丹酚酸B对大鼠心肌梗死过程中病理形态学的影响*

[目的]探讨丹酚酸B(Salvianolic acid B,Sal B)治疗大鼠心肌梗死(myocardial infarction,MI)以后的病理形态学变化.[方法]通过结扎冠状动脉左前降支制作大鼠心肌梗死模型,测定各组心肌梗死面积占总面积的百分比,并且对心肌梗死部位成纤维细胞和毛细血管进行计数,观察Sal B对MI的干预作用.[结果]Sal B可以减少心肌梗死面积,促进毛细血管的生长,加速梗死灶的修复.[结论]Sal B可以减轻MI的面积,是中药丹参起效的重要物质基础之一,具有良好的开发及应用前景.     

丹酚酸B/三七总皂苷配伍对心肌梗死大鼠左室结构和功能的影响*

[目的]研究丹酚酸B(Sal B)、三七总皂苷(PNS)对心肌梗死大鼠左室结构和功能的影响,探讨中药组分配伍的作用.[方法]结扎冠脉左前降支复制大鼠心肌梗死模型,假手术组作对照,连续灌胃给药7 d.用彩色超声心动仪观察心脏左室结构和功能变化.[结果]Sal B、PNS以及配伍组可以不同程度地降低左室收缩末期内径(LVDs)、左室收缩末期容积(LVESV),升高左室射血分数(EF)、左室短轴缩短率(FS),配伍组有优于其他中药组的趋势.[结论]Sal B、PNS配伍可以有效改善心肌梗死大鼠的左室结构和功能.     

丁苯酞促进心肌梗死大鼠血管再生的作用研究#br#

［摘要］ 目的探讨丁苯酞（dl-3-n-butyphthalide，NBP）对心肌梗死大鼠血管再生的促进作用及其相关机制。 方法取SD大鼠建立心肌梗死模型，分为假手术（Sham，0.9％氯化钠注射液）组、心肌梗死（MI）组、NBP低剂量（NBP-L，20 mg/kg）组和NBP高剂量（NBP-H，40 mg/kg）组，每组6只大鼠。每天给药1次，连续给药2周。通过氯化三苯基四氮唑染色计算心肌梗死面积，超声心动图检测心脏功能，免疫组织化学染色检测心肌梗死边缘区新生血管密度，实时荧光定量PCR检测心肌组织中血管生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor，β-FGF）以及Notch 1基因表达情况。 结果Sham组大鼠均未见心肌梗死灶，MI组、NBP-L组和NBP-H组大鼠心肌梗死面积百分率大于Sham组，NBP-L组和NBP-H组大鼠心肌梗死面积百分率小于MI组,NBP-H组大鼠心肌梗死面积百分率小于NBP-L组（P＜0.05）。MI组、NBP-L组和NBP-H组大鼠LVESP、+dp/dt max、-dp/dt max低于Sham组，LVED高于Sham组，NBP-L组和NBP-H组大鼠LVESP、+dp/dt max、-dp/dt max高于MI组，LVED低于MI组，NBP-H组大鼠LVESP、+dp/dt max、-dp/dt max高于NBP-L组，LVED低于NBP-L组（P＜0.05）。NBP-L组和NBP-H组心肌梗死边缘区毛细血管密度高于MI组，NBP-H组心肌梗死边缘区毛细血管密度高于NBP-L组（P＜0.05)。MI组大鼠心肌VEGF、β-FGF mRNA水平低于Sham组，NBP-L组和NBP-H组VEGF和β-FGF mRNA水平高于Sham组和MI组,NBP-H组VEGF和β-FGF mRNA水平高于NBP-L组（P＜0.05）。MI组大鼠心肌组织中Notch 1基因表达明显低于Sham组，NBP-L组和NBP-H组大鼠心肌中Notch 1基因表达高于Sham组和MI组，NBP-H组大鼠心肌中Notch 1基因表达高于NBP-L组（P＜0.05）。 结论NBP能够促进心肌梗死后大鼠血管再生，并且可能与激活Notch 1通路有关。     

