离体兔肺灌注模型的建立及不同成份保存液的肺保护研究

目的:建立离体兔肺灌注模型,研究不同成分保存液对离体兔肺的保存作用.方法:将30只兔分为5组分别为对照组(A组)、uw液 硝酸甘油组(B组)、uw液 前列腺素E1(C组)、UW液与自身动脉血1:2混合组(D组)、UW液与自身动脉血1:4混合组(E组).切取兔心肺作为离体心肺模型,对心肺模型进行冷灌注、低温保存.分别在2 h和4 h取肺部分标本做电镜分析.4 h末检测肺湿干重比、肺气道压力.离体肺接呼吸机后将自身静脉血用泵从主肺动脉泵入,用负压吸引真空试管取左心房血液做血气分析.结果:E、D组对于肺组织气体交换功能的保护相当,明显优于其他组.B、C组对于肺实质细胞的气体交换功能的保护结果相当,明显优于A组.结论:本实验模型可靠.稳定性好.在UW液中加入自体动脉血对离体肺灌注可以使肺保存时间明显延长、肺气体交换功能保存良好,明显优于其他组.在UW液中加入前列腺素E1和硝酸甘油对离体肺保护作用再次得到肯定,明显好于对照组,但和自体动脉血组相比仍有不足.     

前列腺素E1?腺苷对离体兔肺保护作用良好

目的:研究前列腺素E1以及腺苷对离体兔肺的保护作用.方法:将18只新西兰大白兔分为3个实验组,分别为单纯UW液(A组、对照组)、UW液+前列腺素E1(B组)、UW液+腺苷(C组).切取实验兔整体心肺作为离体心肺模型,对心肺模型进行冷灌注、低温保存.分别在2 h末和4 h末,取肺部分标本做电镜分析.于4 h末,结扎右肺门,取右肺检测肺湿/干重比(W/D)、测肺气道压力(Paw).左侧离体心肺接呼吸机模拟移植手术后呼吸,并将自身静脉血用泵从主肺动脉泵入,用负压吸引真空试管取左心房血液做血气分析.结果:B组肺组织气体交换功能的保护作用以及降低供体肺保存过程中含水量的作用明显优于其他组;降低气道压力和C组相当,明显优于对照组.C组肺实质细胞的气体交换功能的保护、降低肺含水量以及降低气道压力明显优于A组.结论:UW液中加入前列腺素E1进行离体肺灌注可以使肺保存时间明显延长、肺气体交换功能保存良好.     

评价含抑肽酶肺保护液疗效的实验研究

目的：利用兔在体肺保存模型．评价含抑肽酶的改良肺保护液对肺的保护作用。方法：新西兰白兔30只,随机分为对照组、低钾右旋糖酐液（LPD液）组、抑肽酶组．每组10只。制备免在体左肺保存模型,对照组仅阻断肺门和冷藏．不灌肺保护液,LPD液组和抑肽酶组分别经肺动脉插管,在体灌注LPD液和含抑肽酶的LPD液,完毕后将左肺下叶放入特制的肺保存器内在体低温冷藏2h．移去肺保存器。开放肺门再灌注2h。在实验过程中抽取肺静脉血标本行血气分析,取肺组织行病理学检查．同时检测支气管灌洗液中性粒细胞百分比及肺湿／干重比以评价肺保存效果。结果：抑肽酶组再灌注5min和2h两个时间点肺静脉血氧分压显著高于LPD液组和对照组（P〈0．05）。抑肽酶组肺泡出血及肺结构损害分级均较对照组及LPD组轻微（R0．05）。肺湿／干重比抑肽酶组较对照组和LPD液组均有非常显著的差异（P〈0．01）。结论：含抑肽酶的肺保护液对肺的保护效果确切,其保护作用明显优于单纯LPD液。     

Euro-Collins液、LPD液、前列腺素E1及硝酸甘油对离体肺保护作用的比较

目的 应用兔离体肺再灌注模型研究Euro-Collins液，低钾保护液（LPD）及LPN液（前列腺素E1，硝酸甘油加入LPD）在离体肺保护中的作用。方法 27只实验用兔随机分为3组（n=9)，分别以Euro-Collins液（E组），LPD液（L组）及LPN（LPN组）进行肺灌洗及保存。每组再分为3小组（各含6个肺）分别保存2，4，8h后进行再灌注，测定再灌注后肺血管阻力（PVR),肺通气阻力（LR），肺含水量（LW）及PO2以了解肺保护效果。结果 保存8h后E组LR显著增高，且明显高于L组及LPN组LPN组PVR在保存各时间明显低于E组及L组。结论 LPN组在保护肺血管内皮细胞及降低肺血管阻力方面优于E组及L组，作用机制可能通过扩张肺动脉，改善肺早期灌洗及抑制中性粒细胞，血小板在肺内聚集而减轻肺再灌注损伤。     

同种异体犬单肺移植的实验研究

目的：通过同种异体犬单肺移植，掌握供肺的灌注、切取、保存和修剪方法以及爱体单肺移植的手术技巧。方法：杂种犬8只（供体4只，受体4只），供体犬经肺动脉顺行及逆行灌注改良Euro-Coilins（iEC）液后，整块切取心肺，进行保存和修剪。受体犬取后外侧切口第4肋间入胸，切除一侧全肺后，按支气管-肺动脉-左房袖的顺序吻合。结果：全组实验无手术死亡，移植后肺动脉通畅良好，受体犬存活26h～14d。结论：通过实验，掌握了同种异体肺移植供肺获取及植入全过程，为进一步开展同种异体肺移植研究打下了基础．并为临床开展人体肺移植积累了经验。     

