穴位埋药线对难治性癫痫大鼠大脑海马及皮质多药耐药基因MDR1b的影响

目的探讨穴位埋药线对难治性癫痫大鼠大脑海马及皮质中多药耐药基因MDR1b的影响。方法选用雄性SD大鼠120只。随机分为空白对照组、模型组、拉莫三嗪组、普通线组、药线组。普通线组与药线组均取大椎、肝俞（双）、血海（双）、丰隆（双）穴,先埋一侧穴位,间隔15d后埋对侧穴位;拉莫三嗪组按照人用拉莫三嗪剂量为5mg／（kg·d）换算灌胃大鼠。每日2次;模型组给予灌胃同等体积（2mL／d）的蒸馏水,均干预30d。采用荧光实时定量聚合敏链反应（RT—PCR）的方法检测多药耐药基因MDR1b在海马与颞叶皮层的表达。结果与模型组相比,药线、普通线、拉莫三嗪干预后能降低致痫大鼠海马区多药耐药基因MDR1b的表达水平（P〈0．05）;与空白对照组比较,模型组中致痫鼠海马区多药耐药基因MDR1b的表达水平明显升高（P〈0．01）;与普通线组比较,药线组明显降低致痫大鼠海马区多药耐药基因MDR1b的表达水平（P〈0．05）;模型组的海马区与颞叶皮质区多药耐药基因表达差异有统计学意义（P〈0．05）。结论埋药线逆转与降低致痫大鼠海马区及皮质区多药耐药基因的表达水平．可能是其抗癫痫生物学作用机制之一。     

穴位埋药线对难治性癫痫大鼠癫痫样波的发放及大脑海马和颞叶皮质多药耐药相关蛋白MRP_1、P-gp表达的影响

目的探讨穴位埋药线对难治性癫痫大鼠癫痫样波的发放及大脑海马和皮质中多药耐药相关蛋白MRP1、P-gp表达的影响。方法 (1)造模:大鼠海马区注射红藻氨酸(KA),经过点燃和再次亚惊厥剂量点燃造模,且脑电图检测有癫痫样波发放者筛选为造模成功耐药难治性癫痫模型鼠。(2)分组与处理:普通线组(PTX组)与药线组(YX组),先埋一侧穴位,间隔15 d后埋对侧穴位。拉莫三嗪组(LTG组)按照人用拉莫三嗪剂量换算灌胃大鼠,每日2次;空白对照组(Normal组)和模型组(Model组)给予灌胃同等体积的蒸馏水,均灌胃30 d。(3)采用VEEG-1518K型数字化视频脑电监测分析系统检测脑波基本节律的波幅与频率变化。(4)标本处理与检测:采用免疫组织化学技术,检测多药耐药相关蛋白MRP1、P-gp在海马与颞叶皮层不同部位的表达。结果各组治疗前比较差异无统计学意义(P0.05);各组治疗后,YX组、LTG组分别与Model组、PTX组比较差异有统计学意义(P0.05),YX组与LTG组比较差异无统计学意义(P0.05);与Model组相比,LTG组和YX组干预后能降低致痫鼠EEG痫波放电持续时间与发放频率以及海马区和颞叶皮质区多药耐药蛋白MRP1、P-gp的表达水平(P0.05或P0.01);YX组与PTG组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论(1)埋药线使KA致痫鼠EEG痫波放电持续时间缩短,发放频率减少。(2)KA点燃难治性癫痫模型大鼠大脑海马区存在多药耐药蛋白MRP1、P-gp的表达较皮质区明显升高。(3)埋药线逆转与降低致痫鼠海马区多药耐药蛋白MRP1、P-gp的表达水平,可能是其抗癫痫生物学作用机制之一。     

穴位埋药线和穴位注射对脑缺血大鼠PAI-1影响的比较观察

目的观察穴位埋药线和穴位注射对脑缺血再灌注后大鼠纤溶酶系统PAI-1含量的影响,比较两种方法的优劣。方法将SD大鼠随机分为模型组、穴位注射组和穴位埋药线组;采用改良线栓法制备局灶型脑缺血(MCAO)再灌模型,以胶原川芎嗪制备的缓释剂(药线)在百会、大椎穴位埋药线。用免疫组化法观察各组大鼠缺血皮质区中PAI-1含量的变化。结果大鼠缺血侧皮质区PAI-1表达降低,两治疗组均能上调PAI-1的表达,穴位注射与模型组比较有显著性差异(P0.01);其中穴位埋药线1d对PAI-1的调节作用并不明显,与模型组比较无统计学意义(P0.05),其优势作用表现在3d和5d,与模型组比较有显著性差异(P0.01),与穴位注射组比较有显著性差异(P0.05)。结论穴位埋药线可以上调大鼠缺血皮质区中PAI-1的表达,减轻脑微血管基底膜和内皮细胞的损害进而保护脑微血管结构的完整性,从而起到脑保护作用,其作用优于穴位注射组。     

