趋化素样因子1对鼠肺巨噬细胞吞噬活性的作用

目的:观察超化素样因子1(CKLF1)导入对小鼠肺巨噬细胞吞噬功能的作用.方法:将1%锥虫兰水溶液注入至CKLF1基因导入的小鼠腹腔内,观察小鼠肺巨噬细胞对锥虫兰的吞噬作用.结果:与对照组小鼠相比,导入CKLF1小鼠的肺组织巨噬细胞聚集增生,被肺泡巨噬细胞吞噬的锥虫兰颗粒数量为73.6±5.2与对照小鼠32.5±8.1相比明显增多,体积明显增大.结论:CKLF1在体内可明显增强小鼠肺巨噬细胞的吞噬功能.     

嗜肺军团菌主要外膜蛋白DNA疫苗的免疫保护性研究

目的观察m ompS基因DNA疫苗对嗜肺军团菌感染的免疫保护作用。方法将18只BALB/c雌性小鼠随机分为3组,pcDNA 3.1-m ompS实验组股四头肌肌肉接种pcDNA 3.1-m om opS质粒100μg,两周后加强免疫1次,2个对照组分别肌肉注射等体积的生理盐水和空质粒,加强免疫后3周小鼠鼻腔滴注嗜肺军团菌L 1型菌液进行攻击感染,感染4周后,检查小鼠肺组织带菌量,观察肺组织病理形态学改变。结果pcDNA 3.1-m ompS免疫组肺组织带菌量少于生理盐水对照组和空质粒对照组(P<0.01);与生理盐水对照组和空质粒对照组比较,pcDNA 3.1-m ompS免疫组肺组织病理改变轻微。结论由m ompS基因构建的嗜肺军团菌DNA疫苗能诱导小鼠产生保护性免疫。     

IL-12真核表达质粒对小鼠气道变应性炎症的免疫调节作用

目的:研究IL-12真核表达质粒(psIL-12)在气道内表达对成年小鼠气道变态反应炎症的影响.方法:以卵白蛋白(OVA)复制成年小鼠气道变态反应炎症模型,气道内应用单剂量psIL-12,pcDNA3.1(+),PBS/脂质体复合物,同时设正常对照组.分别检测肺单链IL-12表达,计数支气管肺泡灌注液(BALF)中嗜酸粒细胞的百分比和IL-4,IFN-γ含量,观察肺组织形态学变化.结果:气道转染psIL-12可在小鼠肺组织中表达IL-12mRNA;psIL-12干预组BALF中嗜酸粒细胞百分比为(2.6±2.3)%,较PBS对照组(11.6±2.3)%明显降低,两组组间差异具有显著性(P<0.05).psIL-12干预组BALF中IL-4含量为(103±53)ng/L,IFN-γ含量为(171±20)ng/L,而PBS对照组IL-4含量为(319±12)ng/L,IFN-γ含量为(77±36)ng/L,两组组间差异具有统计学意义(P<0.05).psIL-12可明显阻止模型鼠肺组织病理改变,降低血清中OVA特异性IgE抗体含量.结论:psIL-12转染气道表达IL-12,增加Th1型细胞因子IFN-γ的产生,...     

脓毒血症引起肺损伤的实验研究

目的 探讨脓毒血症引起肺损伤的相关机制.方法 将30只SD大鼠随机均分为正常对照组和模型组,1周后分别予等体积的生理盐水、8 mg/kg的脂多糖(LPS)尾静脉注射,48 h后取支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织,测定BALF中的中性粒细胞计数;ELISA法测定肺组织和BALF中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)的浓度,称重并计算肺组织湿/干重比(W/D).观察小鼠肺组织病理切片并行肺损伤评分.结果 与正常对照组比较,模型组小鼠肺泡组织结构发生明显改变,大鼠肺组织肿大,有轻微的溃烂,且肺组织W/D较正常对照组显著增加,HE染色显示模型组组织膨胀,细胞水肿疏松,并有部分细胞脱落,肺损伤评分明显升高(P<0.01),正常对照组无明显病变.模型组BALF中的中性粒细胞计数显著提高(P<0.01),肺组织和BALF中TNF-α和IL-6浓度显著升高(P<0.01).结论 脓毒血症肺组织、BALF炎性因子TNF-α和IL-6明显升高,脓毒血症所致急性肺损伤的病变程度加重,中性粒细胞的浸润、肺组织炎症介质的产生和渗出增加.脓毒血症可引起的肺水肿和大分子物质渗出.     

