左旋多巴诱发帕金森病大鼠异动症模型的建立和评价

目的探讨左旋多巴诱发帕金森病(PD)大鼠异动症模型的建立,并从行为学角度对模型进行评价.方法6-羟多巴立体定向注射至SD大鼠(n=25)前脑内侧束,并于3周后腹腔注射阿朴吗啡(每千克体质量0.5 mg),10 min后开始计数旋转频率(共30 min),若旋转频率＞7次/分,即PD大鼠模型建立成功.采用左旋多巴甲酯(每千克体质量25 mg)腹腔注射,治疗21d,2次/天,观察大鼠异常不自主运动(AIM)的情况.结果成功模型的PD大鼠共10只,经左旋多巴治疗后,其中8只大鼠出现了AIM,包括刻板动作和对侧旋转行为,且程度各不相同;AIM积分随治疗时间的延长,呈现逐渐升高的趋势.结论左旋多巴治疗诱发的PD大鼠AIM与PD患者左旋多巴诱发异动症在某些方面相似,为深入研究异动症的机制奠定了基础.     

左旋多巴诱发帕金森病大鼠异动症模型的建立和评价

目的探讨左旋多巴诱发帕金森病(PD)大鼠异动症模型的建立,并从行为学角度对模型进行评价。方法6-羟多巴立体定向注射至SD大鼠(n=25)前脑内侧束,并于3周后腹腔注射阿朴吗啡(每千克体质量0.5 mg),10 m in后开始计数旋转频率(共30 m in),若旋转频率>7次/分,即PD大鼠模型建立成功。采用左旋多巴甲酯(每千克体质量25 mg)腹腔注射,治疗21 d,2次/天,观察大鼠异常不自主运动(AIM)的情况。结果成功模型的PD大鼠共10只,经左旋多巴治疗后,其中8只大鼠出现了AIM,包括刻板动作和对侧旋转行为,且程度各不相同;AIM积分随治疗时间的延长,呈现逐渐升高的趋势。结论左旋多巴治疗诱发的PD大鼠AIM与PD患者左旋多巴诱发异动症在某些方面相似,为深入研究异动症的机制奠定了基础。     

滋补肝肾、通络解毒中药对异动症大鼠行为学及纹状体多巴胺D2受体活性的影响

目的：观察滋补肝肾、通络解毒中药对异动症大鼠行为学和多巴胺D2受体活性的影响。方法：采用6-羟基多巴胺（6-hydroxydopamine,6-OHDA）注射于大鼠脑右侧黑质造成偏侧帕金森病（Parkinson＇s disease,PD）模型,进一步对PD大鼠予以左旋多巴/苄丝肼制作异动症（levodopa-induced dyskinesias,LID）模型。实验设立正常对照组、模型组、中药干预组、中止给药对照组和中止给药＋中药干预组,观察中药对LID大鼠异常不自主运动（abnormal involuntary movement,AIM）评分的影响,测定大鼠纹状体多巴胺D2受体的最大结合容量（maximum binding capacity,Bmax）和平衡解离常数（equilibrium dissociation constant,KD）,来评价中药对LID大鼠多巴胺D2受体亲和力的影响。结果：与模型组和中止给药对照组比较,中药干预组可明显减少异动症大鼠的AIM积分（P〈0.01）;纹状体多巴胺D2受体亲和力检查示,中药可使Bmax显著上调（P〈0.05,P〈0.01）,KD值下降（P〈0.01）,多巴胺D2受体亲和力显著提高。结论：滋补肝肾、通络解毒中药可以有效缓解异动症症状,明显改善纹状体多巴胺D2受体活性。     

