流感病毒鼠肺适应株FM1诱导犬肾细胞MDCK凋亡的实验研究

流感病毒鼠肺适应株FM1攻击犬肾细胞36 h后,通过对其细胞形态学的观察、DNA电泳图谱的分析及流式细胞仪的检测,显示受到病毒攻击后犬肾细胞在形态学上主要表现为细胞圆缩,核固缩、碎裂等,在细胞周围形成典型的圆形凋小体;琼脂糖凝胶电泳实验图谱可见到清晰的ladder梯状条带;流式细胞仪的检测提示在正常的二倍体峰前可见明显的亚二倍体峰,并有一定的细胞凋亡率.根据以上结果可得出结论:在流感病毒鼠肺适应株FM1攻击犬肾细胞MDCK后诱导了细胞凋亡的发生.     

甲型H1N1流感病毒鼠肺适应株的建立及潜在分子机理研究

2009年甲型H1N1流感的大爆发进一步促进了人们对流感病毒跨物种传播分子机理的研究热情。Ily-ushina等通过将甲型流感非致死株A/CA/04/09(H1N1)及A/TN/1-560/09(H1N1)在小鼠肺组织内连续     

甲3型流感病毒流行株金刚烷胺耐药性的初步研究

目的 调查流感病毒流行株对金刚烷胺的耐药情况。方法2003至2005年北京地区流感流行季节分离的流行株经提取RNA,RT-PCR一步法扩增流感病毒的M2基因片断,用凝胶电泳、核酸测序以及生物信息软件分析法对耐药性有关的氨基酸位点确定。结果41株流行株中30株对金刚烷胺类药耐药,其比例为75％（30／40）。耐药株变异表现为31位氨基酸被天冬酰胺置换。结论此变异现象值得我们高度关注,应在我国开展抗流感病毒耐药性的监测,进一步确定我国流感病毒耐药株的发生频率,为我国制定应对流感大流行措施提供参考。     

江苏省江阴市2014-2016年乙型流感病毒流行特征分析

目的通过对2014-2016年江阴市乙型流感病毒的流行病学特征进行分析,为制定乙型流感病毒防控策略提供依据。方法收集江阴市2014-2016年流感监测哨点医院上报的流感样病例数据及咽拭子标本,运用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)进行乙型流感病毒检测。结果 2014-2016年共采集流感样病例咽拭子标本1 575份,其中乙型流感病毒阳性146份,阳性率为9. 27%。男、女阳性率分别为9. 98%和8. 27%,差异无统计学意义(χ~2=5. 22,P> 0. 05)。5～14岁组阳性率最高(14. 68%),0～4岁组阳性率最低(5. 99%)。乙型流感病毒感染具有明显的季节性,主要集中发生于冬春季。不同医院间乙型流感病毒阳性率差异无统计学意义(P>0. 05)。结论江阴市乙型流感病毒阳性率逐年增加,5～14岁青少年为高危人群,应继续加强监测,及时发现病毒变异方向,并加强高危人群的流感疫苗接种。     

中国乙型肝炎病毒流行株的适应性进化分析

目的:检测中国乙型肝炎病毒(HBV)B型和C型4个基因(区)(S、C、X和RT)的正选择位点,推断近年来中国HBV的变异趋势和原因。方法:从基因库下载中国所有B型和C型全长序列共864条,参照标准序列分别截取S、C、X和RT 4个基因(区),使用HyPhy方法筛选各基因序列集的正选择位点并进行统计和分析。结果:共检测到226个正选择位点(B型101个,C型125个),其中85个位点(B型37个,C型48个)分别位于75个(B型32个,C型43个)抗原表位上,表明正选择的发生与病毒的免疫逃逸相关。值得注意的是,B型RT区的3个耐药位点180、181和223,和C型RT区的4个耐药位点173、180、181和223,也被检测到受到正选择压力,表明正选择发生与耐药发生相关。结论:中国地区HBV B型和C型的RT区受到的选择压力与耐药突变存在潜在联系,其他区域的正选择与病毒的逃逸机制密切相关。     

H3N2流感病毒冷适应株的无血清培养

目的：探索无血清培养H3N2流感病毒冷适应株的适宜条件。方法以无血清适应的Vero细胞为介质,对流感病毒冷适应株（H3N2）的培养条件进行优化,以得到较优的基础培养基、pH值、TPCK胰酶添加量及其补加时间、病毒接种量和病毒收获时间。结果 H3N2流感病毒冷适应株能够感染无血清适应的Vero细胞;经过优化,病毒培养液适宜pH为7．15～7．64, BSA和TPCK胰酶添加量均为0．8～1．2μg／ml,细胞培养36h接种病毒,接种量MOI为0．05～0．10,于25℃培养168h收获时病毒效价达最高。结论优化了H3 N2流感病毒冷适应株无血清培养的适宜条件。     