MJD1基因真核表达载体的构建及其在SH-SY5Y细胞中的表达

目的：分别构建野生型MJD1以及CAG三核苷酸重复扩展突变型MJD1的真核表达载体；明确ataxin-3的多聚谷氨酰胺扩展突变是否可导致细胞核内蛋白聚合体形成。方法：分别以pAS2-1-MJD20Q和pAS2-1-MJD68Q为模板，通过PCR扩展野生型MJD1以及CAG三核苷酸重复扩展突变型MJD1的编码序列。PCR产物经Bam HI和Hind III双酶切后连入pcDNA3.1-Myc-His(-)B，通过酶切以及DNA测序鉴定重组质粒pcDNA3.1-Myc-His(-)B-MJD20Q和pcDNA3.1-Myc-His(-)B-MJD68Q。重组质粒转染SH-SY5Y细胞，通过Western印迹验证ataxin-3的表达，应用激光共聚焦显微镜观察转染细胞的核内蛋白聚合体形成情况。结果：酶切和DNA测序证实目的基因已被克隆入pcDNA3.1-Myc-His(-)B；其在转染细胞中的表达亦经Western印迹得以验证；SH-SY5Y细胞转染pcDNA3.1-Myc-His(-)B-MJD68Q后可见核内蛋白聚合体形成，而转染pcDNA3.1-Myc-His(-)B-MJD20Q后未见核内蛋白聚合体形成。结论：成功构建了MJD1的真核表达质粒；ataxin-3的多聚谷氨酰胺扩展突变可导致细胞核内蛋白聚合体形成。     

FN及HA在高氧致新生鼠肺损伤中动态变化及其意义

目的:探讨纤维连接蛋白(FN)及透明质酸(HA)在高氧诱导新生鼠肺损伤发生中动态变化及意义。方法:将160只新生鼠随机分为实验组和对照组,每组80只,采用高浓度氧诱导的肺损伤模型,于实验后1,3,7,14,21d,观察支气管肺泡灌洗液(BALF)中嗜中性粒细胞及肺组织含水量的变化,并应用酶联免疫吸附法测定肺组织FN及HA的含量。结果:与对照组比较,在实验组肺组织含水量1d增加(P<0.05),3d达高峰(P<0.01),7d仍高于正常(P<0.05);BALF中嗜中性粒细胞的水平7,14,21d均明显升高(P<0.01);而FN含量3d开始升高(P<0.05),7d达高峰(P<0.01),14d仍高于正常(P<0.05);HA含量1d开始升高(P<0.05),3d达高峰(P<0.01),7d仍高于正常(P<0.05)。结论:暴露高氧环境中新生鼠的肺组织FN及HA水平增加可能与早期肺泡炎性反应和肺间质水肿密切相关。     

呼吸道合胞病毒增加小鼠肺组织的高迁移率族蛋白B1的表达和释放

探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染小鼠模型肺组织高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的表达和释放.方法 18只Balb/C小鼠,随机分成3组,分别为磷酸盐缓冲液(PBS)对照组、RSV组、RSV+利巴韦林治疗组;RSV感染小鼠7d后处理:支气管肺泡灌洗液(BALF)作细胞分类计数,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定BALF上清中自细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)及HMGB1含量,左肺行苏木精-伊红(H E)染色,蛋白免疫印迹方法检测右肺组织HMGB1表达.结果 1、RSV感染诱导了小鼠肺组织TH1型反应:BALF中的IFN-γ含量增加,IL-4含量减低.与对照组比较,RSV组BALF中细胞总数、中性粒细胞、巨噬细胞均显著增加(P<0.05),RSV+利巴韦林治疗组上述细胞数显著减低(P<0.05).HE染色:RSV组可见黏膜下及管壁周同中性粒细胞,淋巴细胞等炎症细胞浸润.2、BALF中HMGB1含量变化:与对照组比较,RSV组显著升高(P<0.05)、利巴韦林治疗组显著降低(与RSV组比较,P<0.05).3、肺组织HMGB1的表达情况:与对照组比较,RSV组明显升高(P<0.05)、治疗组无显著降低(与RSV组比较,P>0.05).结论 HMGB1在RSV感染小鼠的肺组织中表达和释放明显增加,提示其可能参与了RSV感染相关肺疾病的发生发展.     

