副溶血性弧菌食物中毒分离株毒力基因检测及耐药性的调查

目的了解近年引起食物中毒的26株副溶性弧菌分离株的携带主要毒力基因的分子流行病学特征和耐药性状况,为制定相应的防控措施提供参考。方法根据副溶血性弧菌耐热直接溶血素(TDH)和耐热相关溶血素(TRH)基因序列设计PCR引物,建立PCR反应体系,检测26株从2005年11月至2008年8月发生的8起散发性食物中毒事件中分离的副溶血性弧菌菌株的毒力基因TDH和TRH,K-B法测定其药物敏感性。结果26株副溶血性弧菌有23株携带有TDH基因,阳性率为88%,所有菌株均未带有TRH基因;26株菌对亚胺培南、阿米卡星、头孢吡肟、头孢噻肟、庆大霉素、环丙沙星、哌拉西林、头孢哌酮、头孢他啶、头孢西丁等13种药物未见有耐药菌株;但对磺胺异恶唑、替卡西林、氨苄西林等有较高的耐药率,分别达76.9%、69.2%、80.8%。而对复方新诺明、四环素、头孢呋辛酯、头孢噻吩、头孢唑啉等也有耐药菌株的存在。结论带有TDH基因是近年引起食物中毒的副溶性弧菌分离株的主要分子流行病学特征,所分离菌株对多种常用药物敏感性高。研究结果为评价引起食物中毒的副溶性弧菌的分子流行病学特征和制定可行的防控措施提供了科学依据。     

腹泻患者粪便中副溶血弧菌四年监测的结果分析

目的：了解副溶血弧菌（V．Parahaemolyticus）在腹泻病人中分布情况。方法：取一天腹泻3次以上患者肛拭子标本用碱性蛋白胨水（pH8．4～9．0）增菌后，转种四号琼脂培养基（含庆大霉素、亚碲酸钾）及硫代硫酸盐-柠檬酸钠-胆盐-蔗糖琼脂（TCBS）培养基上，分纯后进行生化鉴定。结果：从1994年～1997年我院副溶血弧菌的年检出率分别为6．53％、7．18％、8．％、17．35％，进行卡方检验P＜0．01，其结果差异有显著性。结论：副溶血弧菌年检出率有上升的趋势，年检出率不断增高应引起有关部门的重视。     

秦皇岛市2017—2021年副溶血性弧菌毒力基因和耐药性分析

目的 了解秦皇岛市市售食品、食源性疾病主动监测及食源性疾病暴发事件中检出的副溶血性弧菌的毒力基因携带情况和耐药性,为由该菌引起的食源性疾病的防治提供科学依据。方法 对2017—2021年检出的96株副溶血性弧菌进行不耐热性溶血毒素(thermolabile hemolysin, TLH)的基因tlh、热稳定直接溶血毒素(thermostable direct hemolysin, TDH)的基因tdh及热稳定直接溶血相关毒素(thermostable direct hemolysin-related hemolysin, TRH)的基因trh进行测定和药敏实验。结果 市售食品中检出的副溶血性弧菌仅携带tlh毒力基因,食源性疾病主动监测检出的副溶血性弧菌均携带tlh和tdh毒力基因,食源性疾病暴发事件中检出的副溶血性弧菌除携带tlh和tdh毒力基因外,还携带trh毒力基因;副溶血性弧菌耐药性实验结果显示,其对头孢唑林的耐药率为81.25%,对氨苄西林的耐药率为25.00%,对头孢他啶的耐药率为10.42%,对其他抗生素的耐药率为0%～10.00%;多重耐药菌株的构成比为10.42%。结论...     

