GAD67-GFP基因敲入小鼠GFP与nNOS在嗅球中的表达和共存研究

目的:探究GAD67-GFP基因敲入小鼠嗅球各细胞层中GAD67阳性神经元的分布及与一氧化氮合酶(bNOS)的共存。方法:对该实验室繁育的成年GAD67-GFP基因敲入小鼠利用聚合酶链式反应(PCR)进行基因型等鉴定,取阳性GAD67-GFP基因敲入小鼠嗅球做冰冻切片进行尼氏染色、免疫荧光染色,观察GAD67阳性神经元在嗅球各细胞层中的分布比例及与bNOS共存。结果:GAD67阳性神经元在嗅小球层、僧帽细胞层、颗粒细胞层所占比例分别为:(42.98±0.92)%、(23.64±0.84)%、(77.75±0.84)%,bNOS阳性神经元在球旁细胞层、僧帽细胞层有强阳性分布,而在颗粒细胞层几乎没有分布。GAD67与bNOS仅在嗅小球层偶有共存。结论:GAD67阳性神经元主要分布于嗅小球层与颗粒细胞层,GAD67与bNOS仅少数共存于嗅小球层。     

慢性氟中毒大鼠中缝大核5-羟色胺神经元免疫细胞化学研究

目的：探讨慢性氟中毒大鼠中缝大核5－羟色胺（5－HT）神经元的病理变化。方法：以饮用含氟水的方法制造了雄性大鼠慢性氟中毒模型，对脑干中缝大核5－HT神经元进行了免疫细胞化学定性，定量研究。结果：慢性氟中毒大鼠中缝大核5－HT神经元减少，胞质内5－HT阳性反应颗粒减少且界限不清，显微图像分析仪定量检测神经元内5－HT含量降低，结论：高氟对中枢神经系统有直接损害作用。     

淋巴性脑水肿大鼠孤束背内侧亚核Glu、GABA及GAD67的时程变化

目的观察淋巴性脑水肿(LBE)模型大鼠孤束背内侧亚核(dmNTS)内谷氨酸(Glu)、γ-氨基丁酸(GABA)的改变及谷氨酸脱羧酶亚型67(GAD67)表达的时程变化,并探讨其意义。方法应用免疫组化方法,观察LBE大鼠dmNTS内Glu、GABA及GAD67在颈淋巴引流阻滞后不同时间点的变化情况。结果 LBE组Glu改变及GAD67表达在颈淋巴引流阻滞后1 d即开始升高,至第7天达高峰,后逐渐下降,于21 d恢复;而GABA在颈淋巴引流阻滞后1d即开始降低,至第7天降至最低,后逐渐升高,于21d恢复。结论 LBE大鼠dmNTS内Glu和GA-BA的改变可能参与了血压调节功能的降低;GAD67早期表达逐渐增加,可能是机体的一种代偿性机制,有助于神经递质水平的平衡和恢复。     

中缝大核NO和5-HT对大鼠胃运动的影响

目的:研究中缝大核一氧化氮(NO)和五羟色胺(5-HT)对大鼠胃运动的影响.方法:采用SD大鼠中缝大核(NRM)微量注射药物,记录胃运动收缩的幅度和频率.结果:中缝大核微量注射5-HT,能明显增强胃运动;中缝大核内预先注入精氨酸(L-Arg),可完全反转5-HT对胃运动的增强效应;中缝大核内预先注入一氧化氮合酶抑制剂(...     

大鼠中枢内源性镇痛系统内GABAB受体与5-HT共存神经元的观察

目的：观察GABAB受体（GABABR）与5－HT在大鼠中脑导水管周围灰质（PAG）,中缝核簇和巨细胞网状核a（部（GiA)神经元内的共存,方法：GABABR和5－HTGABABR5－HT和GABA特异性抗体的免疫荧光组织化学双重及三重染色技术,结果：GABABR／5－HT双标神经元胞体较密集地见于中缝背核,中缝正中核,中缝桥核,中缝大核,中缝苍白核,中缝隐核,此外,PAG和GiA内也可见双标神经元,GABA样阳性终末与GABABR／5－HT双标神经元的胞体和树突形成密切接触,结论：PAG,K中缝核簇和GiA内的5－HT能神经元几乎均呈GABABR样阳性,GABA能终末与GABAB受体／5－HT双标神经元形成密切接触,GABA可能通过GABAB受体调节5－HT能神经元的活动,参与对伤害性信息传递的的调控。     

兴奋不同传入神经纤维对大白鼠中缝大核神经元活动的影响

于清醒的肌肉麻痹的大鼠,用直流电分级阻滞法,以n=10或n=100的电脉冲刺激腓肠神经的不同传入纤维(分Ⅱ、Ⅱ+Ⅲ、Ⅲ、Ⅱ+Ⅲ+Ⅳ和Ⅳ类五组),观察刺激后即刻和10min时对中缝大核(NRM)神经元单位放电的影响。可见到(1)无论从引起兴奋的神经元数或反应的强度来看,均以细纤维的作用最大,粗纤维的作用最小,粗加细纤维居中。(2)Ⅲ类纤维的兴奋作用,短串脉冲大于长串脉冲。Ⅳ类纤维的兴奋作用,长串脉冲稍大于短串脉冲。(3)在刺激各组纤维后,所引起的反应,潜伏期有的较长;反应有的呈单相,有的呈兴奋和抑制的相互转化。上述结果为解决针刺或刺激神经镇痛的外周传入纤维问题提供了直接的实验依据。     

促甲状腺激素释放激素注入大鼠楔状核对中缝大核痛放电的影响

用玻璃微电极记录大鼠中缝大核（NRM）内痛兴奋性神经元（PEN）的单位放电，观察楔状核（NCF）注入微量促甲状腺激素释放激素（TRH）对PEN痛诱发放电频率的影响，并初步探讨TRH与阿片肽之间的关系。结果显示，NCF内注入TRH（0.5μg/0.5μl)能明显抑制NRM的PEN痛放电，最大抑制率为71.5±5.9％；在NCF或中脑导水管周围灰质（PAG）预先注射纳络酮（lμg／0.5μl）均可使TRH的上述抑制效应显著减弱。提示，NCF内的TRH可能参与伤害性信息的调制过程；在此过程中，NCF和PAG内的阿片受体起介导作用。     

母鼠孕期摄入乙醇对子鼠背侧中缝核内5-羟色胺合成的影响

[目的]探讨母鼠孕期摄入乙醇对子鼠背侧中缝核内5-羟色胺(5-HT)合成的影响.[方法]选择SD母鼠24只,于怀孕第6日随机分为乙醇组、正常对照组和代理母组.乙醇组母鼠每日摄取热量为35 cal的乙醇,正常对照组母鼠为35 cal糊精,代理母组母鼠为普通饲料.乙醇组、正常对照组母鼠分娩6 h后与其子鼠分开,麻醉后心脏采血,检测血液中乙醇和甲状腺素水平.乙醇组及正常对照组新生子鼠由代理母组代理母鼠养育,并分别于出生后0,7,14,21,28 d时麻醉处死子鼠,采用免疫组织化学ABC染色法观察子鼠背侧中缝核内含有5-HT的神经元的分布及形态.[结果]乙醇组母鼠血中乙醇浓度明显高于正常对照组,而乙醇组母鼠血中甲状腺素水平明显低于正常对照组.正常对照组子鼠生后7 d开始出现成熟的含有5-HT的神经元,即可观察到长而突起明显的、双极或多极的含有5-HT的神经元,出生后14 d开始出现含有5-HT神经元突起所形成的分支及其相互间的连接.乙醇组子鼠始终未出现具有上述表现的成熟的含有5-HT的神经元.在所有时间段中,乙醇组子鼠含有5-HT的神经元数均较正常对照组明显减少,并于生后第7日开始显著减少.[结论]母鼠孕期摄取乙醇不仅可引起血中甲状腺素水平降低,而且可抑制后代背侧中缝核内5-HT的合成及神经元的发育.     

大鼠楔状核内微量注射吗啡、乙酰胆碱对中缝大核痛放电的影响

用玻璃微电极细胞外记录神经元放电与脑核团注药方法，观察大鼠楔状核内微量注射吗啡、乙酸胆碱对中缝大核内痛兴奋性神经元痛放电频率的影响。结果表明；向楔状核分别注入吗啡和乙酰胆碱均能抑制中缝大核的痛放电；若预先向楔状核注射纳络酮和阿托品能分别拮抗吗啡及乙酰胆碱的抑制痛放电效应。单独注入纳络酮或阿托品可引起痛放电频率增加。结果提示：楔状核内某些神经元对中缝大核的痛兴奋性神经元活动起抑制作用，楔状核内的内源性阿片肽与乙酰胆碱参与这一过程，并分别由阿片受体及胆碱能M-受体介导。