暴露式与非暴露式气管滴注方法建立小鼠急性肺损伤模型及其效果比较

目的：比较暴露式与非暴露式气管滴注方法建立的小鼠急性肺损伤(ALI)模型的各种指标,确立更有效的气管滴注方法。方法：45只健康雄性C57/BL6小鼠随机分为对照组、非暴露组和暴露组,每组15只。以脂多糖（LPS）作为刺激物,非暴露组和暴露组小鼠分别采用非暴露式和暴露式气管滴注方法建立ALI模型,造模后24 h进行支气管肺泡灌洗液（BALF）生化指标检测、BALF细胞分类计数、肺湿/干重（W/D）比值测定以及肺组织病理形态学观察。结果：暴露组小鼠造模的成功率（100%）高于非暴露组（86.7%）。与对照组比较,非暴露组和暴露组小鼠BALF中总蛋白浓度、碱性磷酸酶(ALP)和乳酸脱氢酶(LDH)活性、中性粒细胞数量以及肺W/D比值显著升高（P<0.05）;暴露组小鼠BALF总蛋白浓度、ALP和LDH活性、中性粒细胞数量以及肺W/D比值明显高于非暴露组（P<0.05）。非暴露组小鼠主要表现为肺间质水肿;暴露组小鼠主要表现为渗出性肺水肿。结论：暴露式气管滴注方法对于建立小鼠ALI模型更有效。     

甘草黄酮对肺部炎症小鼠细胞因子表达和氧化反应的调节作用

目的 研究甘草黄酮对抗内毒素脂多糖 (LPS) 诱导小鼠肺部炎症的作用机制。方法 小鼠气管内滴入 LPS 或生理盐水,6 或 24 h 后取支气管肺泡灌洗液 (BALF) 和肺组织,测定 BALF 中的白细胞总数和中性粒细胞以及超氧化物歧化酶 (SOD) 活性,测定肺组织的含水量和病理变化,测定肺组织匀浆和 BALF 中的髓过氧化物酶 (MPO) 活性、肿瘤坏死因子-α (TNF-α) 和白细胞介素-1β (IL-1β) 的 mRNA 表达以及 TNF-α 蛋白水平。结果 白细胞计数、肺含水量测定和肺组织病理检查等指标显示,小鼠气管内滴入 LPS 引起严重的肺部炎症。甘草黄酮给药后能预防 LPS 引起的这些变化。甘草黄酮能明显减少 BALF 中的总白细胞和中性粒细胞的数目,升高 SOD 活性。甘草黄酮能明显降低肺组织中的 MPO 活性,抑制 TNF-α和 IL-1β mRNA 的表达,抑制 TNF-α蛋白水平。结论 甘草黄酮能改善 LPS 引起的小鼠肺部炎症,其抗炎作用可能与抑制细胞因子的表达和调节氧化/抗氧化反应有关。     

结缔组织生长因子单链抗体对博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化的影响

目的:研究结缔组织生长因子(CTGF)单链抗体(ScFv)对博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化模型各阶段的支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞数及纤维化程度的影响.方法:昆明小鼠36只,随机分为对照组、模型组和ScFv组,每组12只;后2组麻醉后气管内滴入博莱霉素制备模型,滴药后第2天开始尾静脉分别注入生理盐水或ScFv(4 mg·kg-1),3次·周-1,对照组给予等量的生理盐水;气管内滴药后第7、14、28天分3批处死小鼠,收集左肺BALF,进行炎症细胞计数和分类;肺组织HE染色后观察肺纤维化程度.结果:(1) 第7天模型组有明显的肺泡炎,ScFv组小鼠肺泡炎症病变轻微;第28天模型组出现肺纤维化,ScFv组纤维化程度明显低于模型组(P<0.05);(2) 第7、14天模型组小鼠BALF中细胞总数及巨噬细胞、淋巴细胞、中性粒细胞均明显高于对照组(P<0.05),ScFv组明显低于模型组(P<0.05).结论:CTGF ScFv可减少肺纤维化模型BALF中的炎症细胞,减缓肺纤维化的发生发展.     

