大鼠中缝背核至背海马投射纤维递质性质的研究

目的研究大鼠中缝背核至背海马投射纤维的递质性质。方法用辣根过氧化物酶(HBP)逆行追踪法和免疫细胞化学相结合的双重标记技术研究中缝背核5-羟色胺(5-HT)样神经元至背海马投射。结果在中缝背核内可见到HRP标记细胞、5-HT阳性反应细胞和5-HT-HRP双标细胞。结论中缝背核5-HT样神经元至背海马投射为进一步研究海马的生理功能提供了有价值的形态学资料。     

大鼠肠神经系统内γ-氨基丁酸能神经元与乙酰胆碱、一氧化氮、血管活性肠肽的共存关系

目的:探讨-氨基丁酸(GABA)在大鼠肠神经系统中与乙酰胆碱、一氧化氮、血管活性肠肽的共存关系。方法:应用免疫组织化学和免疫荧光双重染色技术对大鼠肠神经系统内谷氨酸脱羧酶(GAD)与乙酰胆碱酯酶(AchE)、一氧化氮合酶(NOS)、血管活性肠肽(VIP)的共存关系进行观察。结果:GAD样阳性神经元主要位于肌间神经丛,与AchE、NOS、VIP存在共存关系。双重标记神经元分别占GAD阳性神经元的5.6%、62.6%和51.1%,而占AchE、NOS、VIP阳性神经元的3.4%、19.8%和43.5%。结论:在肠神经系统中GABA可能通过调节其它神经递质的释放而发挥着间接的调控作用。     

大鼠中缝背核、正中隆起接触脑脊液神经元化学性质的研究

用CB-HRP追踪与免疫细胞化学结合的方法,对大鼠中缝背核、正中隆起接触脑脊液神经元的化学性质进行了研究。将CB-HRP注入第三脑室后,中缝背核、正中隆起内观察到CB-HRP标记细胞。标记细胞分布于中缝背核的腹侧部(在中脑水管腹侧呈对称性分布)及正中隆起的室管膜带。在CB-HRP与5-羟色胺(5-HT)免疫细胞化学结合的切片上,中缝背核及正中隆起内出现三种标记细胞:HRP单标细胞、5-HT免疫反应阳性细胞、HRP/5-HT双标细胞,双标细胞中为中小型、三角形或圆形。上述结果提示:中缝背核、正中隆起存在着5-HT能触液神经元。     

GAD67-GFP基因敲入小鼠GFP与nNOS在嗅球中的表达和共存研究

目的:探究GAD67-GFP基因敲入小鼠嗅球各细胞层中GAD67阳性神经元的分布及与一氧化氮合酶(bNOS)的共存。方法:对该实验室繁育的成年GAD67-GFP基因敲入小鼠利用聚合酶链式反应(PCR)进行基因型等鉴定,取阳性GAD67-GFP基因敲入小鼠嗅球做冰冻切片进行尼氏染色、免疫荧光染色,观察GAD67阳性神经元在嗅球各细胞层中的分布比例及与bNOS共存。结果:GAD67阳性神经元在嗅小球层、僧帽细胞层、颗粒细胞层所占比例分别为:(42.98±0.92)%、(23.64±0.84)%、(77.75±0.84)%,bNOS阳性神经元在球旁细胞层、僧帽细胞层有强阳性分布,而在颗粒细胞层几乎没有分布。GAD67与bNOS仅在嗅小球层偶有共存。结论:GAD67阳性神经元主要分布于嗅小球层与颗粒细胞层,GAD67与bNOS仅少数共存于嗅小球层。     

大鼠中缝背核至背海马投射纤维递质性质的研究

目的：研究大鼠中缝背核至背海马投射纤维的递质性质。方法：用辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）逆行追踪法和免疫细胞化学相结合的双重标记技术研究中缝背核５－羟色胺（５－ＨＴ）样神经元至背海马投射。结果：在中缝背核内可见到ＨＲＰ标记细胞、５－ＨＴ阳性反应细胞和５－ＨＴ－ＨＲＰ双标细胞。结论：中缝背核５－ＨＴ样神经元至背海马投射为进一步研究海马的生理功能提供了有价值的形态学资料。     