滋补肝肾、通络解毒中药对异动症大鼠行为学及纹状体多巴胺D2受体活性的影响

目的：观察滋补肝肾、通络解毒中药对异动症大鼠行为学和多巴胺D2受体活性的影响。方法：采用6-羟基多巴胺（6-hydroxydopamine,6-OHDA）注射于大鼠脑右侧黑质造成偏侧帕金森病（Parkinson＇s disease,PD）模型,进一步对PD大鼠予以左旋多巴/苄丝肼制作异动症（levodopa-induced dyskinesias,LID）模型。实验设立正常对照组、模型组、中药干预组、中止给药对照组和中止给药＋中药干预组,观察中药对LID大鼠异常不自主运动（abnormal involuntary movement,AIM）评分的影响,测定大鼠纹状体多巴胺D2受体的最大结合容量（maximum binding capacity,Bmax）和平衡解离常数（equilibrium dissociation constant,KD）,来评价中药对LID大鼠多巴胺D2受体亲和力的影响。结果：与模型组和中止给药对照组比较,中药干预组可明显减少异动症大鼠的AIM积分（P〈0.01）;纹状体多巴胺D2受体亲和力检查示,中药可使Bmax显著上调（P〈0.05,P〈0.01）,KD值下降（P〈0.01）,多巴胺D2受体亲和力显著提高。结论：滋补肝肾、通络解毒中药可以有效缓解异动症症状,明显改善纹状体多巴胺D2受体活性。     

左旋多巴诱发异动症大鼠模型的制作及其行为学研究

目的 探讨左旋多巴(L-dopa)诱发帕金森病(PD)大鼠异动症模型的建立,以及多巴胺受体激动剂与拮抗剂对异动症大鼠不自主运动的影响.方法 6-羟多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)立体定向注射制备偏侧PD大鼠模型并给予L-dopa+苄丝肼治疗21 d,对其异常不自主运动(AIM)进行录像并评分,观察肢体运动功能及旋转行为改变情况.对出现异动症的大鼠给予多巴胺受体激动剂和拮抗剂并观察其行为学改变.结果 PD大鼠在接受L-dopa慢性治疗后出现不自主运动,第3天评分:(31.13±0.32)分,肢体运动功能在接受治疗过程中同时改善.D2受体激动剂可诱发大鼠不自主运动(48.24±1.27)分,D2受体拮抗剂可减轻L-dopa诱发的大鼠不自主运动(41.93±2.27)分,但同时拮抗L-dopa运动功能改善效应.结论 慢性脉冲式L-do-pa治疗PD大鼠可以诱发大鼠AIM,与人类L-dopa诱导的异动症(LID)具有相似的特点,可作为研究异动症的动物模型.     

首乌方对左旋多巴诱发异动症模型大鼠脑内氨基酸类神经递质水平的影响

目的观察中药首乌方(shou wu fang,SWF)对左旋多巴诱发异动症(levodopa-induced dyskinesias,LID)模型大鼠行为学指标及其脑内氨基酸类神经递质的影响,探讨首乌方干预异动症的作用机制。方法采用6-羟多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)脑内立体定位注射造成偏侧帕金森病(parkinson’s disease,PD)大鼠模型,成模动物灌胃投予左旋多巴(levodopa,L-DOPA)或L-DOPA+不同剂量SWF,分为L-DOPA组、L-DOPA+SWF低剂量组、LID+SWF高剂量组,另设假手术组。所有动物连续给药22 d,给药期间对大鼠进行异常不自主运动(abnormal involuntary movement,AIM)评分。第22天采用微透析技术对清醒大鼠纹状体细胞外液进行取样,并采用高效液相-荧光法检测样本中谷氨酸(glutamate,Glu)、γ-氨基丁酸(GABA)水平动态变化。结果大鼠给服LDOPA后,逐渐出现AIM,至给药结束,与假手术组相比,L-DOPA组AIM评分显著升高(P0.01);与L-DOPA组相比,L-DOPA+SWF高剂量组AIM评分显著降低(P0.05)。第22天,与假手术组相比,各给药组大鼠纹状体细胞外液Glu、GABA水平升高,其中L-DOPA组Glu、GABA水平表现出统计学差异(P0.05);与L-DOPA组相比,L-DOPA+SWF高剂量组Glu水平明显降低(P0.05)。给药后60 min,L-DOPA+首乌方各剂量组Glu、GABA水平均显著低于L-DOPA组(P0.05,P0.01)。结论 SWF能够减轻L-DOPA引起的副反应,改善LID大鼠行为学症状,其作用机制或与其改善LID大鼠脑内异常的氨基酸类神经递质水平有关。     

