ATP-TCA检测乳腺癌细胞对体外化疗药物敏感性的研究

目的 ATP-TCA检测乳腺癌患者肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,评价本方法指导乳腺癌个体化疗的可行性。方法 35例行乳腺癌改良根治术患者纳入本研究,术中取新鲜无菌肿瘤组织,进行原代细胞培养,分别加入9种化疗药物,采用ATP-TCA测定药物对肿瘤细胞的抑制情况。结果 35例标本中32例完成药敏检测,标本的可评价率为91.4%。患者对化疗药物的体外敏感性存在个体差异,乳腺癌细胞对ADM最敏感,体外有效率达到81.2%(26/32),其余依次为DOC68.8%(22/32)、TAX59.4%(19/32)、NVB43.8%(14/32)及5-Fu 34.4%(11/32)、DDP31.2%(10/32)、GEM25%(8/32)。而对于MTX及Vp-16,耐药个体占很大部分,体外有效率分别为0(0/32)和12.5%(4/32)。结论乳腺癌体外化疗药物敏感性检测结果以蒽环类和紫杉类有效率最高,ATP-TCA检测的开展可能为临床化疗用药的个体化实施提供实验依据。     

PTEN、survivin基因表达与胃癌化疗药物敏感性的相关性研究

目的研究原代培养胃癌细胞对化疗药物的敏感性,并进一步探讨其敏感性与胃癌组织中PTEN(phos-phatase and tensin homolog deleted on chromosome ten)及survivin基因表达的关系,为胃癌的临床化疗提供个体化用药的实验资料和依据。方法取手术切除的新鲜胃癌组织标本,用MTT法检测经羟基喜树碱(HCPT)、顺铂(DDP)、阿霉素(ADM)、5-氟尿嘧啶(5-FU)、丝裂霉素(MMC)药物作用后肿瘤细胞活力及代谢活性的变化;同时取胃癌组织制成石蜡切片,用免疫组化检测PTEN、survivin蛋白的表达。结果 PTEN阳性表达与五种化疗药物的敏感性无关(P<0.05)。survivin阳性表达与5-FU及ADM耐药有关(P<0.05);survivin阳性表达与PTEN蛋白阳性表达呈负相关关系(rs=-0.668,P=0.000);结论 1、胃癌组织中survivin阳性表达者与5-FU及ADM耐药有关,提示survivin可作为胃癌原发性耐药标志之一。2、胃癌组织中PTEN的表达与survivin的表达呈负相关关系,提示两者在胃癌的发展中可能具有协同作用,两基因除各自直接作用外还可通过负性调节对方基因的表达而间接发挥功能。     

体外药敏试验ATP-TCA在胃癌中的应用

目的 探讨用生物荧光肿瘤体外药敏检测技术(ATP-TCA)研究胃癌药敏的异质性和个体化疗的可行性.方法 用ATP-TCA技术检测22份胃癌标本对6种抗癌药单药或联合用药的敏感性,其中应用20倍的氟尿嘧啶模拟希罗达.结果 不同标本的药物敏感性存在着明显差异,单药中最有效的药物依次为丝裂霉素、氟尿嘧啶、顺铂,敏感率分别为22.7%、18.2%、13.6%.最有效联合用药方案是20倍氟尿嘧啶+草酸铂,敏感率为81.8%,其次是表阿霉素+顺铂+氟尿嘧啶、氟尿嘧啶+阿霉素+丝裂霉素.结论 胃癌对抗癌药物的敏感程度存在明显异质性.试验结果与临床治疗经验比较一致,ATP-TCA可用于为胃癌患者选择合适的化疗药物.     

survivin基因检测在胃癌辅助诊断中的应用

目的:探讨survivin基因检测在胃癌辅助诊断中的应用价值.方法:收集49例胃癌组织及相应的癌旁非瘤胃组织标本,分别采用RT-PCR和IHC两种方法检测胃癌和癌旁组织中survivin mRNA和survivin蛋白的表达.结果:65.3%(32例)的胃癌组织survivin mRNA和63.3%(31例)的胃癌组织survivin蛋白表达阳性,而癌旁非瘤胃组织内survivin mRNA和survivin蛋白均无阳性表达;运用RT-PCR法较IHC法检测survivin表达的阳性率略高,但其差异无统计学意义(P＞0.05).结论:survivin在胃癌组织中表达上调,免疫组化和RT-PCR检测胃癌组织survivin基因的表达有望成为一种新的胃癌辅助诊断指标.     

