人动脉平滑肌细胞贴块培养法

应用贴块法成功地进行了人动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ）原代培养。培养出的人ＳＭＣ呈典型的“谷”与“峰”样生长，电镜下见细胞浆内含有肌丝结构，马氏染色呈红色。经历１０个月传代培养至３５代，该细胞生长未见异常改变。文内还讨论了人主动脉ＳＭＣ体外培养应注意的问题。     

组织贴块法培养大鼠主动脉平滑肌细胞及鉴定

目的探讨以原代培养的方法获得活力稳定、高度纯化的大鼠血管平滑肌细胞的体外模型,并为相关研究提供所需的试验材料。方法采用组织贴块法进行细胞原代培养,胰酶消化传代,液氮冻存,并应用倒置相差显微镜和SP法免疫组化染色对细胞进行鉴定。结果85％的组织块接种存活,传代后90％以上的平滑肌细胞重新贴壁生长,冻存后细胞再行1～2次传代后可恢复增生活力。显微镜下细胞呈典型的“谷峰状”生长,SP法免疫组化染色显示胞质内“平滑肌肌动蛋白表达阳性。结论组织块贴壁法简便易行,短期内可获大量符合后续试验要求的血管平滑肌细胞。     

人脐动脉平滑肌细胞贴块培养法

以人脐动脉为材料，用贴块法在含２０％新生牛血清的ＤＭＥＭ中培养出细胞，经电镜和马氏染色鉴定，确认培养出的细胞为平滑肌细胞。平滑肌细胞传至第１９代仍保持“谷与峰”生长特征。该法取材独辟蹊蹊径，具有取材容易，操作简单，费用低廉的特点。为人动脉平滑肌细胞的培养提供了一种方便、实用的方法。     

人脐动脉平滑肌细胞贴块培养

以人脐动脉材料，用贴块法在含２０％新生牛血清的ＤＭＥＭ中培养出细胞，经电镜和马氏染色鉴定，确认培养出的细胞为平滑肌细胞，平滑肌细胞传至第１９代仍保持“谷与峰”生长特征。该法取材独辟嘴径，具有取材容易，操作简单，费用低廉的特点，为人动脉平滑肌细胞的培养提供了一种方便，实用的方法     

组织块贴壁法行SD大鼠肺内动脉段平滑肌细胞的原代培养及其鉴定

目的研究采用组织块贴壁法进行SD大鼠肺内动脉段平滑肌细胞（PASMCs）原代培养的方法特点及其生物学特性。方法将SD大鼠消毒后剖开胸腹腔,无菌下取出心肺组织,然后分离出肺血管段,用组织块贴壁法培养,倒置相差显微镜观察细胞形态、普通免疫组织化学法（SP法）和免疫荧光法进行细胞鉴定。结果组织块贴壁法培养的SD大鼠PASMCs为典型的＂峰-谷＂样生长状态,细胞的胞核较大,免疫组织化学法和免疫荧光法检测α-actin均为强阳性表达,免疫荧光法检测传至三代以后的细胞纯度可达98%以上,传代细胞生长未见明显异常改变。结论在不使用显微技术情况下,用组织贴块法成功培养大鼠PASMCs,得到稳定生长、纯度高的PASMCs,且培养与纯化可以同时进行,可获得稳定传代的细胞。     

组织块法培养兔主动脉平滑肌细胞

目的探讨培养兔主动脉平滑肌细胞的方法，为心血管疾病的病因机制研究提供有用的体外模型。方法采用组织块贴壁、反转干涸方法培养兔主动脉平滑肌细胞并传代。倒置显微镜下进行形态学观察及免疫细胞化学鉴定。结果成功培养兔血管平滑肌细胞并传代。倒置显微镜下细胞呈典型的“峰-谷”状。免疫细胞化学染色呈棕黄色，均呈阳性表达，胞浆内可见纵行排列肌丝。结论利用组织块贴壁、反转干涸方法成功进行兔主动脉平滑肌细胞原代培养，具有简便易行、培养周期短、纯度高等优点，是心血管疾病良好的体外研究模型。     

人脐动脉平滑肌细胞原代培养方法的比较

目的比较人脐动脉平滑肌细胞（HUASMC）两种原代培养方法的优劣。方法分离脐动脉，剥离中膜，将其剪成小块，贴块法将小块直接接种于培养瓶中；酶解法①单用胶原酶Ⅰ（0．2％）分别消化5小时、8小时、24小时后接种于培养瓶，②分别用胶原酶Ⅰ（0．2％）消化3小时和胰蛋白酶（0．25％）消化2小时，接种于培养瓶。结果贴块法6天可以见到细胞从组织块周围游出，20～30天后可以进行传代；单用胶原酶Ⅰ消化24小时可以见到少量细胞，但由于细胞数少，无法进行传代；单用胶原酶Ⅰ消化5小时和8小时以及用胶原酶Ⅰ和胰蛋白酶联合消化均未见到贴壁生长的细胞。结论HUASMC原代培养贴块法较酶解法简便经济且成功率较高。     

成人动脉平滑肌细胞体外培养模型的建立

目的：建立成人动脉血管平滑肌细胞（hVSMC)体外培养模型,并保持体外传代培养过程中hVSMC生物学特性的稳定。方法：运用改良的植块贴壁法,在植块贴壁过程,培养基选取,换液时间及培养液用量等多个关键环节进行改进,成功建立了成人hVSMC体外培养模型,并用光镜和透射电镜对培养细胞进鉴定和形态学观察。结果：培养的细胞生长良好,光镜下呈长梭形及“峰与谷”样生长,透射电镜下可见肌丝,密斑及密体,具有典型的hVSMC特征,经传代培养至35代,细胞生长特性未见异常改变,结论：改良植块贴壁法能使hVSMC原代培养的时间明显缩短,传代后hVSMC生物学特征的稳定性好,细胞扩增量大,且培养与纯化能同步进步。     

原代肠系膜动脉平滑肌细胞的分离培养

取大鼠肠系膜动脉,用I型胶原酶消化,并进行体外培养,倒置相差显微镜观察ASMC 生长状态及特点;免疫组织化学进行细胞鉴定。大鼠肠系膜平滑肌细胞呈典型“峰-谷”样生长,该原代培养细胞对平滑肌特异性肌动蛋白表达阳性。传代细胞生长稳定,可为研究小血管平滑肌细胞特性提供一个较理想的模型。     

胎儿脐动脉血管平滑肌细胞贴块培养方法的改进

目的 探讨胎儿脐动脉血管平滑肌细胞的培养方法.方法 取无菌新鲜健康孕妇胎儿脐动脉,采用组织贴块法培养血管平滑肌细胞,并用α-actin肌动蛋白免疫组化方法对培养的细胞进行鉴定.结果 运用此方法成功地培养出胎儿脐动脉血管平滑肌细胞,培养的细胞呈典型的"峰-谷"样生长特性,用抗平滑肌α-肌动蛋白(α-actin)的单克隆抗体做免疫组化检测,低倍镜下可见细胞普遍呈阳性反应,高倍镜下可见α-actin肌动蛋白在胞浆内均匀分布.结论 此方法取材容易,操作简单,费用低廉,为人动脉血管平滑肌细胞的培养提供了一种实用、可靠的方法.