姜黄素对血管平滑肌细胞源性荷脂细胞胆固醇代谢及SREBP-1表达的影响

目的观察姜黄素对血管平滑肌细胞源性荷脂细胞胆固醇代谢的影响，并初步探讨SREBP-1蛋白表达在其中的作用。方法以血管平滑肌细胞源性荷脂细胞为模型，不同浓度姜黄素（12．5、25．0、50．0μmol／L）作用于细胞24h及25．0μmol／L姜黄素不同时间（0、6、12、24、48h）作用于细胞，高效液相色谱分析法检测细胞内总胆固醇。游离胆固醇和胆固醇酯的含量。在SREBP-1蛋白抑制剂ALLN干预下，25．0μmol／L姜黄素处理平滑肌细胞源性荷脂细胞24h，Western印迹法检测SREBP-1蛋白的表达。结果不同浓度姜黄素（12．5、25．0、50．0μmol／L）作用于血管平滑肌细胞源性荷脂细胞24h及25．0μmol／L姜黄素不同时间（0、6、12、24、48h）作用于血管平滑肌细胞源性荷脂细胞，细胞内总胆固醇，游离胆固醇和胆固醇酯含量呈现一定的剂量和时间依赖性下降趋势；在SREBP-1蛋白抑制剂ALLN干预下，25．0μmol／L姜黄素处理平滑肌细胞源性荷脂细胞24h，SREBP-1表达下调，总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯含量无明显变化。结论姜黄素能引起血管平滑肌细胞源性荷脂细胞总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯含量下降，且这种作用跟SREBP-1蛋白的表达上调有一定关系。     

Caveolin-1结合Cyclophilin A改善大鼠血管平滑肌细胞胆固醇蓄积

观察caveolin-1和cyclophilin A在血管平滑肌细胞荷脂过程中的表达变化及其对细胞内胆固醇蓄积的影响。实验采用Western-blot、免疫荧光法分别定量,定位检测caveolin-1和cyclophilin A蛋白的表达;油红O染色观察细胞内脂滴的形成情况;高效液相检测细胞内外总胆固醇含量;免疫共沉淀检测caveolin-1和cyclophilin A相互作用。结果显示,随着荷脂时间延长,caveolin-1和cyclophilin A的蛋白表达逐渐减弱;细胞内脂滴形成逐渐增多,细胞内总胆固醇含量不断增加;caveolin-1和cyclophilin A在大鼠血管平滑肌细胞中相互结合,并且cyclophilin A活性抑制后,与caveolin-1结合能力减低,而细胞内胆固醇含量增加。这提示,caveolin-1和cyclophilin A在血管平滑肌细胞内可相互结合,并参与改善细胞内胆固醇蓄积。     

Caveolin-1在氧化型低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞荷脂过程中的表达

目的观察Caveolin-1在氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导的巨噬细胞荷脂过程中的表达变化,进而分析Caveolin-1在巨噬源性泡沫细胞形成过程中的作用。方法采用75mg／L ox-LDL与RAW264.7细胞共同孵育不同时间,高效液相色谱法检测细胞内胆固醇含量的变化,建立巨噬细胞荷脂化模型;Western-blot检测Caveolin-1蛋白的表达改变。结果75mg／L ox-LDL与RAW264.7细胞共同孵育48h后,细胞内胆固醇酯／总胆固醇的比值上升至42.3％±5.9％,符合荷脂细胞特征。Caveolin-1的蛋白表达较0h组明显减弱。     

过表达KLF4对RAW264.7巨噬细胞ABCA1表达和胆固醇蓄积的影响

目的观察KLF4过表达对小鼠巨噬细胞(RAW264.7)胆固醇蓄积的影响及对ATP结合盒转运蛋白A1(ABCA1)表达的影响。方法构建KLF4过表达的RAW264.7细胞株。将细胞分为三组:对照组、ox-LDL组、KLF4过表达+ox-LDL组,后两组加入终浓度为30 μg/mL的ox-LDL处理24 h。分别运用油红O染色观察细胞质脂滴变化,高效液相色谱法（HPLC）检测细胞内总胆固醇(TC)和游离胆固醇(FC)含量,Western blot法检测各组细胞ABCA1及KLF4蛋白表达。结果泡沫细胞模型组的细胞内存在大量的红色脂滴,KLF4及ABCA1蛋白表达及胆固醇含量较对照组升高;KLF4过表达细胞经ox-LDL处理后,细胞内脂滴较模型组明显减少,胆固醇含量下降,ABCA1蛋白表达进一步升高。结论KLF4可上调巨噬细胞ABCA1的表达,抑制ox-LDL诱导的RAW264.7巨噬细胞胆固醇蓄积。     