进展期胃癌β-tubulinⅢ和survivin的表达及与多西紫杉醇耐药性关系

目的探讨进展期胃癌中β-tubulinⅢ和survivin的表达与多西紫杉醇化疗耐药性关系。方法回顾性分析74例接受多西紫杉醇化疗的晚期胃癌患者的临床病理资料。免疫组织化学法检测肿瘤标本β-tubulinⅢ和survivin蛋白的表达,并对疗效、不良反应进行分析。结果β-tubulinⅢ阳性表达率为37.8%(28/74),survivin阳性表达率为58.1%(43/74),均与性别、年龄及组织类型无关。化疗有效率(CR+PR)为54.10%,β-tubulinⅢ(+)的患者有效率低(32.14%),β-tubulinⅢ(-)患者有效率高(69.57%),差异有显著性(P<0.05)。Survivin(+)组的有效率为32.56%,低于survivin(-)组的67.74%,差异有显著性(P<0.05)。联合检测显示:β-tubulinⅢ(+)且survivin(+)组有效率为25.0%,中位疾病无进展期为4.1个月,1年、2年生存率分别为35.0%、15.0%,β-tubulinⅢ(-)且survivin(-)组有效率为73.91%,中位疾病无进展期为7.8个月,1年、2年生存率分别为56.5%、30.4%,差异均有显著性(P<0.05)。最常见的不良反应为骨髓抑制、消化道反应。结论β-tubulinⅢ和survivin高表达的进展期胃癌患者对多西紫杉醇化疗耐药。     

生存蛋白在胃癌中的表达及与p53、c-erbB2表达的关系

目的　研究人胃癌组织中凋亡抑制蛋白 (IAP)家族的生存蛋白 (survivin)的表达与临床病理及与 p5 3和c erbB2表达的关系。方法　采用免疫组化的方法检测 5 6例胃癌患者肿瘤组织及 2 0例慢性胃炎患者胃粘膜中survivin和 p5 3、c erbB2的表达。结果　 2 0例慢性胃炎患者胃粘膜中survivin的表达阳性 1例 ,阳性率为 5 % ;5 6例胃癌组织中survivin阳性 2 7例 ,阳性率 4 8.2 % ;5 6例胃癌患者c erbB2阳性率 35 .7% (2 0 / 5 6 ) ,p5 3阳性率39.3% (2 2 / 5 6 )。survivin表达与患者年龄、肿瘤浸润深度、淋巴结转移、临床分级等无明显相关性 ,而与肿瘤Lauren组织分型相关。survivin阳性率在肠型胃癌 (2 0 / 32 ,6 2 .5 % )中显著高于弥漫型 (7/ 2 4 ,2 9.2 % ,P <0 .0 5 )。survivin在c erbB2阳性和阴性患者中阳性率分别为 80 % (16 / 2 0 )和 30 .6 % (11/ 36 ) ,两者间有显著差异 (P <0 .0 1) ;survivin在 p5 3阳性和阴性患者中阳性率分别为 6 8.2 % (15 / 2 2 )和 35 .3% (12 / 34) ,两者比较也有显著差异 (P <0 .0 5 )。结论　胃癌患者survivin高表达导致的凋亡抑制在胃癌的发生发展中起了重要作用 ,survivin表达与胃癌中 p5 3和c erbB2异常表达相关。     

肺癌的体外化疗药物敏感性及其与临床病理的关系

目的　探讨肺癌对临床常用化疗药物的体外敏感性及其与临床病理的关系。方法　62例手术切除或活检的肺癌组织标本，采用组织块培养-终点染色-计算机辅助分析方法（TECIA），得出该例肿瘤组织对11种常用抗癌药物的敏感性，药物包括紫杉醇 (TAX)、依托泊苷(VP-16)、长春瑞滨 (NVB)、卡铂(CDP)、顺铂(DDP)、多西他赛 (TAT)、表柔比星（EADM）、吉西他滨(GEM)、丝裂霉素(MMC)、奥沙利铂(L-OHP)和伊立替康（CPT-11）。结果　受检肺癌标本对11种药物敏感率顺序由高到低依次为TAX 45.2%(28/62)、VP-16/NVB/CBP 32.3%(20/62)、DDP/TAT/EADM 25.8%(16/62)、GEM /MMC/ L-OHP 19.4(12/62)、CPT-11 12.9%(8/62)。不同患者的肺癌组织对化疗药物具有不同的敏感谱。40～60岁组比>60岁组对化疗药物的体外敏感率高（68.42% vs 41.67%， P<0.05）。腺癌组比细支气管肺泡癌组的敏感率高（72.73% vs 42.86%, P<0.05）。结论 肺癌组织对抗癌药的体外敏感性存在明显的个体性差异，至少与患者年龄以及肿瘤的病理类型有关。 【关键词】　抗癌药 肺肿瘤 体外药敏实验     