副溶血弧菌感染性腹泻临床和耐药分析

目的了解副溶血弧菌感染性腹泻患者临床特征和病原菌耐药性。方法回顾性分析2016年4月至2018年10月首都医科大学附属北京同仁医院肠道门诊收治的330例副溶血弧菌感染性腹泻患者的临床特点及病原菌耐药性。结果副溶血弧菌感染性腹泻患者在青壮年组较中年组、老年组发病率显著增高,差异有统计学意义(P<0. 05)。副溶血弧菌感染性腹泻患者大便性状多为水样便(72. 7%),其它症状依次为腹痛占77. 3%,恶心占66. 1%、呕吐占50. 3%,发热占23. 3%,脱水占总数的17. 6%,里急后重占13. 6%。330株副溶血性弧菌分离株对庆大霉素、左氧氟沙星、甲氧苄啶/磺胺甲噁唑、头孢曲松、氨苄西林/舒巴坦的敏感率均≥97. 0%,对氨曲南敏感率仅为77. 6%。结论青壮年是副溶血弧菌感染性腹泻的高发人群。副溶血弧菌感染性腹泻患者症状表现为水样便、腹痛、恶心、呕吐、发热、脱水、里急后重。副溶血弧菌对庆大霉素、左氧氟沙星、甲氧苄啶/磺胺甲噁唑、头孢曲松、氨苄西林/舒巴坦的敏感率高,对氨曲南敏感率较低。     

产耐热溶血毒素副溶血弧菌耐药性调查

目的：了解临床引起急性腹泻的副溶血弧菌产耐热溶血毒素的（TDH）情况和耐药现状。方法：用常规方法对临床大便标本进行培养及分离．Vitek-2全自动微生物仪进行鉴定,TDH用我妻培养基检测,药物敏感性试验采用K-B法（结果参照NCCLS肠杆菌科标准判读）。结果：①分离出的167株副溶血弧菌中96．4%（161／167）产耐热溶血毒素;②副溶血弧菌对临床常用23种抗生素的体外抗菌活性除了氨苄西林、头孢唑林、头孢噻吩、头孢呋新较低,敏感率小于10．6％,其他均较高,敏感率在84．5％以上。结论：引起急性腹泻的副溶血弧菌大部分都产TDH,临床常用的抗菌素时其均有较好的体外抗菌活性。     

副溶血弧菌肠道感染64例临床和药敏分析

副溶血弧菌是成人急性腹泻的致病菌，其临床表现易与急性细菌性痢疾相混淆。现将我院１９９５—１９９７年收治的６４例副溶血弧菌肠道感染的临床和药敏结果分析报告如下。１资料和方法１．１一般资料６４例患者中，男性３１例，女性３３例；年龄１５～７２岁，平均３８岁...     

深圳西乡2007-2009年腹泻患者中副溶血弧菌感染情况

目的掌握本地区腹泻患者中副溶血弧菌的构成,了解该菌流行季节及血清型的变迁趋势。方法采集在西乡医院就诊的腹泻患者粪便标本2 588份,对致病菌进行分离、培养和鉴定,并对分离出的585株副溶血弧菌感染年龄段、流行季节及血清学进行分析。结果副溶血弧菌是本地区的主要致病菌,阳性率以10～20岁年龄组最高,10岁以下的年龄组最低,且不同年龄组间阳性率差异有统计学意义(χ2=235.32,P0.001)。副溶血弧菌的发病率在秋季达高峰,血清型以03:K6为主。结论副溶血弧菌是本地区的主要病原菌,以03:K6血清型为主,3年均以秋季高发,易感人群以青壮年为主。     

黄连素治疗副溶血弧菌肠道感染70例临床分析

副溶血弧菌是成人腹泻中常见的致病菌之一,临床症状轻重不一,重者可有明显的全身中毒症状,常需住院治疗.笔者自2003年6月-2009年6月,应用黄连素治疗副溶血弧菌肠道感染70例,收到了很好的效果,现报告如下.     

银川市水产品副溶血弧菌病原学特征分析

目的探讨副溶血弧菌(VP)在银川市的流行特点和变异变迁规律,了解该菌是否伴随着沿海地区的变化而呈动态变化,为副溶血弧菌引起疾病和食物中毒的预防提供科学依据。方法采用食品卫生学检验方法GB/T4789.7进行分离、鉴定;应用PCR方法对分离菌株进行耐热直接溶血素(TDH)、耐热直接溶血素相关溶血素(TRH)基因检测。应用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型方法对分离、鉴定的副溶血弧菌进行遗传学分析。结果 166份水产品检出副溶血性弧菌24株,检出率14.46%,其中海产品116份,检出23株,阳性检出率为19.83%,淡水产品50份,检出副溶血性弧菌1株,阳性检出率为2%;所有菌株几乎不携带毒力基因;通过PFGE分子分型,24株菌共分为14个带型,呈现型别多样性。结论银川市海产品副溶血弧菌污染状况较为严重。     

