IL-1β对大鼠下丘脑室旁核神经元放电活动的影响

目的 研究白细胞介素-1β(IL-1β)对室旁核神经元自发电活动的影响,并探讨其机制.方法 采用细胞外记录单位放电技术,在大鼠下丘脑脑片上观察IL-1β对室旁核神经元自发电活动的影响,以及氯沙坦对IL-1β诱发电活动的影响.结果 在59个PVN神经元放电单位给予IL-1β(1×10-7 mol/L)后,有46个(78%)放电单位放电频率明显增加(P<0.01);在对IL-1β(1×10-7 mol/L)呈兴奋反应的12个神经元放电单位中,用氯沙坦(1×10-6 mol/L)灌流后,除2个放电频率无明显变化外,其余10个单位放电频率显著低于灌流氯沙坦前的放电频率(P<0.05).结论 IL-1β能兴奋下丘脑室旁核神经元自发放电,可能与血管紧张素1型受体(AT1R)有关.     

成骨生长肽1O～14及其结构类似物G48A对大鼠成骨细胞增殖和分化的影响

目的 探讨成骨生长肽10～14（G36G）及其结构类似物G48A对大鼠成骨细胞增殖与分化功能的影响。方法 采用无血清培养条件，G36G和G48A各9组：浓度依次为1&#215;10^-2、1&#215;10^-8、1&#215;10^-9、1&#215;10^-10、1&#215;10^-11、1&#215;10^-12、1&#215;10^-13、1&#215;10^-14和1&#215;10^-15mol／L。甲状旁腺激素（PTH）组：培养结束前6h培养液中的PTH浓度为1&#215;10^-8mol／L。对照组：培养液中含1％牛血清白蛋白。分别观察不同浓度G36G及其类似物G48A对大鼠成骨细胞增殖及碱性磷酸酶（ALP）活性的影响，免疫组织化学法检测不同处理因素对成骨细胞胰岛素样生长因子（IGF）-1蛋白表达水平的变化。结果 透射电子显微镜下，G36G、G48A和PTH组的成骨细胞形状丰满，核膜清晰，粗面内质网丰富，高尔基器发育良好，胞质内分泌颗粒增多，可见细胞核分裂相；对照组的成骨细胞胞体扁平，胞质内部分细胞器丧失，细胞核分裂相比例降低。G36G、G48A组分别在1&#215;10^-11、1&#215;10^-13mol／L时促进成骨细胞增殖的效应最强。PTH组的ALP活性显著高于对照组（P〈0．05）。G36G组在1&#215;10^-13mol／L时促进ALP活性作用最强，显著高于对照组（P〈0．01）。G48A组在1&#215;10^-15mol／L时促进ALP活性作用最强，显著高于对照组（P〈0．01）。4组间IGF-1蛋白表达水平的差异无统计学意义（P值均〉O．05）。结论 G36G及其类似物G48A在体外能够促进大鼠成骨细胞的增殖及分化。     

羟基红花黄色素A的血管作用及其机制研究

目的探讨羟基红花黄色素A（HSYA）对离体大鼠胸主动脉环收缩功能的影响及其机制。方法采用生物信号采集系统记录灌流大鼠胸主动脉环张力变化,观察HSYA（1&#215;10^-6～1&#215;10^-4mol／L）对苯肾上腺素（PE）（1&#215;10^-6～1&#215;10^-4mol／L）、KCl（6&#215;10^-2mol／L）和CaCl2（1&#215;10^-5～3&#215;10^-3mol／L）收缩血管功能的影响,并观察钌红（RR）或肝素（HP）预处理对HSYA作用的影响。结果HSYA抑制KCl、PE对完整内皮和去内皮血管环的收缩作用,且呈浓度依赖性。HSYA可使CaCl2量-效曲线下移,呈浓度依赖性。HSYA＋HP抑制血管收缩的作用比单用HSYA明显（P〈0．05）,与HP相比差异无统计学意义（P〉0．05）;HSYA＋RR抑制血管收缩的作用与单用RR或HSYA比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论HSYA的血管作用可能是通过抑制Ca^2＋内流和减小Ca^2＋浓度实现的。     

