转化生长因子β1对胰腺星状细胞中结缔组织生长因子基因的调控作用

目的 探讨转化生长因子β1(TGF-β1)对大鼠结缔组织生长因子(CTGF)基因启动子活性的调控作用。方法 将大鼠CTGF基因启动子片段与荧光素酶报告基因组成重组体pcTGF-luc。采用脂质体转染方法将该质粒转至原代分离并培养的2～5代大鼠胰腺星状细胞(PSCs)中,24h后分别在不同时间和不同浓度的体外CTGF-β1刺激下用Dual-luciferase报告系统检测相应荧光素酶的活性。结果 TGF-β1表现为以剂量和时间依赖的方式上调PSCs中CTGF基因启动子活性,TGF-β1在短时间内即可使CTGF基因启动子活性明显增高,并达到高峰,且能有效地保持至36h左右。结论 在PSCs中,TGF-β1主要在转录水平调节CTGF表达,较小浓度和较短时间即可使CTGF启动子活性增强。     

转化生长因子β1基因修饰的小鼠树突状细胞在移植体内的迁移？…

目的 观察β型转化生长因子（ＴＧＦβ１）基因修饰的Ｂ１０小鼠骨髓树突关细胞（ＤＣ）在Ｃ３Ｈ小鼠体内的迁移和存活,以探讨ＤＣ生物学特性与移植耐受性的关系。方法 从Ｂ１０小鼠骨髓分离ＤＣ前体细胞,在粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子＋β型转化生长因子（ＧＭ－ＣＳＦ＋ＴＧＦβ）条件下培养增殖（ＧＣ１）并转导Ａｄ－ＬａｃＺ（Ｄｃ２）或Ａｄ－ＴＧＦβ１（ＤＣ３）,每组５×１０＾５个细胞注入Ｇ３Ｈ小鼠后掌皮下,分别     

转化生长因子β1基因修饰的小鼠树突状细胞在移植体内的迁移与生存

目的观察β型转化生长因子（ＴＧＦβ１）基因修饰的Ｂ１０小鼠骨髓树突状细胞（ＤＣ）在Ｃ３Ｈ小鼠体内的迁移和存活,以探讨ＤＣ生物学特性与移植耐受性的关系。方法从Ｂ１０小鼠骨髓分离ＤＣ前体细胞,在粒细胞巨噬细胞集落刺激因子＋β型转化生长因子（ＧＭＣＳＦ＋ＴＧＦβ）条件下培养增殖（ＤＣ１）,并转导ＡｄＬａｃＺ（ＤＣ２）或ＡｄＴＧＦβ１（ＤＣ３）。每组５×１０５个细胞注入Ｃ３Ｈ小鼠后掌皮下,分别于第１、２、７及１４天取淋巴器官,以免疫组织化学方法检测ＩＡｂ阳性细胞的分布及数量。结果各组ＤＣ在Ｃ３Ｈ小鼠体内的迁移及分布均相似,即ＩＡｂ阳性细胞首先出现在窝淋巴结被膜下,继而迁入脾的Ｔ细胞依赖区和边缘区,第７天脾内阳性细胞数达顶峰。与ＤＣ１组相比,ＤＣ２在脾内的阳性细胞数减少,ＤＣ３阳性细胞数在各时间点都为最高。结论ＤＣ经转导ＡｄＬａｃＺ,可增加其免疫活性,使宿主加速排斥反应;而转导ＡｄＴＧＦβ１可使ＴＧＦβＤＣ表达ＴＧＦβ１,维持ＤＣ于功能不成熟状态,从而提高宿主的耐受性。     