Visfatin诱导THP-1源性泡沫细胞形成的机制研究

目的观察内脂素(visfatin)对人单核细胞株(THP-1)源性巨噬细胞胆固醇代谢相关基因ATP结合盒转运蛋白A1(ABCA1)和酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(ACAT1)表达的影响,探讨visfatin诱导THP-1源性泡沫细胞形成的机制。方法 THP-1单核细胞诱导分化为巨噬细胞,随机分组,给予不同浓度和不同作用时间的visfatin进行干预,分别运用油红O染色观察细胞质脂滴变化,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法和蛋白免疫印迹(Western blot)法检测各组细胞ABCA1及ACAT1 mRNA和蛋白表达,酶荧光学法检测细胞内总胆固醇(TC)和游离胆固醇(FC)含量,TC与FC之差为胆固醇酯(CE)含量。结果与对照组比较,visfatin干预组细胞质脂滴明显增多,细胞内FC和CE含量增加(均P<0.05),CE与TC的比值明显增加(>50%),ABCA1 mRNA和蛋白表达水平降低(均P<0.05),ACAT1 mRNA和蛋白表达水平升高(均P<0.05)。相关分析显示,visfatin呈浓度和时间依赖性下调ABCA1 mRNA和蛋白的表达,上调ACAT1 mRNA和蛋白的表达。结论 visfatin下调巨噬细胞ABCA1的表达,上调ACAT1的表达,使细胞内FC流出减少,CE合成增加,从而诱导THP-1源性泡沫细胞的形成,这可能为visfatin致动脉粥样硬化发病机制的研究提供一个新的理论依据。     

姜黄素对脂变肝细胞胆固醇流出及ABCA1表达的影响

目的研究姜黄素对脂变肝细胞胆固醇的转运机制。方法取正常人肝L-02细胞作为研究对象。用10%（V/V）医用脂肪乳注射液和10%（V/V）胎牛血清的RPM I-1640完全培养基孵育24 h建立的脂肪变性肝细胞模型。实验分为为6个组,即正常肝细胞组、人肝L-02细胞脂肪变性模型组、姜黄素处理组（脂变细胞模型建立后,分别加入不等量姜黄素,使其终浓度分别为12.5、25、50、100μmol/L）。RT-PCR检测细胞ABCA1表达;高效液相色谱法定量检测细胞内外胆固醇含量。结果姜黄素呈浓度依赖性地减少细胞内脂变肝细胞内总胆固醇（TC）、胆固醇酯（CE）含量,增加培养基中游离胆固醇（FC）含量,同时增加ABCA1的表达。结论姜黄素能降低脂变人肝L-02细胞TC及CE含量,增加FC的外流;姜黄素增加脂变肝细胞胆固醇转运可能与AB-CA1的上调有关。     

静压力对Caveolin-1调节ox-LDL诱导的血管平滑肌细胞荷脂的影响

目的 观察静压力对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells, VSMCs)荷脂情况的影响.方法 原代培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞,取第4～10代与ox-LDL 50 μg/mL共孵育,用自行研制的压力可调细胞培养箱以不同压力加压处理(0 kPa、8 kPa、16 kPa和24 kPa).HPLC法观察静压力对VSMCs荷脂的影响;用免疫印迹法检测小凹蛋白1(caveolin-1)的表达与磷酸化情况;用下调caveolin-1活性的药物干预后再用HPLC法观察血管平滑肌细胞胆固醇含量.结果 静压力可以减少ox-LDL诱导的VSMCs内胆固醇含量,上调caveolin-1的磷酸化;其中以16 kPa压力时作用最明显.SB203580可显著抑制caveolin-1磷酸化,从而导致16 kPa静压力下VSMCs内胆固醇含量增加.结论 静压力可通过调节caveolin-1磷酸化抑制ox-LDL诱导的VSMCs胆固醇蓄积.     