Chemokine-like factor 1, a novel cytokine, contributes to airway damage, remodeling and pulmonary fibrosis

Background Chemokine-like factor 1 (CKLF1) was recently identified as a novel cytokine. The fulllength CKLF1 cDNA contains 530 bp encoding 99 amino acid residues with a CC motif similar to that of other CC family chemokines. Recombinant CKLF1 exhibits chemotactic activity on leucocytes and stimulates proliferation of murine skeletal muscle cells. We questioned whether CKLF1 could be involved in the pathogenesis of inflammation and proliferation in the lung. Therefore we used efficient in vivo gene delivery method to investigate the biological effect of CKLF1 in the murine lung. Methods CKLFl-expressing plasmid, pCDI-CKLF1, was constructed and injected into the skeletal muscles followed by electroporation. Lung tissues were obtained at the end of week 1,2,3 and 4 respectively after injection. The pathological changes in the lungs were observed by light microscope. Results A single intramuscular injection of CKLF1 plasmid DNA into BALB/c mice caused dramatic pathological changes in the lungs of treated mice. These changes included peribronchial leukocyte infiltration, epithelial shedding, collagen deposition, proliferation of bronchial smooth muscle cells and fibrosis of the lung. Conclusions The sustained morphological abnormalities of the bronchial and bronchiolar wall, the acute pneumonitis and interstitial pulmonary fibrosis induced by CKLF1 were similar to phenomena observed in chronic persistent asthma, acute respiratory distress syndrome and severe acute respiratory syndrome. These data suggest that CKLF1 may play an important role in the pathogenesis of these important diseases and the study also implies that gene electro-transfer in vivo could serve as a valuable approach for evaluating the function of a novel gene in animals.     

色氨酸代谢物调控Th17/Treg分化在小鼠哮喘变应原特异性免疫治疗中的作用及机制研究

目的 对色氨酸代谢物调控Th17/Treg分化在小鼠哮喘变应原特异性免疫治疗中的作用及机制进行研究.方法 将30只BALB/c鼠随机法分为5组:对照组、哮喘组、OVA-SIT组(OVA:鸡卵白蛋白;SIT:变应原特异性免疫治疗)、OVA-SIT+ 1-MT组(1-MT:IDO抑制剂,1-甲基色氨酸),OVA-SIT+1-MT+ KYN组(KYN:色氨酸代谢产物,犬尿氨酸).哮喘组:第0、7d予OVA致敏,第6周每天予1％OVA雾化激发,50 d予10％ OVA加强激发;OVA-SIT组:第4周每天予大剂量OVA皮下注射,余同哮喘组;OVA-SIT+ 1-MT组:第4周每天在腹腔内注入1-MT,1h后予大剂量OVA皮下注射h,余同哮喘组;OVA-SIT+ 1-MT+ KYN组:第3周每天加入1-MT,第4周每天加入KYN,末次加入KYN后1h予大剂量OVA行免疫治疗,余同哮喘组.末次激发6h内检测气道高反应性;对支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞计数分析;ELISA检测血清IgE及BALF中IL-5、IL-10、IL-17;流式细胞技术检测脾脏CD4+RORγt+T及CD4+Foxp3+T细胞分化情况.结果 OVA-SIT+1-MT+KYN组较OVA-SIT+1-MT组酸性粒细胞浸润减少,炎症反应明显减轻.前者BALF中Il-5为74.8 ～ 86.8(83.48±6.02) pg/mL,IL-17为33.8～46.5(38.72 ±4.61) pg/mL,CD4+ RORγt+T细胞为2.45 ～2.82(2.60±0.14)％,CD4+ Foxp3+T细胞为7.83 ～9.09(8.36 ±0.53)％;后者BALF中Il-5为240.3～285.1 (259.65±16.27) pg/mL,IL-17为55.2 ～ 65.8(59.97±3.76) pg/mL,CD4+ RORγt+T细胞为4.31 ～5.34(4.94±0.38)％,CD4+Foxp3+T细胞为5.93～6.59(6.33 ±0.28)％,因此OVA-SIT+ 1-MT+ KYN组中Il-5、IL-17细胞因子以及脾脏中CD4+ RORγt+T细胞均明显低于OVA-SIT+ 1-MT组,差异均有统计学意义(P＜0.01),而前组脾脏中CD4+ Foxp3+T细胞水平明显高于后者,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 色氨酸代谢产物有助于特异性免疫治疗减轻气道炎症作用,其机制与通过调控Th17及Treg分化有关.     