丹酚酸B对心肌梗死模型大鼠心肌的保护作用及其分子机制

目的：观察丹酚酸B（Sal B）对心肌梗死模型大鼠心肌的保护作用,阐明Sal B干预大鼠心肌梗死的分子机制。方法：将大鼠随机分为对照组、模型组、阳性药实验组（AsA组和BHT组）和观察药实验组（Sal B组）,采用冠状动脉结扎法构建大鼠心肌梗死模型。各实验组大鼠均按120 mg/kg剂量腹腔注射给药,模型组与对照组大鼠注射相同剂量的蒸馏水,连续7 d。测定各组大鼠血清中肌酸磷酸激酶（CK）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）的活性,并利用ELISA法分析各组大鼠血清中白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达水平;流式细胞术检测各组大鼠心肌细胞凋亡率,分光光度法检测自由基清除率。结果：与对照组比较,模型组大鼠血清CK、AST和LDH活性明显升高（P<0.01）;与模型组比较,阳性药实验组和Sal B组大鼠血清CK、AST和LDH活性明显降低（P<0.05或P<0.01）。与对照组比较,模型组大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平明显增加（P<0.01）;与模型组比较,Sal B组大鼠血清中IL-1β、IL-6和TNF-α水平显著降低（P<0.01）;而AsA和BHT组上述3种因子水平无明显变化（P>0.05）。与对照组比较,模型组大鼠心肌细胞凋亡率明显增加（P<0.01）;与模型组比较,Sal B组大鼠心肌细胞凋亡率明显降低（P<0.01）;而AsA和BHT组大鼠心肌细胞凋亡率无明显改变(P>0.05)。不同浓度的Sal B均能提高1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基的清除率（P<0.05）,且20～100 mg/L Sal B对自由基的清除率均高于AsA和BHT（P<0.05或P<0.01）。结论：Sal B对大鼠冠状动脉结扎诱发实验性心肌梗死具有一定的保护作用,可以有效抑制心肌细胞凋亡,其作用机制可能与抑制免疫炎症因子的分泌和自由基清除作用有关。     

丹酚酸B配伍丹皮酚对大鼠心肌梗死病理形态学的影响

目的观察丹酚酸B配伍丹皮酚治疗大鼠心肌梗死之后的病理形态学改变,探讨药物对大鼠心肌梗死的治疗作用。方法通过结扎大鼠冠状动脉左前降支制作心肌梗死模型,测定各组心肌梗死范围,计算梗死部位成纤维和毛细血管数,观察丹酚酸B配伍丹皮酚对心肌梗死的干预作用。结果丹酚酸B配伍丹皮酚能够减少大鼠心肌梗死面积,促进毛细血管的生长,并加快梗死灶的修复。结论丹酚酸B配伍丹皮酚,对心肌梗死有治疗作用。     

单独或联合应用rhG-CSF与bFGF对大鼠急性心肌梗塞的治疗作用

目的：研究重组人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）与碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）单独或联合腹腔注射对大鼠急性心肌梗死（AMI）的治疗作用。方法：结扎大鼠冠状动脉前降支制作AMI模型。成活大鼠随机分为4组：心梗对照组（MI）、rhG-CSF组（G）、bFGF组（B）和联合治疗组（GB）,造模后24 h开始依次分别腹腔注射生理盐水、rhG-CSF、bFGF和rhG-CSF+bFGF。另设假手术组（S）,只开胸不造模,不给药。分别计数注射前和注射后1周大鼠外周血白细胞（WBC）和单个核细胞（MNC）百分比,心梗后1周免疫组化染色观察CD34⁺细胞表达,HE染色计数新生毛细血管,心梗后4周HE染色观察心肌病理改变,计数毛细血管,测量心功能和梗死面积。结果：G、B、GB组与MI组比较,及GB组与G组或B组相比,外周血WBC计数、MNC百分比、梗死区周围CD34⁺细胞计数、毛细血管密度升高（P<0.01）,梗死面积减小（P<0.01）,+dp/dt_max、－dp/dt_max和LVSP增高（P<0.01）,LVDP降低（P<0.01）。结论：腹腔注射rhG-CSF可以动员大量心肌样细胞;腹腔注射rhG-CSF或bFGF都可以促进血管侧支循环建立,增加梗死区毛细血管数量,两者都可缩小梗死面积,改善心脏的收缩功能;联合应用较单独应用效果更佳。     