番石榴叶总黄酮抑制泡沫细胞形成及LOX-1表达的实验研究

目的 研究番石榴叶总黄酮抑制泡沫细胞形成及LOX-1表达的作用。方法 建立THP-1单核-巨噬细胞源性泡沫细胞模型,根据CCK-8法测定的番石榴叶总黄酮对该细胞的安全浓度范围,将配制的番石榴总黄铜溶液在其安全范围内选取低、中、高三个剂量组,以无血清培养液的空白对照组及ox-LDL模型组为对照。采用油红O染色观察细胞内脂质堆积情况,酶偶联比色法检测细胞内总胆固醇含量,Western blot法检测LOX-1的蛋白表达水平。结果 三个剂量组细胞内总胆固醇含量均低于模型组（P〈0.05）,并随番石榴叶总黄酮浓度升高而下降;三个剂量组的LOX-1蛋白表达均低于模型组（P〈0.05）,抑制作用随剂量升高而增强。结论 番石榴叶总黄酮通过抑制LOX-1的表达,减少巨噬细胞摄取ox-LDL,抑制泡沫细胞形成,从而起到抗动脉粥样硬化的作用。     

血管紧张素Ⅱ对THP-1源性泡沫细胞ATP结合盒转运子A1表达的调控作用

目的:观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对THP-1源性泡沫细胞ATP结合盒转运子A1(ABCA1)表达的调控作用.方法:以50 mg/L的氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)温育人巨噬细胞系THP-1源性巨噬细胞48 h为对照,同时分别加入10-7 mol/L、10-6 mol/L、10-5 mol/L的AngⅡ,采用RT-PCR和Western blotting法分别检测THP-1源性泡沫细胞中ABCA1 mRNA与蛋白的表达,采用酶法检测细胞内胆固醇含量,应用液体闪烁计数仪检测胆固醇流出的变化.结果:与对照组比较,10-7 mol/L、10-6 mol/L、10-5 mol/L AngⅡ组ABCA1 mRNA和蛋白表达均下降(P＜0.05),胞内胆固醇含量增加(P＜0.05),胆固醇流出率减少(P＜0.05).结论:AngⅡ可下调THP-1源性泡沫细胞ABCA1的表达,促进泡沫细胞形成.     

胆固醇敏感器SCAP功能失调对THP-1源性巨噬细胞炎症因子表达的影响

目的 观察胆固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白(sterol regulatory element binding proteins cleavage-activating protein,SCAP)功能失调对THP-1源性巨噬细胞脂质代谢及IL-1β、MCP-1表达的影响,探讨SCAP的促炎作用是否依赖于其介导的胆固醇稳态调节功能.方法 采用基因转染方法在THP-1源性巨噬细胞中过表达SCAP或沉默SCAP,结合使用炎症刺激剂LPS(1μg/mL)或SCAP转位抑制剂Betulin(3μmol/L)处理THP-1源性巨噬细胞,将细胞分为对照组、过表达SCAP组、沉默SCAP组、LPS组、沉默SCAP+ LPS组、Betulin组以及过表达SCAP+Betulin组,RT-PCR法检测过表达SCAP或沉默SCAP对HMGCoAR、pro-IL-1β、MCP-1基因表达水平的影响.油红O染色观察不同组别细胞内中性脂质沉积的变化.酶法定量测定胞内胆固醇含量.Western blot法检测SCAP、pro-IL-1β以及培养上清中IL-1β的蛋白水平.结果 ①过表达SCAP组与对照组比较,其HMGCoAR、MCP-1、pro-IL-1β基因表达水平升高(P＜0.01),细胞内pro-IL-1β及细胞培养上清中IL-1β蛋白含量均上升(P＜0.05),且细胞内总胆固醇(total cholesterol,TC)及胆固醇酯(cholesterol ester,CE)含量上升(P＜0.01).②沉默SCAP组与对照组比较,HMGCoAR、MCP-1、pro-IL-1β基因表达水平下降(P＜0.05),细胞内pro-IL-1β及培养上清中成熟IL-1β蛋白含量均降低(P＜0.05),且细胞内中性脂质蓄积减少,TC及CE含量下降(P＜0.05);沉默SCAP+ LPS组与LPS组比较,MCP-1、pro-IL-1β基因表达下调(P＜0.05),成熟IL-1β蛋白水平下降(P＜0.05).过表达SCAP+ Betulin组与过表达SCAP组比较,HMGCoAR基因表达水平下降(P＜0.05),其细胞内,TC及CE含量亦下降(P＜0.05),但MCP-1、pro-IL-1β基因表达水平差异无统计学意义(P＞0.05),培养上清中成熟IL-1β蛋白含量差异也无统计学意义(P＞0.05).结论 胆固醇敏感器SCAP功能失调促进THP-1源性巨噬细胞内炎症因子IL-1β、MCP-1表达,增加成熟IL-1β的生成及其向细胞外分泌;SCAP这一新发现的功能不依赖于其介导的胆固醇稳态调节功能.     

