底物特异性进行分析。结果:应用上述分离方法得到电泳呈单一条带的酶蛋白,相对分子量大约为64000,得率为17.6%以上;该酶对十二烷醇的Km在2.5和3.0μmol/L之间,最适pH值为8.5,在pH7.0环境中,酶活性为pH8.5时的60%;对十二烷醇催化的相对活性较其它一些长链的二醇和脂肪酸醇为高。结论:从fao基因转化的E.coli BL21/DE3菌分离出重组酿酒酵母长链脂肪酸醇氧化酶,该酶为碱性酶,其最适底物为十二烷醇,但也可氧化一些长链的二醇和脂肪酸醇。  相似文献   

10.
张晓影  辛毅 《西部医学》2008,20(5):919-921
目的确定源于纤维单胞菌(Cellulomonose sp.)的聚阿拉伯糖内切酶的性质。方法SDS—PAGE和凝胶层析测定相对分子质量,离子交换层析估计等电点,TLC法测定酶活力,Lineweare—Burk双倒数做图法测定酶促反应动力学特性。结果相对分子质量为45kD,等电点约为6.0,酶促反应动力学符合Michaelis—Menten动力学规律,在37℃反应条件下,米氏常数Km为2.5mg/ml,最大反应速率Vmax为0.083μmol/L·min,最适pH为8.0,pH6.0~9.0时较稳定。最适温度为40℃,在40℃以下较稳定,超过50℃时酶活力开始下降。结论确定了一种聚阿拉伯糖内切酶的性质。  相似文献   

11.
免疫活性地龙肽的制备及其对小鼠NK细胞活性的影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:提取低分子量免疫活性地龙肽,并就其对自然杀伤(NK)细胞活性的影响进行体外研究。方法:采用粗分离、凝胶过滤层析和阴离子交换层析等方法分离纯化地龙肽;采用乳酸脱氢酶法测定NK细胞活性。结果:用凝胶过滤层析分离得到地龙肽T(分子量8000~20000,含有7种蛋白)。用离子交换层析又将地龙肽T分为A、B两部分,地龙肽A由5种蛋白组成,其中有4种分子量在13000以下;地龙肽B仅由一种蛋白构成,分子量约11000;地龙肽A和T可明显提高NK细胞的活性;地龙肽A、B和T皆可减弱环磷酰胺和地塞米松的免疫抑制作用,提高NK细胞的杀伤率。结论:地龙肽T、A单独应用即可以增强NK细胞的活性,并与IL-2具有协同作用;地龙肽T、A和B还可以拮抗地塞米松、环磷酰胺等免疫抑制剂。  相似文献   

12.
蚯蚓组织成分对成纤维细胞增生作用的实验研究   总被引:2,自引:0,他引:2       下载免费PDF全文
通过蚯蚓组织成分对成纤维细胞增生作用的实验研究 ,探讨其对创伤愈合的作用机制。用醋酸盐缓冲液抽提蚯蚓组织成分 ,经硫酸铵分段盐析、阴离子交换层析、凝胶过滤层析等方法 ,分离提取到 1组蛋白质成分。采用MTT法分析各分离组分对小鼠成纤维细胞增生作用的影响。结果 :经分离提取促增生组分位于SephadexG1 0 0层析第 1峰 ,经SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳显示此促增生组分为 3条区带 ,相对分子质量范围 5 70 0 0、72 0 0 0、870 0 0。经实验证明蚯蚓组织中含有能够促进成纤维细胞增生的活性成分  相似文献   

13.
三种方法测定蚯蚓脱氧核糖核酸酶(EWD2)的分子量   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的用不同方法测定蚯蚓组织中一种新型脱氧核糖核酸酶分子量。方法采用凝胶过滤层析法、SDS-PAGE法和基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱法(MALDI-TOF)三种方法测定一种新型蚯蚓脱氧核糖核酸酶(EWD2)的分子量。结果凝胶过滤层析法、SDS-PAGE法和质谱法测定其分子量分别为62.16kD、62.08kD和69.075kD。结论EWD2为单亚基脱氧核糖核酸酶,其分子量在60-70kD。  相似文献   

