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相似文献
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1.
胰液K-ras 12密码子点突变检测对胰腺癌诊断的临床价值   总被引:6,自引:1,他引:5  
目的:探讨胰液中K-ras 12密码子点突变对胰腺癌诊断的临床应用价值.方法:采用内镜下置鼻胰管方法收集20例胰腺疾病的胰液标本,聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)检测胰液K-ras基因第12密码子点突变,与肿瘤标记物CA19-9及CEA检测结果比较.结果:12例胰腺癌患者胰液标本中K-ras突变率为58.3%(7/12);8例慢性胰腺炎患者标本K-ras突变率为12.5%(1/8),胰腺癌胰液K-ras基因突变检测的敏感性为58.3%,特异性为87.5%,阳性预示值为87.5%,阴性预示值为58.3%.同一组病例以血清CA19-9>37 U/ml、CEA>4.5 μg/ml为阳性界值.胰腺癌血清 CA19-9、CEA阳性率分别为58.3%(7/12)、41.7%(5/12).结论:K-ras基因突变与胰腺癌相关性好,胰液中K-ras 12密码子突变率高,特异性强,为胰腺癌早期诊断的初步筛选提供了手段.  相似文献   

2.
目的:探讨胰管刷检标本P53蛋白检测对胰管良、恶性狭窄的鉴别诊断价值.方法:应用免疫细胞化学的方法检测25例ERCP示胰管狭窄或梗阻病例的胰管刷检标本P53蛋白的表达.结果:16例胰腺癌性胰管狭窄胰管刷检标本P53蛋白阳性率为56%,9例炎性胰管狭窄胰管刷检标本未见P53蛋白阳性表达.胰腺癌胰头部胰管狭窄刷检标本P53染色阳性率(73%)高于体尾部(20%).结论:胰管刷检标本细胞学检查的同时进行P53检测有助于胰腺癌与慢性胰腺炎的鉴别.  相似文献   

3.
胰腺癌患者外周血游离K-ras基因突变检测的临床意义   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:通过检测胰腺癌患者外周血中游离K-ras基因突变,探索无创性胰腺癌诊断的新方法.方法:采用两步法聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)技术,部分样本行DNA直接测序确证,检测胰腺良性病变患者(11例)血浆、恶性病变患者(30例)血浆及肿瘤组织K-ras基因的突变情况.对照组为8例慢性胰腺炎和3例胆石症患者.结果:胰腺癌和慢性胰腺炎病例外周血K-ras基因突变率分别为60.0%(18/30) 和12.5%(1/8),3例胆石症未见K-ras基因突变.其中肿瘤组织K-ras基因突变阳性病例外周血检测阳性率为69.6%(16/23).结论:胰腺癌患者外周血游离K-ras基因突变的检测有助于胰腺癌的无创性诊断.  相似文献   

4.
胰管刷检细胞端粒酶活性检测诊断胰腺癌的临床意义   总被引:3,自引:0,他引:3  
目的:探讨胰管刷检细胞端粒酶活性检测在胰腺癌诊断中的价值.方法:对27例胰腺疾病患者采用ERCP下胰管细胞刷获取标本,H-E染色,进行病理学观察;其中21例采用PCR-TRAP-ELISA法测端粒酶活性,并与常规细胞学及血清CEA、CA19-9检查作比较.结果:胰腺癌患者端粒酶活性水平明显高于慢性胰腺炎患者,以端粒酶活性D>0.2为阳性界限值,胰腺癌端粒酶活性阳性率为77.8%,慢性胰腺炎无1例端粒酶阳性,胰管刷检细胞端粒酶活性检测和细胞学诊断总符合率为77.8%,端粒酶活性与胰腺癌部位未见明显相关.结论:胰管刷检标本细胞学检查的同时结合端粒酶活性检测是提高胰腺癌诊断水平的有效方法.  相似文献   