姜黄素对SGC7901和HepG_2两种细胞株生长和凋亡的影响

目的:探讨姜黄素抑制人胃癌SGC7901细胞和人肝癌HepG2细胞生长及促进两种癌细胞发生凋亡的效应。方法:将被研究细胞分为空白对照组、姜黄素组、As2O3组、姜黄素+As2O3组,用MTT法检测不同浓度姜黄素溶液作用后SGC7901、HepG2细胞的生长抑制率,观察细胞的形态改变。结果:各浓度姜黄素组、As2O3组、姜黄素+As2O3组部分细胞形态呈现凋亡表现;40μg/mL姜黄素组对两种细胞的生长抑制率最大;As2O3组、姜黄素+As2O3合用组对细胞的生长抑制率随浓度增加而增大。结论:姜黄素及As2O3均可显著抑制细胞增殖;二者合用可加强各自作用。     

姜黄素、阿米洛利联用对大鼠肝星状细胞增殖的影响

目的　探讨姜黄素 (curcumin)、阿米洛利 (Amiloride)联用对大鼠肝星状细胞增殖的影响。方法　HSC T6细胞与不同浓度的姜黄素、阿米洛利共同培养 2 4h。LDH法观察姜黄素、阿米洛利对HSC T6的毒性作用 ,以MTT法观察姜黄素、阿米洛利单用及联用对HSC T6增殖的效应。结果　各治疗组HSC的增殖与对照组相比明显为低 ,均有显著性差异 (P <0 0 0 1) ;联用组对HSC增殖的抑制率最高 ;联用组HSC的增殖更低于姜黄素组 (P <0 0 5 )。各治疗组培养上清液中LDH活力与对照组相比未见显著性差异 (P >0 0 5 )。结论　姜黄素、阿米洛利均可抑制HSC的增殖 ,且联用组优于姜黄素单用组 ;它们的作用不是非特异性细胞毒作用所致。     

姜黄素对bFGF诱导的人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖的影响

目的 通过观察姜黄素（Cur）对碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）诱导人乳腺癌细胞（MDA-MB-231）增殖的影响,探讨Cur治疗乳腺癌的作用机制.方法 将人乳腺癌细胞MDA-MB-231用含10%胎生血清的RPMI-1640培养基培养.同时根据加入Cur的不同浓度将实验分为7组：空白对照组、bFGF组（bFGF 5 ng/ml）、干预1组（bFGF 5ng/ml＋Cur 1 μmol/L）、干预2组（bFGF 5ng/mI＋Cur 2.5 μmol/L）、干预3组（bFGF 5 ng/ml＋Cur 5 μmol/L）、干预4组（bFGF 5ng/ml＋Cur 10 μmol/L）、干预5组（bFGF 5 ng/ml＋Cur 20 μmol/L）,并在倒置显微镜下观察各组细胞形态,通过MTT法检测Cur对细胞增殖的影响.结果 bFGF组可显著促进人乳腺癌细胞（MDA-MB-231）的增殖,与对照组的差异有统计学意义（P〈0.05）,且其作用随着处理时间的延长而增强.各干预组均可显著抑制人乳腺癌细胞（MDA-MB-231）的增殖,且呈时间和浓度依赖性.结论 Cur可有效抑制bFGF诱导的人乳腺癌细胞增殖,可能为其用于乳腺癌治疗的机制所在.     