东莨菪碱对大鼠离体室旁核神经元单位放电的影响

目的 为对东莨菪碱抗休克的机制作进一步分析，观察其对大鼠离体下丘脑室旁核神经元活动的影响。方法与结果 在２５个大鼠下丘脑薄片上，用玻璃微电极记录了５５个室旁核神经元自发放电。其放电活动可分非周期型和周期型两类。当灌流含东莨菪碱（１０＾－７ｍｏｌ／Ｌ，３ｍｉｎ）的人工脑脊液后，在３２个非周期型放电单位中呈现增频反应的有５个（１５．６％），减频反应的１２个（３７．５％），１５个无反应（４６．９％）；７     

乙酰胆碱对离体大鼠下丘脑腹内侧核神经元电活动的影响

在２３个下丘脑脑片上，用玻璃微电极细胞外记录了５０个下丘脑腹内侧核神经元的自发放电单位，观察了乙酰胆碱对它们的作用。当脑片用含乙酰胆碱（１０－７ｍｏｌ／Ｌ）的人工脑脊液灌流后，有１８个单位放电频率明显增加，这种反应可被乙酰胆碱拮抗剂阿托品所阻断。８个单位放电频率明显减少，８个单位放电频率呈双相反应，１６个单位无明显反应。实验结果表明：约１／３的下丘脑腹内侧核神经元能被乙酰胆碱所激活，且这种作用是由Ｍ受体所介导的。     

ZLJ-601抗炎作用及其机制研究

目的：考察对甲磺酰基苯乙烯环酮类衍生物ZLJ-601对大鼠急性胸膜炎的作用以及对体外培养巨噬细胞炎症细胞因子释放和吞噬功能的影响，对其抗炎作用机制进行初步研究。方法：将角叉菜胶注入大鼠胸膜腔造成急性炎症模型，观察药物对急性炎症渗出、白细胞游出、炎症介质（PGE2、NO）释放及脂质过氧化产物（MDA）生成的影响。用脂多糖刺激原代小鼠腹腔巨噬细胞，观察药物对其释放细胞因子（IL-1）及NO的影响；利用巨噬细胞吞噬中性红实验考察药物对巨噬细胞吞噬功能的影响。结果：ZLJ-601能显著地抑制急性炎症中的渗出、白细胞游走和PGE。NO释放，能减少MDA的生成；ZLJ-601在1&#215;10^-5、1&#215;10^-6mol／L均能抑制脂多糖刺激的巨噬细胞NO的释放，在1&#215;10^-5mol／L能抑制IL-1的释放；在1&#215;10^-5-1&#215;10^-7mol／L均能增强巨噬细胞吞噬功能。结论：ZLJ-601有较强的抗炎活性，作用机制包括抑制炎症细胞因子及其炎症介质的释放和增强巨噬细胞吞噬功能。     

芍药甘草附子汤对类风湿关节炎大鼠下丘脑室旁核nNOS、IL-1β及TNF-α表达的影响

目的探讨芍药甘草附子汤（PGAD）对类风湿关节炎（RA）大鼠下丘脑室旁核神经元型一氧化氮合酶（nNOS）、白介素1β（IL-1β）及肿瘤坏死因子α（TNF-α）表达的影响。方法选取48只健康Wistar大鼠,随机分3 组,每组16 只,分别为对照组、模型组及药物干预组。由Ⅱ型胶原酶诱导关节炎大鼠,采用大鼠关节炎评分法和足爪肿胀评分法评价其模型是否复制成功;30mg/kg PGAD 灌胃;免疫荧光和Western blot 检测下丘脑室旁核nNOS、IL-1β及TNF-α的表达。结果3组大鼠关节炎评分、足爪肿胀评分、下丘脑室旁核nNOS、IL-1β及TNF-α表达比较,模型组和药物干预组较对照组升高（p <0.05）,药物干预组较模型组下降（p <0.05）。结论PGAD对RA 大鼠有治疗、保护作用,其机制可能与抑制下丘脑室旁核nNOS、IL-1β及TNF-α表达有关。     