柴贝止痫汤对难治性癫痫大鼠多药耐药蛋白P-gp表达影响的研究

目的通过比较不同药物干预对多药耐药蛋白P-gp的影响,观察难治性癫痫大鼠脑内P-gp的表达和分布,探讨难治性癫痫多药耐药可能的分子病理机制,及中药复方柴贝止痫汤对其表达的影响。方法 80只Wistar大鼠腹腔注射氯化锂-盐酸匹罗卡品建立难治性癫痫模型,12只同周龄Wistar大鼠作为正常组。筛选出59只造模成功大鼠,随机分为模型组14只,柴贝止痫汤组(15只;8. 1 g/kg灌胃),卡马西平组(15只; 36 mg/kg灌胃)和联合用药组(15只;柴贝止痫汤和卡马西平联合灌胃)。干预2周后观察各致痫组大鼠癫痫发作的平均持续时间、癫痫发作级别,以判定、分析药物的疗效。采用免疫组织化学和蛋白质印迹法,分析、比较P-gp在各组大鼠海马和皮质等部位的表达和分布。结果与正常组大鼠比较,在难治性癫痫大鼠海马和皮质部位,各致痫组P-gp表达含量均有明显增高,具有统计学意义(P 0. 05)。结论柴贝止痫汤联合卡马西平的给药方式对难治性癫痫大鼠的疗效优于单独应用卡马西平及柴贝止痫汤。中药复方柴贝止痫汤具有一定的抑制P-gp药物转运体功能。     

愈痫灵方对难治性癫痫大鼠多药耐药相关蛋白MRP1、P-gp、LAP、MCP-1表达的作用

目的：探讨“愈痫灵”方对红藻氨酸（KA）致痫难治性癫痫模型大鼠海马及颞叶皮质区多药耐药相关蛋白1（MRP1）、P糖蛋白（P-gp）、层黏连蛋白（LAP）以及单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)表达的影响。方法（1）造模：在脑立体定位仪引导下,海马区微量进样器注入KA1.0μL（即1.0μg）点燃发作,选取发作行为级别在Racines标准Ⅳ级以上者,以丙戊酸钠及卡马西平灌胃干预14 d后,再次以亚惊厥剂量KA0.5μL复燃,筛选再次发作级别在Ⅳ级以上或持续状态大鼠,且脑电图检测有癫痫样波放电者为造模成功的耐药难治性癫痫模型鼠。（2）分组与处理：造模成功鼠随机分为愈痫灵方干预组、拉莫三嗪对照组、模型组,另设假手术对照组、空白对照组共5组,分别给予“愈痫灵”汤剂、拉莫三嗪及同等体积的蒸馏水(2 mL/d)灌胃30 d。（3）标本处置与检测：采用免疫组织化学技术,检测多药耐药相关蛋白MRP1、P-gp、LAP、MCP-1在海马与颞叶皮层的表达。结果与假手术对照组、空白对照组间比较,造模成功组海马区及颞叶皮质区MRP1、P-gp、LAP、MCP-1的表达均明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,愈痫灵、拉莫三嗪干预处理后能显著降低模型鼠海马区MRP1、P-gp表达水平（P<0.05）,海马区及颞叶皮质区LAP、MCP-1的表达差异均无统计学意义(P>0.05);愈痫灵方组与拉莫三嗪组比较,差异均无统计学意义(P>0.05);各组间颞叶皮质区LAP、MCP-1表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论耐药性癫痫大鼠模型海马及颞叶皮质区多药耐药相关蛋白MRP1、P-gp、LAP、MCP-1表达均明显升高,逆转与降低海马区MRP1、P-gp的表达可能是“愈痫灵”方抗耐药性癫痫作用机制之一。     