血必净对哮喘小鼠气道重塑及黏附分子 ICAM-1、VCAM-1 的影响

目的 探讨血必净注射液对哮喘小鼠气道重塑及肺泡灌洗液中黏附分子ICAM-1、VCAM-1 的 影响。方法 40 只BALB/c 小鼠随机分成健康对照组（C 组）、慢性哮喘组（A 组）、血必净干预1 周组（1 组）、 血必净干预2 周组（2 组）和血必净干预3 周组（3 组）,每组8 只。复制哮喘模型后以血必净注射液分别干预1、 2、3 组小鼠1、2 和3 周。麻醉处死后取肺泡灌洗液（BALF）及肺组织。BALF 以酶联免疫吸附实验（ELISA） 法测定细胞间黏附分子1（ICAM-1）、血管内皮细胞黏附分子1（VCAM-1）的含量,肺组织切片并染色,镜 下观察肺组织病理形态改变及气道形态学改变。结果 ①血必净干预后可降低哮喘小鼠BALF 中ICAM-1、 VCAM-1 的水平,3 组与其他组比较,差异有统计学意义（P <0.05）,降低最显著。②镜下观察见血必净可改 善哮喘小鼠气道及肺组织的病理形态,3 组效果最明显。③ 1 组、2 组、3 组支气管壁厚度、平滑肌厚度逐渐变薄, 但均厚于C 组,差异有统计学意义（P <0.05）。结论 血必净可改善哮喘小鼠气道重塑并可通过下调ICAM- 1、VCAM-1 的水平改善气道炎症。     

白细胞介素1受体拮抗剂对大鼠过敏性哮喘的治疗作用及相关机制研究

目的 研究白细胞介素1受体拮抗剂(IL-1ra)对大鼠过敏性哮喘的治疗作用及相关机制.方法 雌性SD大鼠分为正常对照组、哮喘模型组、哮喘模型低剂量IL-1ra(6 mg/kg)治疗组(低剂量治疗组)和高剂量IL-1ra(30 mg/ks)治疗组(高剂量治疗组).每组10只.采用卵白蛋白腹腔及皮下注射致敏加雾化吸入激发的方法建立大鼠过敏性哮喘模型.激发前尾静脉注射不同剂量的IL-1ra.通过检测各组大鼠肺功能、肺泡灌洗液(BALF)炎性细胞构成、肺组织病理切片、血清总IgE含量等指标评价治疗效果,利用半定量RT-PCR检测信号转导子和转录激活子6(STAT6)mRNA以及核因子κB(NF-κB)mRNA表达情况.结果 哮喘模型组大鼠呼吸速率[(206±11)次/min]、呼气流量[(77±8)μl/s]、BALF嗜酸粒细胞比例(24.8%±1.3%)、血清总IgE含量[(72.5±8.1)ng/ml]、STAT6表达(0.294±0.048)和NF-κB表达(0.686±0.052)均明显高于低剂量治疗组[分别为(183±9)移c/min,(64±5)μl/,s,18.5%±3.1%,(63.4±4.8)ng/ml,0.229±0.038,0.613±0.062,均P＜0.05]和高剂量治疗组[分别为(181±11)次/min,(57±4)μl/s,14.7%±2.1%,(41.4±7.8)ng/ml,0.194±0.076,0.352±0.267,均P＜0.05].高剂量治疗组治疗效应优于低剂量治疗组(P＜0.05).肺组织病理检查与以上结果相近.结论 IL-1ra对大鼠过敏性哮喘具有明显的治疗效果,这种作用可能是通过同时调控STAT6 mRNA和NF-κB mRNA的表达实现的.     