大鼠中枢内源性镇痛系统内GABAB受体与5-HT共存神经元的观察

目的：观察GABAB受体（GABABR）与5－HT在大鼠中脑导水管周围灰质（PAG）,中缝核簇和巨细胞网状核a（部（GiA)神经元内的共存,方法：GABABR和5－HTGABABR5－HT和GABA特异性抗体的免疫荧光组织化学双重及三重染色技术,结果：GABABR／5－HT双标神经元胞体较密集地见于中缝背核,中缝正中核,中缝桥核,中缝大核,中缝苍白核,中缝隐核,此外,PAG和GiA内也可见双标神经元,GABA样阳性终末与GABABR／5－HT双标神经元的胞体和树突形成密切接触,结论：PAG,K中缝核簇和GiA内的5－HT能神经元几乎均呈GABABR样阳性,GABA能终末与GABAB受体／5－HT双标神经元形成密切接触,GABA可能通过GABAB受体调节5－HT能神经元的活动,参与对伤害性信息传递的的调控。     

中缝背核触液神经元对荧光活性染料DiI亲和性的实验研究

目的 观察荧光染料DiI标记中缝背核触液神经元的可行性.方法 6只雄性SD大鼠,侧脑室注射1％3μl的DiI染料,3天后经4％多聚甲醛灌注固定,冰冻切片机切片,共聚焦显微镜下观察,并进行连续光学切片兼对标记的触液神经元进行三维重塑.结果 DiI对中脑导水管腹侧处中缝背核内的触液神经元标记清楚,且阳性标记神经元的三维重塑显示,中缝背核触液神经元的胞体和近胞体的一级树突可被清楚标记.结论 中缝背核触液神经元对荧光活性染料DiI的亲和力较强,脑切片无需进行其他染色处理,可直接在荧光显微镜下观察到触液神经元,是一种示踪标记中缝背核触液神经元的良好方法.     

中缝背核注射对氯苯丙氨酸观察睡眠的变化及5-羟色胺神经元形态学的改变

目的观察大鼠中缝背核(DRN)微量注射对氯苯丙氨酸(PCPA)后睡眠的变化及5-羟色胺(5-HT)能神经元的形态学改变.方法采用核团微量注射、多导睡眠描记和免疫组织化学技术.结果DRN内微量注射PCPA(10μg)引起睡眠时间增加,尤以深慢波睡眠增加明显;免疫组织化学显示DRN内5-HT阳性神经元明显减少.结论大鼠DRN微量注射PCPA后睡眠增加且5-HT阳性神经元明显减少,提示5-HT神经元参与睡眠调节.     

小鼠双侧杏仁核去5-HT支配后的抑郁样行为学变化及杏仁核内FosB／△FosB的异常表达

目的探讨双侧杏仁核去5-羟色胺（5-HT）支配后小鼠的行为学变化,投射到杏仁核的5-HT能神经纤维的精确来源以及杏仁核神经元的异常功能活动,为验证杏仁核-中缝核群5-HT在抑郁症发病机制中的联系提供实验资料。方法雄性昆明小鼠32只,随机分为对照组和实验组,每组各16只,应用脑立体定位注射技术向双侧杏仁核注射5,7-双羟色胺（5,7-DHT,5μg／侧）,悬尾实验和强迫游泳实验检测抑郁行为;脑石蜡切片H—E染色检测5-HT能投射神经元的位置;脑冰冻切片免疫组织化学染色检测杏仁核FosB／AFosB的表达。结果①行为学检测：实验组小鼠强迫游泳无动时间和悬尾无动时间较对照组显著减少（P〈0．01）;②H—E染色：实验组小鼠中缝背核尾侧份与中缝正中核嘴侧份的部分神经元胞体皱缩变形,胞质呈深紫伊红色染色,尼氏小体溶解或消失,胞核缩小或消失;③免疫组织化学染色：FosB／△FosB阳性神经元在实验组小鼠杏仁核明显增多,与对照组相比差异显著（P〈0．01）。结论杏仁核的5-HT能纤维投射主要来自中缝背核的尾侧和中缝正中核的嘴侧;单独的杏仁核去5-HT支配即可引发小鼠产生抑郁样行为;杏仁核内的即早基因FosB／△FosB在抑郁样行为形成的相关精神病理学机制中占有重要地位。     