5.
应用肽核酸钳制PCR技术检测胰腺癌K-ras基因突变   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:应用肽核酸钳制PCR技术检测胰腺癌K-ras基因突变,探讨其诊断价值.方法:结合特异性肽核酸(针对野生型序列)与实时定量PCR技术建立一步K-ras基因检测法,与传统限制性片段长度多态性PCR法检测结果进行比较,评价新方法的诊断价值.结果:肽核酸钳制PCR法可同时对胰腺癌标本中K-ras基因的第12、13密码子突变情况进行检测,操作简便;可在105倍的野生型K-ras基因背景下检测出突变,灵敏度为0.001%,可检测突变基因最低限为102拷贝;该方法可同时进行较大规模的样品检测,单次检测时间仅需1 h.而传统方法可检测的突变基因最低限为103拷贝,检测灵敏度为0.01%;需花费约2 d完成同样数量的样本检测.结论:肽核酸钳制实时定量PCR法较限制性片段长度多态性PCR法有明显优势,适用于胰腺癌大规模临床样本的K-ras基因突变检测,可作为胰腺癌筛查的有效手段.  相似文献   

6.
目的 探讨胆汁中K-ras基因突变检测在胰腺癌肝转移早期诊断中的价值.方法 通过建立胰腺癌及胰腺癌肝转移的大鼠动物模型,收集模型大鼠的胆汁,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)检测胆汁中K-ras基因12密码子点突变情况并与病理切片法相比较.结果 16例胰腺癌动物模型胆汁标本中无K-ras基因突变(0/16),19例胰腺癌肝转移动物模型胆汁标本中K-ras基因突变率为84.20%(16/19).胰腺癌肝转移胆汁K-ras基因突变检测的敏感性为84.20%,特异性为85.7%,阳性预测值为84.20%,阴性预测值为85.70%.结论 胰腺癌肝转移胆汁中K-ras基因可以发生突变,其突变率高,特异性强,可能为胰腺癌肝转移早期诊断的初步筛选提供新的方法.  相似文献   

7.
目的:探讨检测纤维支气管镜活检标本K-ras基因突变对肺癌诊断的临床意义.方法:采用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-single strand conformational polymorphism,PCR-SSCP)-银染技术,检测52例肺癌患者和9例肺良性疾病患者的纤支镜活检标本中K-ras基因第12,13和61位密码子的突变率,并对K-ras基因突变与临床病理参数进行相关分析.结果:52例肺癌患者活检标本中,12例检测出K-ras基因点突变,突变率为23.1%,9例肺良性疾病患者活检标本中未检测出K-ras基因点突变.K-ras基因突变与肺癌病理组织类型相关,在腺癌中达43.8%,但与患者年龄、性别、吸烟史、肿瘤细胞分化程度及临床分期无关.结论:检测纤支镜活检标本K-ras基因突变有可能作为肺癌早期诊断的一个参考指标.  相似文献   

8.
目的通过对胰腺癌患者手术切除肿瘤组织K-ras基因突变位点进行分析,探讨检测K-ras基因突变对胰腺癌的诊断预测价值。方法选取170例健康良性对照与66例病理证实胰腺癌患者,提取石蜡组织基因组DNA,使用MassARRAY时间飞行质谱技术进行K-ras基因突变分析。采用Fisher’s精确检验进行统计学分析。结果正常对照胰腺组织未检出阳性;66例胰腺癌组织中,8例K-ras基因第12位密码子(位点位于K-ras 12c1G)突变,通过Fisher’s精确检验统计分析,χ2值为21.329(P〈0.001),差异具有显著统计学意义;本实验检测的其余两个位点K-ras12c2、K-ras 13未见突变。结论 K-ras基因第12位密码子(K-ras 12c1G)突变可能是胰腺癌变发生发展过程中的一个重要过程和信号。  相似文献   