14.
复方地龙胶囊对哮喘小鼠血清IL-4分泌的影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:探讨复方地龙胶囊对哮喘小鼠血清白细胞介素-4(IL-4)分泌的影响。方法:实验分5组:正常对照组、哮喘模型组、复方地龙胶囊高剂量组、复方地龙胶囊低剂量组和地塞米松组,每组各10只。采用卵白蛋白(OVA)腹腔注射致敏建立小鼠支气管哮喘模型,并予以复方地龙胶囊或地塞米松对哮喘小鼠进行治疗,处死后用ELISA法检测小鼠血清白细胞介素-4(IL-4)的表达水平。结果:哮喘模型组小鼠血清IL-4含量明显高于正常对照组(P〈0.05);复方地龙胶囊高、低剂量组及地塞米松组IL-4含量水平均明显低于哮喘模型组,差异有显著性(P〈0.05);复方地龙胶囊高、低剂量组与地塞米松组比较,差异没有显著性(P〉0.05)。结论:复方地龙胶囊可通过影响哮喘小鼠血清IL-4的水平,调节免疫系统,进而对其治疗起重要作用。  相似文献   

15.
用赤子爱胜蚓提取物给小鼠口服,观察其有无毒副作用及抗血栓作用,同时进行了血液凝血时间及纤溶活性的测定,结果表明:赤子爱胜蚓提取物小鼠口服后有极为明显的抗栓作用及增强纤溶活性的效应(P<0.01),优球蛋白溶解时间也有缩短。口服赤子爱胜蚓提取物具有毒副作用小,使用方便的特点,有进一步开展临床研究与应用的价值。  相似文献   

16.
中药地龙胶囊对食管癌和肺癌的辐射增效作用   总被引:21,自引:1,他引:20  
张绍章  徐德门 《医学争鸣》1992,13(3):165-168
  相似文献   

17.
目的:探讨复方地龙胶囊对哮喘小鼠模型气道炎症及IL-23的影响。方法:50只小鼠随机分为空白对照组、哮喘模型组、复方地龙胶囊高剂量组、复方地龙胶囊低剂量组和地塞米松组,每组10只小鼠。卵白蛋白(OVA)抗原溶液腹腔注射致敏,雾化吸入激发制备哮喘小鼠模型。HE染色观察小鼠肺组织的形态结构,ELISA法测定小鼠血清IL-23的水平。结果:各治疗组小鼠的一般情况明显优于模型组;复方地龙胶囊治疗组、地塞米松组小鼠肺组织的病理变化明显减轻;复方地龙胶囊治疗组、地塞米松组小鼠血清IL-23水平明显低于模型组(P<0.01)。结论:复方地龙胶囊能明显抑制哮喘小鼠的气道炎症,并通过降低哮喘小鼠血清IL-23的水平调节免疫系统,且治疗哮喘的作用与地塞米松相当。  相似文献   

18.
将赤子爱胜蚓整体组织匀浆的抽提液,经Sephadex G-75凝胶过滤、DEAE-Sepharose CL-6B离子交换及在FPLC仪上用Mono Q柱分离,可以纯化到多种组分的纤维素酶,研究了它们的酶学性质,证明均为C_X酶。  相似文献   

19.
采用薄层色谱法鉴别了聪圣胶囊中的制何首乌、荷叶、肉苁蓉、地龙。结果表明 ,色谱斑点清晰 ,重复性好 ,可用于成品的定性鉴别。  相似文献   

20.
作者进行本实验的目的是检测蚯蚓提取物的化学成分,为分离其有效组分提供依据.蚯蚓提取物是按该室方法从蚯蚓体内提取的混合物.化学成分分析选用分光光度仪、紫外分光光度仪、氨基酸分析仪和原子吸收光谱仪等.实验结果表明每百克提取物中各化学成分的含量(g):多肽蛋白质类物质为40.480,核黄素为0.012,维生素C为0.021,DNA为0.094,RNA为0.820,总还原糖为14.280,并有17种氨基酸和11种无机元素.  相似文献   

设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司  京ICP备09084417号