胃癌细胞转铁蛋白受体的表达与化疗药物敏感性的关系

目的　研究胃癌细胞转铁蛋白受体 (CD71)的表达与化疗药物敏感性的关系。方法　利用流式细胞仪 (FCM)检测 5 8例胃癌组织CD71+ 细胞表达率 ,同时用MTT比色法检测化疗药物敏感性。结果　胃癌组织CD71+细胞表达率与 5 -氟脲嘧淀 (5 -FU)及氨甲喋呤 (MTX)相对抑制率存在正相关 (均P <0 0 5 ) ,而与顺铂 (DDP)及丝裂霉素 (MMC)相对抑制率无相关 (均P >0 0 5 ) ;5 -FU、MTX药物敏感与不敏感两组间的胃癌组织CD71+ 细胞表达率有明显差异 (均P <0 0 1) ,而DDP、MMC药物敏感与不敏感两组间胃癌组织CD71+ 细胞表达率无差异 (均P >0 0 5 )。结论　胃癌组织CD71+ 细胞表达增高时 ,细胞处于增殖状态 ,对周期特异性化疗药物的敏感性增高 ;而对周期非特异性化疗药物不敏感。     

OPN及survivin在前列腺癌组织中的表达及临床意义

目的 检测前列腺癌组织中骨桥蛋白(OPN)及survivin的表达,以探讨OPN和survivin在肿瘤的浸润转移中的作用及二者之间的关系.方法 对前列腺癌、良性前列腺增生与正常前列腺组织标本应用半定量RT-PCR和免疫组织化学技术检测OPN及survivin的表达.结果 46例前列腺癌组织中OPN mRNA及survivin mRNA的表达阳性率分别为76.1%(35/46)和67.4%(31/46),OPN及survivin蛋白的表达阳性率分别为69.6%(32/46)和67.4%(31/46),两者表达呈正相关(P<0.05),并且两者在前列腺癌不同分期和分级之间差异有统计学意义(P<0.05).前列腺增生及正常前列腺组织中均未见阳性表达.结论 OPN和survivin与前列腺癌分化程度、分期呈正相关,可能在前列癌的进展中起协同作用     

应用PCNA和survivin预测鼻咽癌放疗敏感性的研究

目的研究PCNA和survivin作为鼻咽癌放疗敏感性预测的候选分子标志。方法应用自制的组织微阵列,结合免疫组化技术,检测PCNA和survivin在鼻咽癌放疗敏感者和不敏感者中的表达情况,同时对其作为预测鼻咽癌放疗敏感性的分子指标进行有效性评价。结果PCNA在鼻咽癌放疗敏感者和放疗不敏感者阳性表达率分别为94.1%(177/188)和63.4%(26/41),两者比较有统计学差异(P<0.01);而survivin的阳性表达率分别为89.4%(169/189)和56.1%(18/41),两者比较有统计学差异(P<0.01)。对PCNA作为预测鼻咽癌放疗敏感性分子指标进行有效性评价,结果其灵敏度为94.1%,特异度为31.7%,Youden指数为0.31,符合率为83.8%,阳性预测值和阴性预测值分别为87.2%和57.7%;而survivin的灵敏度为89.4%,特异度为43.9%,Youden指数为0.33,符合率为81.3%,阳性预测值和阴性预测值分别为88.2%和47.4%。结论PCNA和survivin可作为预测鼻咽癌放疗敏感性正相关的候选分子指标之一。     

多西他赛抑制胃癌MKN45细胞增殖的研究

目的: 探讨多西他赛治疗胃癌细胞的作用机制.方法: 采用不同浓度的多西他赛处理胃癌MKN45细胞后,四唑盐比色试验检测癌细胞生长,分别以琼脂糖凝胶电泳和TUNEL检测癌细胞凋亡,采用荧光实时定量PCR和Western blot检测存活素(survivin)基因mRNA、蛋白表达情况.结果: 多西他赛抑制胃癌MKN45细胞的恶性增殖,且呈浓度依赖性;琼脂糖凝胶电泳和TUNEL显示,多西他赛处理组出现凋亡现象,且呈浓度依赖性.多西他赛处理组存活素基因mRNA、蛋白表达下调,且呈时间和浓度依赖性.结论: 多西他赛体外能抑制胃癌细胞的恶性增殖,与诱导凋亡,下调存活素基因表达有关.     

Survivin和VEGF在胃癌组织中的表达及相关性研究

目的探讨Survivin和VEGF在胃癌组织中的表达及二者间的相关性。方法应用SP免疫组化方法检测Survivin和VEGF在胃癌组织、癌旁正常黏膜组织中的表达,并分析二者间的相关性。结果Survivin和VEGF在胃癌组织中表达的阳性率分别为62．0％（31／50）、70。3％（35／50）,分别高于在癌旁正常黏膜组织中表达的阳性率[12．0％（6／50）、18．0％（9／50）1,差异有显著性（P〈0．05）。Survivin在胃癌组织中的阳性表达与TNM分期有关,而与组织类型以及淋巴结转移无关。VEGF在胃癌组织中的阳性表达与组织类型、淋巴结转移、TNM分期关系密切（P〈0．05）。Survivin和VEGF在胃癌组织中表达呈正相关。结论Survivin、VEGF在胃癌组织中具有较高的阳性表达率,且Survivin与VEGF在胃癌中表达具有相关性．说明Survivin可能通过抑制胃癌中细胞凋亡及调节肿瘤血管的发生参与胃癌的发生、发展过程．     

P-糖蛋白、多药耐药相关蛋白在胃癌的表达与化疗敏感性的相关性研究

目的：探讨胃癌组织中P-糖蛋白（P-glycoprotein，P-gP）、多药耐药相关蛋白（muhidrug resistance-associated protein，MRP）的表达及对胃癌原代细胞培养体外化疗药物敏感性的影响。方法：应用免疫组化法检测P-gP及MRP在48例胃癌及癌旁组织的表达，同时通过胃癌原代细胞培养MTT药敏试验，检测胃癌对7种临床常用化疗药物的敏感性及耐药性，进一步分析药敏试验结果与P-gp、MRP表达的相关性。结果：在48例胃癌中，P-gP及MRP阳性率分别为41．7％、29．2％，共同表达率为25．0％。癌旁组织与癌组织的P-gP、MRP阳性表达率无显著差异。在顺铂（DDP）、丝裂霉素（MMC）、阿霉素（ADM）、鬼臼乙叉甙（VP-16）、5-氟尿嘧啶（5-FU）、羟基喜树碱（HCVF）、甲氨蝶呤（MTX）中，ADM、VP-16、HCVF耐药组P-gP、MRP阳性表达及共表达率较敏感组显著升高。结论：胃癌组织P-gp、MRP表达可导致胃癌原发性耐药。P-gP、MRP介导的MDR是ADM、VP-16、HCPT耐药的重要因素．     

生存素在胃癌中的表达

目的:探讨生存素在胃癌组织中的表达及与临床病理资料的关系。方法:采用荧光实时定量PCR(real time quantitative PCR)方法和免疫组织化学S-P法分别在mRNA转录水平和蛋白水平检测30例胃癌组织及远癌切端正常组织中生存素的表达。结果:本组30例标本,胃癌组织中生存素在mRNA转录水平和蛋白水平的表达均显著高于远癌切端正常组织。而生存素在mRNA转录水平和蛋白水平的表达与胃癌的分化程度、浸润深度、TNM分期及有无淋巴结转移无显著相关性。结论:提示生存素的过度表达是胃癌形成的早期事件,而在恶性胃癌的进展过程中可能不起主要作用,也说明胃癌的形成是个多因素参与的过程。生存素可作为胃癌早期诊断的特异性指标之一。     

Survivin在胃腺癌、异型增生组织中的表达及临床意义

目的:探讨凋亡抑制基因Survivin在胃癌、胃黏膜异型增生组织中的表达及临床意义,为胃癌的诊断及治疗提供一定的实验和理论依据。方法:应用免疫组织化学SP法检测50例胃腺癌、32例异型增生组织和20例正常胃黏膜中Survivin的表达。结果:Survivin在胃癌、轻、中、重度异型增生和正常黏膜中的阳性表达率分别为56%、9%、10%、54.5%、0%,轻、中度异型增生组织中Survivin的阳性表达率明显低于重度异型增生和癌组织中的表达(P<0.01),而在重度异型增生和癌组织间差别无显著性(P>0.05);Survivin的表达与胃癌的组织分化、浆膜侵犯、淋巴结转移、临床分期呈正相关(P<0.05),与年龄及肿瘤大小无相关性(P>0.05)。结论:Survivin在胃癌及异型增生组织中呈异常表达,且该基因蛋白与胃癌的临床病理因素相关,提示Survivin在胃癌的发生发展中起重要作用,检测Survivin的表达,不仅有助于了解胃癌的发病机制,还可作为癌前或交界性病变发展演变的监测指标,此对胃癌的早期诊断及指导治疗均有重要意义。     