穴位埋药线对脑缺血再灌注大鼠皮质基质金属蛋白酶-9的影响

目的 观察穴位埋药线对脑缺血再灌注大鼠脑皮质区基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达和含量的影响,探讨穴位埋药线对局灶性脑缺血再灌注损伤的保护机制.方法 将42只SD大鼠随机分为正常组、模型组(1d组、3d组、5d组)、穴位埋药线组(1d组、3d组、5d组).采用改良线栓法制备局灶性脑缺血(MCAO)再灌模型,在"大椎"、"百会"穴埋入胶原川芎嗪缓释剂药线.蛋白免疫印迹法检测缺血侧脑皮质区组织MMP-9蛋白的表达与含量.结果 正常组可见少量MMP-9表达,模型组MMP-9表达明显增高,与正常组有显著性差异(P＜0.01);穴位埋药线组MMP-9表达与模型组各相同时相组比较,有显著差异(P＜0.01),并随时间的推移趋于正常.结论 穴位埋药线疗法可明显下调脑缺血再灌注大鼠缺血侧皮质组织MMP-9的表达,减少脑微血管基底膜的降解,保护微血管的完整性,减轻脑缺血再灌注损伤,起到脑保护作用.     

难治性癫痫患者血清和脑脊液多药耐药基因-1表达的研究

目的 探讨难治性癫痫的发病机制,为寻找难治性癫痫新的治疗方法提供理论依据.方法 采用ELISA方法及荧光定量聚合酶链反应技术检测临床确诊为难治性癫痫的15例患者血清、脑脊液p-糖蛋白( P-glycoprotein,P-gp)及多药耐药基因-1(multidrug resistancel,MDR1)-mRNA,并与用药物控制良好的15例癫痫患者和15例正常人比较.结果 难治性癫痫组血清、脑脊液P-gp和MDR1-mRNA明显高于癫痫治疗有效组和正常对照组.结论 MDR1过度表达可能是癫痫耐药的重要因素,并可作为癫痫耐药的一个客观指标.     

中药柴贝止痫汤对难治性癫痫大鼠多药耐药基因MDR1表达的研究

[目的]通过比较不同药物干预对多药耐药基因1(MDR1)的影响,观察难治性癫痫大鼠脑内MDR1mRNA的表达和分布,探讨难治性癫痫多药耐药可能的分子病理机制,及中药复方柴贝止痫汤对其表达的影响。[方法]以不同药物干预下,观察癫痫发作的平均持续时间、癫痫发作级别,以判定、分析药物的疗效。采用荧光实时定量聚合敏链反应(PCR)的方法,分析、比较多药耐药基因MDR1在各组大鼠海马和皮质部位的表达和分布。[结论]与正常组大鼠比较,各致痫组MDR1mRNA表达含量均有明显增高,具有统计学意义(P<0.05)。[结论]癫痫的反复发作可以诱导慢性难治性癫痫大鼠海马和皮质MDR1mRNA的表达,中药复方柴贝止痫汤具有一定抑制MDR1药物转运体功能。     

山茱萸多糖对难治性癫痫幼鼠行为学和海马组织中多药耐药基因1b及主穹隆蛋白表达的影响

目的:探讨山茱萸多糖对难治性癫痫(RE)幼鼠行为学和海马组织中多药耐药基因1b(MDR1b)及主穹隆蛋白(MVP)的影响,并阐明其作用机制.方法:40只幼鼠建立RE模型,随机分为模型组(n=8)、低剂量山茱萸多糖组(n=9)、高剂量山茱萸多糖组(n=10)和阳性对照组(n=10),同时另设假手术组(n=10).低和高剂...     

穴位埋药对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马Fas蛋白表达的影响

目的探讨川芎嗪缓释剂穴位埋药（后简称埋药法）对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马区Fas蛋白表达的影响。方法用改良线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞（MCAO）模型,免疫组化法检测局灶性脑缺血再灌注大鼠海马区Fas的表达。结果穴位埋药组各时相组Fas蛋白表达均显著低于模型组,与电针组和腹腔注射组比较差异也较显著。结论川芎嗪缓释剂穴位埋药法能下调促凋亡基因Fas的表达,发挥神经保护作用,可能是穴位埋药抗局灶性脑缺血再灌注损伤后的神经细胞凋亡的机制之一。     

穴位埋线与穴位注射对2型糖尿病大鼠pander及Caspase-3表达影响的比较研究

目的:探讨和比较穴位注射、穴位埋线保护胰岛β细胞功能的机制。方法:将50只雄性SD大鼠随机分成空白对照组、模型组、穴位注射组、穴位埋线组。空白对照组用普通饲料喂养,其余3组用高糖高脂饲料喂养4周,并按体质量35 mg·kg-1右侧腹腔注射链脲佐菌素复制2型糖尿病大鼠动物模型。空白组注射等量柠檬酸缓冲液,穴位埋线组予双侧足三里、三阴交、胃脘下俞埋线,穴位注射组在相同穴位注射参麦注射液,均隔日1次,共4周。观察各组大鼠的血糖水平、胰岛形态学变化及pander、Caspase-3蛋白的表达。结果:穴位埋线组、穴位注射组空腹血糖显著低于模型组(P0.05),穴位注射组下降更显著。穴位埋线和穴位注射组大鼠胰腺组织内的胰岛细胞损伤少于模型组(P0.05),穴位注射组胰岛细胞损伤更少。与空白组比较,模型组胰腺pander、Caspase-3蛋白表达上升(P0.05);穴位埋线组与穴位注射组胰腺pander蛋白表达较模型组下降(P0.05),穴位埋线组下降更显著。结论:穴位注射、穴位埋线或许通过降低血糖,抑制高血糖对胰岛β细胞pander的激活和Caspase-3表达,以减少胰岛β细胞凋亡,缓解2型糖尿病的进程,且穴位注射改善胰岛β细胞功能更显著。     

丹红注射液对颞叶癫痫大鼠海马可塑性的影响

目的研究丹红注射液对氯化锂-匹罗卡品点燃慢性颞叶癫痫（temporal lobe epilepsy,TLE）大鼠海马神经元及GFAP表达的干预作用。方法建立氯化锂-匹罗卡品点燃颞叶癫痫大鼠模型,将50只造模成功的颞叶癫痫大鼠随机分为颞叶癫痫组（生理盐水10ml/kg腹腔注射）及丹红治疗组（丹红注射液10ml/kg腹腔注射）,另选10只大鼠作为正常对照组;每组大鼠随机分为5个不同时间点：24h、3d、7d、15d及30d。采用尼氏染色及免疫组化染色,检测每组大鼠不同时间点海马CA1区神经元存活数目及GFAP表达。结果与正常对照组相比,颞叶癫痫组大鼠海马CA1区存活神经元数目明显减少,海马GFAP表达显著增多（P〈0.05）;与颞叶癫痫组相比,丹红治疗组大鼠海马CA1区存活神经元数目明显增多,海马GFAP表达显著减少（P〈0.05）。结论丹红注射液可以减轻颞叶癫痫大鼠海马神经元脱失及减少GFAP表达,有助于减轻大鼠发作程度及阻断慢性颞叶癫痫的形成和发展。     

穴位埋线对心肌梗死大鼠巨噬细胞MerTK胞葬作用的影响

目的 观察“内关”和“心俞”穴位埋线对心肌梗死大鼠巨噬细胞Mer受体酪氨酸激酶(MerTK)相关表达影响，探讨“内关”和“心俞”穴位埋线对心肌梗死大鼠心肌肥大其可能的机制作用。方法 雄性大鼠(SD)采用左冠状动脉前降结扎法构建心肌梗死模型，按照随机数字法分为伪手术组、模型组、“内关”和“心俞”穴位埋线组、培哚普利组，每组5只，其中伪手术组只开胸撕开心包膜。术后第2 天开始干预治疗，以第7、28 天为观测点。苏木精-伊红(HE)染色观察心肌组织病理形态，酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清IL-6、TNF-α、IL-1β浓度水平，蛋白质印迹(Western blotting)检测心肌组织MerTK、p-Mertk蛋白表达。结果 (1)与伪手术组大鼠相比较，模型建构后7、28 d，模型组大鼠HE染色心肌细胞形态异常、错乱排列，游离细胞核增多，见明显的细胞间质且心肌细胞横截面积增大(P＜0.05)，血清IL-6、TNF-α、IL-1β浓度呈明显上升趋势，MerTK蛋白表达降低(P＜0.05)，p-MerTK蛋白表达升高(P＜0.05)。(2)与模型组大鼠相比较，治疗后7、28 d，两治疗组大鼠HE染色心肌细胞形态和大小相对规则，排列相较平行有序，心肌细胞核游离及肥大的情况均有不同程度改善且心肌细胞横截面积均不同程度降低(P＜0.05)，IL-6、TNF-α、IL-1β浓度均下降(P＜0.05)，MerTK蛋白表达均不同程度升高(P＜0.05)，p-MerTK蛋白表达不同程度降低。结论 “内关”和“心俞”埋线能够改善心肌梗死大鼠心肌肥大的程度，其机制可能与维持心肌组织中巨噬细胞表面受体MerTK的表达、降低血清炎症细胞因子含量相关。     

穴位埋线治疗变应性鼻炎的临床疗效及作用机制研究进展

近年来对于穴位埋线治疗变应性鼻炎的研究多以临床疗效评价为主,本文通过文献检索,总结、回顾及探讨穴位埋线治疗变应性鼻炎的临床疗效观察及实验研究进展.研究表明,穴位埋线治疗变应性鼻炎疗效显著,其作用机制主要为降低血清免疫球蛋白(IgE)含量、调节Th1与Th2平衡、减少炎性细胞浸润等.提示穴位埋线治疗变应性鼻炎的临床应用已...     

谷氨酸干预体外大鼠星形胶质细胞MRP1表达

目的在体外无神经元作用下,观察谷氨酸对星形胶质细胞表达多药耐药相关蛋白1（MRP1）的影响,探讨谷氨酸与多药耐药现象的关系。方法取新生SD大鼠脑,分离纯化星形胶质细胞,适当传代后加用含谷氨酸500μmol/L、1000μmol/L的培养基干预3天、7天、10天,通过免疫细胞化学检测细胞MRP1的表达。结果与对照组比较,谷氨酸干预后MRP1表达水平升高,3天表达水平稍升高,7天表达水平升高明显并可持续至10天余,低浓度组与高浓度组作用无明显差异。结论 MRP1在星形胶质细胞中仅少量表达;谷氨酸环境培养可促进体外大鼠星形胶质细胞MRP1的表达。     

穴位埋线辅助治疗对超重或肥胖伴2型糖尿病患者FBG、PBG、HbAlc的影响

目的 观察穴位埋线辅助治疗对超重或肥胖伴2型糖尿病患者的临床疗效评价。方法 将60例超重或肥胖伴2型糖尿病患者按照1 ∶ 1随机分为观察组和对照组。对照组予口服盐酸二甲双胍治疗，观察组在对照组基础上加用穴位埋线治疗，每周埋线1次，两组均连续治疗8周，并于治疗后8周随访。分别于第0周，第8周，第16周评价2组患者空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(PBG)、糖化血红蛋白(HbAlc)、肥胖指标，并评定临床疗效。结果 1)两组的FPG、PBG、HbAlc水平在第8周，16周时均较第0周下降，且观察组优于对照组(P＜0.05)；2)两组的体质量指数(BMI)、腰围(WC)、腰臀比(WHR)在第8周，16周时均较第0周下降，且观察组BMI优于对照组(P＜0.05)；3)两组的不良事件发生率均较低，差异无统计学意义(P＞0.05)。结论 穴位埋线配合二甲双胍治疗能有效改善超重或肥胖伴2型糖尿病患的FPG、PBG、HbAlc水平、减轻体重，具有较好的安全性，疗效优于单纯二甲双胍治疗。     

针刀松解术结合穴位埋线治疗对慢性胃炎患者血清超氧化物歧化酶及丙二醛的影响

目的观察针刀松解术结合穴位埋线治疗对慢性胃炎患者血清超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)含量的影响。方法将112例慢性胃炎患者随机分为观察组与对照组,观察组57例采用针刀松解术结合穴位埋线治疗,对照组55例采用常规西药口服治疗,比较两组患者治疗前后血清SOD及MDA含量的变化。结果两组治疗后,血清SOD含量均明显升高(P0.01,P0.05),MDA含量均明显降低(P0.01);治疗后与对照组比较,观察组血清SOD及MDA含量变化更明显,经统计学分析,差异均具有极显著性意义(P0.01)。结论针刀松解术结合穴位埋线治疗可明显改善慢性胃炎患者血清SOD及MDA的含量,进而良性调节血清氧自由基的产生与清除,从而治愈本病。     

逆转胶囊对人乳腺癌MCF-7/ADR细胞中P-gp和MRP表达的影响

目的:检测逆转胶囊对乳腺癌耐药相关蛋白表达的影响,探讨其逆转乳腺癌多药耐药的作用机制。方法:流式细胞术、免疫印迹技术(Western-blot)检测逆转胶囊作用前后MCF-7/ADR细胞表面P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)的表达。结果:逆转胶囊能显著抑制MCF-7/ADR细胞表面P-gp的表达,并可诱导MRP表达下降,其作用随血药浓度增加和作用时间的延长而增强。结论:逆转胶囊逆转乳腺癌多药耐药的机制与下调P-gp和MRP的表达有关。