大鼠中缝背核内一氧化氮合酶阳性神经元向伏隔核的投射

目的:观察大鼠中缝背核内一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元向伏隔核的投射,为阐明一氧化氮(NO)在中缝背核与伏隔核的纤维联系中的作用提供有价值的形态学依据。方法:用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(NADPH d)法结合辣根过氧化物酶(HRP)逆行追踪法,观察大鼠中缝背核内NOS阳性神经元向伏隔核的投射。结果:在中缝背核内观察到HRP/NOS双标记神经元,所占比例为5%。结论:中缝背核内有NOS阳性神经元向伏隔核投射。     

抑制 NO 合酶观察大鼠中缝背核 5-HT 神经元免疫阳性反应的变化

目的：通过抑制ＮＯ合酶，观察大鼠中缝背核５ ＨＴ神经元免疫阳性反应的变化，旨在探讨脑内内源性ＮＯ与５ ＨＴ神经元之间的关系。方法：应用免疫组织化学技术，观察大鼠腹腔给予ＮＯ合酶抑制剂—硝基左旋精氨酸（Ｌ ＮＮＡ）后不同时间（１ｈ，２ｈ，４ｈ）中缝背核５ ＨＴ神经元免疫阳性细胞数的变化。结果：给予Ｌ ＮＮＡ后２～４ｈ，大鼠中缝背核５ ＨＴ神经元阳性细胞数明显增多。与对照组比较，Ｐ＜００１。结论：内源性ＮＯ合成抑制可使中缝背核５ ＨＴ神经元免疫阳性反应增强。提示中缝背核５ ＨＴ神经元的功能活动可能与脑内ＮＯ有关。     

刺激和损毁蓝斑核对缝际大核神经元自发放电及其伤害性反应的影响

在清醒麻痹大鼠观察了电刺激和损毁脑桥蓝斑核对缝隙大核神经元自发放电及其对伤害性刺激反应的影响。大多数神经元放电频率在刺激蓝斑核后减少;损毁后增加。大多数对伤害性刺激的反应可被蓝斑核刺激所压抑;损毁后则加强。损毁蓝斑核的效应在损毁后10分钟时最显著,以后随时间而减弱。本工作说明蓝斑核对缝隙大核神经元活动有紧张性抑制作用,这种抑制作用可能与蓝斑核在脑干水平拮抗镇痛有关。     

缰外侧核向中缝背核腹侧亚核投射的递质性质

取20只大白鼠,应用HRP和免疫组化双标记法对缰外侧核向中缝背核腹侧亚核投射的递质性质进行了研究,结果在缰外侧核看到三种细胞:①HRP单标记细胞;②SP免疫阳性反应细胞;③SP-HRP双标记细胞。实验从形态学上证明缰外侧核的SP能纤维投射到中缝背核腹侧亚核,该结果对进一步探讨缰核、中缝背核在针刺镇痛中的相互关系提供了形态学依据。     

5-羟色胺能神经元向三叉神经运动核和感觉核的投射

目的 观察５－羟色胺（５－ＨＴ）能神经元向三叉神经运动核（Ｕｍ）和三叉神经脊束核尾侧亚核（Ｖｃ）的投射。方法 荧光金（ＦＧ）逆行单标或ＦａｓｔＢｌｕｅ（ＦＢ）和Ｄｉａｍｉｄｉｄｎｏ Ｙｅｌｌｏｗ（ＤＹ）逆行双标与免疫荧光组化染色相结合的双重或三重标记技术。结果 将ＦＧ注入Ｖｍ或Ｖｃ后,在中缝核簇和中脑导水管周围灰质内可见ＦＧ逆标并呈５－ＨＴ样阳性的双重标记神经元;将ＦＢ和ＤＹ同时分别注入Ｖｍ和Ｖｃ     