动员人外周造血祖细胞定向诱导树突状细胞

目的 探讨由动员人外周造血祖细胞体外培养扩增获得的树突状细胞（DC）的生物学特性, 为临床应用肿瘤树突状细胞疫苗建立制备方法。方法 用CS-3000血细胞分离机分离预经干细胞动员的患者外周血单个核细胞（PBMC）,去除淋巴细胞和单核细胞,阴性选择得到外周造血祖细胞,加入rhGM-CSF和rhIL-4培养10~14 d成为树突状细胞,然后进行形态学检测、细胞表型和T细胞刺激能力分析。结果 由外周造血祖细胞来源的树突状细胞可以达到(0.5~1.0)×108数量级;高倍镜和电镜照片显示典型的树突状细胞形态和超微结构;流式细胞仪分析显示细胞高表达HLA-Ⅰ、Ⅱ类抗原和共刺激分子CD80、CD86;同种混合淋巴细胞反应显示细胞具有高效的刺激静止T淋巴细胞活化增殖的能力。结论 用血细胞分离机分离动员外周造血祖细胞体外定向诱导制备树突状细胞可以作为制备肿瘤疫苗的新途径。     

动员人外周造血祖细胞定向诱导树突状细胞

目的 探讨由动员人外周造血祖细胞体外培养扩增获得的树突状细胞（ＤＣ）的生物学特性。为临床应用肿瘤树突状细胞疫苗建立制备方法。方法 用ＣＳ－３０００血细胞分离机分离预经干细胞动员的患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）,去除淋巴细胞和单核细胞,阴性选择得到外周造血祖细胞。加入ｒｈＧＭ－ＣＳＦ和ｒｈＩＬ－４培养１０￣１４ｄ成为树突状细胞,然后进行形态学检测、细胞表型和Ｔ细胞刺激能力分析。结果 由外周造血祖细     

Smad3小干扰RNA在转化生长因子β1作用下对树突状细胞成熟及功能的影响

目的 研究通过RNA干扰技术阻断外周单核细胞来源的树突细胞(DC)内的Smad3,并在转化生长因子β1(TGF-β1)作用下对DC的成熟和免疫抑制作用的影响.方法 设计针对Smad3特异性小干扰RNA(siRNA),利用RNAiMAX转入DC,并用RT-PCR检测转染效果.实验分Control-DC组、TGF-β1-Control-DC组、TGF-β1-Negative siRNA-Smad3 DC组和TGF-β1-siRNA-Smad3 DC组.流式检测各组DC成熟表型的变化,ELISA检测各组DC上清白细胞介素12(IL-12)的水平,CCK-8法检测DC刺激同种异体T细胞增殖的能力.结果 TGF-β1-siRNA-Smad3 DC组表面成熟标志CD80、CD83、CD86、HLA-DR及IL-12分泌水平明显高于TGF-β1-Control-DC组和TGF-β1-Negative siRNA-Smad3 DC组(P＜0.05),且TGF-βNegative siRNA-Smad3 DC组刺激同种异体T细胞增殖的能力显著增强.结论 通过阻断DC的Smad3表达,可以逆转TGF-β1对DC成熟和免疫功能的抑制.     

转化生长因子β与细胞周期调控

自80年代中叶,Derynck第一次成功地从小鼠细胞中分离出转化生长因子β(TGF-β)以来,人们对其复杂的生物学行为进行了广泛的探讨。由于该细胞因子具有调节细胞生长和分化的功能,并且能与抑癌基因相协同,对上皮肿瘤产生强大的抑制效应,故已引起肿瘤学家的极大兴趣。随着TGF-β研究的进一步深化,将有利于阐明细胞癌变机理,并为恶性肿瘤的治疗开辟新途径。     