G蛋白偶联受体激酶6参与天芪平颤颗粒预防帕金森病异动症的发生

目的：研究天芪平颤颗粒对左旋多巴诱发的异动症大鼠行为学及G蛋白偶联受体激酶6（Gprotein—coupled receptor kinase6,GRK6）表达的影响。方法：通过6-羟基多巴（6-hydroxydopa,6-OHDA）立体定向注射至大鼠前脑内侧束的方法成功建立帕金森病（Parkinson disease,PD）模型。25只模型大鼠随机分为5组,每组各5只。PD组：腹腔注射0．2％维生素C溶液;左旋多巴组：腹腔注射左旋多巴甲酯和苄丝肼;小、中、大剂量天芪平颤颗粒组：在给予左旋多巴甲酯和苄丝肼基础上分别加用相应剂量的天芪平颤颗粒。另设假手术组（n=5）为对照。连续给药29d后,评估不同剂量天芪平颤颗粒对PD模型大鼠行为学的影响,并用免疫组织化学法和蛋白质印迹法检测大鼠纹状体区GRK6蛋白的表达情况。结果：左旋多巴等长期使用后,PD模型大鼠出现异常不自主运动（abnormal involuntarv movement,AIM）,且AIM评分随治疗时间的延长逐渐增加;损伤侧纹状体区GRK6蛋白表达减少。天芪平颤颗粒能改善PD模型大鼠的AIM评分,增加GRK6蛋白的表达。免疫组织化学法结果显示,高、中剂量天芪平颤颗粒组的GRK6蛋白的表达较左旋多巴组增加（P〈0．05）;蛋白质印迹法结果显示,中剂量天芪平颤颗粒组的GRK6蛋白的表达较左旋多巴组增加（P〈0．01）。结论：天芪平颤颗粒可能通过增加纹状体区GRK6的表达,改善PD模型大鼠的AIM评分,减少PD大鼠异动症的发生。     

依达拉奉对大鼠黑质神经元保护作用研究

目的：探讨依达拉奉对6-羟基多巴胺（6-hydroxydopamine,6-OHDA）诱导的帕金森病大鼠模型的神经保护作用及其作用机制。方法：将实验动物分为神经生化学和组织学两组,各组分为（1）正常对照组6只;（2）生理盐水对照组6只;（3）依达拉奉组24只,依达拉奉又分为0．3mg/kg14d组6只,1mg／kg14d组6只,3mg／kg14d组6只及3mg／kg28d组6只4个亚组。采用6-OHDA立体定位下注入SD大鼠左侧前脑内侧束制备帕金森病模型,观察依达拉奉对帕金森病模型大鼠的行为学改变、酪氨酸羟化酶阳性细胞数和谷胱甘肽的影响。结果：依达拉奉（3mg／kg14d）呈剂量依赖性减少APO诱发的6-OHDA大鼠帕金森病模型旋转次数（火0．叭）,并能改善大鼠自发行为学变化。依达拉奉（3mg／kgl4d．28d）阻止了6-OHDA导致的大鼠酪氨酸羟化酶阳性细胞数量和谷胱甘肽的减少（P〈0．05o结论：依达拉奉对6-OHDA诱导的帕金森病动物模型具有神经保护作用,依达拉奉改善6-OHDA损伤早期大鼠的行为学改变,抑制多巴胺神经元的脱失。     

药物干预对帕金森病大鼠行为的影响

目的通过建立大鼠帕金森病(PD)异动症(LID)模型,观察大鼠在药物干预前后的行为改变。方法选取内侧前脑束(MFB)注射6-OHDA建立单侧毁损PD鼠模型,给予左旋多巴(L-dopa 20 mg.kg-1.d-1)及生理盐水(NS,2 ml)干预满1个月,并设正常对照。观察大鼠的行为并每周1次阿朴吗啡诱发旋转行为,每2两次异常不自主运动(AIM)评分。结果MFB注射点造模成功率为75%,PD大鼠的行为改变有一定的规律性,其旋转速度存在先升后降的现象;AIM评分显示异动症发生率为72%。结论选择MFB注射点造模成功率高;PD大鼠行为变化有规律性;LID的发生与波动用药、损伤程度密切相关。     