9.
目的:通过对良恶性胰腺组织、胰腺癌细胞的DPC4(Delected in Pancreatic Cancer,Locus4)基因的9个外显子变化的检测,以探索胰腺癌早期诊断的新途径。方法:应用聚合酶链反应(PCR)、复合PCR(Multiplex PCR)、直接基因测序的方法,检测19例胰腺良、恶性组织物、2例正常胰腺组织、3个胰腺癌细胞株DPCA基因的纯合缺失及突变。结果:13例胰腺癌中11例DPCA的9个外显子PCR成功。2例未扩增出产物。经复合PCR证实为DPCA的纯合缺失,缺失率为15.4%(2/13);3个胰腺癌细胞株中有1例纯合缺失(1/3)。PCR产物直接基因测序示:11例胰腺癌组织中有2例DPCA的第5/6外显子有1个碱基突变(A→T),突变率18.2%(2/11),2个胰腺癌细胞株中有1个在同样部位发生碱基突变(1/2),2例胰岛细胞瘤、2例慢性胰腺炎、2例正常胰腺组织既无DPCA纯合缺失、也未检测到基因突变。结论:DPC4基因可能是胰腺癌候选抑癌基因之一。分析DPCA的变化有助于胰腺癌的诊断。  相似文献   

10.
胰腺癌组织K-ras基因点突变检测的临床意义   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的 :探讨胰腺癌中K -ras 12密码子点突变对胰腺癌诊断的价值。方法 :采用聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性分析 (PCR -RFLP)检测了 2 3例胰腺癌K -ras基因第 12密码子点突变 ,并评价其临床应用价值。结果 :2 3例胰腺癌组织标本中K -ras基因突变率为 78.3 % (18/ 2 3 ) ,胰腺癌K -ras基因突变与胰腺癌分级、临床分期及伴随局部淋巴结转移无显著相关 (P >0 .0 5 )。结论 :胰腺癌中K -ras 12密码子突变率高 ,特异性强 ,有助于胰腺癌的诊断  相似文献   

11.
目的:探讨慢性胰腺炎K-ras基因突变的临床病理学意义。方法:9例手术切除的慢性胰腺炎的石蜡标本,用微解剖法分离慢性胰腺炎的胰导管上皮粘液细胞增生灶,提取,扩增DNA,用ASO斑点杂交检测K-ras基因第12密码子的碱基序列。对9例接受手术治疗的病人进行长期随访,结果:9例慢性胰腺炎中4例有明显的胰导管上皮粘液细胞增生,其中2例被检出GAT型突变,分别占全组和有胰管上皮粘液细胞增生的22%和505,两个突变病例分别是接受了胰体尾切除和胰头十二指肠切除手术,术后分别随访17年和10年,没有发现任何恶变迹象,结构:慢性胰腺为可以检出K-ras基因突变,发生了K-ras基因突变的慢性胰腺炎上皮粘液细胞增生灶,未必一定发生为胰腺癌,胰液、粪便、末梢血液和尿液的检测,以及胰腺组织细针刺液检出K-ras基因突变,对胰腺癌的诊断有重要参考价值,但不应视为胰腺癌的确诊依据。  相似文献   

12.
Lu X  Xu T  Qian J  Wen X  Wu D 《中华医学杂志(英文版)》2002,115(11):1632-1636
目的:通过检测胰液、粪便癌基因K-ras和抑癌基因p53的突变,探索早期诊断胰腺癌的手段。方法:1994年至2000年5月住院和门诊患共201例,正常对照60例,通过聚合酶链反应-限制片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测胰液、粪便K-ras突变,PCR-SSCP方法检测p53突变。结果:胰腺癌患胰液K-ras突变率为87.8%(36/41),胰腺良性病变为23.5%(4/17)。粪便K-ras扩增成功率为90.0%(235/261)。胰腺癌患粪便K-ras突变率为88.0%(66/75),胰腺良性病变为51.1%(24/47),正常人粪便K-ras突变率为19.6%(9/46)。胰腺癌胰液细胞p53突变率47.4%(18/38),胰腺良性疾病为12.5%(2/16)。胰腺癌粪便p53突变率为37.1%(23/62),慢性胰腺炎为19.1%(4/21)。结论:胰腺癌患胰液K-ras突变的敏感性、特异性高,可以作为胰腺癌诊断的辅助手段。粪便K-ras结合p53检测可以提高敏感性,在胰腺癌筛选中有潜在的价值,联合血清CA19-9等肿瘤标记物检测有助于提高胰腺癌早期诊断率。  相似文献   