武汉地区流感病毒及其流行特征的研究

为了解武汉地区流感病毒变异及其流行趋势,进行了5年的病原学和流行病学监测。结果：共分离到100株病毒,其国甲3型29株,甲1型31株,乙型40株。5年中3种型别病毒的流行呈现此消彼长的规律;分离到“O”相病毒,证实其在近40年后在武汉地区重现;人群抗体水平甲3型抗体阳性率已达62％,0－4岁和60岁人群分别只有35％和50％。     

正柴胡饮体外抗甲型流感病毒和乙型流感病毒作用的研究

为探讨中药复方正柴胡饮(柴胡、陈皮、防风、芍药、甘草、生姜等)的抗病毒作用,从体外抗病毒实验对其抑制甲型流感病毒(FM1)和乙型流感病毒(昆科70B)的作用进行了研究。结果显示:中药复方正柴胡饮在无毒浓度1.56g/L、6.25g/L分别对FM、昆科70B有明显的抑制病毒致细胞病变作用。     

从感染鼠脑浓缩提纯流行性乙型脑炎病毒的研究

本文用硫酸鱼精蛋白沉淀、差速离心、蔗糖线状梯度速率区带离心法从感染鼠脑中浓缩提纯JEV。鱼精蛋白最终浓度在5mg/ml、pH8.0时,一次可沉淀57％的杂蛋白,HA回收66％,感染性回收55％。再经差速离心及蔗糖梯度离心后,病毒区带蛋白含量0.5mg/ml,最终HA回收29％,感染性回收37％,因此提纯系数分别为138和175。在梯度柱的顶部发现有SHA,不具有感染性,其免疫学方面的特征尚待研究。     

鱼金抑制乙型流感病毒诱导细胞凋亡研究

目的探讨鱼金注射液阻断乙型流感病毒诱导狗肾传代细胞（Madin-Darby canine kidney，MDCK）凋亡。方法采用瑞氏染色法光镜下观察细胞形态变化、原位末端标记术测定细胞凋亡率。结果病毒感染组MDCK细胞凋亡百分率显著高于其他组（P〈0.001）；试验组、药物对照和细胞对照组比较无差异（P〉0．05）；原位末端标记组细胞凋亡显著高于瑞氏组（P〈0．01）。结论该研究提示乙型流感病毒可诱导MDCK细胞凋亡，而鱼金能阻断乙型流感病毒诱导MDCK细胞凋亡。     

乙型脑炎减毒活疫苗乳鼠传代返祖试验中稀释液的筛选

目的 探讨安全试验之乳鼠传代返祖试验中稀释液对乙型脑炎减毒活疫苗的影响.方法 随机选取14批乙型脑炎减毒活疫苗,分别用磷酸盐缓冲液(PBS)、最少细胞培养物质培养液(MEM)、0.5%水解乳蛋白液、199培养液4种稀释液进行乳鼠传代返祖试验.结果 使用PBS组LD50<1.0 Log LD50/0.03mL,小鼠没有死亡梯度;0.5%水解乳蛋白液组和MEM组出现LD50>3.0 Log LD50/0.03 mL,病毒毒力增强;使用199培养液组乙型脑炎病毒活疫苗毒力稳定,重复性好,无返祖现象.结论 199培养液适宜作为乙型脑炎减毒活疫苗乳鼠传代返祖试验中所用的稀释液.     

我国猪群中抗乙型流感病毒抗体的发现

用单扩溶血、血凝抑制、神经氨酸酶抑制、株特异补结和鸡胚中和试验证明,我国猪群血清中存在抗乙型流感病毒抗体,从而证实猪可能是所有型别流感病毒的天然宿主;少数猪可同时感染两种型别或亚型毒株,但其感染率不同;人群中已消失的毒株查不到相应抗体;病毒分离率有季节特点,均在冬春季分离到;猪乙型流感病毒与甲、丙型相似,可能是人传给猪的。     