自拟醒脑除颤方对6-羟基多巴诱导帕金森病模型大鼠增效减毒作用

目的:研究自拟醒脑除颤方对6-羟基多巴诱导帕金森病模型大鼠的增效减毒作用。方法:将SD大鼠的大脑定位于内侧前脑束(Medial forebrain bundle,MFB)部位再注入6-羟基多巴(24μg)制成PD模型大鼠。再把成功的PD大鼠随机分为5组,每组10只,雌雄各半,即模型组、美多巴组(75 mg/kg)、左旋多巴组(60 mg/kg)、β-细辛醚组(15 mg/kg)、自拟醒脑除颤方组(左旋多巴60 mg/kg+β-细辛醚15 mg/kg)。给药组按上述剂量灌胃给药,1 d 2次,给药30 d。给药结束观察各组5 min内的AIM评分(口面部、轴性和前肢部位),计算肝肾系数和HE染色观察纹状体的组织病理形态。结果:与假手术组比较,模型组的口面部、轴性和前肢的AIM评分都显著增加(P0.01),肝肾系数无显著差异(P0.05),纹状体中神经细胞较少,残留神经元核固缩,部分细胞胞浆明显肿胀,这说明了PD大鼠造模成功和造模剂6-羟基多巴对模型大鼠无肝肾毒性。与模型组比较,各给药组的AIM评分都显著减少(P0.01),给药治疗后纹状体神经细胞数略有增多,结构基本正常,无明显炎性浸润变性及坏死现象,其中左旋多巴组的肾脏系数显著增加(P0.05)。与左旋多巴组比较,美多巴组和自拟醒脑除颤方组的口面部、轴性和前肢的AIM评分及右肾系数都显著减少(P0.05)。结论:自拟醒脑除颤方对6-羟基多巴诱导帕金森病模型大鼠具有一定增效减毒的作用。     

Effect of Levodopa Chronic Administration on Behavioral Changes and Fos Expression in Basal Ganglia in Rat Model of PD

Atpresent ,levodopatherapyisthemosteffec tivemedicationknownforthetreatmentofParkinsondisease (PD )witha pronouncedsymptomaticim provement However ,long termtreatmentoftenre sultsinthedevelopmentofseverecomplicationssuchasdyskinesiasandmotorfluctuations Pulsatilead ministrationoflevodopaandgradualreductioninsur vivingdopaminergicterminalstobufferdopaminere leasehavebeenattributedascausesofmotorfluctua tions Dyskinesiaswerethoughtrelatedtoimbalancebetweendirectoutput pathwayandindirectoutputpa…     

左旋多巴诱发异动症大鼠脑内多巴胺转运体的放射自显影研究

目的研究左旋多巴对帕金森病大鼠脑内多巴胺转运体的影响,探讨左旋多巴诱发异动症的可能机制。方法建立右侧毁损帕金森病大鼠模型,采用左旋多巴（20mg.kg-1.d-1）治疗1个月,停药2d后断头取脑,处死前3h尾静脉注射131I-FP-β-CIT,纹状体部位冠状振动切片,磷屏显影。图像分析系统分析每个切片中左、右纹状体区单位面积的特异性放射性摄取,用比值R左/右来评估多巴胺转运体的数量及功能。结果 （1）假手术组大鼠左右两侧右纹状体区多巴胺转运体对131I-FP-β-CIT特异性放射性摄取差异无统计学意义（左侧为419.407±14.267,右侧为437.604±19.046,P〉0.05）,R左/右=0.96±0.044;图像清晰,对称分布于基底节纹状体区。（2）帕金森病模型鼠损伤侧（右侧脑）放射性摄取明显减少（右侧284.052±105.84,P〈0.01）,R左/右值升高（R左/右=1.495±0.25,P〈0.01）,图像明显稀疏;（3）左旋多巴治疗组部分鼠损伤侧（右侧脑）放射性摄取进一步减少（右侧221.799±75.346,P〈0.01）,R左/右值较帕金森病模型组进一步升高（R左/右=2.06±0.60,P〈0.05）;图像中右侧基底节纹状体区更加稀疏,临床观察评分有异动症发生（53%）。结论经左旋多巴治疗后部分帕金森病鼠脑内多巴胺转运体的数目及功能进一步下调,对多巴胺能神经元有毒性作用,易促发异动症。     