姜黄素对肾癌786-O细胞增殖及凋亡的实验研究

目的观察姜黄素对肾癌786-O细胞缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP蛋白)表达水平以及细胞凋亡的影响,研究姜黄素对肾癌细胞的生长抑制作用并探讨其分子机制,进一步揭示姜黄素对肾癌的治疗作用。方法不同浓度姜黄素作用人肾癌786-O细胞24、48、72 h后,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测姜黄素对人肾癌786-O细胞的增殖抑制率;流式细胞术检测姜黄素诱导细胞的凋亡率;免疫细胞化学检测姜黄素对786-O细胞HIF-1α和XIAP表达的影响。结果姜黄素对人肾癌786-O细胞有明显的抑制作用,可引起细胞凋亡,并且存在剂量和时间依赖;不同浓度姜黄素作用细胞48 h后,HIF-1α和XIAP蛋白表达量下降。结论姜黄素通过下调HIF-1α和XIAP的表达抑制人肾癌786-O细胞的增殖,诱导人肾癌786-O细胞的凋亡。     

姜黄素对miR-29-VGEF的调控作用及对肝癌发生发展的影响

目的 研究肝癌细胞内miR-29-VEGF的表达情况和对肝癌细胞生物学过程的影响,并探索姜黄素对miR-29-VEGF的调控作用。方法 收集2008年12月1日-2018年12月1日期间就诊于我院临床资料较完整的收储切除肝癌标本41例,含癌组织和癌旁的非癌组织,采用免疫组化研究VEGF的表达情况以及与肝癌分型的相关性;转染VEGF siRNA后,MTT检测其对细胞增殖的调控作用,Western Blot 检测其对凋亡蛋白Bcl2、Bax表达的影响;PCR检测肝癌细胞内miR-29的表达,转染miR-20mimics后,qRT-PCT和Western blot 检测对VEGF的影响;MTT检测姜黄素对HepG2细胞的IC50,qRT-PCT和Western blot 检测姜黄素对miR-29-VEGF的调控作用。结果 肝癌组织中VEGF阳性率显著升高,为70.73%(29/41),且VEGF在正常肝组织、癌旁肝组织和肝癌组织中的表达呈现递增趋势,肝癌组织中的VEGF显著高于癌旁肝组织和正常肝组织,差异有显著性(p<0.001),肝癌组织中VEGF表达水平与肿瘤分化程度有关,病理分级3-4级明显高于1-2级(p<0.05);VEGF表达水平与肝癌侵袭转移性有关,高侵袭转移性有关,高侵袭转移组明显高于低侵袭转移组(p<0.05);而与肿瘤大小、血清AFP水平及HBsAg状态无相关(p>0.05);转染VEGF siRNA后,细胞的增殖受到明显抑制,细胞抗凋亡蛋白Bcl2表达显著下降,细胞凋亡蛋白Bax表达显著上升;与阴性对照组相比,抑制VEGF的表达后,HepG2细胞迁移能力明显降低;qRT-PCR检测结果显示在HepG2细胞中,miR-29的表达异常降低;转染miR-29 mimics促进miR-29的表达后,VEGF mRNA水平和蛋白质水平均显著降低;姜黄素对HepG2细胞的抑制率在72h最好,IC50为49.50umol/L;在肝癌HepG2细胞内添加姜黄素59.68umol/L作用72h后,miR-29的表达显著升高,同时VEGF表达下降。结论在肝癌细胞内,姜黄素可在某种程度上促进miR-29的表达,进而抑制VEGF的表达,调控肝癌细胞生物学过程。     

姜黄素对A549细胞亚群SP和NON-SP的NF-κB、VEGF及Notch通路的影响

[目的] 通过动物实验了解姜黄提取物-姜黄素抗肿瘤血管生成的具体作用机制。[方法] 将40只BALB/C雄性裸小鼠分为4组,每组10只。分别为A组(SP亚群细胞姜黄素组)、B组(SP亚群细胞荷瘤对照组)、C组(NON-SP亚群细胞姜黄素组)、D组(NON-SP亚群细胞荷瘤对照组).A、B两组于实验前建立肺腺癌A549 SP细胞亚群荷瘤模型,C、D两组建立肺腺癌A549 NON-SP细胞亚群荷瘤模型,建立模型后观察16 d,于A组、C组小鼠腹腔注射姜黄素,隔天1次,B、D两组注射生理盐水。16 d后将小鼠称重后处死,剥离瘤块组织,比较各组瘤质量;免疫组化法检测肿瘤组织中血管生长因子(VEGF)、核因子-κB(NF-κB)的表达;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Notch1 mRNA含量。[结果] 肺腺癌A549 SP细胞亚群荷瘤模型组小鼠瘤体与NON-SP细胞亚群荷瘤模型组小鼠相比体积较大;SP亚群细胞姜黄素组抑瘤作用及抗肿瘤血管生成优于NON-SP亚群细胞姜黄素组,两组相比差异具有统计学意义。[结论] 姜黄素可以抑制肿瘤生长,考虑可能与其抑制NF-kB的表达,下调Notch1 mRNA含量,阻断Notch信号通路,抑制肿瘤组织中VEGF的表达有关。     

Effects of TNF-α and curcumin on the expression of VEGF in Raji and U937 cells and on angiogenesis in ECV304 cells

Background To better understand the possibilities of antiangiogenic tumor therapy and to assess possible side effects, we investigated the effect of tumour necrosis factor （TNF）-α and curcumin on the expression of vascular endothelial growth factor （VEGF） in U937 and Raji cell lines and their effect on angiogenesis in a human umbilical vein endothelial cell （HUVECs）-derived cell line （ECV304）, and also the relationship between Notchl and VEGF. The aim of this study was to elucidate potential mechanisms controlling tumor neovascularization. Methods VEGF secreted by U937 and Raji cell lines was determined by ELISA. Angiogenesis was tested by network formation of endothelial cells on Matrigel. Levels of VEGF mRNA in U937 and Raji cells and Notchl mRNA levels in EV304 cells were determined by RT-PCR. Results Secretion of VEGF by U937 and Raji cells was increased by TNF-α treatment and suppressed by curcumin （P 〈 0. 01 ）. The mRNA expression of VEGF165 and VEGF121 （containing 165 and 121 amino acid residues, respectively） were detected in any fractions. TNF-α augmented the expression of VEGF165 and VEGF121 mRNA and curcumin reduced the expression （P 〈0. 01 ）. No networks or cords formed in control and curcumin groups. There was tube formation on matrigel in the supernatants of the Raji culture group and the supernatants groups treated by VEGF group and TNF-α in Raji cell. Notch1 mRNA was detected but there was no significant change in the VEGF group compared with control （P 〉 0. 05）. Conclusions Expressions of VEGF mRNA in U937 and Raji cells were increased by TNF-α and suppressed by curcumin. VEGF and TNF-α can induce angiogenesis, and curcumin can inhibit angiogenesis in ECV304 cells.     

姜黄素促进大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化中活性氧表达变化研究

目的研究姜黄素对成年大鼠骨髓间充质干细胞（rBMSCs）的成骨性分化中活性氧（ROS）表达变化的影响。方法贴壁筛选法体外培养健康SPF级SD大鼠rBMSCs,分为四组,姜黄素组（15μmol/L姜黄素干预）,N-乙酰半胱氨酸（NAC）组（含40 mmol/L NAC）,姜黄素＋NAC组（含15μmol/L姜黄素＋40 mmol/L NAC）,对照组（只含等体积溶剂）。比较各组间碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）活性,骨钙素（bone glaprotein,BGP）含量和ROS相关蛋白表达变化。结果①姜黄素组第4、8、12天ALP表达OD值[（35.72±0.295）、（60.44±0.347）、（51.51±0.487）]均高于对照组[（19.96±0.874）、（53.55±0.978）、（41.32±0.755）],差异均有统计学意义（P〈0.05）;NAC组和姜黄素＋NAC组第4、8、12天ALP活性表达的OD值低于姜黄素组,差异均有统计学意义（P〈0.05）。②姜黄素组培养12 d时BGP活性[（6.900±0.026）μg/L]高于对照组[（5.690±0.099）μg/L],差异有统计学意义（P〈0.05）,说明姜黄素可明显增强rBMSCs的BGP活性。NAC组和姜黄素＋NAC组的BGP活性[（5.360±0.254）、（5.500±0.232）μg/L]低于姜黄素组[（6.900±0.026）μg/L],差异有统计学意义（P〈0.05）。③rBMSCs诱导成骨化培养8 d后,姜黄素组ERK1/2,p38蛋白的表达量高于对照组,差异有统计学差异（P〈0.05）;NAC组ERK1/2,p38蛋白表达量低于姜黄素组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论姜黄素促进rBMSCs成骨分化过程中ROS表达量的增加。     

在缺氧微环境中姜黄素对PANC-1中HIF-1α基因表达的影响

目的探讨体外缺氧条件下姜黄素对人胰腺癌细胞PANC-1中缺氧诱导因子-1α（HIF-1α的抑制作用和机制。方法缺氧条件下体外培养PANC-1,RT～PCR检测不同剂量的姜黄素作用24h后HIF-1αmRNA表达的变化;ELISA检测处理后PANC-1细胞中HIF-1α蛋白的表达水平。结果PANC-1细胞在O．1、1、10、100gmol／L姜黄素处理后,HIF-1α蛋白水平与对照组比较明显降低（F=138．43,P〈0．01）,且有明显的剂量依赖性,随剂量的增大而降低,但各剂量组HIF-1α的mRNA水平与对照组比较无显著性差异。结论缺氧条件下,姜黄素抑制人胰腺癌PANC-1细胞HIF-1α的转录活性,是通过抑制HIF-1α蛋白的合成来调控的。     

姜黄素对肿瘤相关巨噬细胞分泌细胞因子基因表达的影响

目的：研究姜黄素对口腔鳞状细胞癌（OSCC）细胞（Cal27细胞）上清液诱导的肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）分泌细胞因子基因表达的影响,阐明姜黄素抗OSCC的作用机制。方法：将Raw264.7细胞随机分为对照组及不同浓度（1.25、2.50、5.00、10.00、20.00和40.00μmol·L^-1）姜黄素组,各组细胞加入Cal27细胞上清液共同孵育48 h,CCK-8法检测细胞活性。将Raw264.7细胞随机分为对照组及不同浓度（5、10和20μmol· L^-1）姜黄素组,各组细胞加入Cal27细胞上清液共同孵育36和48 h后,采用Real-time PCR法检测各组细胞中白细胞介素12（IL-12）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素10（IL-10）mRNA表达水平;Cal27细胞上清液孵育Raw264.7细胞48 h后,姜黄素组加入不同浓度（5、10和20μmol·L^-1）姜黄素干预48 h,采用Real-time PCR法检测各组细胞中IL-12、iNOS、TNF-α、IL-10和精氨酸酶1（Arg-1）mRNA表达水平。结果：与对照组比较,40 μmol·L^-1姜黄素组Raw264.7细胞活性明显降低（P<0.01）。不同浓度姜黄素与Cal27细胞上清液共同孵育Raw264.7细胞36 h,与对照组比较,20 μmol·L^-1姜黄素组Raw264.7细胞中IL-12 mRNA表达水平明显升高（P<0.01）,10和20μmol·L^-1姜黄素组Raw264.7细胞中iNOS和TNF-α mRNA表达水平明显降低（P<0.05或P<0.01）,20μmol·L^-1组Raw264.7细胞中IL-10 mRNA表达水平降低（P<0.01）;不同浓度姜黄素与Cal27细胞上清液共同孵育Raw264.7细胞48 h,与对照组比较,5和20 μmol·L^-1姜黄素组Raw264.7细胞中IL-12 mRNA表达水平明显升高（P<0.01）,5和20μmol·L^-1姜黄素组Raw264.7细胞中iNOS、TNF-α和IL-10 mRNA表达水平均明显降低（P<0.01）。Cal27细胞上清液孵育Raw264.7细胞48 h后,采用不同浓度姜黄素进行干预,与对照组比较,10和20 μmol·L^-1姜黄素组Raw264.7细胞中IL-12 mRNA表达水平升高（P<0.01）,不同浓度姜黄素组Raw264.7细胞中iNOS、TNF-α和Arg-1 mRNA表达水平降低（P<0.05或P<0.01）,20μmol·L^-1姜黄素组Raw264.7细胞中IL-10 mRNA表达水平均明显降低（P<0.01）。结论：姜黄素可以在诱导TAMs的不同阶段调节TAMs分泌细胞因子IL-12、iNOS、TNF-α、IL-10和Arg-1 mRNA表达水平。