左旋精氨酸对吸烟大鼠肺部炎症干预作用机制的研究

目的：探讨左旋精氨酸（L－Arg)干预吸烟大鼠肺部炎症变化的机制。方法：99只Wistar大鼠随机分为对照组,吸烟组,吸烟＋L－Arg组,实验大鼠计数肺泡灌洗液（BALF）中的中性粒细胞数,并测定其中IL－8的含量,观察肺组织的病理变化。结果：（1）BALF中的中性粒细胞数;吸烟组显高于对照组（P＜0．05）,吸烟＋L－A rg组高于对照组,低于吸烟组（P＜0．05）,BALF中IL－8含量;吸烟组在1周,2周及2个月显高于对照组（P＜0．05）,并与中性粒细胞数呈正相关,同时,吸烟＋L－Arg组IL－8的含量较吸烟组显减少（P＜0．05）,（2）HE染色显示,吸烟组肺组织有明显的炎症细胞浸润,吸烟1周后,支气管上皮细胞纤毛不完整,至2个月伴有支气管上皮细胞脱落,吸烟＋L－Arg组肺组织炎症变化及上皮细胞损伤较累,结论：吸烟引起的肺炎症症和损伤与IL－8含量升高有关;L－Arg干预可能通过抑制IL－8的产生而减轻吸烟引起的上述变化。     

肺炎克雷伯菌致大鼠重症肺炎模型的建立

目的 探索大鼠细菌性重症肺炎的诊断标准及病理生理特点。方法 Sprague Dawleg大鼠随机分为模型组、观察组和对照组．每组分为3小组，前两组每小组8只，对照组每小组4只。其中，模型组和观察组分别接种相同浓度不同剂量的肺炎克雷伯菌菌液，对照组接种与观察组剂量相同的生理盐水。分别与接种后的第2、4、6天分批处死动物．动态观察动物的血液动力学、血气分析、外周血象、肺泡灌洗液中白细胞和中性粒细胞计数及病理改变。结果 接种高剂量菌液的模型组于接种后第5天出现明显血液动力学改变，于第4天出现血气分析的改变。模型组外周血象、肺泡灌洗液的白细胞和中性粒细胞计数及病理改变在各处死时间段较接种低剂量的观察组明显加重。同时，模型组和观察组随着接种时间的延长，血液动力学、血气分析、外周血象、肺泡灌洗液的白细胞和中性粒细胞计数及病理改变逐渐加重。对照组的各项检测指标于接种前后无明显变化。结论 随着接种一定浓度菌液剂量的增加，致使大鼠肺炎明显加重，出现类似人群细菌性重症肺炎的改变。     

脱氢穿心莲内酯琥珀酸半酯通过抑制iNOS减轻LPS诱导的急性肺损伤导致的氧化应激

目的探讨脱氢穿心莲内酯琥珀酸半酯(DAS)通过抑制iNOS减轻LPS诱导的急性肺损伤导致的氧化应激。方法 30只雄性BALB/C小鼠平均分为对照组(Control组)、治疗组(LPS+DAS组)和模型组(LPS组)。使用ELISA对肺泡灌洗液(BALF)中IL-1β、IL-6和TNF-α水平进行测定。测量BALF中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平。对肺组织进行湿/干比(wetto dry ratio,W/D)测定。HE染色用于肺组织病理变化观察和肺组织损伤评分测量。RT-PCR被用于iNOS mRNA的测定。使用Western blot测定iNOS和β-肌动蛋白(β-actin)蛋白的表达。结果 LPS干预后小鼠BALF中IL-1β、IL-6、TNF-α和MDA水平明显上升而SOD水平显著下降,W/D比值和肺组织损伤评分明显升高,iNOS mRNA和蛋白的表达明显增加。LPS+DAS组小鼠BALF中IL-1β、IL-6、TNF-α和MDA水平、W/D比值、肺组织损伤评分、iNOS mRNA和蛋白的表达较LPS组小鼠明显下降;同时BALF中SOD水平较LPS组小鼠明显增加。结论 DAS可能是通过抑制iNOS表达减轻LPS诱导的急性肺损伤导致的氧化应激。     