多西他赛联合塞替派与多西他赛联合卡培他滨治疗转移性乳腺癌的随机、对照临床研究

目的:比较多西他赛联合塞替派方案和多西他赛联合卡培他滨方案治疗转移性乳腺癌的临床疗效及其安全性。方法:选择北京大学临床肿瘤学院乳腺肿瘤内科2006年8月至2008年9月收治的女性乳腺癌患者共46例,采用多西他赛联合塞替派(A组)或卡培他滨(B组)方案进行随机、对照临床治疗试验,A组第1、8天多西他赛35 mg/m2静脉滴注,第1天塞替派60~65 mg/m2静脉滴注,B组第1、8天多西他赛35 mg/m2静脉滴注,第1~14天卡培他滨1 000 mg/m2,口服,每日2次。21 d为1个周期,至少应用2个周期。结果:多西他赛联合塞替派组22例,多西他赛联合卡培他滨组24例,两组患者基线情况一致。可评价疗效多西他赛联合塞替派组21例,多西他赛联合卡培他滨组22例。两组疗效分别为部分缓解9.52%vs.27.27%(2/21例,6/22例),稳定52.38%vs.31.82%(11/21例,7/22例),进展38.10%vs.40.91%(8/21例,9/22例),疾病控制率分别为61.90%vs.59.09%(13/21例,13/22例),中位无进展生存期分别为7.9个月(95%CI0.77~15.03)vs.8.3个月(95%CI4.01~12.59),1年生存率分别为88.2%vs.81%,P值均>0.05,每两组间差异无统计学意义。无化疗相关死亡病例。多西他赛联合塞替派组和多西他赛联合卡培他滨组最常见的不良反应为骨髓抑制,主要不良反应Ⅲ~Ⅳ度发生率分别为白细胞减少45.45%vs.26.09%,中性粒细胞减少45.45%vs.21.74%,血小板减少9.09%vs.0%,手足综合征0%vs.13.04%,P值均>0.05,每两组间差异无统计学意义。结论:多西他赛联合塞替派方案治疗转移性乳腺癌有一定近期疗效,不良反应可耐受,可以作为经济、有效的解救方案。     

Survivin在胃癌前病变与胃癌中的表达及其与Hp感染的相关性

目的 探讨Survivin在胃癌前病变与胃癌中的表达，并了解其表达与Hp感染的相关性。方法 Survivin检测采用免疫组化染色；Hp检测采用快速尿素酶试验与Giemsa染色。结果 30例胃癌前病变中有10例Survivin呈阳性（33．3％），30例胃癌有22例Survivin呈阳性（73．3％），两者比较差异有显著性（P〈0．05）。Hp在两种组织中差异无显著性（P〉O．5）。38例Hp阳性中有25例Survivin表达阳性（65．8％），13例阴性；22例Hp阴性中只有7例阳性（31．9％），15例呈阴性反应；两者相关比较差异有显著性（P〈0．05）。结论 survivin表达在胃癌前病变与胃癌中均有表达，随着病变加重，表达逐渐增加；Survivin表达与Hp感染相关。     

胃癌耐药细胞株耐药谱的体外实验

观察胃癌细胞与抗肿瘤药作用后对不同药物耐的耐受情况，方法：胃癌细胞系ＳＧＣ７９０１在体外分别与长春新碱（ＶＣＲ），５氟尿嘧啶（５－Ｆｕ），阿霉素（ＡＤＭ）及氨甲喋呤（ＭＴＸ）作用，获得ＳＧＣ７９０１／ＶＣＲ，ＳＧＣ７９０１／ＡＤＭ，ＳＧＣ７９０１／５－Ｆｕ及ＳＧＣ７９０１／ＭＴＸ４个耐药细胞株。体外细胞毒性实验观察它们对ＶＣＲ，ＡＤＭ，５－Ｆｕ，ＭＴＸ，顺铂（ＣＤＤＰ）以及丝裂霉素Ｃ（ＭＭＣ）的敏