肺动脉和支气管动脉双循环冲洗在供肺保存中的作用

目的：探讨肺动脉和支气管动脉双循环冲洗在供肺保存中的作用。方法：12只健康新西兰白兔随机分为2组；对照组（肺动脉冲洗组）和实验组（肺动脉和支气管动脉双循环冲洗组），每组6只。供肺经过24h保存后采用离体肺循环灌流模型再灌流60min。灌流中观察2组肺动静脉血氧分压差（△po2）、二氧化碳分压差（△pco2）、肺动脉压（pPA）、气道压（pAW）、静态肺顺应性（Cstat）的变化和2组保存末、灌流末肺组织和灌流末支气管肺泡灌洗液中的总磷脂（TPL）、卵磷脂（PC）、卵磷脂／总磷脂（PC／TPL）、卵磷脂／鞘磷脂（L／S）的变化。比较2组间肺质量湿干比（W／D）。结果：实验组灌流中△po2、△pco2、Cstat明显高于对照组，pPA、pAW明显低于对照组，保存末、灌流末肺组织和灌流末支气管肺泡灌洗液中的TPL、PC、PC／TPL、L／S均明显高于对照组，W／D明显低于对照组。结论：肺动脉和支气管动脉双循环冲洗能保护肺表面活性物质磷脂，从而改善供肺保存和再灌注后的肺功能。     

用新的离体肺灌注模型探讨不同浓度的维生素C对大鼠肺缺血再灌注损伤的影响

目的:建立一种新的大鼠离体肺灌注模型,用于肺缺血再灌注损伤的研究;用该新模型探讨不同浓度的维生素C对肺缺血再灌注损伤的影响。方法:将32对Sprague Dawley大鼠随机分为4组:A组(Euro-collins液)、B组(维生素C100mg/L)、C组(维生素C200mg/L)、D组(维生素C400mg/L)。每组8对,每对中一只作为供体提供肺,另外一只作为受体鼠用于灌注。取肺并于4℃保存6h后连接体外灌注装置,灌注1h。动态监测气道压、肺动脉压,灌注完毕后行动静脉血气分析,取肺组织分析干湿比、MDA、ATP,并行组织病理学检查。结果:该灌注模型运转顺利,供体、受体的手术时间分别为30min、25min。与A组相比,B、C、D组肺组织再灌后的含水量、MDA、动脉压均降低(P<0.05),ATP、PaO2水平提高(P<0.05),再灌后的组织损伤也轻。A、B、C3组的气道压于再灌后无明显差异,但D组低于其它3组(P<0.05)。结论:该离体肺灌注模型用于研究大鼠肺缺血再灌注损伤有很多优点,耗费少,简单易行,维生素C对肺缺血再灌注损伤有保护作用,可降低肺血管阻力,减少氧自由基的生成,提高ATP水平及肺组织的氧合能力,并减轻肺水肿及组织损伤,而增加保存液中维生素C的浓度,可能对肺组织提供更好的保护作用。     

L-精氨酸在供肺离体保存中的作用

目的:探讨NO前体L-精氨酸(L-Arg)在供肺离体保存中的作用及可能机制. 方法:将实验犬10只随机分为2组,每组5只,对照组以4℃ euro-collins(EC)液灌注及保存供肺,实验组以4℃含L-Arg(2 g/L)的EC液灌注及保存供肺. 分别于肺离体低温保存30,60,120,180和240 min后取材,测定不同时间点NO、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量变化及240 min肺组织的湿干质量比(W/D)和超微结构的改变. 结果:两组在不同时间点NO,SOD,MDA的含量和W/D有显著性差异(P<0.05, P<0.01);实验组肺组织中NO及SOD含量明显增高,MDA含量显著降低. 随着时间的延长,NO,SOD均有下降趋势,但实验组下降幅度较对照组小. MDA均轻度上升,但实验组上升幅度较对照组小. W/D测定及光镜检查发现,实验组损伤明显轻于对照组(P<0.05). 结论:在EC液中加入L-Arg用于离体肺的灌注和保存,能明显减轻供肺损伤,其机制可能与NO生成增加、氧自由基生成及清除过程的变化有关.     

改良EC液低温灌注犬肺离体组织中一氧化氮与氧自由基变化的研究

目的 探讨改良型EC液低温灌注犬肺离体组织内一氧化氮（NO）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量和湿干重比值（W／D）的变化,旨在为实验动物供肺保存研究提供分子水平的观察依据。方法 4℃改进型EC洗灌注6只健康成年杂种犬肺并离体低温保存,30、60、120、180、240min后取材测定不同时间NO、MDA、SOD含量和W／D,以灌注前为对照组。结果 不同时间点NO、SOD和MDA含量及W／D实验组与对照组之间无显著性差异（P＞0．05）;随时间延长NO、SOD均有下降趋势,MDA、W／D轻度上升。结论 改良EC液具有增加渗透压和清除氧自由基的作用;灌注前肺动脉内注射PGE1及增加代谢底物有助于抑制供体肺保存期间氧自由基的产生。     

经皮体外循环心肺复苏与常规复苏的对比性实验研究

目的：探讨经右颈动脉插管急诊体外循环心肺复苏的方法与效果。方法：健康成年雄性杂种犬18只平均分成3组,窒息心跳停止建立模型,A组行常规心肺复苏,B组经股动静脉穿刺体外循环复苏,C组经颈动脉、股静脉穿刺体外循环复苏。结果：B、C两组自主循环恢复（ROSC）率显著高于A组,ROSC前C组冠脉灌注压（CPP）、平均动脉压（MAP）高于B组。结论：颈动脉插管较股动脉插管体外循环心肺复苏提供更佳的冠脉灌注压和血气,缩短自主循环恢复时间。