13.
目的:探讨c-K-ras癌基因与胰腺癌的关系。方法:查阅近年来的国内外文献,对c-K-ras癌基因与胰腺癌发生的关系进行分析。结果:胰腺癌中呈现高发的c-K-ras基因第12密码字点突变。结论:检测c-K-ras基因点突变有助于胰腺癌的早期诊断,而且是对细胞学、影像学及酶学检查的重要补充。  相似文献   

14.
目的 通过检测胰液、粪便癌基因K-ras和抑癌基因p53的突变,探索早期诊断胰腺癌的手段。方法 1994年至2000年5月住院和门诊患者共201例,正常对照60例,通过聚合酶链反应-限制片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测胰液、粪便K-ras突变,PCR-SSCP方法检测p53突变。结果 胰腺癌患者胰液K-ras突变率为87.8%(36/41),胰腺良性病变为23.5%(4/17)。粪便K-ras扩增成功率为90.0%(235/261)。胰腺癌患者粪便K-ras突变率为88.0%(66/75),胰腺良性病变为51.1%(24/47),正常人粪便K-ras突变率为19.6%(9/46)。胰腺癌胰液细胞p53突变率47.4%(18/38),胰腺良性疾病为12.5%(2/16)。胰腺癌粪便p53突变率为37.1%(23/62),慢性胰腺炎为19.1%(4/21)。结论 胰腺癌患者胰液K-ras突变的敏感性、特异性高,可以作为胰腺癌诊断的辅助手段。粪便K-ras结合p53检测可以提高敏感性,在胰腺癌筛选中有潜在的价值,联合血清CA19-9等肿瘤标记物检测有助于提高胰腺癌早期诊断率。  相似文献   

15.
Wei S  Liu T  Liu H  Gao J 《中华医学杂志(英文版)》2003,116(10):1585-1587
Objective To investigate the K-ras mutation pattern in six pancreatic cancer cell lines from Chinese patients. Methods All six cell lines were analyzed for mutations in exon 1 of the K-ras gene by polymerase chain reaction (PCR) and direct sequencing.Results All 6 pancreatic cancer cell lines had GGT→GTT mutations at K-ras codon 12 but no mutations at codon 13.Conclusion The unique GGT→GTT mutation at codon 12 plays a potential role in the carcinogenesis of pancreatic cancers in Chinese.  相似文献   

16.
目的观察散性大肠癌K—ras基因12、13密码子点突变情况,探讨其与临床病理特征的关系。方法对2005~2009年问浙江省肿瘤医院确诊的140例大肠痛进行回顾性分析,并提取石蜡标本中癌组织DNA,经PCR扩增后应用焦磷酸测序技术检测K—ras基因第12、13密码子点突变情况。结果K—ras基因突变率397%(55/140),12密码子突变率78.2%(43/55),13密码子突变率21.8%(12/55)。共发现7种突变类型,包括12密码子(GGT→AT、GGT→AGT、GGT→TGT、GGT-→GTT、GGT→CGT、GGT→GCT)和13密码子(GGC→GAC),以12密码子(CGT→GAT)最常见,占突变总数41.8%(23/55)。K—ras基因突变与性别、年龄、大体类型、瘤体、原发部位、病理亚型、组织学分级、浸润深度、转移、Duke’S分期、脉管侵犯均无相关性(P〉0.05);第12与13密码子突变在原发部位、淋巴结转移上差异有统计学意义(P〈0.05)。结论散发性大肠癌中K—ras基因突变率为39.7%,12密码子(GGT→GAT)突变是最常见类型。特定位点的突变与一些临床病理参数密切相关,其中12密码子突变在结肠癌中的发生率高,并易出现淋巴结转移。通过K—ras基因检测有助于指导临床开展大肠癌个体化治疗。  相似文献   

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