氯沙坦的外周降压效应和对缰核神经元单位放电的影响

目的:探讨氯沙坦(腹腔注射)对大鼠血压、心率及神经元电活动的影响.方法:用生理记录仪记录大鼠腹腔注射氯沙坦前、后动脉血压及心率的变化.用玻璃微电极记录大鼠腹腔注射氯沙坦前、后外侧缰核及内侧缰核神经元单位放电的情况.结果:低剂量氯沙坦(2 mg*kg-1)对大鼠血压、心率无明显影响,而中、高剂量氯沙坦(5,10 mg*kg-1)可明显地降低大鼠动脉血压.低、中剂量氯沙坦对外侧缰核及内侧缰核神经元单位放电无明显影响,而高剂量氯沙坦使外侧缰核66.6%(12/18)单位放电的自发频率明显增加,使内侧缰核61.9%(13/21)单位放电的自发频率明显减少.结论:高剂量氯沙坦可明显降低大鼠的动脉血压,且使外侧缰核神经元活动增强的同时抑制内侧缰核神经元的活动.     

乙酰胆碱对离体大鼠下丘脑腹内侧核神经元电活动的影响

在２３个下丘脑脑片上，用玻璃微电极细胞外记录了５０个下丘脑腹内侧核神经元的自发放电单位，观察了乙酰胆碱对它们的作用，当脑片用含乙酰胆碱的人工脑脊液灌流后，有１８个单位放电频率明显增加，这种反应可被乙酰胆碱拮抗剂阿托品所阻断。８个单位放电频率明显减少，８个单位放电频率呈双相反应，１６个单位无明显反应，实验结果表明：约１／３的下丘脑腹内侧核神经元能被乙酰胆碱所激活，且这种作用是由Ｍ受体所介导的。     

电刺激大鼠束旁核对脚内核神经元自发放电的影响

目的观察不同频率电刺激束旁核（PF）对正常大鼠、帕金森病（PD）模型鼠脚内核（EP）神经元自发放电的影响，探讨不同频率电刺激PF对EP神经元活动的调节作用。方法采用单管玻璃微电极细胞外记录方法，记录不同频率电刺激PF对正常和PD状态下大鼠EP神经元自发放电频率和模式的影响。结果PD模型鼠的EP神经元自发放电频率较正常大鼠增加20．34％（P〈0．01）。高频刺激（强度0．4mA，波宽0．1ms，时程5s，频率130Hz）PF使93．65％正常大鼠及96.30％PD模型鼠的EP神经元放电活动受到抑制，且抑制效应时程具有频率依赖性。结论高频刺激PF可以减少基底神经节输出核团EP神经元的活动。     

S1P1真核表达载体的构建及在HEK293细胞膜上的表达

目的构建含人Ⅰ型1-磷酸鞘氨醇受体(SIPI)-全长cDNA序列及HA和/或EGFP标签的真核表达载体,并观察其在HEK293细胞上的表达。方法合成2条HA寡核苷酸,克隆入S1P1-Myc-EGFP-N1载体。以HA-S1P1-Myc-EGFP-N1为模板,用PCR的方法扩增HA-S1P1并克隆入pcDNA3.1(+)载体。限制性酶切消化、PCR、测序的方法鉴定,载体经Polyfect转染入HEK293细胞。G418筛选出稳定细胞株。用流式细胞仪和激光共聚焦显微镜检测S1P1在HEK293细胞上的表达。结果限制性酶切消化、PCR、测序结果证实载体构建成功。S1P1表达在HEK293稳定细胞株的表面。结论成功构建带有HA和/或EGFP标签的S1P1真核表达载体,表面表达S1P1的HEK293稳定细胞株可作为我们进一步研究的细胞模型。     

疏风解毒胶囊治疗上呼吸道感染480例临床观察

目的评价疏风解毒胶囊治疗上呼吸道感染的临床疗效和安全性。方法采用分层区组随机、双盲、阳性药平行对照、多中心临床试验设计。上呼吸道感染患者480例,其中试验组360例,对照组120例。试验组口服疏风解毒胶囊,对照组口服双黄连胶囊,疗程均为3d。结果对体温异常者起效时间比较,两组差异有统计学意义（P〈0.05） 解热时间比较,两组差异无统计学意义（P〉0.05） 中医证候单项疗效——咳嗽记分,两组间比较有高度统计学意义（P〈0.01）。结论疏风解毒胶囊治疗上呼吸道感染疗效确切,未发现毒副作用。     