一起副溶血弧菌致食物中毒分析

副溶血弧菌是重要的嗜盐菌,广泛地分布于海洋和其他咸水环境中,并能以水和水生物等为媒介,引起人类胃肠炎或食物中毒。近年来,传统细菌性腹泻（沙门菌和志贺菌引起的腹泻）呈下降趋势,而副溶血弧菌引起的胃肠感染却逐年上升。副溶血弧菌是我国沿海地区夏秋季食物中毒的主要病原菌,也是深圳市南山区2000～2007年食物中毒最主要的致病菌（占49．06％）。2007年8月深圳市南山区发生了一起副溶血弧菌引起的食物中毒,现将结果报告分析如下。     

副溶血弧菌不耐热溶血毒素tlh基因的序列分析

目的:利用PCR技术扩增副溶血弧菌不耐热溶血毒素tlh基因，对tlh基因进行生物信息学分析。方法:利用PCR技术扩增tlh基因，克隆至载体pET32a^ 并测序。将测序结果提交国际互联网上有关生物信息网站进行生物信息学分析。结果和结论:测序结果tlh14-90被GenBank收录，登录号为AY289609。tlh14-90全长1257bp，与国际标准株WPI的同源性为99%，含有启动子和密码子，预测其编码一个含418个氨基酸的蛋白质(TLHl14-90)，分子式为C2131H3184N548O649S16，相对分子质量47392．9，理论等电点pI为4．92，丙氨酸、亮氨酸和天冬酰氨的含量分别为11．0％、7．4％和7．2％．含有4个半胱氨酸(Cys)，κ—D法推算的疏水性参数为-34。预测其二级折叠结构为α/□蛋白，三级结构未给出。     

副溶血弧菌毒力评价小鼠模型的建立与应用

目的建立用于评价副溶血弧菌毒力的小鼠模型,为研究副溶血弧菌的致病机制奠定基础。方法将适宜浓度的菌液经腹腔感染4～5周龄雌性BALB/c小鼠,观察小鼠的症状及死亡数。结果高盐(2%NaCl)条件下培养的强毒株RIMD2210633,经腹腔感染10⁷CFU 的菌量,小鼠存活率为20%～30%,而环境无毒株S251的小鼠存活率为100%。结论建立了评价副溶血弧菌毒力的实验小鼠模型,并应用于不同盐分浓度培养的强毒株与环境无毒株的毒力比较实验。     

一起副溶血弧菌引起食物中毒的调查报告

目的查找18名患者以腹痛、腹泻、呕吐、发热为主要症状的食物中毒原因。方法依照《食物中毒诊断及技术处理总则》,实施流行病学调查及实验室检测可疑食物、患者呕吐物、肛拭子。结果在拼盘、2份呕吐物、3份肛拭子中检出副溶血弧菌。结论本次食物中毒是由副溶血弧菌污染所引起。     

深圳市副溶血性弧菌血清型及毒力基因特征研究

目的了解从深圳市食源性疾病患者和环境中分离的副溶血性孤菌的血清型和毒力基因特征。方法2006-2008年从食源性疾病患者和海水、海产品等外环境分离到133株副溶血性孤菌,按GB／T4789．7-2008进行血清学鉴定。用PCR技术检测耐热直接溶血素基因（tdh）和耐热直接溶血素相关溶血素基因（trh）。结果133株副溶血性弧菌中,以03（43．6％）、01（16．5％）、04（16．5％）群为主。84．4％（76／90）的食源性疾病样本分离株携带毒力基因tdh,无单独携带trh基因的菌株;79．1％（34／43）的环境样本分离株不携带tdh和trh毒力基因,无同时携带两种基因的菌株。结论近年来引起深圳市食源性疾病的副溶血性孤菌主要为tdh阳性、trh阴性菌株,在外环境中检出的绝大多数副溶血性弧菌tdh基因和tdh基因均为阴性;O3仍为主要的流行群。     

副溶血性弧菌耐热直接溶血毒素基因的克隆

目的探讨克隆副溶血性弧菌（Ｖｐ）耐热直接溶血毒素基因的方法。方法用ＰＣＲ技术扩增目的基因,双酶切载体 ｐＵＣ１９和目的基因 ＤＮＡ,连接并转化大肠杆菌 ＪＭ１０９。对重组质粒进行 ＰＣＲ鉴定、酶切鉴定和序列分析。结果凝胶电 泳显示,标准株Ｖｐｌ４－９０基因组ＤＮＡ的ＰＣＲ产物长约６００ ｂｐ。阳性克隆的ＰＣＲ产物也为一长约６００ ｂｐ）的条带,经双 酶切可切出一约 ６００ ｂｐ的条带。 ＤＮＡ 测序结果表明与 Ｇｅｎｅｂａｎｋ中的序列有 ９９．６５％的同源性。结论利用该方法成功 克隆了目的基因,为制备用于现场检测的基因探针和Ｖｐ的保护性菌苗以及阐明Ｖｐ的致病机理奠定了基础。     

副溶血弧菌不耐热溶血毒素tlh基因的序列分析

目的 利用PCR技术扩增副溶血弧菌不耐热溶血毒素tlh基因,对tlh基因进行生物信息学分析。方法 利用PCR技术扩增tlh基因,克隆至载体pET32a⁺ 并测序。将测序结果提交国际互联网上有关生物信息网站进行生物信息学分析。结果和结论 测序结果tlh14-90被GenBank收录,登录号为AY289609。tlh14-90全长1257bp,与国际标准株WP1的同源性为99%,含有启动子和密码子,预测其编码一个含418个氨基酸的蛋白质(TLH14-90),分子式为C₂₁₃₁H₃₁₈₄N₅₄₈O₆₄₉S₁₆,相对分子质量47392.9,理论等电点pI为4.92,丙氨酸、亮氨酸和天冬酰氨的含量分别为11.0%、7.4%和7.2%,含有4个半胱氨酸(Cys),κ-D法推算的疏水性参数为-34。预测其二级折叠结构为α/□蛋白,三级结构未给出。     

副溶血性弧菌耐热直接相关溶血素基因的克隆与序列分析

目的：探讨克隆副溶血弧菌（Vp）耐热直接相关溶血素基因的方法。方法：用PCR技术扩增目的基因，双酶切载体pGEX-3和目的基因DNA，连接并转化大肠杆菌DH5α。对重组质粒进行PCR鉴定、酶切鉴定和序列分析。结果：凝胶电泳显示，标准株Vp14-91基因组DNA的PCR产物长约600bp.阳性克隆的PCR产物也为一长约600bp的条带，经双酶切可切出一约600bp的条带。DNA测序结果表明与GenBank中的序列有99．1％的同源性。结论：利用该方法成功克隆了目的基因，为制备用于现场检测的基因探针和Vp的保护性疫苗以及Vp 的致病机制研究奠定了基础。     

副溶血性弧菌耐热直接溶血毒素基因的克隆

目的 探讨克隆副溶血性弧菌（Vp）耐热直接溶血毒素基因的方法。方法 和PCR技术扩增目的基因,双酶切载体pUC19和目的基因DNA,连接并转化大肠杆菌JM109。对重组质粒进行PCR鉴定、酶切鉴定和序列分析。结果 凝胶电泳显示,标准株Vp14-90基因组DNA的PCR产物长约600bp。阳性克隆的PCR产物也为一长约600bp的条带,经双酶切可切出一约600bp的条带。DNA测序结果表明与Genebank中的序列有99.65%的同源性。结论 利用该方法成功克隆了目的基因,为制备用于现场检测的基因探针和Vp的保护性菌苗以及阐明Vp的致病机理奠定了基础。     

一起副溶血弧菌与奇异变形杆菌致食物中毒分析

目的对某一餐厅发生的一起婚宴食物中毒事件进行病原菌的检测。方法参照GB4789—94及《卫生防疫细菌检验》方法对患者肛拭及剩条食物进行病原学检测。结果10份标本中8份检出副溶血弧菌，5份检出奇异变形杆菌，发镉初期与恢复期血清学抗体实验有4倍增高。结论本次食物中毒是由副溶血弧菌和奇异变形杆菌混合感染引起。