转化生长因子-β1以浓度依赖的方式重组人成熟树突状细胞的细胞骨架丝状肌动蛋白

目的：探索转化生长因子β1（tansforming growth factor-β1,TGF-β1）对人成熟树突状细胞（mature dendritic cells,mDCs）骨架丝状肌动蛋白（filament actin,F-actin）及其部分骨架结合蛋白表达的影响,为深入理解树突状细胞（dendritic cells,DCs）的生物学行为和提高基于DCs的抗肿瘤免疫治疗的临床效率提供线索。方法：不同浓度的TGF-β1处理mDCs后,用激光共聚焦显微镜和免疫印迹实验分别研究细胞骨架F-actin的结构和部分细胞骨架结合蛋白表达水平的变化。结果：（1）与对照组相比,TGF-β1处理后的mDCs的F-actin出现了明显重排,F-actin的表达量在3 ng/ml组下调（P=0.000）,在5 ng/ml组上调（P=0.000）。（2）mDCs表面丝状突起长度和数量的变化,长度在3 ng/ml和5 ng/ml组较对照组细、短（P=0.001,0.000）;数量在1、3 ng/ml和5 ng/ml组较对照组少而稀疏（P=0.000）;在7 ng/ml组mDCs表面丝状突起长度和数量的变化均无统计学意义（P=0.114）;通过回归分析细胞丝状突起长度和数量与F-actin表达量之间存在非线性相关性（R2分别为0.828和0.746,P=0.000）。（3）细胞骨架蛋白结合蛋白的表达,fascin1在所有实验组中均出现了下调（P=0.001、0.000）;p-cofilin1与总cofilin1的表达水平比在1 ng/ml和3 ng/ml组均下调（P=0.000）;profilin的表达在1、3 ng/ml和5 ng/ml组均上调（P=0.001、0.001、0.013）。结论：TGF-β1以浓度依赖的方式影响mDCs的细胞骨架F-actin结构及其部分结合蛋白的表达,提示在临床上施行基于DCs的抗肿瘤免疫治疗时,需以适当的方式阻断TGF-β1的信号转导通路,这对进一步深入理解DCs的生物学行为和肿瘤的免疫逃逸机制具有重要意义。     

基质细胞衍生因子—1及其受体在造血调控中的作用

造血干／祖细胞（HSC）移植是目前治疗多种恶性肿瘤及遗传疾病的主要方法,而SC归巢骨髓的能力则决定了移植的成功与否。目前的研究证实,基质细胞衍生因子－1（SDF－1）及其受体（CXCR4）在HSC增殖、分化及促进其归巢骨髓,重建造血功能中发挥着重要作用。本文就SDF－1在造血调控中的作用及其机制作一综述。     

转化生长因子-β1对鼠肝细胞凋亡调控作用的研究

目的：本研究旨在明确正常肝和肝硬化肝细胞中转化生长因子-β1(TGF-β1)的作用及其与凋亡的关系。方法：通过50％四氯化碳(CCl4)腹腔注射诱发BALB／c小鼠形成肝硬化模型；应用改良的胶原酶原位灌注法分离正常和肝硬化小鼠的肝细胞；利用1．5％的琼脂糖凝胶电泳观察DNA梯形条带，并应用DNA荧光染料Hoechst 33342对正常肝细胞进行染色，以检测TGF-β1诱导的凋亡。结果：以胶原酶原位二步灌流法分离肝细胞的活率为95．2％。正常肝细胞予以TGF-β1处理后，应用1．5％的琼脂糖凝胶电泳可以发现具有凋亡特征的梯形条带。硬化肝细胞则很少出现梯形条带。经TGF-β1处理的正常肝细胞应用Hoechst染色发现．其凋亡率明显高于未处理组。结论：肝硬化肝细胞不能像正常肝细胞那样发生TGF-β1诱导的凋亡，提示肝硬化肝细胞的抑制性生长调控机制已经受损。     

转化生长因子-β1通过活化ERK途径和上调Ets-1蛋白刺激基质金属蛋白酶-9产生

目的　探讨转化生长因子 -β1(TGF -β1)调节基质金属蛋白酶- 9(MMP -9)生成的分子机理。方法　选用小鼠肾小球足突细胞系,以细胞因子TGF -β1为刺激物,建立炎症细胞模型,分别应用明胶酶谱法和逆转录 PCR方法观察TGF -β1刺激细胞后培养上清MMP- 9活性及细胞MMP- 9mRNA变化;应用Western蛋白印迹检测TGF β1调节MMP-9中对ERK信号途径和转录因子Ets 1蛋白的影响。结果　对照组细胞上清有微弱MMP- 9活性, TGF β1刺激细胞 24h后培养上清MMP 9活性较对照组明显升高 (P<0 01),并呈TGF -β1刺激剂量依赖趋势; TGF- β1刺激 6h细胞MMP 9mRNA较对照组明显增加 (P<0 01),并且维持高水平至 24h;TGF- β1刺激细胞 4h转录因子Ets- 1蛋白增加(P<0 01),持续高水平至 24h。TGF- β1可以刺激细胞ERK-1 /2活化; ERK-1 /2活化阻断剂PD98059预处理细胞,可以阻断TGF β1刺激引起的Ets 1蛋白、MMP -9活性、MMP -9mRNA增加的效应。结论　以上结果提示TGF β1是通过活化细胞内ERK信号途径和上调转录因子Ets -1蛋白刺激足突细胞MMP- 9mRNA表达,继而蛋白活性增加。     

转化生长因子及大黄酸对肾小球系膜细胞葡萄糖转运蛋白功能的影响

目的对人肾小球系膜细胞葡萄糖转运蛋白-1（GLUT1）进行鉴定。研究GLUT1的作用特点,TGF-β1对其影响以及大黄酸的干预作用。方法分别用RT-PCR,免疫荧光染色,流式细胞仪和［3H］-2脱氧葡萄糖摄入率,对系膜细胞GLUT1mRNA表达,蛋白质分布和功能进行鉴定。观察不同浓度TGF-β1在加或不加大黄酸的情况下对系膜细胞葡萄糖摄人以及GLUT1mRNA表达的影响。结果人类肾小球系膜细胞上存在功能性的GLUT1。TGF-β1能刺激系膜细胞GLUT1mRNA的表达,并增加系膜细胞葡萄糖的摄入率[TGF-β1（836±35）％,对照（154±12）％、P＜0.01]。大黄酸对正常糖浓度培养条件下系膜细胞糖摄入无影响,但能明显抑制TGF-β1增加系膜细胞糖摄入的作用［TGF-β1为（198±28）％、大黄酸为（576±12）％,P＜0.01]。结论首次报道人系膜细胞上存在GLUT1,TGF-β1能从转录水平上调控GLUT1的功能,使系膜细胞葡萄糖摄入增加,但该作用能够明显地被大黄酸所抑制。     

转化生长因子β1通过Smad2途径调节足细胞结缔组织生长因子表达

目的　研究肾脏足细胞是否表达结缔组织生长因子 (CTGF)以及TGFβ1对CTGF表达调控的信号途径。方法　以肾小球足细胞为对象 ,应用Western印迹分析技术 ,观察了 3种促进肾脏纤维化的蛋白因子 ,转化生长因子 β1(TGFβ1)、血小板源生长因子 (PDGF)和血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )对体外培养的足细胞CTGF蛋白表达的影响 ,以及ERK、Smad两条信号途径在TGFβ1调节CTGF蛋白表达中的影响 ;逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测CTGFmRNA的变化。结果　体外培养的足细胞表达基础水平CTGF蛋白 ,2 0ng/mlPDGF和 10 -6mol/LAngII刺激 2 4小时后细胞内CTGF蛋白水平与对照相比差异无显著意义 (P >0 0 5 ) ,而 1ng/mlTGFβ1刺激 2 4h足细胞CTGF蛋白水平显著高于对照 (P <0 0 5 ) ,且增加呈TGFβ1剂量依赖趋势 ;1ng/mlTGFβ1刺激 12h可以使细胞CTGFmRNA表达增加。1ng/mlTGFβ1使足细胞Smad2 和细胞外信号调节激酶 (ERK1/ 2 )磷酸化 ,在刺激 30min达高峰 ;应用丝 /苏氨酸激酶抑制剂Staurosporine抑制Smad2 磷酸化可以消减TGFβ1刺激的CTGF蛋白增加 ,但ERK1/ 2 活化抑制剂PD 980 5 9阻断ERK1/ 2 磷酸化不能减弱TGFβ1刺激CTGF蛋白表达的效应。结论　在足细胞上 ,TGFβ1刺激CTGF表达依赖于Smad2 信号通路的活化 ,而不依赖于ERK1/     

转化生长因子β1对组织工程瓣膜体外构建的作用

目的 研究转化生长因子β1（TGF-β1）对组织工程瓣膜（TEHV）体外构建的影响。方法 采用酶＋去污剂法制备去细胞瓣。脂质体介导pcDNA3．0／TGF-β1基因转染大鼠肌成纤维细胞,48h后G418筛选3周使TGF-β1基因稳定表达。去细胞瓣种植转基因细胞为实验组A,种植未转基因细胞且加TGF-β1（10 μg/L）为实验组B,种植未转基因细胞不加TGF-β1为对照组。2周后HE染色和扫描电镜观察,检测羟脯氨酸和DNA含量及瓣叶最大负荷力。结果 SABC法示转染48h和4周后肌成纤维细胞瞬时和稳定表达TGFβ1。形态学示实验组A、B细胞紧密联合且细胞外基质丰富。羟脯氨酸含量A组（5．83‰±0．67‰）和B组（5．02‰±0．40‰）,均高于对照组（4．34‰±0．47‰）;DNA含量A组（0．126‰±0．013‰）和B组（0．109‰±0．004‰）均高于对照组（0．089‰±0．011‰）;最大负荷力A组（13．4±1．0）N和B组（11．8±1．4）N均高于对照组（10．0±1．1）N增高。结论 TGF-β1能促进细胞生长和细胞外基质分泌,有利于提高TEHV力学性能。     

ERK1/2丝裂原活化蛋白激酶对醛固酮促进肾小管上皮细胞合成转化生长因子β1的作用

目的探讨ERK1/2丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导途径在醛固酮(ALDO)促进肾小管上皮细胞系(HKC)合成转化生长因子β1(TGF-β1)中的作用。方法利用体外培养的HKC细胞行如下试验。(1)不同浓度MAPK三种支通路特异性阻滞剂对其分别进行阻断,以酶联免疫吸附方法(ELISA)检测外源性ALDO作用下HKC合成TGF-β1量的改变。(2)不同浓度及不同作用时间的外源性ALDO刺激HKC,以Western印迹方法检测细胞裂解物中磷酸化ERK1/2以及总ERK1/2表达,并对ERK1/2相对表达量(磷酸化ERK1/2/总ERK1/2)与相应刺激条件下TGF-β1合成量进行相关分析。(3)在不同浓度的安体舒通和糖皮质激素受体阻滞剂RU486作用细胞后,以外源性ALDO刺激HKC,同上方法检测细胞裂解物中磷酸化ERK1/2及总ERK1/2表达。结果(1)15μmol/L及25μmol/LERK1/2通路阻滞剂(U0126)分别使TGF-β1的合成量减低至(87±11)pg/ml及(75±19)pg/ml,而仅使用10-7mol/LALDO刺激作用下HKC中TGF-β1的合成量(121±10)pg/ml,与前者比较差异有统计学意义(P<0·05),而JNK和P38两条支通路阻滞剂(SP600125、SB203580)未使TGF-β1合成量出现显著性变化(均P>0·05)。(2)外源性ALDO可使HKC对ERK1/2相对表达量呈现剂量依赖性增加。10-9及10-7mol/LALDO刺激组ERK1/2相对表达量分别为0·67±0·06及0·80±0·05,显著高于0mol/LALDO组(P<0·05或0·01)。相应浓度醛固酮刺激下ERK1/2相对表达量与TGF-β1合成量之间具有显著正相关关系(R=0·793,P<0·01);10-7mol/LALDO刺激HKC15min后,磷酸化ERK1/2开始出现显著性增加并达到高峰(P<0·01),其相对表达量为0·84±0·06,此后逐渐减低,至360min时其表达量为0·49±0·08,与0min比较差异无统计学意义(P>0·05)。(3)10-7mol/LALDO与10-9、10-7mol/L安体舒通共同孵育HKC30min,可使ERK1/2的相对表达量分别为0·62±0·08及0·60±0·04,显著低于0mol/L安体舒通组(P<0·05或P<0·01),但其表达量仍显著高于未加任何刺激的对照组(P<0·05);10-7mol/LALDO与相应浓度的RU486共同刺激HKC30min未使ERK1/2相对表达量显著低于0mol/LRU486组(P>0·05)。结论ERK1/2信号转导通路可能是介导醛固酮促HKC合成TGF-β1的主要通路之一,醛固酮与胞质内受体结合是其通过活化ERK1/2途径而发挥上述病理作用的重要条件。     