抗流1号对发热患者预防甲型H1N1流感的临床分析

目的：研究抗流1号对197例发热患者甲型H1N1流感的预防。方法：体温T≥37.5℃的患者197例,根据患者有无接触甲型H1N1病例,分为密切接触组25例,一般接触组48例,非接触组124例。进行体格检查、查血常规和胸片,服用抗流1号中药制剂（红景天、大青叶、虎仗和贯众）,根据症状和病情给予中医辨证治疗或抗生素及抗病毒治疗,观察患者一般情况,比较治疗情况。结果：密切接触组中性粒细胞和淋巴细胞降低的患者明显多于非接触组（P〈0.01）;用抗病毒治疗的患者密切接触组与非接触组比较有显著差异（P〈0.01）,中医辨证治疗的患者密切接触组与非接触组比较有差异（P〈0.05）。结论：以扶正和清热解毒为主的抗流1号能有效的预防甲型H1N1的传播可以起到降低发病率、减轻病情,值得推广应用。     

CYP1A1、GSTM1和GSTT1基因多态性与甘肃省武威市食管癌易感性的关系

目的探讨甘肃省武威市食管癌组织中生物代谢酶Ⅰ相酶细胞色素（CYPIA1）和Ⅱ相酶谷胱甘肽转硫酶MI（GSTM1）、谷胱甘肽硫转移酶TI（GSTT1）基因多态性与食管癌的关系。方法采用PCR-RFLP、multiplex—PCR方法检测216例正常对照f血液）和189例食管癌组织中代谢酶基因CYPIA1和GSTM1、GSTT1的多态性。结果食管癌病例组与正常对照组中：CYP1A1基因MspⅠ酶切位点多态性的频率分别为74．1％和67．6％,差异无统计学意义;GSTM1纯合缺失基因型分别占58．7％和41．2％,差异有统计学意义（P〈0．05）,该基因型可能与食管癌易感性的增高有关（OR1．956）;GSTT1纯合缺失基因型分别占51．9％和43．5％,差异无统计学意义,该基因未明显增加对食管癌的易感性（OR1．169）;GSTM1、GSTT1联合缺失基因型在病例组和对照组中的频率分别为38．6％和19．6％,差异有统计学意义（P〈0．05）;同时携带CYPIA1MspⅠ多态突变基因型与GSTM1、GSTT1缺失基因型的个体患食管癌的风险增加（OR2．385,95％CI1．094-3．495）。结论单独的CYP1A1MspI多态突变基因型或者GSTT1缺失基因型与食管癌的易感性不相关;GSTM1纯合缺失基因型及其与GSTT1缺失基因型、CYP1A1MspⅠ多态突变基因型同时存在可增加个体患食管癌的风险,提示GSTM1纯合缺失基因型可能为食管癌发病的易感因素之一,且与其他缺陷基因型存在协同作用。     

甲型H1N1流感病例临床分析

目的 分析甲型H1N1流感的流行和临床特点.方法 回顾性分析首都医科大学附属北京佑安医院2009年5至8月间收治的137例甲型H1N1流感病毒感染者的临床资料.结果 流行早期患者以输入性病例为主,主要来自美国、澳大利亚、加拿大,英国,后期为续发病例为主.发病年龄以儿童和青少年为主;临床主要表现为发热(108例)、咳嗽(93例)、咽部不适(67例).最常见的体征:咽充血(99例)和扁桃体肿大(46例).平均热程(3.3±1.5)d,症状消失时间平均(4.4±1.9)d.平均住院时间(5.5 ±2.1)d.实验室检查:39例(39.5%)外周血白细胞计数降低(3.3±0.4)×109/L,淋巴细胞百分比升高;甲型H1N1流感病毒核酸均阳性;胸部X线表现为肺纹理增强、模糊和肺炎表现.治疗:中药组、西药+中药组、对症或未用药组3组疗效对热程、症状消失时间、甲型H1N1流感病毒核酸转阴时间差异均无统计学意义.结论 甲型H1N1流感可为隐性感染和显性感染,传染性强、临床症状轻,临床过程多为自限性、轻症病例,类似季节性流感.     

透邪通络法对肝纤维化大鼠肝组织MMP-1及TIMP-1的影响

目的：研究“主客交”理论指导下透邪通络法抗肝纤维化的机制及效果。方法：选用SD雄性大鼠,40％CC4。腹腔注射造模,正常组和模型组予生理盐水灌胃,对照组予秋水仙碱灌胃,透邪通络组予加减三甲散灌胃,8周后处死大鼠,显微镜下观察肝组织形态,免疫组化法检测MMP-1、TIMP-1的表达,用图像分析软件和统计软件处理结果。结果：与模型组相比,透邪通络组升高MMP-1表达与降低TIMP-1表达均有显著差异（P〈0．01）,对照组升高MMP-1表达有差异（P〈0．05）、降低TIMP—1表达有显著差异（P〈0．01）;与对照组比较,透邪通络组提高MMP-1表达、降低TIMP-1表达均有差异（P〈0．05）。结论：透邪通络法能明显改善HF大鼠的病理,具有显著的抗肝纤维化,其机制可能与提高MMP-1表达、降低TIMP-1表达而调控ECM的代谢有关。     

当归多糖对小鼠骨髓基质细胞黏附分子表达和黏附功能的影响

目的：研究当归多糖（APS）对小鼠骨髓基质细胞（BMSCs）生长、粘附分子ICAM-1和VCAM-1表达及其对骨髓单个核细胞黏附功能的影响．方法：观察APS对小鼠BMSCs消化时间的影响;MTT法检测APS对小鼠BMSCs增殖及对骨髓单个核细胞黏附功能的影响;流式细胞术检测APS对BM—SCs表面ICAM-1和VCAM-1表达的影响．结果：100,200mg／LAPS使BMSCs达80％贴壁后消化时间明显缩短（P〈0．05）;50,100mg／LAPS组BMSCs增殖能力较对照组增强（P〈0．05）;200,300mg／LAPS能使BMSCs表面ICAM-1表达降低,而50,100,200,300mg／LAPS均可使VCAM-1表达降低（P〈0．05）;体内注射APS后BMSCs表面ICAM-1和VCAM-1表达均降低（P〈0．05）;100,200,300mg／LAPS使小鼠BM．SCs对单个核细胞黏附率减弱（P〈0．05）．结论：APS能促进小鼠BMSCs增殖,降低其表面黏附分子ICAM-1和VCAM-1的表达,进而使小鼠BMSCs达80％贴壁后消化时间明显缩短,对骨髓单个核细胞的黏附率减弱．     

高糖对人肾小球内皮细胞膜表面多糖-蛋白复合物厚度及核心蛋白Syndecan-1和Glypican-1表达的影响

目的 观察高糖刺激对体外培养人肾小球内皮细胞(HRGECs)膜表面多糖-蛋白复合物厚度及对HRGECs表面核心蛋白Syndecan-1和Glypican-1表达的影响.方法 体外培养HRGECs,随机分为3组,分别为;高糖组(30 mmol/L D-葡萄糖)、正常糖浓度组(5 mmol/L D-葡萄糖+25 mmol/L甘露醇)、甘露醇组(30mmol/L甘露醇),分别培养72 h后,用特异性异硫氰酸盐荧光标记的麦胚凝集素(WGA-FITC)进行免疫荧光染色,共聚焦激光显微镜(CLSM)进行三维(3D)重建,观察HRGECs表面多糖-蛋白复合物厚度的变化.利用倒置荧光显微镜观察各组HRGECs膜表面核心蛋白Syndecan-1和Glypican-1免疫荧光染色情况.实时荧光定量PCR法检测各组细胞Syndecan-1和Glypican-1 mRNA的含量,Western blot检测Syndecan-1和Glypican-1蛋白的表达.结果 与正常糖浓度组相比,高糖组HRGECs表面多糖-蛋白复合物厚度减少36.8%(P＜0.05).高糖组HRGECs表面Syndecan-1和Glypican-1免疫荧光染色弱于正常糖浓度组和甘露醇组.高糖组HRGECs Syndecan-1和Glypican-1表达弱于正常糖浓度组和甘露醇组(P＜0.05),且未检测到高糖组Glypican-1蛋白的表达.结论 高糖可导致HRGECs表面多糖-蛋白复合物的缺失(厚度减少)和HRGECs膜表面核心蛋白Sydecan-1和Glypican-1的表达减弱.     