帕金森病异动症的影响因素及其相关机制的研究

通过长期服用左旋多巴恢复脑内多巴胺水平,一直以来都是帕金森病（Parkinson’s disease,PD）的金标 准疗法。补充左旋多巴改善了PD 运动症状,但长期用药对PD 异动症（levodopa-induced dyskinesias,LID）的影 响仍然是一个争议很大且临床亟待解决的问题。目前研究对左旋多巴导致LID 危险因素分析不尽相同,很多因 素都是相互影响的。该文将综述LID 的发生率及影响因素,从而在诊治过程中尽量避免并干预危险因素,及早 预防和减少LID 的发生。     

阴虚动风证帕金森病异动症模型大鼠纹状体内大麻素CB1受体的变化及复方地黄方的干预作用

目的 探讨阴虚动风证帕金森病（PD）异动症（LID）大鼠纹状体内大麻素CB1受体的表达及复方地黄方的干预作用。方法 采用6-羟基多巴胺（6-OHDA）偏侧损毁黑质制备帕金森病大鼠模型,进一步腹腔注射左旋多巴 苄丝肼（50mg/kg左旋多巴和12.5mg/kg苄丝肼）制备阴虚动风证帕金森病LID大鼠模型,并随机分为LID组、复方地黄方组,另取正常对照组、假手术组大鼠为对照,每组6只。分别在4周、6周进行神经行为学检测后,处死大鼠并取纹状体,应用Western blot法测定各组大鼠纹状体内大麻素CB1受体的表达情况。结果 阴虚动风证LID模型大鼠随造模时间延长,AIM评分呈增加趋势（P?0.05）,旋转启动时间呈缩短趋势（P?0.05）,旋转持续时间呈增加趋势（P?0.01),剂峰旋转圈数呈减少趋势（P?0.05）,复方地黄方可改善上述变化。阴虚动风证LID模型大鼠大麻素CB1受体表达增加,且随造模时间延长呈现减少趋势（P?0.01）,而复方地黄方干预后大麻素CB1受体的表达呈现逐渐增加的趋势（P?0.01）。结论 阴虚动风证LID模型大鼠大麻素CB1受体的含量明显升高,其变化能够较好的反映阴虚动风证的严重程度,复方地黄方干预LID模型大鼠可能是通过激活纹状体内大麻素CB1受体,抑制兴奋性氨基酸（主要是谷氨酸）的释放和诱导细胞发生级联反应来减弱神经元的兴奋性,从而起到减轻L-dopa的兴奋毒性的作用。     

天芪平颤颗粒对帕金森病大鼠异动症行为学及信号转导蛋白表达的影响

目的：研究天芪平颤颗粒对帕金森病（PD）大鼠异动症行为学及信号转导蛋白DARPP-32、ERK磷酸化表达的影响。方法：通过6-羟基多巴（6-OHDA）立体定向至大鼠前脑内侧束建立帕金森病模型,共25只,随机分为5组,每组5只。PD组：腹腔注射0．2％维生素C液;西药组：腹腔注射左旋多巴甲酯29d;中药小剂量组、中剂量组、大剂量组：给予左旋多巴甲酯基础上分别加用不同剂量天芪平颤颗粒;另设假手术组为对照组（n=5）。评估不同剂量天芪平颤颗粒对PD模型大鼠运动并发症的行为学影响,并用免疫组织化学方法检测大鼠纹状体区磷酸化的DARPP-32和ERK表达情况。结果：天芪平颤颗粒能减少左旋多巴制剂产生的剂峰旋转次数。免疫组化显示,与PD组大鼠比较,西药组磷酸化DARPP-32（Thr75）明显降低,中剂量组和大剂量组均未出现明显的降低（P〉0．05）。与PD组磷酸化ERK1／2比较,左旋多巴长期治疗后,磷酸化ERKl／2表达升高,中剂量组和大剂量组表达量均未出现明显上升（P〉0．05）。结论：天芪平颤颗粒可以减少PD大鼠剂峰异动行为,可能通过DARPP-32（Thr75）及ERKl／2磷酸化,达到调节胞内异常信号转导的功能。     