中药对鼠流感病毒感染的预防效果研究

目的探索中药体内对鼠流感病毒感染的防治作用。方法采用流感病毒A/FM/1/47(H1N1)鼠肺适应株感染小鼠的肺指数及死亡保护实验动物模型评价银翘散制剂、玉屏风散制剂、冰香散对感染鼠的保护作用及肺重改善程度。结果银翘散制剂与玉屏风散制剂的肺指数抑制率达到35%～43%,冰香散滴鼻给药与雾化给药均有不同程度的降低肺指数的作用,肺指数抑制率在19%～25%之间;各试验药预先给药7d,病毒感染后继续给药5d,与病毒对照组相比,银翘散制剂在剂量20～40g/kg范围内对感染鼠的死亡保护率为50%～60%,玉屏风散制剂在剂量40～60g/kg范围内对感染鼠的死亡保护率为70%,冰香散雾化给药对感染鼠的死亡保护率为70%。银翘散制剂、玉屏风散制剂和冰香散延长鼠生命率在50%以上,尤以玉屏风散制剂效果显著,达76.31%。鼠平均生存时间均有不同程度的延长,大约在11～13.4d左右。结论银翘散制剂、玉屏风散制剂及冰香散这三类预防流感方药在体内表现出良好的防治流感病毒作用,为临床运用中药预防流感提供了科学的依据。     

季节性流感病毒H1N1 BALB/c鼠肺适应株的建立及其分子机制

目的 建立季节性流感病毒H1N1的鼠肺适应株，并对适应的分子机理进行研究。方法 以病毒滴鼻感染小鼠，通过在BALB/c小鼠肺组织中连续传代，观察小鼠存活情况及肺病理改变，来获得季节性流感病毒H1N1的鼠肺适应株。结果 季节性流感H1N1 A/Brisbane/59/2007病毒野生型毒株，经过在小鼠体内进行8次传代后，毒力逐渐增强，从无致病力到致死率达到100%，对鼠肺适应株与野生型毒株进行基因比对，发现适应株HA基因发生了3个有义突变。结论 野生季节性低致病力H1N1流感病毒可经在小鼠中经过多次传代而获得高致病力H1N1鼠肺适应株，HA蛋白89位Thr至Ile的突变对毒力的增强起决定性作用。     

数株我国主要流行的流感病毒血凝抑制试验抗原性变异的分析

本文报道用血凝抑制试验对部分世界范围内流行的流感病毒株进行了抗原变异性分析。1993～1994年的三价流感灭活疫苗A/Beijin/32/92(H3N2),A/Texas/36/91/(H1N1),B/Panama/45/90株与其他前流行株之间有明显抗原变异。1989年中国分离的三株甲3型之间也有抗原变异,提示在国内不同流行区可能应使用不同的三价疫苗。流感病毒的分离监测,国内应推广使用MDCK细胞系。实验结果对流感监测,疫苗应用有一定参考价值     

关于乙型脑炎流行预测的研究

本文根据中卫县1954～1986年的研究资料,以生态学观点对乙脑的流行规律与媒介蚊种的消长、气象条件的变化、扩散宿主的感染和人群易感性的关系进行了综合分析。根据现有资料预测当地动脑流行高峰时,如果用一个指标,应首先考虑八月上句三带喙库蚊的密度;采用两个指标时,应加上七月上句的平均气温或日照时间;采用三个指标时,应再加上七日上旬猪群中乙脑病毒扩散的强度。在制定预防乙脑流行措施时,首先应努力消灭八月份三带喙库蚊的密度高峰,其次应在五、六月间完成对易感猪群和易感人群的预防接种。     

美研究人员制造出新的流感病毒株

美国研究人员报道说,他们已研制出一种可用遗传工程生产整个甲型流感病毒的有效方法。该技术可使科学家们通过改变A病毒基因(一个核苷酸接一个核苷酸)来修补该病毒。威斯康辛大学的Yoshiniro Kawaoka说,甲型流感病毒有一些特点,很难从克隆的基     

鼠肺支原体单克隆抗体的研究

通过杂交瘤技术建立了３株抗鼠肺支原体单克隆抗体细胞株，它们分别是ＢＡ１１，ＢＤ７和Ｂ６１２．试验表明：３株细胞所分泌的抗体均属ＩｇＧ１亚类，都是鼠肺支原体的特异性抗体，与多种其它支原体无交叉反应。     

鼠伤寒在医院中流行的调查

1983年7月至1984年1月,我旗发生鼠伤寒爆发流行,共发生鼠伤寒病人80例,其中14例做粪便培养,11例阳性。外环境采样28份,阳性4份。现报告如下: 流行开始于旗医院,发病时间为1983年7月31日-1984年1月18日。后波及到旗中蒙医院。时间是1983年11月14日至1984年1月4日。两所医院发病统计见下表: