BRAFV600E基因与甲状腺乳头状癌的相关性研究

目的 探究BRAFV600E基因突变情况与甲状腺乳头状癌临床特征的相关性.方法 回顾性的分析了2018年6月至2020年7月期间新疆医科大学第一附属医院甲状腺外科收治并行手术治疗的450例患者的临床资料及荧光定量PCR法测定BRAF基因突变情况.将患者按照BRAFV600E基因突变情况分为BRAF基因突变组(387例)...     

BRAFV600E突变对甲状腺乳头状癌HMGB1表达的影响

目的 近年来甲状腺乳头状癌(PTC)的发病率逐渐升高,发生复发和转移的患者也在增多。本文意在探索在PTC中BRAFV600E突变对高迁移率族蛋白(HMGB1)表达的影响,寻求BRAF基因影响PTC发展及预后的机制,指导临床进行精准治疗。 方法 收集2015年9—12月青岛大学附属医院收治的44例PTC患者的术前血清及术后新鲜病理组织,组织提取DNA进行基因测序。根据有无BRAFV600E突变将患者分为BRAF突变阳性组和BRAF突变阴性组,运用免疫组化和Western blot检测组织中HMGB1蛋白的分布和含量;荧光定量PCR检测组织中HMGB1 mRNA的水平;应用ELISA法检测血清中HMGB1蛋白的水平。Western blot数据应用Image J软件计算灰度值,采用相对定量法计算荧光定量PCR数据,用2-△Ct进行分析,应用ELISA Calc回归/拟合计算程序计算血清中的HMGB1蛋白浓度。所得数据均采用SPSS 20.0进行统计分析。Western blot、荧光定量PCR和ELISA数据分别用χ2检验、Mann-Whitney-Wilcoxon test和独立样本t检验的方法进行统计学处理。淋巴结转移和腺体外浸润与BRAFV600E突变发生的关系采用χ2检验进行统计分析。 结果 在PTC组织中,HMGB1蛋白主要定位于胞浆,BRAFV600E突变阳性组HMGB1的转录水平及蛋白水平均低于BRAFV600E突变阴性组(Z=2.117,P<0.01;χ2=19.989,P<0.05),而这种变化在外周血中并未呈现(t=1.135,P>0.05)。BRAFV600E突变增加淋巴结转移和腺体外浸润的风险(χ2=6.117,P<0.05;χ2=5.587,P<0.05)。发生淋巴结转移PTC中的HMGB1 mRNA和蛋白的表达量均低于无淋巴结转移PTC (Z=-2.216,P<0.05;t=-2.217,P<0.05),发生腺体外浸润的PTC也呈现此种趋势(Z=-2.267,P<0.05;t=-3.885,P<0.01)。 结论 在PTC中,BRAFV600E突变可能通过下调HMGB1的表达加速肿瘤的恶性发展。      

碘摄入与甲状腺乳头状癌BRAF V600E突变的相关性研究

目的 探究碘摄入量与BRAF V600E基因突变以及甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma,PTC）发生发展的相关性,为合理碘摄入量提供科学依据。方法 选取2016年1月至2019年1月间,邢台医学高等专科学校第一附属医院内分泌科收治的邢台地区共124例PTC患者为观察对象,设为观察组,留取住院前尿液10 m L,监测尿碘水平并计算其中位数,并行BRAF V600E突变基因检测,同时选取同期同地区的120例甲状腺正常人群设为对照组,以相同办法进行对比研究。结果 观察组PTC患者中位尿碘值（median urinary iodin,MUI）水平为343μg/L,明显高于对照组甲状腺功能正常者192μg/L(P<0.05);观察组124例PTC患者中发生BRAF V600E基因突变80例（64.5%）,明显高于对照组0%(P<0.05);突变基因型在尿碘值分组间比较,碘缺乏组、碘足量组、碘超足量组及碘过量组中BRAF V600E基因突变率分别为16.7%、50.0%、64.9%及74.6%,BRAF V600E基因突变率伴随着尿碘值增加而增加,组...     