侧脑室注射改构体酸性成纤维细胞生长因子对帕金森病大鼠旋转行为的影响

目的 观察改构体酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)对帕金森病大鼠模型行为学的影响.方法 采用SD雄性大鼠72只,随机分为假手术组,PD模型组,PD模型加生理盐水组(PD+NS组),PD模型加改构体aFGF组(PD+aFGF组),每组18只.通过脑内立体定向术,将6-OHDA注入后3组大鼠左侧黑质致密部(substantia nigra pars compacta,SNC)和中脑被盖腹侧区(ventral tegmeatal area,VTA)以建立帕金森病模型,PD+Ns组于术后第1天起每隔2d于右侧侧脑室注射10μl Ns,PD+aFGF组于术后第1天起每隔2d于右侧侧脑室注射10μl改构体aFGF(0.2μg/μl),假手术组只进行假手术处理,分别于术后4d,1,2,3,4周用阿扑吗啡(apomorphine,APO)给大鼠腹腔注射(0.5mg/kg),观察并记录大鼠行为学变化情况.结果 假手术组均未出现旋转行为,PD模型组和PD+Ns组大鼠旋转启动时间逐渐缩短,持续时间逐渐延长,旋转速度逐渐加快,至术后2周旋转行为趋于稳定;在术后2周,PD+aFGF组旋转启动时间[(5.50±1.18)min],较PD模型组[(3.60±1.17)min,P<0.05]和PD+Ns组[(3.10±1.02)min,P<0.05]明显延长;PD+aFGF组旋转持续时间[(25.90±8.80)min],较PD模型组[(55.40±10.14)min,P<0.05]和PD+Ns组[(53.90±12.27)min,P<0.05]明显缩短;PD+aFGF组旋转平均速度[(6.52±1.34)r/min],较PD模型组[(12.90±2.21)r/min,P<0.05]和PD+Ns组[(11.80±3.65)r/min,P<0.05]明显减慢.术后3周、4周,大鼠旋转行为各项指标统计学分析结果 与术后2周相同.结论 PD模型大鼠具有明显得行为学改变,改构体aFGF能明显改善大鼠的旋转行为.     

低频重复经颅磁刺激对帕金森病大鼠行为学的影响

目的探讨0.5Hz重复经颅磁刺激(rTMS)对帕金森病大鼠行为学的影响。方法取健康SD大鼠45只,用6-OHDA毁损右侧黑质致密部(SNc)与中脑腹侧背盖(VTA)制备偏侧帕金森病模型。用阿扑吗啡(APO)腹腔注射筛选,将成功的20只帕金森病鼠随机分为治疗组和对照组,每组10只。治疗组给予rTMS治疗,频率为0.5Hz,刺激强度为阈上30%,连续20个刺激,每天1次,连续刺激2周。对照组予以假刺激。在治疗前、治疗结束后第1天、14天、28天分别测定APO诱导的大鼠旋转圈数、启动潜伏期的变化。结果(1)大鼠旋转圈数(r/min):治疗组与对照组在治疗结束后第14天为(9.7±3.0vs14.6±2.6)、28天为(9.2±2.7vs14.2±2.6),治疗组旋转圈数减少,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗组在治疗结束后第14天、28天与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05);对照组各时间点比较差异无统计学意义(P>0.05)。(2)启动潜伏期(s):治疗组与对照组rTMS治疗结束后第1天(25±9vs39±16)、第14天(18±7vs42±16)、第28天(17±7vs42±16)比较,治疗组启动潜伏期明显缩短,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组各时间点与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05);对照组各时间点比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论0.5Hz、阈上30%刺激强度的rTMS可改善PD大鼠的行为学异常。