丹酚酸B干预骨髓间充质干细胞移植对AMI大鼠心梗区血管新生的影响

[目的]探讨丹参单体丹酚酸B(SalB)干预骨髓间充质干细胞(MSCs)心肌移植及其对大鼠心梗区毛细血管新生的影响。[方法]选用成年近交系Wistar大鼠建立心肌缺血模型。将造模成功的75只大鼠随机分为5组。冠脉结扎术后,联合组给于大鼠SalB并移植MSCs(SalB B组),细胞移植组(B组)移植等量的MSC,中药组给予等量的SalB(SalB组),对照组注射等容积的MSCs完全培养液(S组),模型组(C组)。手术后2周,通过心肌组织CD34免疫组化染色,观察丹酚酸B干预MSCs心肌移植对血管新生的影响。[结果]CD34染色示联合组动物心肌梗死区毛细血管密度高于B组和SalB组,且有少数细胞形成血管样结构。[结论]在急性心肌梗死(AMI)大鼠心肌移植MSCs,通过参与血管形成,改善梗死区的血液供应,是SalB起效的重要物质基础之一,具有良好的开发和应用前景。     

激活Notch信号的骨髓间充质干细胞移植促心肌梗死模型鼠血管新生研究

目的探讨干预Notch信号骨髓间充质干细胞（BMSCs）移植对心肌梗死（MI）大鼠心肌的治疗性血管新生作用及其机制。方法 60只Wistar大鼠经结扎冠状动脉前降支建立MI模型后,建模2周进行相应处理后,随机分为MI模型对照组（B组）、培养液移植对照组（C组）、激活Noth信号的BMSCs移植实验组（D组）、BMSCs移植对照组（E组）,每组15只;另选取10只为假手术对照组（A组）。4周后观察细胞生长及增殖情况,测定缺血心肌中血管内皮细胞生长因子（VEGF）蛋白的表达及缺血区心肌毛细血管密度的改变。结果 BMSCs在梗死区中可增殖分化为内皮细胞,与A、B、C组相比,D组、E组缺血心肌中VEGF蛋白的表达增多及毛细血管密度均明显增高（P〈0.01）,且D组较E组更明显（P〈0.05）。结论激活Notch信号有促进心肌梗死区BMSCs向内皮细胞分化,并通过自分泌和旁分泌的方式增加缺血心肌VEGF的表达,由此促进缺血心肌中毛细血管新生。     

同种心肌细胞移植对大鼠急性心肌梗死面积的影响

[目的]探讨乳鼠心肌细胞移植到心肌梗死后大鼠心肌组织内生长发育情况及其对实验性大鼠急性心肌梗死面积的影响.[方法]30只雄性SD大鼠经左冠状动脉前降支永久性结扎建立前壁心肌梗死模型并随机分为对照组和实验组.大鼠心肌梗死手术后第4周进行细胞移植.[结果]光镜显示移植的乳鼠心肌细胞存活在梗死的心肌中、生存良好,实验组与对照组比较,能显著减少实验性大鼠急性心肌梗死面积(P＜0.05).[结论]乳鼠心肌细胞可以被移植并在大鼠梗死心肌中存活.乳鼠心肌细胞移植到大鼠心肌梗死区域可明显减轻心肌梗死面积.     

心肌梗死大鼠心室组织Smads蛋白表达及卡托普利的干预作用

[目的]研究心肌梗死（myocardial infarction,MI）大鼠心室组织不同区域中Smads蛋白的表达水平及血管紧张素转化酶抑制剂（angiotensin coveroting enzyme inhibitor,ACE I）对Smads表达的影响。[方法]采用大鼠心肌梗死模型,随机分为卡托普利（captopril,Cap）组、MI对照组（分为14 d和21 d两组）和假手术组（sham）。对大鼠梗死区、室间隔和右心室中Smad蛋白的表达水平行免疫组化分析。[结果]4组大鼠梗死区Smad2/3和Smad4的表达以Cap组最低,21 dMI对照组最高,Smad7的表达呈现Cap组最低而14 dMI对照组最高的趋势;非梗死区Smad2/3和Smad4的表达Cap组最低,MI对照组最高,而Smad7的表达Cap组最低,14 dMI对照组最高;与14 dMI对照组比较,21 dMI对照组Smad2/3、Smad4在梗死区和非梗死区的表达均增高,而Smad7在两个区域的表达均降低（P〈0.05）。[结论]MI后早期,R-Smads和Co-Smads表达增高能够促进梗死区的修复,但持续增高最终会导致心肌纤维化。ACEI减轻梗死后心肌纤维化的作用在一定程度上与Smad2/3和Smad4的下调有关。     

丹酚酸B干预EPCs对BMSCs移植的AMI大鼠心肌VEGF、bFGF蛋白表达的影响

[目的]探讨中药丹酚酸B预处理的内皮祖细胞(EPCs)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植后,急性心肌梗死(AMI)大鼠心肌血管新生的影响。[方法]密度梯度离心法和贴壁筛选法培养、纯化EPCs与BMSCs;免疫细胞化学法(CD34/CD133/CD44)分别鉴定两种细胞。结扎大鼠左冠状动脉,制作大鼠急性心肌梗死模型;丹酚酸B最佳药物浓度干预的EPCs,与BMSCs混合,在大鼠心肌梗死区周边分5点注射。免疫组织化学法检测心肌蛋白的表达。[结果]细胞移植4周后,EPCs与BMSCs共移植组血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的积分光密度(IOD)分别13.179±3.053、23.634±4.705,与对照组差异具有统计学意义。[结论]丹酚酸干预EPCs提高BMSCs移植后大鼠心肌VEGF、bFGF蛋白表达,有效改善了BMSCs向心肌分化的血管微环境。     

丹酚酸B预处理EPCs联合BMSc移植对AMI大鼠心功能的影响

[目的]通过建立大鼠急性心肌梗死模型,将中药丹酚酸B预处理的内皮祖细胞(EPCs)按不同比例与骨髓基质细胞(BMSc)进行混合后注射至缺血局部,观察细胞移植后大鼠急性心肌梗死模型心功能的改善情况。[方法]应用密度梯度离心法和贴壁筛选法培养、纯化EPCs与BMSCs;采用结扎大鼠左冠状动脉前降支,制作大鼠急性心肌梗死模型。丹酚酸B最佳药物浓度处理的EPCs,以不同比例(1:1,2:1,4:1,8:1)与BMSc混合,在大鼠心肌梗死区周边分5点注射。[结果]各细胞移植组均能不同程度的改善心肌梗死大鼠心室结构,增强心功能。超声心动图结果:同一时间细胞移植组均能不同程度的改善心肌梗死大鼠心室结构,增强心功能,与模型组相比,4:1组、8:1组左室射血分数及心输出量明显升高(P<0.05)。[结论]丹酚酸B预处理的EPCs联合BMSc的移植促进了AMI大鼠左室功能的恢复。     

丹酚酸B/三七总皂苷配伍对心肌梗死大鼠左室结构和功能的影响

[目的]研究丹酚酸B(SalB)、三七总皂苷(PNS)对心肌梗死大鼠左室结构和功能的影响,探讨中药组分配伍的作用。[方法]结扎冠脉左前降支复制大鼠心肌梗死模型,假手术组作对照,连续灌胃给药7d。用彩色超声心动仪观察心脏左室结构和功能变化。[结果]SalB、PNS以及配伍组可以不同程度地降低左室收缩末期内径(LVDs)、左室收缩末期容积(LVESV),升高左室射血分数(EF)、左室短轴缩短率(FS),配伍组有优于其他中药组的趋势。[结论]SalB、PNS配伍可以有效改善心肌梗死大鼠的左室结构和功能。     