BRAFV600E突变在甲状腺球蛋白抗体阳性的甲状腺乳头状癌中的应用价值

<正>甲状腺癌(thyroid cancer,TC)是内分泌系统最常见的恶性肿瘤,主要分为3种组织学类型：分化型甲状腺癌(differentiated thyroid carcinoma,DTC)、未分化型甲状腺癌(undifferentiated thyroid cancer,UTC)和甲状腺髓样癌(medullary thyroid cancer,MTC)^[1]。甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)作为最常见的DTC类型,其数量最多,总体预后较好,但部分患者仍可能伴有侵袭性临床病理特征(包括气管、食管、颈部大血管及喉返神经侵犯等)。迄今为止几乎没有任何PTC治疗决策具有严格的随机对照实验证据支持,     

BRAFV600E基因突变与甲状腺乳头状癌中央区淋巴结转移的关系

目的分析BRAFV600E基因突变与甲状腺乳头状癌（PTC）中央区淋巴结（CLN）转移的关系,探讨CLN转移的危险因素。方法检测104例PTC病例BRAFV600E基因突变情况,分析该突变与PTC临床病理特征、超声特征的关系,单因素及多因素分析CLN转移的危险因素。结果BRAFV600E基因突变与肿瘤最大径、肿瘤钙化、被膜外侵犯及CLN转移相关（P < 0.01）,BRAFV600E基因突变和被膜外侵犯是CLN转移的独立因素（P < 0.01）。结论BRAFV600E基因突变可为PTC手术CLN清扫提供基因依据。     

BRAFV600E基因突变与200例甲状腺乳头状癌临床特征相关性分析

目的 文章主要论述BRAFV600E基因突变与甲状腺乳头状癌临床诊断,中医治疗及预后方面的相关性,并大体概括其在治疗甲状腺乳头状癌(PTC)方面的应用现状,以期对甲状腺乳头状癌个体化精准诊治制定提供科学线索.方法 选择2018年12月-2019年12月辽宁省肿瘤医院头颈外科二病区诊治的200例经病理学诊断为PTC的手术...     

甲状腺乳头状癌中促甲状腺激素受体与钠碘转运体mRNA的表达

目的钠碘转运体(Na+/I-symporter,NIS)是介导甲状腺细胞摄取碘的重要载体,其表达、定位与促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone,TSH)关系密切。文中主要研究甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinomas,PTC)及癌旁组织中TSH受体(TSH receptor,TSHR)与NIS基因的表达。方法实时荧光定量PCR法测定36例PTC及癌旁组织,20例正常组织中TSHR mRNA及NIS mRNA的表达水平。结果 PTC及癌旁组织中TSHR mRNA表达水平明显低于正常组织,P<0.05;NIS mRNA表达水平在PTC组织中显著下降,P<0.05。结论 PTC组织中TSHR与NIS mRNA基因表达水平呈现同步下降趋势,可能与TSH-TSHR信号通路的调控有关。     

超声及BRAFV600E基因对甲状腺乳头状癌颈部淋巴结转移的预测因素

目的 探讨甲状腺乳头状癌（PTC）超声征象及BRAF^V600E基因与颈部淋巴结转移的相关性。方法 回顾性分析病理诊断为甲状腺乳头状癌136例患者,178个甲状腺癌结节,83枚颈部淋巴结的超声影像学资料和BRAF^V600E基因结果,分析BRAF^V600E基因、各超声特征与颈部淋巴结转移的相关因素。结果 单因素分析结果显示：多发病灶、年龄<40岁、结节最大径≥1.5 cm、微钙化、甲状腺包膜侵犯、BRAF^V600E基因突变与甲状腺乳头状癌颈部淋巴结转移的发生有关（P<0.05）;多变量分析结果显示：甲状腺包膜侵犯、BRAF^V600E基因突变是颈部淋巴结转移的危险因素（OR=2.701、3.282,均P<0.05）。结论 甲状腺包膜侵犯、BRAF^V600E基因突变的甲状腺乳头状癌患者,更易发生颈部淋巴结转移。     

钠/碘转运体在甲状腺乳头状癌的表达和分布

目的:研究钠/碘转运体(NIS)在甲状腺乳头状癌内表达情况,探求NIS与甲状腺乳头状癌的关系.方法:取甲状腺乳头状癌组织22例,正常甲状腺组织12例,淋巴结转移组织7例及结节性甲状腺肿组织12例,运用蛋白免疫印迹技术(Westemblot)检测各实验组NIS的表达情况.结果:乳头状癌组和淋巴结转移组中NIS的阳性率为77.3%和85.7%,高于正常甲状腺组和结节性甲状腺肿组的25%和41.7%,且各实验组之间阳性表达率存在显著性差异(P<0.05),在17例NIS表达阳性的乳头状癌组标本中,有16例阳性表达集中于细胞浆内,仅2例在细胞膜上检测有表达,阳性率分别为94.1%和11.8%.两者差异有统计学意义(P<0.05).结论:在甲状腺乳头状癌组织内,NIS可正常,甚至过度表达,而且分布主要集中于细胞浆内.并非功能靶位细胞膜上,与肿瘤导致的基因翻译和修饰的改变有关.     

甲状腺乳头状癌中BRAF V600E突变及其与甲状腺超声表现的关系

目的:探讨甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)中BRAF V600E突变及其与甲状腺超声表现的关系。方法:采用PCR反应扩增及DNA直接测序法检测34例PTC患者手术切除的新鲜甲状腺组织及其癌旁组织的BRAF V600E突变情况,比较PTC发生和未发生BRAF V600E突变患者的甲状腺超声检查影像。结果:34例PTC癌组织标本中有18例发生BRAF V600E突变,16例未发生突变;34例PTC癌旁组织标本均未检测到BRAF V600E突变。PTC BRAF V600E突变患者与未发生突变患者甲状腺超声检查的癌块大小、边界是否清楚及有无钙化差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:PTC中BRAFV600E突变率较高;BRAF V600E突变与甲状腺超声表现无明显关系。甲状腺超声表现不能预测PTC中BRAF V600E突变的存在。     

甲状腺乳头状癌并BRAFV600E突变及原癌基因重排蛋白表达与其侵袭性的关系

目的探讨BRAFV600E突变及原癌基因重排(RET)蛋白表达并存与甲状腺乳头状癌(PTC)侵袭性的关系。方法收集50例PTC患者术后病理,分别用RT-PCR检测BRAFV600E突变,免疫组织化学SP法检测RET表达情况。分析BRAFV600E突变合并RET表达组(n=24)和BRAFV600E单突变或RET单表达组(n=19)的临床及病理特征。结果 BRAFV600E突变率、RET表达率分别为76%(38/50)、56%(28/50),存在BRAFV600E突变合并RET表达者占48%(24/50)。与BRAFV600E突变合并RET表达组比较,BRAFV600E单突变或RET单表达组肿瘤组织分化程度差,且甲状腺癌评分系统评分较高(P=0.011,P=0.022)。结论 BRAFV600E突变并存RET表达时提示PTC肿瘤组织分化差、更易出现实体亚型等侵袭性较高的病理亚型,有可能增加肿瘤相关死亡风险。     

甲状腺乳头状癌患者BRAF基因V600E检测的意义

目的 评估免疫组化法检测BRAF基因V600E突变对甲状腺乳突状癌的诊断价值,进一步明确BRAF基因V600E突变与甲状腺乳头状癌外扩散的相关性。方法 2011年3月至2014年3月37例经病理确诊甲状腺乳突状癌患者,对于免疫组化染色阳性肿瘤进行染色强度分类。评估年龄、甲状腺外扩散、侵袭淋巴管血管、区域淋巴结转移病理变化。结果 直接测序法显示28例（75.7%）PTC BRAF基因V600E阳性;免疫组化染色显示25（67.6%）BRAF基因V600E阳性。以直接测序法为标准,免疫组化法对BRAF基因V600E特异抗体检测突变的敏感性为89.3%、特异性为100%,阳性预测值为100%,阴性预测值为75.0%。 结论 免疫组化染色是检测甲状腺乳突状癌中BRAF基因V600E突变准确的方法,能够量化BRAF基因V600E表达,预测肿瘤侵袭性。     

甲状腺乳头状癌中BRAF~(V600E)点突变的研究

目的:探讨BRAFV600E点突变与甲状腺乳头状癌(PTC)及其临床病理学特征之间的关系。方法:采用突变等位基因特异性扩增法(MASA-PCR)检测108例甲状腺石蜡包埋组织中BRAFV600E点突变(包括83例甲状腺癌,11例甲状腺腺瘤,13例结节性甲状腺肿和1例癌旁正常组织)。结果:仅在PTC和1例甲状腺未分化癌中检测到BRAFV600E突变,PTC中突变率为66.7%(48/72),主要见于经典型PTC和微小癌,其突变率分别为72.6%(45/62)和66.7%(2/3),在其它类型的甲状腺良恶性病变中均未检测到BRAFV600E突变。40岁以上患者的BRAFV600E突变率显著高于40岁以下者,而与性别、淋巴结转移、慢性淋巴细胞浸润无显著关系。结论:BRAFV600E突变仅发生于PTC和部分未分化癌,是PTC中较常见的遗传学事件,为PTC的发生机制提供新思路。BRAFV600E突变主要见于经典型PTC和微小癌,可能是甲状腺乳头状癌表型的重要决定因素之一。     

BRAF V600E和PD-L1蛋白表达在甲状腺乳头状癌中的临床意义

目的：研究甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma,PTC）中BRAF V600E与程序性死亡因子配体1（programmed death ligand 1,PD-L1）蛋白表达,探讨其与PTC临床特征的相关性。方法：随机收集2015至2017年重庆医科大学附属第一医院128例PTC患者作为研究对象,收集40例甲状腺癌旁正常组织患者作为对照。采用免疫组化检查BRAF V600E蛋白和PD-L1蛋白的表达。结果：PTC中BRAF V600E蛋白阳性率为67.9%（87/128）,明显高于正常组（ ?字2=11.693,P=0.000）;单因素卡方检验分析BRAF蛋白阳性与患者年龄≥45岁（ ?字2=22.345,P=0.000）、甲状腺包膜侵犯（ ?字2=4.643,P=0.031）关系密切。而PD-L1在PTC中阳性率为57.8%（74/128）,明显高于正常组织（ ?字2=9.812,P=0.000）;单因素卡方检验分析PD-L1蛋白阳性与PTC患者年龄≥45岁（ ?字2=44.390,P=0.000）、淋巴结转移状态（ ?字2=28.584,P=0.000）及甲状腺包膜侵犯（ ?字2=12.895,P=0.000）显著相关。多因素logistic回归分析显示BRAF蛋白的表达与患者患者年龄≥45岁（OR=3.003,95%CI=1.218~7.404,P=0.017）、甲状腺包膜侵犯（OR=12.341,95%CI=3.944~38.620,P=0.000）关系密切,PD-L1蛋白表达与患者患者年龄≥45岁（OR=6.667,95%CI=2.668~16.657,P=0.000）、淋巴结转移（OR=3.987,95%CI=1.592~9.987,P=0.003）和甲状腺包膜侵犯（OR=4.249,95%CI=1.447~12.478,P=0.008）关系密切。进一步分析显示,BARFV600E蛋白阳性的PTC中PD-L1阳性率为75.8%（66/87）,明显高于BARF蛋白阴性PTC中PD-L1阳性率19.5%（8/41）（Kappa=0.520,P=0.000）。提示在甲状腺乳头状癌中,BRAF蛋白与PD-L1蛋白表达存在一致性。结论：BRAF蛋白阳性的PTC中,PD-L1免疫抑制分子存在过量表达,BRAFV600E蛋白和PD-L1蛋白的共同过量表达与患者更差的预后相关。     

PD-L1、BRAFV600E、CD68蛋白表达及肿瘤浸润淋巴细胞在恶性黑色素瘤诊断中的意义

  目的   分析PD-L1、BRAFV600E、CD68蛋白和肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）在恶性黑色素瘤诊断中的意义。  方法   应用高通量组织芯片技术及免疫组化方法,检测60例原发性恶性黑色素瘤组织中PD-L1、BRAFV600E、CD68蛋白表达;分析PD-L1、BRAFV600E、CD68蛋白以及TIL与患者的临床病理特征及预后关系。  结果   （1）恶性黑色素瘤组织中CD68蛋白表达与肿瘤T分期之间,差异有统计学意义（P = 0.018）,而与肿瘤大小、肿瘤浸润深度、淋巴结转移和溃疡形成之间,差异均无统计学意义（P > 0.05）;（2）PD-L1、BRAFV600E和TIL与肿瘤T分期、肿瘤大小、肿瘤浸润深度、淋巴结转移和溃疡形成之间,差异均无统计学意义（P > 0.05）;（3）皮肤黑色素瘤BRAFV600E突变率约36.67%（22/60）,其中,肢端型黑色素瘤BRAFV600E突变率约68.18%（15/22）;黏膜黑色素瘤BRAFV600E突变率约23.33%（14/60）;（4）Cox回归生存分析结果显示肿瘤淋巴结转移是影响恶性黑色素瘤患者预后的因素。   结论   （1）CD68蛋白表达在判定患者预后方面可能有一定作用;（2）皮肤部位的黑色素瘤建议行BRAFV600E免疫组化检测;（3）患者存在淋巴结转移可作为恶性黑色素瘤预后判断的参考指标。