大鼠中缝背核至尾壳核的SOM能投射——HRP法与PAP法的联合研究

采用ＨＲＰ逆行追踪与免疫细胞化学相结合的方法对大鼠中缝背核至尾壳核的ＳＯＭ能纤维投射进行了研究。结果显示，将ＨＲＰ注射至尾壳核，并用ＨＲＰ＿ＰＡＰ法联合应用技术后，在大鼠中缝背核内均可见到明显的双重染色胞体，即ＨＲＰ＿ＳＯＭ双标记核周体，其分布具有一定的局部定位关系。这类细胞主要位于中缝背核尾侧部，且缝际区多于外侧区。表明中缝背核至尾壳核的投射，含有生长抑素样纤维。此外，在该核内还可见到数量不等的ＨＲＰ和ＳＯＭ能单标记细胞，它们散布在双标记细胞之间。上述结果表明，大鼠尾壳核接受中缝背核的传入投射，该投射纤维呈现ＳＯＭ样免疫反应。     

吗啡戒断大鼠中缝背核FOS、NADPH-d的表达

目的　研究吗啡戒断大鼠中缝背核FOS、NADPH -d酶表达的变化。方法　运用免疫组织化学、组织化学方法观测吗啡戒断大鼠动物模型中缝背核FOS、NADPH -d酶表达的变化。结果　吗啡戒断组FOS、NADPH-d阳性神经元、纤维和终末表达明显增加 (P <0 .0 5 )。结论　一氧化氮参与吗啡耐受、依赖和戒断的转导与调控 ;中缝背核可能是介导吗啡耐受、依赖和戒断的部位之一。     

促甲状腺激素释放激素注入大鼠楔状核对中缝大核痛放电的影响

用玻璃微电极记录大鼠中缝大核（NRM）内痛兴奋性神经元（PEN）的单位放电，观察楔状核（NCF）注入微量促甲状腺激素释放激素（TRH）对PEN痛诱发放电频率的影响，并初步探讨TRH与阿片肽之间的关系。结果显示，NCF内注入TRH（0.5μg/0.5μl)能明显抑制NRM的PEN痛放电，最大抑制率为71.5±5.9％；在NCF或中脑导水管周围灰质（PAG）预先注射纳络酮（lμg／0.5μl）均可使TRH的上述抑制效应显著减弱。提示，NCF内的TRH可能参与伤害性信息的调制过程；在此过程中，NCF和PAG内的阿片受体起介导作用。     

小鼠部分中枢核团cAMP和cGMP含量的昼夜节律

为阐明小鼠视交叉上核、中缝背核和松果体之间昼夜节律信号的联系和传递关系,测定了这些核团细胞内cAMP和cGMP含量的昼夜波动,对其节律性变化经余弦法分析处理后,得到各项余弦参数和拟合的余弦方程,并在此基础上推测了各核团第二信使节律的传递关系。     

中缝大核内神经降压素对大鼠痛和电针镇痛作用的影响

目的 探讨大鼠中缝大核(NRM)内神经降压素(NT)在电针镇痛中的作用，分析内源性NT和5-HT在电针镇痛中作用的相互关系。方法 以钾离子透入法引起大鼠甩尾反应的电流强度(mA)为痛反应指标，测定动物痛阈，观察中缝大核内神经降压素对痛和电针镇痛的影响。结果 大鼠中缝大核内微量注射神经降压素后，大鼠电针镇痛的效应明显增加；注入抗神经降压素血清或NT拮抗剂后，大鼠电针镇痛效应则明显降低。大鼠中缝大核内注入噻庚啶后，可阻断NT电针镇痛的效应。结论 大鼠中缝大核内的神经降压素在电针镇痛复杂病理生理过程中发挥着重要作用。至少其部分效应可能是通过内源性5-HT系统中介的。