自体骨骼肌卫星细胞移植对心肌梗死大鼠心功能的影响

目的 了解自体骨骼肌卫星细胞(satellite cell,SC)移植至心肌对心肌梗死(myocardial infarction,MI)大鼠心功能的影响及其可能机制.方法 45只Wistar大鼠采用随机抽签法分为假手术组、对照组及移植组,对照组及移植组大鼠经结扎冠状动脉前降支建立MI模型.将体外培养2周的大鼠自体SC以注射的方式移植到移植组大鼠梗死区周围,4周后测定各组大鼠血流动力学、心功能、血清血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)浓度及缺血心肌毛细血管密度的变化,同时观察移植细胞在梗死区的生长、增殖情况并探讨它们相互的关系.结果 SC在梗死区中可增殖分化为横纹肌纤维;与假手术组比较,尽管对照组及移植组大鼠之收缩压、舒张压、平均动脉压、左室收缩压及左室压力最大上升/下降速率均明显降低(P＜0.05,P＜0.01),左室舒张末压均明显增高(P＜0.01),但移植组左室压力最大上升速率、左室压力最大下降速率及左室舒张末压较之对照组则有明显改善(P＜0.05,P＜0.01);SC移植4周后,对照组大鼠毛细血管密度较之假手术组明显增高(P＜0.05);移植组大鼠缺血心肌中毛细血管密度及血清VEGF浓度较之假手术组、对照组亦明显升高(P＜0.05,P＜0.01).结论 SC在心肌梗死区中能增殖分化为横纹肌样细胞,并可分泌VEGF促使缺血心肌毛细血管增生,从而共同参与改善心功能.     

TGF-β_1/Smads通路与心肌梗死后心室重构的关系及辛伐他汀干预的影响

目的研究TGF-β1/Smads通路与心肌梗死后心室重构的关系及辛伐他汀（simvastatin,Sim）干预的影响。方法清洁级Wistar大鼠40只随机分为4组,结扎大鼠冠状动脉建立心肌梗死模型组（MI,n=10）、假手术组（Sham,n=10）为对照组、辛伐他汀干预组（MI＋Sim,n=10）和辛伐他汀自身对照组（Sim,n=10）。8周后测量各组大鼠血液动力学、心室重量/体重、非梗死区胶原含量、荧光定量RT-PCR检测梗死区和非梗死区转化生长因子（TGF）β1mRNA、Smad3 mRNA、Smad7 mRNA的表达。结果与假手术组和辛伐他汀干预组相比,MI组左室舒张末压、心室重量/体重、非梗死区胶原含量均增加,梗死区和非梗死区TGF-β1mRNA、Smad3 mRNA表达增加,而Smad7 mRNA表达降低（P〈0.05）。结论 TGF-β1/Smads传导通路参与心肌梗死后的心室重构过程,Smad3对心室重构有促进作用,而Smad 7对心室重构有抑制作用。辛伐他汀可能通过抑制Smad3表达,促进Smad7表达,从而有效改善心肌梗死后心室重构。     

丹酚酸B对实验性大鼠急性心肌缺血的保护作用

目的：观察注射丹酚酸B对异丙肾上腺素(ISO)诱导的急性心肌缺血大鼠模型的保护作用。方法：采用腹腔注射ISO方法复制大鼠急性心肌缺血模型,观察丹酚酸B对大鼠心电图及心肌组织形态学的影响,检测血清中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的含量。结果：丹酚酸B l0,5mg／kg能有效对抗心电图ST段下移,T波的升高,显著降低血清中LDH、CK和MDA的含量,升高血清中SOD的含量(与模型组比较P<0．01,P<0．05)。结论：丹酚酸B对ISO诱导大鼠急性心肌缺血有较好的保护作用。