XRCC1和ERCC1在食管鳞状细胞癌中的表达与放疗疗效及预后的相关性研究

目的 探讨X线修复交叉互补基因1(XRCC1)、切除修复交叉互补基因1(ERCC1)在食管鳞状细胞癌(ESCC)患者癌组织中的表达与放射治疗疗效及预后的相关性.方法 采用免疫组织化学SP法检测治疗前59例ESCC组织和23例癌旁组织标本中XRCC1、ERCC1蛋白的表达,结合临床病理特征和随访资料进行分析.结果 XRCC1、ERCC1主要表达于细胞核,两者表达无明显相关性.XRCC1蛋白在ESCC组织和癌旁组织中的阳性表达率分别为52.5%和13.0%(P=0.001).ERCC1蛋白在ESCC组织和癌旁组织中的阳性表达率分别为33.9%和65.2%(P=0.010).XRCC1蛋白在汉族组和少数民族组阳性表达率分别为72.2%和43.9%(P=0.045).ERCC1蛋白在无淋巴结转移组和有淋巴结转移组阳性表达率分别为48.3%和20.0%(P=0.022).XRCC1阴性表达组的近期放疗有效率为92.9%,较阳性表达组的80.6%略有升高(P=0.323).ERCC1阳性表达组和阴性表达组患者的中位生存期分别为13.2个月(95%CI:10.1～16.3)、21.4个月(95%CI:19.1～23.7)(P=0.001).多因素分析显示,ERCC1表达、病变长度与患者的生存期密切相关,是独立的预后因素(P=0.001、0.037).结论 XRCC1、ERCC1蛋白的表达情况可能在食管癌的发生中起一定作用.ERCC1表达与食管癌的淋巴结转移及放疗预后密切相关,其阳性表达是预后不良的标志.     

孕期膳食锌缺乏下向调控胎盘IGF-Ⅱ和GLUT-1 mRNA的表达

目的探讨孕期膳食锌缺乏对胎盘IGF-Ⅱ和GLUT-1 mRNA表达的影响。方法36只SD孕鼠随机分为喂饲AIN93G配方饲料的正常对照组（ZC）、锌缺乏组（ZD）、配对喂养组（PF）以及国产商业饲料对照组（GC）。分别于孕9．5d、孕13．5d和孕17．5d取母鼠血清、肝脏及胎盘，以半定量聚合酶链反应测定胎盘中IGF-Ⅱ和GLUT-1 mRNA以及肝脏MT-1 mRNA的相对表达量，以原子吸收法测定血清锌浓度。结果孕9．5d和孕13．5d时，ZD组血清锌浓度显著低于PF组、ZC组和GC组。孕17．5d时，ZD组血清锌与PF组和ZC组相比无统计学差异。孕9．5d和孕13．5d时，ZD组母鼠肝脏MT-1 mRNA的相对表达量均显著低于PF组、ZC组和GC组。孕9．5d、孕13．5d和孕17．5d时，ZD组胎盘IGF—Ⅱ和GLUT-1 mRNA相对表达量均显著低于ZC组、PF组和GC组。胎盘GLUT-1 mRNA的表达呈现出随着孕龄延长而增高的趋势。孕17．5d时，PF组GLUT-1 mRNA的表达量与ZC组（P〈0．05）和GC组（P〈0．01）相比差异显著。结论孕期膳食锌缺乏显著下向调控胎盘IGF-Ⅱ和GLUT-1 mRNA的表达。