转化生长因子β1（TGF-β1）在胃癌组织中的表达

目的检测转化生长因子β1（transforming growth factor beta 1,TGF-β1）在胃癌组织及其相应正常胃黏膜组织中的表达,并分析其与胃癌患者临床病理学特征之间的关系。方法选取39例经外科手术切除及组织病理学证实的胃癌患者的癌组织标本及相应的正常胃黏膜组织,应用RT-PCR技术和冰冻切片免疫组化染色方法,分别在mRNA和蛋白水平检测TGF-β1的表达。结果30例胃癌组织有TGF-β1的阳性表达。在临床Ⅰ期和Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期两组以及浸润深度为T1和T2、T3、T4两组胃癌患者的癌组织中TGF-β1阳性表达差异有统计学意义（P〈0.05）。胃印戒细胞癌胞浆频繁出现TGF-β1强阳性染色。结论TGF-β1在胃癌发生、发展中发挥着重要作用,TGF-β1可成为早期胃癌诊断、治疗和预后的分子标志。     

转化生长因子-β信号通路与糖尿病肾病

转化生长因子β(TGF-β)信号通路在糖尿病肾病(DN)发病中起着重要的作用,包括诱导肾小球及肾小管细胞肥大,细胞外基质(ECM)积聚,促进肾小球硬化和肾间质纤维化等方面的作用.Smad是新近发现介导TGF-β超家族胞内信号转导过程的一族蛋白质.因此,本文就该信号通路目前研究的一般概况、在DN时激活的因素、发病作用及针对其治疗方面研究现状作一综述,期望能对DN的治疗和研究提供一些参考.     

大鼠正畸牙移动中TGF-β1在牙周膜中的表达和意义

目的：观察大鼠正畸牙移动中牙周膜的组织内转化生长因子β1（TGF—β1）的变化，初步探讨TGF—β1在牙周膜改建中的作用。方法：选用30只健康雄性Wistar大鼠，用单簧圈别针簧矫治器推上颌切牙侧向移动，于加力后1、3、6、10、14天系列观察牙周膜中TGF-β1的表达。以正常组为对照，用免疫组织化学方法进行检测。结果：牙移动时，压力侧、张力侧TGF-β1表达增加，而张力侧3天、6天组TGF-β1表达明显增多，大于压力区。结论：TGF-β1参与了正畸牙移动牙周膜的改建。TGF-β1在正畸牙移动牙周膜改建中具有双重调节及抑制性反馈作用，有明显的成骨作用。     