桃叶珊瑚苷减轻脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤

目的：探讨预防性给予桃叶珊瑚苷(aucubin,AU)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠急性肺损伤 (acute lung injury,ALI)的作用。方法：以成年雄性BABL/c小鼠为研究对象,随机分为对照组、ALI组和AU处理组,每 组16只。气管注射LPS(5 mg/kg)复制ALI小鼠模型,AU处理组于造模前30 min腹腔注射AU(10 mg/kg)。LPS注射6 h后处 死小鼠,采用HE染色检测肺组织形态学改变,并进行损伤评分;采用real-time PCR法检测小鼠肺组织炎症因子肿瘤坏 死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素10(interleukin 10,IL-10)的mRNA表达;收集小鼠支气管肺泡灌洗 液(bronchoalveolar lavage fl uid,BALF)进行细胞计数、检测BALF中的总蛋白量、乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH) 活性以及TNF-α和IL-10的蛋白含量。结果：与ALI组小鼠相比,AU处理组小鼠肺组织病理损伤明显减轻、损伤评分降 低,BALF总细胞、中性粒细胞和巨噬细胞数目显著减少,LDH活性和总蛋白含量亦明显降低(均P<0.01)。同时,AU 可减少ALI小鼠肺内TNF-α mRNA和蛋白的表达,增加IL-10 mRNA和蛋白的表达(均P<0.01)。结论：AU可减轻LPS诱导 的小鼠ALI。     

T-bet基因转染对哮喘小鼠脾脏Th1/Th2平衡的影响

 【目的】 观察气道内T-bet基因转染对哮喘小鼠脾脏淋巴细胞Th1/Th2平衡&;#65380;T-bet及GATA-3 mRNA表达的影响&;#65377; 【方法】 将C57BL/6小鼠32只随机分为4组,每组8只,分别为正常对照组(A组)&;#65380;哮喘模型组(B组)&;#65380;空质粒干预组(C组) 和T-bet质粒干预组(D组)&;#65377;卵白蛋白(OVA) 抗原溶液腹腔注射致敏,滴鼻造模&;#65377;空质粒组和T-bet质粒干预组OVA激发24 h前,分别经鼻滴入50 μg空质粒&;#65380;重组T-bet质粒,对照组用生理盐水代替OVA&;#65377;最后一次滴鼻激发48 h后处死小鼠,流式细胞仪检测各组实验小鼠的脾脏淋巴细胞的Th1/Th2, RT-PCR检测小鼠脾脏淋巴细胞的T-bet及GATA-3mRNA表达&;#65377; 【结果】 哮喘小鼠气道转染pcDNA3-T-bet质粒后:①流式细胞仪检测发现,脾脏Th1百分率较哮喘模型组显著升高[(2.29 ± 1.55)% vs. (1.93 ± 1.14)%,P﹤0.05],Th2百分率显著降低[(0.93 ± 0.64)% vs. (1.63 ± 0.59)%];②RT-PCR检测发现脾脏淋巴细胞转录因子T-bet mRNA表达水平显著增加(0.53 ± 0.027 vs. 0.28 ± 0.035,P﹤0.05), GATA-3 mRNA表达水平显著降低(0.24 ± 0.022 vs. 0.58 ± 0.038,P﹤0.05)&;#65377;而pcDNA3空质粒干预后与哮喘模型组比较无显著差异&;#65377;【结论】 气道内转导pcDNA3-T-bet质粒后,可显著上调哮喘小鼠体内T-betmRNA表达,下调GATA-3 mRNA表达,有效改善哮喘小鼠体内Th1/Th2比例失衡,从而抑制哮喘小鼠的气道炎症,为哮喘的T-bet基因治疗提供依据&;#65377;