抗增殖蛋白抑制转化生长因子-β1诱导的肾脏成纤维细胞增殖和表型改变

目的 研究抗增殖蛋白（prohibitin,PHB）在肾间质纤维化发生中的作用。方法（1）检测48例原发性肾小球肾炎患儿肾组织中PHB蛋白表达,并比较其与肾小管间质损伤程度的相关性。（2）观察PHB在大鼠肾脏成纤维细胞（NRK-49F）中亚细胞定位,以Western印迹和RT-PCR测定NRK-49F受到转化生长因子B1（TGF-β1）刺激后PHB表达的变化。（3）构建PHB表达质粒并转染,观察PHB对NRK-49F细胞周期以及表达α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）蛋白质和mRNA的影响。结果 （1）PHB蛋白主要表达于肾间质细胞和肾小管上皮细胞的胞质,随肾小管间质损伤程度加重而逐渐减弱（组间比较,均P〈0．01）,PHB表达量与肾小管间质损伤程度显著负相关（r=-0．802,P〈0．01）。（2）激光共焦显微镜下见PHB主要分布于NRK49F的细胞质,细胞核亦有较弱表达。TGF-β1刺激后PHB蛋白和mRNA表达均下调,呈现时间和剂量依赖关系（组间比较,P〈0．01）。（3）成功构建PHB真核表达质粒,转染48h细胞中PHB蛋白量升高约2．54倍（与未转染组比较,P〈0．01）。（4）转染PHB基因明显抑制TGF—β1所诱导的细胞增殖,使更多的细胞处于G0／G1期（与TGF-β1组比较,P〈0．01）,而对未受刺激的细胞无影响（P〉0．05）。（5）转染PHB基因明显抑制TGF—β1所诱导的α-SMA蛋白质和mRNA表达（与TGF-β1组比较,P〈0．01）,而对α-SMA基础表达无影响（与TGF-β1组比较,P〉0．05）。结论 PHB在肾组织中的表达水平可以反映肾小管间质损伤程度．外源性PHB显著抑制TGF-β1诱导的成纤维细胞增殖和表型改变。     

1,25双羟维生素D3及转化生长因子β1对人胚成骨细胞增殖和分化的影响

目的　研究 1,2 5双羟维生素D3 [1,2 5 (OH) 2 VD3 ]及人转化生长因子 β1(hTGF β1)对人胚成骨细胞增殖和分化的影响。方法　体外培养人胚成骨细胞 ,经 1,2 5 (OH) 2 VD3 及hTGF β1作用后 ,通过四唑盐 (MTT)比色法观察细胞增殖 ;检测细胞培养液中碱性磷酸酶 (ALP)活性及骨钙素 (OC)含量 ;逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法观察细胞中TGF β信号传导关键蛋白 SMAD蛋白mRNA水平的变化。结果　MTT比色发现 1,2 5 (OH) 2 VD3 组的吸光度值 (OD值 )较对照组下降 30 6 % (0 0 86±0 0 2 2比 0 12 4± 0 0 31,P <0 0 5 )。细胞培养液中ALP活性在 1,2 5 (OH) 2 VD3 组、hTGF β1组以及二者联合应用组均有显著增高 ,为对照组的 1 3～ 2 0倍 (P <0 0 5 )。其中 ,当hTGF β1浓度为 1× 10 -6g/L时 ,1,2 5 (OH) 2 VD3 及hTGF β1对人胚成骨细胞ALP的分泌存在协同刺激作用。 1,2 5 (OH) 2 VD3 与 1×10 -6g/L和 1× 10 -5g/L浓度的hTGF β1合用使得细胞培养液中OC水平增加 (P <0 0 5 ) ,但未发现二者的协同作用。当 1,2 5 (OH) 2 VD3 与 1× 10 -6g/L的hTGF β1合用时SMAD3mRNA水平达高峰 ,约为对照组的 6倍。结论　 1,2 5 (OH) 2 VD3 抑制人胚成骨细胞增殖 ,促进其分化。 1,2 5 (OH) 2 VD3 及hTGF β1